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HPV16e6、e7蛋白在肺癌组织中的表达及意义

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社区医学杂志 2014年第16期12卷 1-3页

作者：杜华贞李维山宋文刚漯河医学高等专科学校病理教研室河南漯河462000

目的研究漯河周边地区非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)病变组织中HPV16e6、e7蛋白表达情况及与临床病理参数之间的关系,探讨HPV16e6和e7蛋白在NSCLC发病机制中的作用。方法 2010年3月—2011年6月采用免疫组织化学技术... 详细信息

目的研究漯河周边地区非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)病变组织中HPV16e6、e7蛋白表达情况及与临床病理参数之间的关系,探讨HPV16e6和e7蛋白在NSCLC发病机制中的作用。方法 2010年3月—2011年6月采用免疫组织化学技术分别检测80例NSCLC标本和55例癌周对照组织中HPV16e6和e7蛋白的表达,并进行对比,计数资料采用χ2检验或确切概率法,Pe6、e7、e6/e7蛋白的表达率分别为31.3%、33.8%和28.8%,55例癌旁组织中,HPV16e6、e7、e6/e7蛋白表达阳性率分别为14.5%、9.2%、7.3%。NSCLC组织中e6、e7和e6/e7蛋白共表达阳性率均高于对照组,差异有统计学意义(Pe6和e7蛋白在NSCLC发生发展中具有重要作用。

关键词：肺肿瘤 HPV16 e6蛋白 e7蛋白免疫组织化学非小细胞肺癌

人乳头瘤病毒16型e7蛋白的表达、纯化及抗血清制备

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国际免疫学杂志 2018年第5期41卷 514-518页

作者：颜学勤王莹莹嵩钰佳王鑫陈思佳魏兰兰钟照华商庆龙哈尔滨医科大学微生物学教研室 150081

目的建立人乳头瘤病毒(human papillomavims,HPV)16型e7蛋白的原核表达系统,表达HPv16e7蛋白,制备小鼠抗HPV16e7血清。方法采用PCR方法扩增HPV16e7基因,构建人peT21b质粒,重组表达载体经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(De3)。诱导表达后经十... 详细信息

目的建立人乳头瘤病毒(human papillomavims,HPV)16型e7蛋白的原核表达系统,表达HPv16e7蛋白,制备小鼠抗HPV16e7血清。方法采用PCR方法扩增HPV16e7基因,构建人peT21b质粒,重组表达载体经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(De3)。诱导表达后经十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulphate,SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGe)和westemblot鉴定表达产物。提取包涵体进行变性复性处理后纯化,纯化后的可溶性蛋白免疫Balb/C小鼠,检测小鼠体内γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)水平、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化。结果PcR扩增片段为0.3Kb,酶切和序列测定证实重组质粒构建正确。SDS—PAGe在11KD处出现蛋白条带。蛋白表达以包涵体为主。免疫后小鼠抗体效价升高,CD4/CD8比值无升高,IFN-γ无反应。结论成功制备可溶性HPV16e7蛋白和小鼠抗HPvl6e7高效价抗血清。

关键词：人乳头瘤病毒16型 e7蛋白抗血清

干扰素诱导蛋白IFI16与HPV16e6、e7蛋白相互作用的研究

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山东大学学报（医学版） 2004年第5期42卷 525-530页

作者：于瑾赵蔚明齐眉宋长芹赵丽刘传聚 Peter Lengyel 于修平山东大学医学院微生物学教研室山东济南250012 耶鲁大学医学院分子生物物理与分子生物化学系

目的:研究人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus熏HPV)16型e6、e7蛋白与干扰素诱导蛋白IFI16的相互作用,初步揭示IFI16拮抗HPV16e6、e7致瘤活性的分子机制。方法:(1)体外GST阻滞分析:克隆、表达及纯化GST鄄HPV16e6和GST鄄HPV16e7融合蛋白,... 详细信息

目的:研究人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus熏HPV)16型e6、e7蛋白与干扰素诱导蛋白IFI16的相互作用,初步揭示IFI16拮抗HPV16e6、e7致瘤活性的分子机制。方法:(1)体外GST阻滞分析:克隆、表达及纯化GST鄄HPV16e6和GST鄄HPV16e7融合蛋白,将含有IFI16蛋白的eB病毒阴性伯基特淋巴瘤穴BJAB雪细胞提取物与上述纯化蛋白孵育,通过WesternBlotting分析蛋白质的体外相互作用;(2)免疫共沉淀分析:构建表达His鄄HPV16e6蛋白的真核表达载体,将表达有IFI16和His鄄HPV16e6蛋白的293T细胞裂解物与抗His抗体孵育,用IFI16抗体检测共沉淀蛋白复合物中IFI16蛋白的存在;将表达有IFI16和HPV16e7蛋白的CaSki和SiHa细胞裂解物与HPV16e7抗体孵育,检测共沉淀蛋白复合物中e7与IFI16是否结合。结果:成功构建了原核表达质粒pGeX鄄4T/HPV16e6及pGeX鄄4T/HPV16e7,并表达、纯化获得GST鄄HPV16e6及GST鄄HPV16e7融合蛋白。体外GST阻滞分析结果表明,用IFI16单抗做WesternBlotting分析可检测到复合物中IFI16蛋白,表明GST鄄HPV16e6和GST鄄HPV16e7均可与IFI16蛋白结合。免疫共沉淀分析进一步证实,共沉淀蛋白复合物中也可检测到IFI16蛋白,证明在细胞中HPV16e6和e7蛋白也能与IFI16蛋白结合。结论:无论在体外还是在细胞中,抑瘤因子IFI16蛋白均能特?

关键词：乳头状瘤病毒,人干扰素诱导剂 e6蛋白 e7蛋白宫颈肿瘤

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人乳头瘤病毒e7蛋白生物活性研究进展

国外医学（病毒学分册） 2003年第2期10卷 37-40页

作者：王飞毕志刚南京医科大学2002级南京210029 南京医科大学第一临床医学院皮肤科南京210029

人乳头瘤病毒 (HPV)是一种小分子 DNA病毒 ,其早期基因 e7编码具有多种生物活性的 e7蛋白。e7蛋白与腺病毒 eIA及多瘤病毒 SV4 0蛋白有相似的结构 ,可与 p RB、P53反应 ,改变宿主细胞 G1 /S期的转化。e7蛋白还能同多种细胞因子发生反应 ... 详细信息

人乳头瘤病毒 (HPV)是一种小分子 DNA病毒 ,其早期基因 e7编码具有多种生物活性的 e7蛋白。e7蛋白与腺病毒 eIA及多瘤病毒 SV4 0蛋白有相似的结构 ,可与 p RB、P53反应 ,改变宿主细胞 G1 /S期的转化。e7蛋白还能同多种细胞因子发生反应 ,影响宿主细胞代谢 ,直接导致宿主细胞中心体的变化。e7蛋白在

关键词：人乳头瘤病毒 e7蛋白生物活性腺病毒多瘤病毒细胞因子

人乳头瘤病毒e6/e7混合CTL表位的筛选与免疫效应研究

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2024年第1期 115-120页

作者：张汶歌姚德生广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科广西南宁530000

验证有效的人乳头瘤病毒(HPV)e6、e7蛋白的HLA-A*0201限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位,比较混合表位和单个表位的体外免疫效应差异,为宫颈癌复合多肽疫苗研究提供基础。方法对宫颈癌相关抗原 HPV e6、e7蛋白CTL表位进行筛选,采用HLA... 详细信息

验证有效的人乳头瘤病毒(HPV)e6、e7蛋白的HLA-A*0201限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位,比较混合表位和单个表位的体外免疫效应差异,为宫颈癌复合多肽疫苗研究提供基础。方法对宫颈癌相关抗原 HPV e6、e7蛋白CTL表位进行筛选,采用HLA-A2分子结合力实验检测T2细胞的表面平均荧光强度(MIF),采用酶联免疫斑点法(eLISOPT)检测IFN-γ斑点数,采用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测吸光度(OD)。结果对已报道的 11条表位多肽进行验证,经过T2细胞肽结合力绑定实验、eLISPOT实验,结果表明,多肽P2 TIHDIILeCV、P3 FAFRDLCIV、P5 YMLDLQPeT、P9 eLTeVFeFA、P11 TLQDIVLHL均具有高免疫反应性,与健康志愿者相比,5条多肽能够刺激宫颈癌患者外周血CTL产生特异性反应,由混合表位诱导的效应细胞对肿瘤细胞的杀伤作用明显优于单个表位的作用。结论验证了5条多肽序列具有免疫反应性,明确了混合表位体外免疫效应优于单个表位,为进一步开展宫颈癌复合多肽疫苗的研究奠定了基础。

关键词：宫颈癌人乳头瘤病毒 e6蛋白 e7蛋白 HLA-A2 限制性 CTL 表位

人乳头状瘤病毒e6、e7蛋白在维吾尔族及汉族宫颈癌发展中的表达及意义

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中国医药导报 2015年第21期12卷 75-78页

作者：王琳韩莉莉玛依努尔.尼牙孜隋霜新疆维吾尔自治区人民医院妇科新疆乌鲁木齐830001

目的分析维吾尔族及汉族宫颈癌患者中人乳头状瘤病毒（HPV）e6、e7蛋白表达与宫颈癌癌前病变恶性进展的关系,进一步了解其在维吾尔族及汉族宫颈癌患者间是否存在差异。方法选取2013年4月~2014年4月在新疆维吾尔自治区人民医院妇科门... 详细信息

目的分析维吾尔族及汉族宫颈癌患者中人乳头状瘤病毒（HPV）e6、e7蛋白表达与宫颈癌癌前病变恶性进展的关系,进一步了解其在维吾尔族及汉族宫颈癌患者间是否存在差异。方法选取2013年4月~2014年4月在新疆维吾尔自治区人民医院妇科门诊行第二代杂交捕技术HPV DNA检测结果为阳性的133例维吾尔族（n=75）和汉族（n=58）患者宫颈不同病变程度的石蜡包埋宫颈组织。采用免疫组化法分别检测各组织中HPV e6、e7蛋白表达,使用Spearman等级相关分析HPV e6、e7蛋白表达与病变程度的相关性,并采用χ2检测比较维吾尔族及汉族宫颈癌患者HPV e6、e7蛋白表达的差异。结果维吾尔族和汉族慢性宫颈炎、CIN 1、CIN 2~3、宫颈鳞癌组织中HPV e6的阳性率,随着病情的进展呈逐渐增高趋势,差异均有统计学意义（χ2=39.61,P=0.001;χ2=19.77,P=0.001）;Spearman等级相关分析发现,维吾尔族及汉族宫颈癌患者HPV e6蛋白的表达与宫颈病变级别均呈显著正相关（r=0.708,P=0.001;r=0.729,P=0.001）、HPV e7在维吾尔族和汉族慢性宫颈炎、CIN 1、CIN 2~3、宫颈鳞癌组织中的阳性表达率,随着病情的进展呈逐渐增高,多组比较差异有统计学意义（χ2=32.48,P=0.001;χ2=24.16,P=0.001）;Spearman等级相关分析发现,维吾尔族及汉族宫颈癌患者e6蛋白表达与宫颈病变级别均呈显著正相关（r=0.649,P=0.001;r=0.759,P=0.001）;慢性宫颈炎、CIN 1、CIN 2~3维吾尔族患者HPV e6、e7蛋白的阳性表达率高于汉族,维吾尔族宫颈癌患者HPV e6、e7蛋白表达率低于汉族,但差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 HPV e6、e7蛋白是维吾尔族和汉族宫颈癌发展的重要因素,HPV e6、e7蛋白可能具有预测宫颈病变进展的价值。

关键词：人乳头状瘤病毒 e6蛋白 e7蛋白宫颈癌维吾尔族汉族

HPV16 e6、e7多表位DNA疫苗的构建及免疫效果评估

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昆明医科大学学报 2024年第5期45卷 16-22页

作者：崔湘杰陶玉芬朱兰芳姚宇峰史荔中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

目的构建和评价HPV16 e6、e7多表位DNA疫苗诱导的特异性CTL细胞应答及其对肿瘤生长的干预作用,从而揭示其作为候选HPV治疗性疫苗的潜能。方法首先通过IeDB网站中的MHC I Processing Predictions和MHC I Binding Predictions方法,分别预... 详细信息

目的构建和评价HPV16 e6、e7多表位DNA疫苗诱导的特异性CTL细胞应答及其对肿瘤生长的干预作用,从而揭示其作为候选HPV治疗性疫苗的潜能。方法首先通过IeDB网站中的MHC I Processing Predictions和MHC I Binding Predictions方法,分别预测人类HLA-A^(*)02:01、HLA-A^(*)11:01、HLA-A^(*)24:02和C57BL/6小鼠H-2b的限制性CTL表位,然后根据评分以及eLISPOT实验筛选出二者共同呈递的CTL表位,并将其构建成多表位DNA疫苗(pVAX1-10P)。从预防性和治疗性二个方面研究pVAX1-10P对小鼠移植TC-1异位癌的免疫干预作用,流式细胞术检测特异性CTL应答。结果获得10条可被人与鼠MHC分子共呈递的CTL表位,eLISPOT结果表明这10条CTL表位均能诱导小鼠淋巴细胞产生特异性免疫应答;由此构建的多表位DNA疫苗pVAX1-10P无论在预防性实验还是治疗性实验中,均能诱导特异性的细胞免疫并抑制肿瘤的生长。结论构建的HPV16 e6、e7多表位DNA疫苗pVAX1-10P能够诱导特异性CTL应答,显著抑制肿瘤生长,有望作为候选HPV治疗性DNA疫苗。

关键词：宫颈癌人乳头瘤病毒16 e6蛋白 e7蛋白多表位DNA疫苗

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HPV16型e7蛋白在喉癌组织中的表达

临床检验杂志 2008年第6期26卷 451-451页

作者：李善玉菏泽市立医院检验科山东菏泽274000

Syrjanen首次提出人乳头瘤病毒(HPV)感染与喉癌有关,但其致癌机制还不完全清楚。我们用免疫组化方法检测了42例喉癌组织及26例声带息肉中的HPV16型e7蛋白表达,探讨其在喉癌发病过程中的生物学意义,为喉癌的防治提供依据。1对象和方法1.... 详细信息

Syrjanen首次提出人乳头瘤病毒(HPV)感染与喉癌有关,但其致癌机制还不完全清楚。我们用免疫组化方法检测了42例喉癌组织及26例声带息肉中的HPV16型e7蛋白表达,探讨其在喉癌发病过程中的生物学意义,为喉癌的防治提供依据。1对象和方法1.1对象42例喉癌及26例声带息肉患者均来自本院耳鼻咽喉专科门诊及病房,所取标本均经病理检查证实。42例喉癌患者中男32例,女10例,年龄35～80岁,按UICCI1987年分级标准分期:Ⅰ期7例,Ⅱ期9例,Ⅲ期19例,Ⅳ期7例。声门上型24例,声门型15例,声门下型3例。按分化程度分为高分化鳞癌21例,中分化鳞癌19例,低分化鳞癌1例,未分化鳞癌1例。1.2试剂免疫组化试剂盒购自福州迈新公司,抗HPV16型e7抗体购自美国Santa Cruz公司。1.3方法活检组织用10%的福尔马林固定,3d后石蜡包埋。应用ultrasensitive~(TM)s-p免疫组织化学方法对所取活检组织进行HPV16型e7的测定。石蜡切片常规脱蜡水化,用抗原修复缓冲液对组织抗原进行修复。然后按ultrasensitive~(TM)s-p说明书进行。抗HPV16型e7抗体(一抗)稀释度为1∶50。

关键词：喉癌人乳头瘤病毒16型 e7蛋白免疫组化法

以HPV 16/18型e6/e7蛋白为靶标的治疗性DNA合成疫苗：VGX-3100的Ⅱb期临床试验

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中华预防医学杂志 2017年第8期51卷 717-717页

作者：赵爽国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院、流行病学研究室

虽然宫颈癌预防性疫苗越来越得以广泛应用,但宫颈上皮内瘤样病变（CIN）仍然很常见.目前对轻度 CIN 建议随访观察,而对 CIN2/3 的治疗主要是环形高频电刀切除术（LeeP）或锥切术等创伤性技术,有较高的妊娠并发症和复发风险.

关键词：治疗性临床试验合成疫苗 e7蛋白 HPV Ⅱb期 DNA 宫颈上皮内瘤样病变