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The Potential of Duck Hepatitis Virus(dhv-1) Stimulating the Body Weight Gain and the Effects of Silymarin on It in Duckling

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Agricultural Sciences in China 2009年第11期8卷 1403-1408页

作者： LIU Wei-min WANG Bing-yun CHEN Jian-hong WANG Jun JI Hui-qin YUAN Sheng HUANG De-chun LI Kang-lin College of Life Science Foshan University Foshan 528231 P.R.China

To evaluate the effects of duck hepatitis virus-1 （dhv-1） on the body weight gain in duck and the effects of silymarin on it in vivo, 100 10-d-old ducks, both male and female, were collected to be subjected to the test. The experiments were conducted in 8 groups： in group 1-3, the animals were inoculated with 1：105 diluted duck hepatitis virus （dhv-1） infected allantoic fluid and given 0, 30, and 50 mg kg^-1 BW d^-1 silymarin orally, respectively. In group 4-6, the animals were inoculated with 1：5 × 105 diluted dhv-1 infected allantoic fluid and given 0, 10, and 30 mg kg^-1 BW d^-1 silymarin orally, respectively. In group 7, the animals were given 10 mg kg^-1 BW d^-1 silymafin only. Group 8 was the control one treated by injecting sterillized saline into the leg muscles. All the silymarin was given from 0 to 4 d after inoculation of the virus. By the 5th d after inoculation, the vein blood was drawn from the dorsal foot vein and the plasma samples were collected and stored at -20℃. The body weight gain （BWG） was measured from 0 to 10 d after inoculation. The plasma IGF-I, T3, and T4 concentrations were measured by radioimmunoassay （RIA）. At the virus dose of 1：5 ×105 diluted virus infected allantoic fluid, the inoculation of the virus enhanced the BWG significantly compared with that of the control （P〈 0.01）, while 10-50 mg kg^-1 BW d^-1 silymarin could counteract the effects of the virus on the BWG dose-dependently. The plasma IGF-I levels showed no correlation with the BWG, but the T3 levels showed a same tropism with the body weight gain. The present results indicated that sublethal dhv-1 enhanced the body weight gain of ducklings significantly, and the silymarin could counteract this effect in vivo.

关键词： duck hepatitis virus-l dhv body weight gain silymarin infection duckling

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dhv对雏鸭肝组织中SOD和GSH-Px活性的影响

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中国预防兽医学报 2003年第1期25卷 44-46页

作者：赵海全王丙云冯军吴培源王凯佛山科学技术学院动物医学系广东南海528231

用不同毒力株鸭肝炎病毒人工感染雏鸭 ,分别于 1、3、5、7天测定雏鸭肝组织中超氧化物歧化酶 (SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH_Px)的活性 ,研究SOD和GSH_Px在鸭病毒性肝炎 (DVH)发病过程中的作用。结果表明 ,雏鸭感染不同毒力株鸭肝炎... 详细信息

用不同毒力株鸭肝炎病毒人工感染雏鸭 ,分别于 1、3、5、7天测定雏鸭肝组织中超氧化物歧化酶 (SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH_Px)的活性 ,研究SOD和GSH_Px在鸭病毒性肝炎 (DVH)发病过程中的作用。结果表明 ,雏鸭感染不同毒力株鸭肝炎病毒后 1天 ,肝组织匀浆中的SOD和GSH_Px活性均下隆 ;3天时弱毒株组 ( 1 78.1 9± 1 7.5 9) ,和中毒株组 ( 1 65 .73± 1 7.2 1 )肝组织中SOD活性都显著低于对照组 ( 1 98.0 2± 8.64) ,强毒株组 ( 1 5 5 .1 1± 1 4.3 4)则极显著低于对照组 ;5天时实验组肝组织中SOD和GSH_Px活性均显著或极显著低于对照组。

关键词：肝组织 dhv 雏鸭 SOD GSH-Px 酶活性病毒性肝炎发病机理自由基

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鸭肝炎病毒(dhv-1)及水飞蓟素对雏鸭生长的影响

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中国农业科学 2008年第5期41卷 1519-1523页

作者：刘为民王丙云陈建红王军计慧琴袁生黄德纯李康林佛山科学技术学院生命科学学院佛山科学技术学院生命科学学院广东佛山528231

【目的】观察雏鸭接种亚致死量鸭肝炎病毒后生长速度的改变及水飞蓟素对其的影响。【方法】100只雏鸭分为8组,于10日龄接种病毒。第1、2、3组腿肌接种105倍稀释的病毒尿囊液,并分别口服0、30、50mg·kg-1bw·d-1的水飞蓟素;第4、5、6组... 详细信息

【目的】观察雏鸭接种亚致死量鸭肝炎病毒后生长速度的改变及水飞蓟素对其的影响。【方法】100只雏鸭分为8组,于10日龄接种病毒。第1、2、3组腿肌接种105倍稀释的病毒尿囊液,并分别口服0、30、50mg·kg-1bw·d-1的水飞蓟素;第4、5、6组腿肌接种5×105倍稀病毒尿囊液并分别口服0、10、30mg·kg-1bw·d-1的水飞蓟素;第7组为水飞蓟素对照组,不接种病毒,但口服水飞蓟素10mg·kg-1bw·d-1;第8组为空白对照组,仅腿肌注射0.2ml灭菌生理盐水。水飞蓟素连续给药5d,于攻毒的第5天采集血浆,测定血浆T3、甲状腺素(T4)、IGF-Ⅰ浓度。于攻毒后10d测定体重。【结果】用5×105倍稀释病毒尿囊液接种雏鸭,动物显示出显著高的生长速度(P<0.01,与对照组比较),此种效应可被口服水飞蓟素剂量依赖性的抑制。T4水平在接种病毒后极显著的降低,未见水飞蓟素对其显著的影响,生长速度与血浆T3水平在一定程度上呈正相关关系,与IGF-Ⅰ水平相关性不强。【结论】亚致死量鸭肝炎病毒可显著促进雏鸭的生长,水飞蓟素可拮抗病毒的这种作用,血浆T3水平与动物生长速度关系密切。

关键词： J型鸭肝炎病毒 dhv 增重水飞蓟素感染雏鸭

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dhv对雏鸭肝组织中SOD活性和MDA含量的影响

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河南农业科学 2002年第7期31卷 43-45页

作者：赵海全王丙云冯军莫小坚佛山科学技术学院动物医学系广东南海528231

用不同毒力株鸭肝炎病毒人工感染雏鸭 ,分别于 1 ,3 ,5 ,7天测定雏鸭肝组织中丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶 (SOD)的活性 ,并研究MDA和SOD在鸭病毒性肝炎 (DVH)发病过程中的作用。结果表明 :雏鸭感染不同毒力株鸭肝炎病毒后 ,强毒... 详细信息

用不同毒力株鸭肝炎病毒人工感染雏鸭 ,分别于 1 ,3 ,5 ,7天测定雏鸭肝组织中丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶 (SOD)的活性 ,并研究MDA和SOD在鸭病毒性肝炎 (DVH)发病过程中的作用。结果表明 :雏鸭感染不同毒力株鸭肝炎病毒后 ,强毒株组雏鸭肝组织MDA含量均显著或极显著高于对照组 ,而弱毒株组和中毒株组的肝组织MDA含量只在感染的中后期即分别在 5天和 3天以后才显著高于对照组 ;中毒株组和强毒株组的肝组织SOD活性均显著或极显著低于对照组 ,弱毒株组肝组织SOD活性在 3天以后才显著低于对照组。

关键词： dhv 雏鸭肝组织 SOD活性 MDA含量病毒性肝炎超氧化歧化酶丙二醛

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dhv-Ⅰ单克隆抗体的制备与胶体金试纸条的研制

DHV-Ⅰ单克隆抗体的制备与胶体金试纸条的研制

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作者：辛英豪山东农业大学

学位级别：硕士

鸭病毒性肝炎是由鸭肝炎病毒(dhv, duck hepatitis virus)引起的主要发生于3周龄以下雏鸭的一种传播迅速、致死率高的传染病(Woolcock, P.R. et al. 2003 )。本课题对dhv-Ⅰ病毒结构蛋白VP1进行了原核表达,制备了抗dhv-Ⅰ的单克隆抗体,... 详细信息

鸭病毒性肝炎是由鸭肝炎病毒(dhv, duck hepatitis virus)引起的主要发生于3周龄以下雏鸭的一种传播迅速、致死率高的传染病(Woolcock, P.R. et al. 2003 )。本课题对dhv-Ⅰ病毒结构蛋白VP1进行了原核表达,制备了抗dhv-Ⅰ的单克隆抗体,研制了检测dhv-Ⅰ的胶体金试纸条。通过RT-PCR方法扩增dhv-ⅠVP1基因片段,并定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,得到的重组质粒转化进大肠杆菌Rosetta(DE3)PLys中,利用IPTG诱导表达得到大小为47KD的融合蛋白;Western blot分析发现该重组蛋白能与抗dhv-Ⅰ阳性血清进行反应,具有良好的免疫学活性。用纯化的dhv-Ⅰ病毒作为抗原免疫BALB/C小鼠并建立了间接ELISA筛选方法。经反复试验确定了间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞株的最佳反应条件,即纯化的抗原以1:800稀释,4℃包被过夜,以1:4000稀释阴、阳性血清分别作为阴阳性对照,反应条件以37℃90min为最佳,酶标二抗的工作浓度为1:1000稀释。取免疫小鼠脾脏与骨髓瘤细胞进行融合,以建立的间接ELISA筛选方法对融合的杂交瘤细胞进行检测筛选,经过初检、二检、三检共获得阳性杂交瘤细胞株21株,利用有限稀释法进行了3-4次亚克隆(其中最少有两次为单克隆)后获得5株能稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株,分别命名为1E10、4F8、4E6、5G4、5E11。对这5株杂交瘤细胞株的稳定性、染色体数、亚类、腹水效价、特异性进行了鉴定,结果如下:经连续传代20次和冻存后4个月复苏检测,其分泌抗体的能力差异不显著,稳定性好;染色体数介于100～110之间,具有典型的杂交瘤细胞染色体特征;经亚类鉴定,1E10、4F8、4E6、5G4、5E11杂交瘤分泌的抗体类型分别为IgG2b、IgM、IgG1、IgM、IgG1;单抗腹水效价分别为1:400,1:8000,1:8000,1:32000,1:16000;并具有很好的特异性。通过硫酸铵沉淀法对腹水单克隆抗体进行纯化并测定了其蛋白含量;在确定标记单克隆抗体最低稳定量后,成功制备了金标单克隆抗体;经反复摸索确定了NC膜最佳包被单克隆抗体的量为1mg/mL,羊抗鼠最佳包被浓度为1:10稀释,同时两者按照1μL/cm喷膜;选择Ahlstrom8964和GRADE7589分别作为金标垫和样品垫制备胶体金试纸条。分别用样品稀释液和病毒液作为阴阳性对照检测试纸条,结果阴性对照只出现质控线而病毒稀释液出现检测线和质控线。临床检测结果表明该胶体金试纸条特异、敏感,可用于dhv-Ⅰ的快速诊断。

关键词： dhv 原核表达单克隆抗体胶体金免疫层析试纸条

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“禽康散”对DPV和dhv感染鸭胚及成纤维细胞的保护效应研究

“禽康散”对DPV和DHV感染鸭胚及成纤维细胞的保护效应研究

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作者：刘小雪四川农业大学

学位级别：硕士

鸭瘟是由鸭瘟病毒(DPV)引起鸭和鹅的一种急性接触性传染病。不同年龄和品种的鸭均可感染该病毒,以麻鸭、番鸭和绵鸭感染性最高。在自然流行中,成年鸭和产蛋母鸭发病和死亡较严重。鸭病毒性肝炎是由鸭病毒性肝炎病毒(dhv)引起小鸭的一种... 详细信息

鸭瘟是由鸭瘟病毒(DPV)引起鸭和鹅的一种急性接触性传染病。不同年龄和品种的鸭均可感染该病毒,以麻鸭、番鸭和绵鸭感染性最高。在自然流行中,成年鸭和产蛋母鸭发病和死亡较严重。鸭病毒性肝炎是由鸭病毒性肝炎病毒(dhv)引起小鸭的一种高度致死性病毒传染病。病的特征是发病急、传播快、死亡率高。本病发病急,传播迅速,一般死亡多发生在3-4d内。雏鸭的发病率和死亡率均很高,1周龄内的雏鸭病死率可达95%。鸭瘟和鸭病毒性肝炎主要通过疫苗接种种鸭以及雏鸭来预防。众多文献报道,多种中药的有效成分在细胞内和胚内对病毒具有明显的拮抗作用。同时,通过近几年的研究表明,复方中药“禽康散”对禽类的多种细菌性疾病、病毒性疾病均有预防和治疗作用,对机体免疫力的提高亦有促进作用。鉴此,开展了“禽康散”对鸭瘟病毒和鸭病毒性肝病毒的抑制作用研究。本试验以复方中药“禽康散”的水煎剂为研究对象,在鸭胚和鸭胚成纤维细胞两个层面上研究其对鸭瘟和鸭病毒性肝炎病毒的抑制效果及其作用机理,为更深入研究该中药方剂对鸭传染病的防治提供试验数据和支持。试验一、“禽康散”对DPV、dhv感染鸭胚的保护效应研究将48枚10日龄非免疫鸭胚随机分为6组,每组8枚。中药杀毒组分别将100mg、25mg中药与0.1ml 100ELD50的病毒液先感作1h后进行鸭胚尿囊膜接种;中药预防组先分别接种100mg、25mg中药24h后,再接种0.1ml 100ELD50的病毒液;阳性对照组接种0.1ml 100ELD50病毒液和0.1ml细胞维持液;阴性对照组接种0.2ml PBS液。试验结果：阳性对照组鸭胚分别在120h、144h内全部死亡;高剂量预防组(1 OOmg禽康散)对dhv、DPV感染的鸭胚保护率分别为100%、87.5%;低剂量预防组(25mg禽康散)对dhv、DPV感染的鸭胚保护率分别为62.5%、50%;高剂量杀毒组(100mg禽康散)对dhv、DPV感染的鸭胚保护率分别为50%、25%;低剂量杀毒组(25mg禽康散)对dhv、DPV感染的鸭胚保护率分别为25%、12.50%。试验结果表明,“禽康散”在10日龄鸭胚内对dhv和DPV具有显著的杀灭和阻断感染的作用。试验二、“禽康散”对鸭胚成纤维细胞(DEF)增殖的影响取培养良好的DEF培养板,每孔分别加入0、2-4、2-5、2-6、2-7、2-8g/ml中药提取液100μl,每个浓度重复4孔;重复5个细胞板。分别在加药后12h、24h、36h、48h、60h时各取1个细胞板,用MTT法测定细胞增殖情况。试验结果表明,“禽康散”对鸭胚成纤维细胞的最大安全浓度为2-4g/ml,在2-4-2-8g/ml浓度范围内对细胞有显著的增殖作用,其中2-5g/ml的中药提取液对DEF的增殖作用最强。试验三、“禽康散”对DPV和dhv人工感染鸭胚成纤维细胞的保护效应研究采用了三种不同加样方式：①不同浓度药液(2-4-2-8g/ml)与100TCID50病毒液(dhv、DPV)等体积混合后37℃作用4h,取200μl接种到DEF内;②先接种100μl病毒液,4h后再分别加入各浓度梯度药液100μl;③先加入各浓度药液100μl,4h后再接种病毒100μl。空白对照组(细胞维持液200μl);阳性对照组(dhv或DPV病毒100μl,细胞维持液100μl)。结果表明：“禽康散”提取液各浓度均在一定程度上降低了dhv、DPV抑制DEF生长的作用;先加入药液的中药预防组效果优于其余两种。禽康散减弱dhv对DEF的抑制作用在2-6-2-4g/ml浓度时,采用先加药液后接种病毒的方式效果最好,与药物阴性对照组相比,差异极显著(P<0.01)。禽康散减弱DPV对DEF的抑制作用在2-5-2-4g/ml浓度时,采用先加药液后接种病毒的方式效果最好与药物阴性对照组相比,差异极显著(P<0.01)。

关键词： DPV dhv “禽康散”提取液鸭胚成纤维细胞

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六边形的森林幕墙——荷兰dhv建筑事务所总部

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中国建筑装饰装修 2011年第8期 146-151页

作者： Roel Brouwers 荷兰dhv事务所 dhv事务所总部

《中装》：设计师自己办公空间的设计将设计师和业主台二为一，此种情况下您觉得什么是首要考虑的因素？***在这种情况下，项目的设计与其他项目没有什么差异。我们首先考虑的是为客户提供最佳的服务。在荷兰，可持续性的翻修项目已不... 详细信息

《中装》：设计师自己办公空间的设计将设计师和业主台二为一，此种情况下您觉得什么是首要考虑的因素？***在这种情况下，项目的设计与其他项目没有什么差异。我们首先考虑的是为客户提供最佳的服务。在荷兰，可持续性的翻修项目已不少见。

关键词：建筑事务所荷兰 dhv 六边形幕墙森林设计师办公空间

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北京小鸭病毒性肝炎的研究——(四)用对流免疫电泳技术检测母鸭卵清的抗dhv物质

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畜牧兽医学报 1982年第1期 51-55页

作者：潘文石北京大学生物学系

本试验取同一份小鸭病毒性肝炎病毒(dhv)强毒作抗原,通过对流免疫电泳检测免疫母鸭和非免疫母鸭卵清的抗 dhv“阳性率”,发现前者的“阳性率”显著高于后者。对非免疫母鸭卵清出现“阳性反应”的问题进行了讨论。

关键词：母鸭免疫注射阳性反应对流免疫电泳免疫电渗电泳 dhv 阳性率琼脂板病毒性肝炎病毒传染性肝炎病毒病物质北京

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NDV与dhv于鸭胚培育时均无鸡红细胞血凝易忽视两者的混合感染

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畜牧兽医学报 1988年第4期 257-260页

作者：刘振寰江西生物药厂

从雏鸭流行病群的病料,获一分离物。它致死非免鸡胚和无母源NDV抗体一日龄来杭雏鸡100％;免疫中雏,11天后NDVF48E8强毒攻击得安全结果。也能致死一日龄实验雏鸭50～100％;分别与NDV和dhv阳性血清中和,各自接种10只一日龄雏鸭,前中和组... 详细信息

从雏鸭流行病群的病料,获一分离物。它致死非免鸡胚和无母源NDV抗体一日龄来杭雏鸡100％;免疫中雏,11天后NDVF48E8强毒攻击得安全结果。也能致死一日龄实验雏鸭50～100％;分别与NDV和dhv阳性血清中和,各自接种10只一日龄雏鸭,前中和组死雏鸭50％,后中和组全健活。最终实验证明该分离物,乃NDV自然弱毒株和dhv强毒株的混合物。发人兴趣的是以上混合毒在鸭胚繁殖时无鸡红细胞血凝,转接鸡胚一代,血凝度为1:16,二代为1:32～64。这一现象当以鸭胚分离时,易导致两者混合感染的忽视。

关键词：鸭胚 dhv 雏鸡分离物 NDV 混合感染鸡红细胞血凝

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间接免疫酶组化检测dhv方法建立及其抗原定位研究

间接免疫酶组化检测DHV方法建立及其抗原定位研究

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第三届第八次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：陈海军程安春汪铭书四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心

建立检测鸭肝炎病毒(Duck Hepatitis Virus,dhv)的免疫组化方法,为dhv感染的实验室诊断、感染雏鸭体内的dhv抗原亚细胞定位研究提供有效的检测手段,阐明dhv在感染细胞内繁殖部位。用蔗糖密度梯度离心提纯的dhv作为抗原免疫家兔制备兔抗... 详细信息

建立检测鸭肝炎病毒(Duck Hepatitis Virus,dhv)的免疫组化方法,为dhv感染的实验室诊断、感染雏鸭体内的dhv抗原亚细胞定位研究提供有效的检测手段,阐明dhv在感染细胞内繁殖部位。用蔗糖密度梯度离心提纯的dhv作为抗原免疫家兔制备兔抗dhv抗体,提纯IgG后成功建立了间接免疫酶组化(Indirect Immunoperoxidase Staining,IIS)检测石蜡组织切片中的dhv抗原的方法,并对dhv强毒人工感染1日龄雏鸭后死亡或濒临死亡雏鸭的各个组织器官进行检测。所建立的IIS只与dhv感染死亡或濒临死亡雏鸭的肝脏等出现阳性反应,而与鸭瘟病毒、鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌感染发病和死亡雏鸭的肝脏以及健康雏鸭的肝脏出现阴性反应,具有良好特异性。人工感染dhv死亡或濒临死亡雏鸭的肝脏、脾脏、肾脏、心脏、胸腺、法氏囊、胰腺、十二指肠、盲肠、空肠、回肠、直肠免疫组化检测呈阳性或强阳性,dhv抗原主要分布于感染细胞的细胞质。[结论]建立的检测石蜡组织切片中的dhv抗原的IIS具有良好特异性, 应用于dhv在感染雏鸭组织细胞中的亚细胞定位具有良好效果,也可用于dhv感染雏鸭的实验室诊断、甲醛固定组织的回顾性诊断。

关键词：免疫组化检测 dhv 雏鸭抗原定位

来源： cnki会议评论

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