检索结果-南通市图书馆

基于dna银纳米簇与金纳米棒能量转移的功能核酸通用荧光传感策略

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基于DNA银纳米簇与金纳米棒能量转移的功能核酸通用荧光传感策略

作者：张茜吉林大学

学位级别：硕士

食品和环境中常见的农药、兽药、生物毒素、致病菌和重金属等化学污染物的残留,对生态系统和人类健康造成了严重的威胁。其中,抗生素在农业养殖中的过度使用和重金属在环境中的积累等问题愈发严重,目前常用的抗生素和重金属的检测方法... 详细信息

食品和环境中常见的农药、兽药、生物毒素、致病菌和重金属等化学污染物的残留,对生态系统和人类健康造成了严重的威胁。其中,抗生素在农业养殖中的过度使用和重金属在环境中的积累等问题愈发严重,目前常用的抗生素和重金属的检测方法成本高且操作复杂。因此,开发简单、快速、可靠的方法检测食品和环境中的抗生素和重金属残留,具有重要意义。dna银纳米簇(dna-Ag NCs)的合成简单、荧光强且稳定性好,作为一种新型的无标记荧光探针被广泛应用于分析检测领域。金纳米棒(Gold nanorods,GNRs)制备简单、具有丰富的化学物理性能,被广泛于生物医学和食品检测领域。本文利用功能核酸(Functional acids,FNAs)的高灵敏度和高选择性,基于dna-Ag NCs和GNRs之间的表面能量转移(SET),分别以核酸适配体和脱氧核酶作为识别元件,开发出一种简单、低成本和通用的无标记功能核酸荧光传感策略,快速检测四环素和铅离子。具体内容如下:(1)将四环素核酸适配体(TET aptamer)的互补dna序列与5个胸腺嘧啶间隔子(T)和模板(CGC)连接,合成互补dna银纳米簇(c dna-Ag NCs),利用带正电荷的GNRs对双链dna的静电吸附能力,以及c dna-Ag NCs与GNRs之间SET原理,开发出一种无标记核酸适配体荧光传感策略,检测TET。c dna-Ag NCs与TET aptamer互补形成双链后吸附在GNRs表面,体系荧光较低。当TET存在时,TET与TET aptamer特异性结合,此时由于c dna-Ag NCs的表面负电荷密度较低,GNRs对其吸附作用弱,c dna-Ag NCs从GNRs表面释放,降低了二者之间的SET效率,使得检测体系中c dna-Ag NCs的荧光恢复。实验条件最优的情况下,在5-500 n M浓度范围内,TET与荧光强度线性相关,检出限为4.411 n M。在牛奶样品的TET检测中,该方法得到了应用,且牛奶样品前处理过程简单快速。该方法省时高效,且可推广至其他目标物的检测。(2)本实验选择依赖Pb的GR5脱氧核酶(GR5 dnazyme)作为探针,该GR5 dnazyme,由一条酶链(GR5 E)和一条连接了模板(CGC)的底物链(sub-CGC)组成,将sub-CGC合成为dna银纳米簇(sub-Ag NCs)。利用带正电荷的GNRs对sub-Ag NCs/GR5 E双链的吸附作用及sub-Ag NCs与GNRs之间的SET原理,开发出一种无标记脱氧核酶荧光传感器,检测Pb。sub-Ag NCs和GR5 E互补形成的双链吸附在GNRs表面,体系荧光较低。在Pb存在的情况下,GR5 E特异性切割sub-Ag NCs,使其断裂成两部分,含Ag NCs的单链dna由于表面负电荷密度低,从GNRs表面释放,导致SET效率降低,此时,Ag NCs的荧光恢复。实验条件最优的情况下,在5-60 n M浓度范围内,Pb与荧光强度呈线性相关关系,检出限为1.416 n M。该方法成功应用于松花江水中Pb的检测,操作简单,省时高效。

关键词：功能核酸 dna银纳米簇金纳米棒表面能量转移荧光传感器

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

基于dna银纳米簇荧光探针的核酸检测研究

基于DNA银纳米簇荧光探针的核酸检测研究

作者：冯璐清华大学

学位级别：硕士

dna检测涉及到疾病诊断、基因识别、环境分析、指纹鉴定等很多方面,发展灵敏的、特异性的dna传感器具有非常重要的意义。现有的检测dna的方法包括了化学发光法、电化学方法、比色法、荧光法等等。荧光探针具有操作方便、快速检测、容易... 详细信息

dna检测涉及到疾病诊断、基因识别、环境分析、指纹鉴定等很多方面,发展灵敏的、特异性的dna传感器具有非常重要的意义。现有的检测dna的方法包括了化学发光法、电化学方法、比色法、荧光法等等。荧光探针具有操作方便、快速检测、容易自动化等优势,在分析检测方面得到广泛的应用。对于检测dna的荧光探针,如何发展出具备合适尺寸、低毒性、高亮度、稳定性强、灵敏度高等要求的荧光探针仍然是这一领域发展的关键问题之一。已经研究报道的荧光探针诸如有机荧光染料和半导体量子点已经在生物化学领域得到了广泛应用,但是有机荧光染料缺乏稳定性,而半导体量子点的体积大、毒性大缺陷都限制了其应用及发展。纳米材料的研究发展则极大推进了分析化学领域的应用,以dna为模板的dna银纳米簇具有良好的性质。dna银纳米簇具有强的荧光发射强度、高稳定性、较小的尺寸。除此之外,可以通过调整模板dna的序列或长度来调整dna银纳米簇的荧光发射波长范围。dna银纳米簇为荧光探针领域的发展带来了新的方向,成为分析化学领域一个有力的研究工具。在过去的十年中,dna银纳米簇作为荧光探针已经在核酸、蛋白、多肽、金属离子等物质检测,以及细胞成像等领域得到推广应用。研究表明,以部分互补的两条dna链为模板合成的银纳米簇其本身具有微弱的荧光,互补杂交之后形成dna银纳米簇对荧光得到显著增强。本工作主要基于dna银纳米簇的特殊荧光性质建立了一种快速、简单、高选择性检测dna的方法,主要开展了以下研究工作:通过设计挑选特定碱基序列和长度的dna,得到了可互补的dna银纳米簇对荧光探针。系统地研究了该dna银纳米簇对荧光探针对于H1N1待测dna的响应特性。研究发现,当H1N1待测dna存在时,由于互补杂交竞争反应的存在,两种dna银纳米簇杂交受阻,单独存在的dna银纳米簇本身呈现微弱的荧光。随着H1N1待测dna浓度的增加,dna银纳米簇对与待测dna共存溶液的荧光强度降低,待测dna浓度与荧光强度在一定范围内存在良好的线性。而据此设计了检测H1N1待测dna的方法,推广了dna银纳米簇在dna检测方面的应用。

关键词： dna银纳米簇荧光检测 H1N1待测dna

基于dna核酶分子机器及银纳米簇核酸传感器的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

基于DNA核酶分子机器及银纳米簇核酸传感器的研究

作者：朱爽丽长沙理工大学

学位级别：硕士

dna核酶(dnazyme)是通过指数富集系统进化技术(SELEX)分离而来的,是一种具有催化活性的dna分子,因其稳定性及良好的催化效应可用于多种传感体系。dna分子机器是一种类似于机器运转的生物分子自组装模式,其内部化学产物引发的分子级别的... 详细信息

dna核酶(dnazyme)是通过指数富集系统进化技术(SELEX)分离而来的,是一种具有催化活性的dna分子,因其稳定性及良好的催化效应可用于多种传感体系。dna分子机器是一种类似于机器运转的生物分子自组装模式,其内部化学产物引发的分子级别的连续功能,使得dna二维及三维结构发生改变,从而形成新的化学产物。dna分子机器具信号放大的作用,可自主控制复制、剪切、链置换等多个进程。基于dnazyme的分子机器具有十分广阔的生物化学应用前景。以dna为模板合成银纳米簇,表现出优异的光谱和光物理性质,成为近年来发展快速的荧光纳米探针。本文主要利用dnazyme、dna分子机器及以dna为模板合成的银纳米簇体系构建用于检测铜离子及巯基化合物的传感体系,主要工作如下：1、基于dnazyme分子机器酶级联扩增反应,设计了一种新颖的循环扩增用于检测铜离子的生物传感器,也是首次尝试将自主断裂dnazyme与聚合酶／核酸内切酶循环反应相结合的传感方法。当铜离子存在时,能够有效催化铜核酶将铜底物在断裂位点处特异性水解,游离出的铜底物片段作为引物,在聚合酶的作用下与模板链完全互补配对形成双链,后被核酸内切酶在剪切位点特异性剪切,又在聚合酶作用下开启新一轮的复制反应。沿着模板链不断复制、置换,置换下来的单链dna又与模板链继续互补配对,依此展开循环扩增反应,随着荧光染料SYBR Green I的嵌入,有明显的荧光增强效果。传感体系在铜离子浓度为0.5～200 nmol·L-1范围内有响应,荧光信号呈现良好的指数扩增趋势。该传感器无标记,也无需对dna进行化学修饰,同时避免了温度循环的信号扩增及复杂的分离过程。开拓了利用dnazyme与多酶复合系统结合检测金属离子的新思路。2、设计了一种简便、灵敏的基于1,4-二硫苏糖醇(DTT)对以dna为模板所合成银纳米簇的荧光淬灭作用,用以定量检测DTT。以寡核苷酸链为模板,将其与AgNO3作用,折叠形成C-Ag-C结构,后采用NaBH4为还原剂合成银纳米簇。通过荧光分光光度计、透射电子显微镜(TEM)等表征方式探讨了银纳米簇与DTT的作用关系。其作用原理是基于DTT中巯基(SH)对银纳米簇有很强的结合力,Ag接受SH中S原子提供的电子形成Ag-S化合物,致使银纳米簇被封闭,影响其电子能量转移,使得银纳米簇较强的荧光发生淬灭。该传感器可用于细胞裂解液中DTT的检测,在生物化学监测领域有较好的应用前景。3、基于Cu2+催化对dnazyme的特异性剪切作用,设计了简单的非标记裂解dnazyme检测Cu2+的荧光传感器。铜核酶与铜底物结合生成含有双链和三链区域的dna,在Cu2+的催化作用下,铜底物被特异性剪切,双链区域断开成单链,荧光染料SYBR Green Ⅰ仅能嵌入三链区域产生较无Cu2+体系更弱的荧光,从而达到对Cu2+的定量检测。该传感器只需dnazyme、L-抗坏血酸、Cu2+、SG,无需预处理、操作简便、反应成本低,整个操作过程绿色、环保,且选择性较好,响应快速。

关键词： dna核酶 dna分子机器 dna银纳米簇荧光铜离子 1,4-二硫苏糖醇

高亮度dna银簇的筛选合成及保健食品掺假物的检测应用

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

高亮度DNA银簇的筛选合成及保健食品掺假物的检测应用

作者：潘欣悦江南大学

学位级别：硕士

长期食用含有抗生素残留的食物或者违法添加抗生素药物的保健品可能会导致人体诸多疾病的产生,如间质性肺炎、皮肤过敏等。卡托普利是临床治疗高血压及充血性心力衰竭等疾病的重要药物之一,博来霉素是用于治疗多种癌症的糖肽类抗生素。... 详细信息

长期食用含有抗生素残留的食物或者违法添加抗生素药物的保健品可能会导致人体诸多疾病的产生,如间质性肺炎、皮肤过敏等。卡托普利是临床治疗高血压及充血性心力衰竭等疾病的重要药物之一,博来霉素是用于治疗多种癌症的糖肽类抗生素。近年来,有报道显示卡托普利和博来霉素存在因药效显著而被非法添加到中成药或保健品中的现象。因此,对卡托普利和博来霉素进行定量监测具有重要意义。以dna为模板的银纳米簇(dna-AgNCs)合成方法简单、光学性能良好、生物毒性低,集目标识别和信号输出于一体,已被广泛应用于食品安全、环境危害分析、医疗诊断和细胞成像等领域。由于dna-AgNCs的荧光特性高度依赖于其模板,合成银簇的模板dna尤为重要。然而,dna模板的筛选大多采用大批量随机筛选法,不仅费时费力,而且随机过程限制了高亮度模板的筛选效率。因此,本论文通过定向筛选的方式获得了可用于合成具有高亮度、高量子产率银簇的dna模板,并采用合成的dna-AgNCs为信号探针,以卡托普利和博来霉素为检测对象,建立了无标签、低成本、高灵敏度的荧光检测方法。具体工作内容如下:(1)自主设计了二十一条基于C、G碱基规律变化的dna序列,作为合成银簇的模板,测定相应dna-AgNCs的荧光激发/发射光谱和荧光强度值。并通过两步筛选,分别得到了双链dna模板序列CCCGGG24和单链dna模板序列CCCGGG-3。合成的CCCGGG24-AgNCs和CCCGGG-3-AgNCs的荧光量子产率分别达到26.16%和27.99%。(2)优化了温度、硝酸银添加量和硼氢化钠添加量三个合成条件,最佳合成条件为dna:AgNO:Na BH=1:18:6、40°C、4 h。相比于传统的一锅合成法,合成时间大大缩短,有利于银簇的快速检测应用。(3)利用合成好的CCCGGG24-AgNCs发展了一种快速检测卡托普利的新方法。卡托普利分子中的巯基可与dna竞争银原子,导致dna-AgNCs的荧光猝灭。方法学验证结果表明,体系的荧光猝灭程度与卡托普利的浓度在0.1-0.8μg/m L的范围内呈线性关系,线性方程为y=1.11647x-0.00397(R=0.99467),检测限为0.0447μg/m L。选择性、准确度和回收率结果表明该检测方法对卡托普利表现出良好的特异性、稳定性和重复性。(4)利用合成好的CCCGGG-3-AgNCs发展了一种快速检测博来霉素的新方法。活化的博来霉素可诱导dna发生不可逆的链断裂,导致dna-AgNCs的荧光猝灭。方法学验证结果表明,银簇的荧光猝灭程度与博来霉素的浓度在25-400 nmol/L的浓度范围内呈线性关系,线性方程为y=-59.857x+46124(R=0.9973),检测限为4.27 nmol/L。该检测方法具有较高的灵敏度,良好的选择性、稳定性和重复性。

关键词： dna银纳米簇合成优化卡托普利博来霉素

dna核酶滚环扩增及金属纳米簇传感方法研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

DNA核酶滚环扩增及金属纳米簇传感方法研究

作者：李盼盼长沙理工大学

学位级别：硕士

随着科学研究的快速发展,功能核酸的发现使人们的视野得到了拓宽,使人们对核酸只作为载体用来转运和存储遗传信息的的传统观念得以打破,使人们对核酸的理解进一步加深,并且为研究生物分子领域提供了一种新的活性物质。同时,由于具有容... 详细信息

随着科学研究的快速发展,功能核酸的发现使人们的视野得到了拓宽,使人们对核酸只作为载体用来转运和存储遗传信息的的传统观念得以打破,使人们对核酸的理解进一步加深,并且为研究生物分子领域提供了一种新的活性物质。同时,由于具有容易操作、特异性强和高的灵敏度等优点,滚环扩增技术已经受到人们的广泛关注。利用单链dna稳定的荧光银纳米簇,由于具有良好的光学和光物理特性,近年来已发展成为常用的纳米荧光探针。本文借助dna核酶分子机器及滚环扩增反应,并结合银纳米簇等荧光纳米探针技术,以铜离子、核酸酶及氨基酸为检测对象,开展以下主要工作:构建了一种以dna核酶分子机器及滚环扩增反应为基础的荧光法用于铜离子(Cu)的定量检测。在无铜离子的情况下,模板链竞争夺取核酶底物链进行互补配对,当存在E.coli dna连接酶时,使模板链连接成环,继而以底物链作为引物,当存在phi29 dna聚合酶时,可以引发滚环扩增反应(RCA),产生长的dna链产物,可杂交事先设计好的分子信标,继而使体系产生强的荧光信号。当存在铜离子时,铜离子诱发dna核酶底物链的断裂,断裂的底物链无法在E.coli dna连接酶存在时,使模板链连接成环,继而不能使RCA有效进行,最终导致体系的荧光信号大幅度降低。此传感器在Cu含量1 nMμM范围内产生优良的线性响应性能,R=0.9947,计算得出可检测铜离子的最低含量为0.6792nM。该方案有很好的反应效益比,开拓采用dnazyme分子机器及滚环扩增反应用于有效测试金属离子含量的生物传感器的新思路。以单链dna稳定的银纳米簇作为功能化探针,开展了一种无标记荧光法来对核酸酶(S1)进行定量检测。由于核酸酶(S1)可以特异性识别单链dna,在最佳的环境条件下,可将其降解为单核苷酸或寡核苷酸片段。当体系中有核酸酶(S1)存在时,作为模板的单链dna被特异性识别并降解,导致荧光银纳米簇无法合成,致使体系的荧光强度信号降低。从实验结果可以看出,在核酸酶(S1)含量持续增加时,银纳米簇的荧光信号强度不断降低。在最优的实验条件下,体系的信号参数(F/F)与S1核酸酶的含量在5×10×10 U/μL范围内呈线性关系,检出限为2×10 U/μL。该方法在RPMI 1640细胞培养基中得到的回收率为91.75%09.5%,因此该方法对样品中S1核酸酶的检测具有一定的可行性。以dna为模板合成银纳米簇,且在L-半胱氨酸(L-Cys)的存在下,L-Cys中的巯基(SH)夺取C-Ag-C中的Ag,使得无法形成银纳米簇从而银纳米簇的荧光信号降低,进而实现对L-Cys的定量检测。在最优的实验条件下,L-Cys含量的对数值与该传感体系的荧光信号强度在2 nM0μM范围内呈现出较好的线性响应关系,计算得出检测下限为0.2 nM。该传感检测体系在干扰性考察中表现出好的选择性,并且还可用来检测实际样品。

关键词：功能核酸滚环扩增 dna银纳米簇铜离子 S1核酸酶 L-半胱氨酸荧光光谱分析

dna银簇合成及基于酶辅等温信号放大的检测方法研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

DNA银簇合成及基于酶辅等温信号放大的检测方法研究

作者：沈福苗江南大学

学位级别：硕士

以dna为模板的银纳米簇（dna-AgNCs）由于其合成简便、尺寸小、量子产率较高、荧光光谱可谐调、生物相容性好等性质,受到研究者关注,其在食源性致病菌、病毒、毒素,以及农兽药残留等食品安全领域的检测应用近几年被广泛报道。但由于dna... 详细信息

以dna为模板的银纳米簇（dna-AgNCs）由于其合成简便、尺寸小、量子产率较高、荧光光谱可谐调、生物相容性好等性质,受到研究者关注,其在食源性致病菌、病毒、毒素,以及农兽药残留等食品安全领域的检测应用近几年被广泛报道。但由于dna模版序列和结构对AgNCs荧光性质的影响机理尚未被清楚阐明,导致其合成具有一定的盲目性,高量子产率的dna-AgNCs也较少报道,一定程度上限制了其应用。本论文研究了dna模板的碱基序列以及二级结构对dna-AgNCs荧光性质的影响,探索了其间的相关性规律,得到具有高量子产率的dna-AgNCs。其次使用此高量子产率dna-AgNCs作为信号输出,借助酶辅等温信号放大技术,设计两种检测方案,建立了高特异性、高灵敏的核酸检测方法,方法具有一定的通用性,其在食品检测领域具有良好的应用前景。论文的主要研究内容如下:（1）开展以dna发夹结构为模版的AgNCs（Hairpin-AgNCs）合成研究,研究了缓冲液、pH、硝酸银浓度、硼氢化钠浓度、反应时间等合成条件,以及茎序列中AT/GC含量、分布,以及茎部长度对Hairpin-AgNCs荧光的影响。数据显示随着茎部GC碱基含量比例的增加,AgNCs发射波长逐渐红移,在过程中由单荧光发射波长变为双荧光发射,pH和银离子浓度对AgNCs的波长也有协同影响作用,高pH条件和高银离子浓度均下有利于红光AgNCs的形成,GC碱基的比例对荧光发射波长具有决定性作用。特定的碱基分布有助于产生强荧光AgNCs。在一定范围内随着茎部长度增加,AgNCs的荧光增强。结合碱基序列以及长度研究结果,最后得到一种量子产率（QY）高达69.2%的Hairpin-AgNCs。（2）为了研究dna空间结构对AgNCs荧光性质的影响,研究使用一个由三条单链dna组装而成的“灯泡”状dna结构合成AgNCs。实验中使用随机序列的dna“灯泡”合成得到具有较高荧光亮度的AgNCs（QY=17.2%）,数据显示其具有更大的尺寸（平均直径=3.36 nm）和优异的稳定性（一周后保持96.6%）,并证明了结构对AgNCs形成的决定性作用。当更换“灯丝”和“灯壳”时,相比于“灯丝”合成的AgNCs,“灯泡”合成AgNCs显示出明显的结构增强荧光的效应。序列研究显示,“灯泡”合成AgNCs的峰值波长和“灯丝”中C碱基的比例相互关联,C比例越大则发射波长越大,AgNCs随C碱基数量增加呈现荧光增强的趋势。（3）基于研究得到的高量子产率的Hairpin-AgNCs以及外切酶辅助循环放大检测技术设计了一个dna检测方案。此方案所用试剂少,实验设计相对简单,并创造性的使用了三通结结构辅助外切酶III酶切,酶切效率最大可提高9倍,同时只需单一的无需特定识别位点的外切酶III即可实现目标链循环利用破坏大量的Hairpin-AgNCs探针从而放大检测信号。此方法用于dna检测时具有很好的选择性,线性范围为5.0 nmol/L~50.0 nmol/L,检出限为2.8 nmol/L。（4）基于链置换等温扩增（SDA）技术模型和已有相关文献,提出了一种循环式等温信号放大技术,使用自筛选得到的高量子产率Hairpin-AgNCs,建立了RNA的高灵敏荧光检测方法。此技术方案设计了两阶段的链置换等温扩增循环,极大的提高了放大倍数,结果显示,目标链加入后诱导高效的核酸扩增过程,最后在聚合酶的作用下,由于模版结构被破坏,Hairpin-AgNCs荧光信号显著降低。方法线性范围为0.02 nmol/L~1.0nmol/L,检测限为17.8 pmol/L,同时具有很好的选择性,回收率为82.1%~106.6%。

关键词： dna银纳米簇等温信号放大工具酶核酸检测

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

基于dna银簇的牛奶中氯霉素检测方法研究

基于DNA银簇的牛奶中氯霉素检测方法研究

作者：李恒超江南大学

学位级别：硕士

长期食用含有抗生素残留的食物可能会导致人类患诸多疾病,如心血管衰竭、肠炎胃炎、肝肾功能损伤、过敏反应等。氯霉素(CAP)是目前最常见的残留抗生素之一,近几年的报道显示,CAP在动物源性食品中的检出率很高,因此需要发展快速高灵敏的... 详细信息

长期食用含有抗生素残留的食物可能会导致人类患诸多疾病,如心血管衰竭、肠炎胃炎、肝肾功能损伤、过敏反应等。氯霉素(CAP)是目前最常见的残留抗生素之一,近几年的报道显示,CAP在动物源性食品中的检出率很高,因此需要发展快速高灵敏的检测方法增强对CAP的残留监测。以dna为模板的银纳米簇(dna-AgNCs)具有合成简便、波长可调、制备成本低等优点,基于dna-AgNCs构建的各类传感器,具有多色检测、灵活信号输出等特点,近些年受到研究者的广泛关注,并应用于化学分析、环境检测、食品安全、疾病诊断、医学治疗等领域。本论文以CAP为检测对象,基于CAP适配体设计识别探针,使用dna-AgNCs作为探针的信号输出方式,设计了三种CAP荧光检测方案,内容如下:(1)构建了基于CAP适配体自模板的“on-off”荧光检测方法。基于C-Ag-C介导CAP适配体形成发卡结构原理,以该发卡为模板开展dna-AgNCs合成条件研究,优化了硝酸银与dna浓度比、缓冲液类型、p H、反应时间等合成条件,得到量子产率为16.36%的dna-AgNCs;进而基于CAP对该dna-AgNCs的猝灭响应,建立了检测CAP的荧光方法,此方法设计简单,可在常温下实现对CAP的快速检测,在0.5-20 nmol/L的CAP浓度范围内,荧光强度和CAP浓度之间有着良好的线性关系,得到的线性方程为Y=0.02867X+0.15709,R=0.997,最低检出限为0.052 nmol/L。(2)借助足点介导的链置换反应技术,建立了基于dna三通结的“off-on”CAP检测方法。开展三通结探针设计研究,包括适配体互补数、三通结碱基臂长、AgNCs模板序列等,使用三通结探针合成了具有良好荧光量子产率(17.54%)的dna-AgNCs,并对其进行了TEM表征;开展缓冲液类型、p H、反应时间等实验条件优化,建立了CAP的“off-on”荧光检测方法,在1-10 nmol/L的浓度范围内,荧光强度和CAP浓度之间有着良好的线性关系,得到的线性方程为Y=0.0484X+0.8523,R=0.9981,最低检出限为0.89 nmol/L。(3)发展了基于dimer银簇及dna三通结的双信号比率检测方法。首先通过一系列的合成筛选得到了具有红色和黄色荧光发射的dna-AgNCs,对其进行了TEM表征,其次通过电泳及荧光实验优化了三通结探针的碱基连接数量,进而优化了温度、银簇合成参数、硝酸银、硼氢化钠和dna的浓度比、缓冲液类型、p H等反应条件,建立了比率型CAP荧光检测方法,在0.01-0.5 nmol/L的浓度范围内,荧光强度和CAP浓度之间有着良好的线性关系,得到的线性方程为Y=1.0543X+0.0867,R=0.9887,最低检出限为9.8 pmol/L。

关键词：食品安全氯霉素适配体 dna银纳米簇