检索结果-南通市图书馆

携带EGFP绿色荧光蛋白标记的腺病毒的构建及其在293A细胞中的包装与表达

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生物技术世界 2015年第12期12卷 4-4页

作者：赵芳广西医科大学广西南宁530021

目的:构建显示EGFP绿色荧光蛋白的腺病毒质粒,在293细胞中包装表达重组腺病毒颗粒。方法:以p Eentry-Ghrh-P2A-EGFP为模板,双酶切出目的基因EGFP,将其与腺病毒穿梭载体Pentry-Trcp1连接为p Eentry-P2A-EGFP质粒;腺病毒骨架载体质粒PAd-D... 详细信息

目的:构建显示EGFP绿色荧光蛋白的腺病毒质粒,在293细胞中包装表达重组腺病毒颗粒。方法:以p Eentry-Ghrh-P2A-EGFP为模板,双酶切出目的基因EGFP,将其与腺病毒穿梭载体Pentry-Trcp1连接为p Eentry-P2A-EGFP质粒;腺病毒骨架载体质粒PAd-DEST再与p Eentry-P2AEGFP质粒同源重组为PAd--P2A-EGFP质粒;用PEI介导转染将PAd--P2A-EGFP质粒转染到293A细胞,包装成重组腺病毒颗粒。结果:PAd--P2AEGFP转染到293A细胞中,合成荧光蛋白,荧光显微镜下细胞发绿色荧光。再次感染293A细胞,90%以上的细胞脱落,并且能见到绿色荧光。结论:显示EGFP绿色荧光蛋白的腺病毒载体构建成功,并能在293A细胞中完整包装成重组腺病毒颗粒,为研究腺病毒载体特性提供参考依据。

关键词： EGFP 腺病毒重组

CMV和SP双启动子增强外源基因在骨骼肌细胞中的特异性表达

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生物技术世界 2016年第4期13卷 319-319页

作者：赵芳唐立春赵永祥广西医科大学广西南宁530000 北京国家蛋白质科学中心北京102202

构建含有CMV和肌肉特异性启动子SP双启动子及报告基因EGFP的表达载体(Pentry-CMV-SP-Ghrh-EGFP),使得生长激素释放激素Ghrh在诱导分化的C2C12细胞中特异性表达。

关键词： CMV、SP启动子 Ghrh EGFP

Radioprotective effects of the expression of FLT3 ligand regulated by Egr-1 regulated element on radiation injury of SCID mice

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感染．炎症．修复 2001年第3期2卷 128-134页

作者： DU Nan Pei Xuetao Luo Chengji SU Yongping CHENG Tianmin Department of Hematology 304th Hospital Beijing 100037 Institute of Radiation Medicine Beijing 100850 Institute of Combined Injury Third Military Medical University Chongqing 400038

Objective: In order to explore the radioprotective effects of the expression of hematopoietic growth factors regulated by radio-inducible promoter on radiation injury. Methods:The human FL (Flt3 ligand) cDNA and EGFP (enhanced green fluorescent protein) cDNA were linked together with IRES and then inserted into the eukaryotic expression vector pCI-Egr, which was constructed by substituting CMV promoter in pCIneo with the Egr-1 promoter (Egr-EF). The vector was transferred into human bone marrow stromal ...

关键词： gene SCID Radioprotective effects of the expression of FLT3 ligand regulated by Egr-1 regulated element on radiation injury of SCID mice FLT EGFP

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视网膜祖细胞分离培养及鉴定

解剖科学进展 2004年第B8期10卷 31-32页

作者：李艳佘振珏周国民复旦大学上海医学院解剖与组织胚胎学系上海200032

目的：探讨体外胚胎视网膜祖细胞的增殖与分化特性。方法：运用无血清培养技术，从培养第2～3代后的神经干细胞，按Lipofeefin?Reagent转染试剂盒的步骤，将CDK5-EGFP重组子和pEGFP-N1空载体分别转染进神经干细胞集落内，24h后加入5％... 详细信息

目的：探讨体外胚胎视网膜祖细胞的增殖与分化特性。方法：运用无血清培养技术，从培养第2～3代后的神经干细胞，按Lipofeefin?Reagent转染试剂盒的步骤，将CDK5-EGFP重组子和pEGFP-N1空载体分别转染进神经干细胞集落内，24h后加入5％胎牛血清，继续培养。于24h、48h、72h分别观察两组分化神经细胞的形态特征并计算细胞的突起长度。

关键词：祖细胞视网膜转染神经干细胞集落 CDK5 分化重组子无血清培养技术 EGFP

单一GFP耦联的生物传感器能够显示血管平滑肌内特定形式的cGMP

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中华男科学杂志 2008年第7期14卷 669-669页

作者：王怀鹏广东省人民医院泌尿外科 510080

Nausch等进行了一项研究,研究者介绍一个名为FlincGs的cGMP生物传感器,它是前所未有的,非FRET为基础的cGMP生物传感器,用来评估一氧化氮(NO)和心房利钠肽(ANP)诱导细胞内合成cGMP[cGMP]1的动力学。将PKGIα,PKGIβ的常规片段以及PKGIαN... 详细信息

Nausch等进行了一项研究,研究者介绍一个名为FlincGs的cGMP生物传感器,它是前所未有的,非FRET为基础的cGMP生物传感器,用来评估一氧化氮(NO)和心房利钠肽(ANP)诱导细胞内合成cGMP[cGMP]1的动力学。将PKGIα,PKGIβ的常规片段以及PKGIαN-末端缺失突变体融合到环状重组后的EGFP上,生成具有α-,β-,和δ-结构的FlincG,分别在35nmol/L,1.1μmol/L,和170nmol/L浓度时具有较高的动力学范围和明显的KD,cGMP值。[第一段]

关键词：生物传感器 cGMP EGFP 血管平滑肌内耦联心房利钠肽缺失突变体

Effect of CXCR4-overexpressing bone marrow-derived mesenchymal stem cells on the repair of the co-cultured hypoxia /re-oxygenation renal tubular epithelial cells and its possible mechanism

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China Medical Abstracts(Internal Medicine) 2014年第1期31卷 50-50页

作者：刘楠梅 Dept Nephrol Changzheng Hosp2nd Milit Med Univ

Objective CXCR4-overexpressing bone marrow-derived mesenchymal stem cells(CXCR4-BMSC)were constructed and co-cultured with hypoxia/re-oxygenation pretreated renal tubular epithelial cells(HR-RTEC).Repair of HR-RTEC was detected and the possible mechanism was also discussed.Methods CXCR4-BMSC(CXCR4-BMSC/EGFP,EGFP as the tracer gene)

关键词： tubular repair oxygenation EGFP cultured tracer transfection supernatant Caspase stimulated

AAV载体介导的人β2-AR、EGFP基因导入心肌细胞的研究

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 133-133页

作者：高文谦李小鹰吴小兵李梁裴雪涛解放军总医院老年心内科!北京100853 军事医学科学院国家生物学分析中心中国预防医学科学院病毒学研究所

目的:观察腺相关病毒(adeno-assoiated virus,简称AAV)载体介导的人β2肾上腺素能受体(简称β2-AR)基因和增强型绿色荧光蛋白基因(简称EGFP)对心肌细胞的转染及其表达. 方法:构建以串联方式携带β2-AR、EGFP基因的AAV载体,转染大鼠的心... 详细信息

目的:观察腺相关病毒(adeno-assoiated virus,简称AAV)载体介导的人β2肾上腺素能受体(简称β2-AR)基因和增强型绿色荧光蛋白基因(简称EGFP)对心肌细胞的转染及其表达. 方法:构建以串联方式携带β2-AR、EGFP基因的AAV载体,转染大鼠的心肌细胞,检测心肌细胞β2-AR、 EGFP的表达及cAMP的含量.结果:Northern印迹杂交显示转染的心肌细胞表达人β2-AR mRNA;Western免疫印迹杂交分析表明转染的心肌细胞有人β2-AR;并在荧光显微镜下可观察到心肌细胞表达EGFP;放射性配基检测显示转基因心肌细胞的β2-AR密度(204.0±6.4 fmol/mg蛋白)明显高于未转染的心肌细胞(76.0±2.8 fmol/mg蛋白)(P＜0.01);经10 μmol/L异丙肾上腺素作用,转基因的心肌细胞的cAMP量(116.2±5.8 pmol/106cells)明显高于对照组(58.4±4.6 pmol/106 cells)(P＜0.01).结论:人β2-AR、EGFP基因经AAV载体导入心肌细胞后能有效地表达,且表达人β2-AR具有激活肾上腺素信号的作用.

关键词：心肌细胞转染 EGFP 载体介导 AAV AR

Twist2-cre转基因小鼠骨髓来源间充质干细胞的分离

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口腔生物医学 2012年第3期3卷 131-131页

作者：王燕萍

人骨髓来源的间充质干细胞（BMSCs）具有很重要的临床治疗价值，小鼠BMSCs为研究观察这些前体细胞群的生物学性能提供了重要的基础模型。本研究从转基因小鼠骨髓中早期分离培养BMSCs，并进行鉴定。把Twist2-ere小鼠与含有Cre报告子的小... 详细信息

人骨髓来源的间充质干细胞（BMSCs）具有很重要的临床治疗价值，小鼠BMSCs为研究观察这些前体细胞群的生物学性能提供了重要的基础模型。本研究从转基因小鼠骨髓中早期分离培养BMSCs，并进行鉴定。把Twist2-ere小鼠与含有Cre报告子的小鼠（如Z／EG和Ai9）杂交，可分别表达EGFP和番茄红荧光蛋白，其中的Cre可切除终止子序列。

关键词：间充质干细胞小鼠骨髓分离培养转基因 BMSCs EGFP 生物学性能临床治疗

splitEGFP在Wnt7a与Fzd5之间的相互作用及信号活化分析中的应用

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现代泌尿外科杂志 2008年第3期13卷 238-238页

作者： Kendra S Carmon David S Loose 陈玉乐（摘译）贺大林（审校） Biochemical and Biophysical Research Communications 不详

Wnt是一种调节包括细胞增殖、分化以及细胞命运的分泌性糖蛋白。在β-catenin/canonical信号途径中,Wnt分子与Fzd受体相互作用后抑制了β-catenin的降解,促进了其核转位,并调节一系列靶基因的表达。该信号通路的调节异常将会导致包括肿... 详细信息

Wnt是一种调节包括细胞增殖、分化以及细胞命运的分泌性糖蛋白。在β-catenin/canonical信号途径中,Wnt分子与Fzd受体相互作用后抑制了β-catenin的降解,促进了其核转位,并调节一系列靶基因的表达。该信号通路的调节异常将会导致包括肿瘤在内的多种疾病。同时对β-catenin/canonical信号途径中的相关组分的更进一步的了解也会提供新的治疗手段和方法。在本研究中,将来自于过表达Wnt7a的细胞溶解液与含有赖氨酸富集区(CRD)并与IgG的FC片段相连的Fzd5共培养于A/G蛋白琼脂糖上,蛋白点阵技术分析证实了前人关于Wnt7a通过与Fzd5的CRD结合而启动Wnt经典途径的说法。应用斯卡查德法进一步证实了上述观点,[第一段]

关键词：信号途径相互作用 β-catenin 活化分析 EGFP 调节异常细胞增殖 A/G蛋白