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抑制GbMIOX5基因表达降低海岛棉对大丽轮枝菌的抗性

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植物生理学报 2022年第3期58卷 524-532页

作者：涂泽行曹爱萍王斐李鸿彬石河子大学生命科学学院新疆石河子832003 石河子大学绿洲城镇与山盆系统生态兵团重点实验室新疆石河子832003 石河子大学新疆植物药资源利用教育部重点实验室新疆石河子832003

由大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)引起的黄萎病病害是影响海岛棉的生长发育的重要因素,对棉花产量和品质等造成严重影响。虽然前人研究已经鉴定了一些参与棉花抗病的基因和蛋白,但是抗病的机制仍不清楚。本研究从海岛棉中鉴定获得一... 详细信息

由大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)引起的黄萎病病害是影响海岛棉的生长发育的重要因素,对棉花产量和品质等造成严重影响。虽然前人研究已经鉴定了一些参与棉花抗病的基因和蛋白,但是抗病的机制仍不清楚。本研究从海岛棉中鉴定获得一个编码肌醇加氧酶(myo-inositol oxygenase)的基因GbMIOX5,表达分析表明GbMIOX5显著受到大丽轮枝菌的诱导表达。为了分析GbMIOX5参与病原菌响应的功能,以海岛棉CLA1(Cloroplastos alterados 1)为标记基因,利用烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus,TRV)诱导的基因沉默技术构建沉默载体sTRV:GbMIOX5并转化海岛棉。GbMIOX5沉默植株中GbMIOX5的表达水平与对照相比显著降低;同时,GbMIOX5沉默植株对大丽轮枝菌的抗性显著降低,并表现出H_(2)O_(2)的显著累积及d-葡萄糖醛酸和抗坏血酸含量的显著降低。

关键词：海岛棉肌醇加氧酶大丽轮枝菌病毒诱导的基因沉默抗坏血酸 d-葡萄糖醛酸

基于多糖组成和含量的3种基原黄精质量比较和识别研究

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中草药 2019年第10期50卷 2467-2473页

作者：陶爱恩杜泽飞赵飞亚夏从龙段宝忠大理大学药学院云南大理671000

目的通过定性与定量分析,结合化学计量学方法,比较黄精3种基原植物中多糖的组成和含量差异,为黄精药材质量评价提供参考。方法采用红外光谱法(FTIR)和柱前衍生化-HPLC(PMP-HPLC)法比较3种基原黄精中多糖的差异;采用紫外光谱法(UV)测定... 详细信息

目的通过定性与定量分析,结合化学计量学方法,比较黄精3种基原植物中多糖的组成和含量差异,为黄精药材质量评价提供参考。方法采用红外光谱法(FTIR)和柱前衍生化-HPLC(PMP-HPLC)法比较3种基原黄精中多糖的差异;采用紫外光谱法(UV)测定总多糖含量。结果 3种基原黄精多糖的IR平均光谱和二阶导数图谱差异明显,主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-dA)及聚类分析(HCA)分析均可将3种基原的黄精加以区分;PMP-HPLC图谱显示3种基原黄精中多糖的单糖组成存在差异,共有成分为d-甘露糖、d-核糖、L-鼠李糖、d-半乳糖醛酸、d-葡萄糖醛酸、d-半乳糖、d-葡萄糖、d-木糖、d-阿拉伯糖和L-岩藻糖;结果表明,所测样品多糖含量符合《中国药典》2015年版的要求。结论本研究所建立方法为黄精类药材的多糖组成研究和质量评价提供了新的参考。

关键词：黄精 d-甘露糖 d-核糖 L-鼠李糖 d-半乳糖醛酸 d-葡萄糖醛酸 d-半乳糖 d-葡萄糖 d-木糖 d-阿拉伯糖 L-岩藻糖红外光谱柱前衍生化紫外光谱质量评价

三七药渣中主要多糖成分的分离纯化及其抗氧化活性研究

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中草药 2023年第1期54卷 100-111页

作者：曹玉标孙亮亮杨野崔秀明邱斌王承潇昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650500 云南省三七资源可持续利用重点实验室云南昆明650500 云南中医药大学中药学院云南昆明650500

目的分离纯化三七药渣中主要多糖组分,分析其单糖组成,并对比研究各组分多糖的抗氧化活性。方法采用水提醇沉法提取三七药渣粗多糖;经dEAE Fast Flow阴离子交换柱、Sephadex G-50柱色谱法进行分离纯化。采用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)... 详细信息

目的分离纯化三七药渣中主要多糖组分,分析其单糖组成,并对比研究各组分多糖的抗氧化活性。方法采用水提醇沉法提取三七药渣粗多糖;经dEAE Fast Flow阴离子交换柱、Sephadex G-50柱色谱法进行分离纯化。采用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)法测定其相对分子质量及纯度,通过扫描电子显微镜(ScanningElectronMicroscope,SEM)、傅里叶变换红外光谱仪(Fourier TransformInfraredspectroscopy,FT-IR)、HPLC-衍生化等方法对各组分多糖的单糖组成和初级结构进行分析。分析其抗氧化能力以及对RAW 264.7细胞氧化损伤的保护作用。结果分离得到3个多糖组分(PNPS-0、PNPS-0.2、PNPS-0.3),3者的单糖组成和比例存在差异:PNPS-0主要由d-葡萄糖(52.28%)和d-半乳糖(34.14%)组成;PNPS-0.2主要由d-半乳糖(40.89%)、d-阿拉伯糖(19.38%)和d-葡萄糖(12.25%)组成;PNPS-0.3主要由d-葡萄糖醛酸(40.43%)、d-半乳糖(22.61%)和d-葡萄糖(18.32%)组成。抗氧化结果表明,PNPS-0.3的总还原能力最强,对dPPH自由基、OH-自由基、ABTS自由基以及超氧阴离子自由基的清除活性最高,对RAW 264.7细胞氧化损伤保护作用最好,并呈现浓度相关性。结论从三七药渣中得到了3种具有抗氧化活性的多糖片段,抗氧化活性与多糖结构密切相关。为三七资源的二次开发利用提供了新的研究思路。

关键词：三七多糖构效关系单糖组成抗氧化药渣高效凝胶渗透色谱 d-葡萄糖 d-半乳糖 d-阿拉伯糖 d-葡萄糖醛酸

基于GC-MS的妇科千金胶囊挥发油治疗盆腔炎大鼠的血清代谢组学研究

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中药新药与临床药理 2020年第12期31卷 1462-1469页

作者：邓静林丽美张鹏凌勇根李亚梅夏伯候龚云湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室湖南中医药大学湖南长沙410208 株洲千金药业股份有限公司湖南株洲412000

目的基于气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术探讨妇科千金胶囊挥发油对盆腔炎大鼠血清中内源性标志物的影响,并初步探讨其作用通路。方法采用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、解脲脲原体混合感染复制大鼠盆腔炎模型。将Sd雌性大鼠随机分为正常对... 详细信息

目的基于气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术探讨妇科千金胶囊挥发油对盆腔炎大鼠血清中内源性标志物的影响,并初步探讨其作用通路。方法采用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、解脲脲原体混合感染复制大鼠盆腔炎模型。将Sd雌性大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、阳性药物组(康妇炎胶囊,0.42 g·kg^-1)和妇科千金胶囊挥发油组(6.3 mg·kg^-1),共5组,每组10只。每天灌胃1次,连续给药3周。模型复制结束后,应用GC-MS进行血清样品的分离和数据采集,以主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-dA)法筛选出相关差异代谢物,对己鉴定结构的代谢标志物通过MetaboAnalyst数据库进行代谢通路分析。结果PCA结果显示,正常对照组、模型组和给药组大鼠血清代谢物发生显著变化。OPLS-dA结果显示,与正常对照组比较,模型组中发现9个显著差异的代谢标志物(VIP>1,|P(corr)|>0.6);与模型组比较,妇科千金胶囊挥发油组中有7个显著差异的代谢标志物,最终确定2个共有差异标志物为尿素、d-葡萄糖醛酸。通路分析显示,差异性代谢物主要与抗坏血酸和醛糖二酸代谢途径有关。结论妇科千金胶囊挥发油对盆腔炎性疾病的干预作用可能与抗坏血酸和醛糖二酸代谢有关。

关键词：妇科千金胶囊挥发油盆腔炎血清代谢组学气相色谱-质谱联用尿素 d-葡萄糖醛酸抗坏血酸和醛糖二酸代谢通路大鼠

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咔唑法测定中华鲟软骨中硫酸软骨素的含量

安徽农业科学 2011年第19期39卷 11597-11598页

作者：周叶赵婷冯伟伟李芸子但招陵刘治华仰榴青江苏大学药学院江苏镇江212013

[目的]建立分光光度法测定中华鲟软骨中硫酸软骨素含量的方法。[方法]采用碱提-酶解法提取中华鲟软骨中硫酸软骨素,采用咔唑法,以d-葡萄糖醛酸为标准品,在硼砂-浓硫酸介质中经咔唑显色后,以蒸馏水为空白,于波长530nm处分别测定对照品溶... 详细信息

[目的]建立分光光度法测定中华鲟软骨中硫酸软骨素含量的方法。[方法]采用碱提-酶解法提取中华鲟软骨中硫酸软骨素,采用咔唑法,以d-葡萄糖醛酸为标准品,在硼砂-浓硫酸介质中经咔唑显色后,以蒸馏水为空白,于波长530nm处分别测定对照品溶液和供试品溶液的吸光度,按标准曲线计算葡萄糖醛酸含量,进而转换为硫酸软骨素含量。[结果]d-葡萄糖醛酸在10～50μg/ml范围内线性关系良好,回归方程为Y=0.015X-0.037(r=0.9997),3个不同浓度的加样回收率分别为100.87%、100.73%和101.29%(n=5),RSd值分别为2.74%、2.56%和2.22%。[结论]该方法快速,重现性好,可用作中华鲟软骨中硫酸软骨素含量的测定。

关键词：咔唑法硫酸软骨素 d-葡萄糖醛酸中华鲟软骨含量测定

基于质谱技术探讨血浆中糖醛酸途径代谢产物与肺动脉高压的相关性

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基于质谱技术探讨血浆中糖醛酸途径代谢产物与肺动脉高压的相关性

作者：欧阳忠华中南大学

学位级别：硕士

背景:特发性肺动脉高压(IPAH)是一种发病率仅次于地中海贫血的罕见病。患者中位生存数仅为2.8年,在接受治疗的情况下其一年死亡率仍高达15%,且目前临床仍无特效药。研究发现肺动脉高压存在与肿瘤类似的Warburg效应,即在有氧条件下,细胞... 详细信息

背景:特发性肺动脉高压(IPAH)是一种发病率仅次于地中海贫血的罕见病。患者中位生存数仅为2.8年,在接受治疗的情况下其一年死亡率仍高达15%,且目前临床仍无特效药。研究发现肺动脉高压存在与肿瘤类似的Warburg效应,即在有氧条件下,细胞也倾向于进行糖酵解来获取能量。这提示我们糖代谢途径紊乱在肺动脉高压的发生发展过程中扮演重要作用。糖醛酸途径是糖代谢的旁路之一,其产物尿嘧啶二磷酸葡萄糖醛酸(Uracil diphosphate-Glucuronic Acid,UdP-Glc UA)是组成糖胺聚糖(Glycosaminoglycan,GAG)的成分之一,而GAG又是组成细胞外基质的成分之一,细胞外基质可被细胞内的溶酶体降解最终生成d-葡萄糖醛酸(d-Glucuronic acid,d-Glc UA)。UdP-葡萄糖-6-脱氢酶(UdP-glucose 6-dehydrogenase,UGdH)是糖醛酸途径的关键酶,研究发现UGdH可以促进肿瘤细胞的迁移,可能作为前列腺癌的新领域特异性候选生物标志物。由于肺动脉高压表现出的与肿瘤相似的特征,鉴于糖醛酸途径代谢产物在肿瘤发展过程中的重要作用,而肺动脉高压表现出与肿瘤相似的代谢改变。因此我们有理由相信糖醛酸途径代谢产物在肺动脉高压发展过程中也扮演重要角色。目的:基于质谱定量技术,研究肺动脉高压大鼠模型下糖醛酸途径代谢产物的浓度变化,筛选出发生显著变化的代谢产物。分析其浓度与肺动脉高压血流动力学指标以及血管重构指标的相关性。在临床研究中证明该指标仍显著升高,并初步研究其浓度在人体内的变化趋势,为其后期作为肺动脉高压的诊疗指标提供依据。方法:(1)建立质谱定量技术:建立能同时准确、精密测试大鼠血浆和人血浆中d-Glc UA和UdP-Glc UA浓度的超高效液相色谱-质谱联用方法;(2)动物实验:构建大鼠肺动脉高压模型,采集血浆样本和肺组织样本,检测血浆样本中d-Glc UA和UdP-Glc UA的浓度,将其与健康对照组的浓度进行统计学分析,筛选出浓度显著变化的代谢物(Pd-Glc UA和UdP-Glc UA在50.000～1000.00ng·m L浓度范围内线性良好(r>0.99),建立的UPLC-MS/MS方法能同时、准确、精密的检测血浆中d-Glc UA和UdP-Glc UA的浓度;(2)构建的肺动脉高压大鼠模型与对照组相比,RVSP,RV/(LV+S)等血流动力学指数显著升高,HE染色显示肺血管重构明显;(3)相比于对照组,肺动脉高压大鼠血浆中d-Glc UA浓度显著升高(PdP-Glc UA。(4)血浆d-Glc UA浓度与右心室收缩压呈现极强相关(r=0.8094),血浆d-Glc UA浓度与右心肥厚指数(RV/(LV+S))呈现极强相关(r=0.8627),血浆d-Glc UA浓度与肺动脉血管重构程度呈现极强相关(r=0.8871);(5)相比于对照组,特发性肺动脉高压病人血浆中d-Glc UA浓度显著升高(PdP-Glc UA,结果与动物实验一致;(6)健康志愿者血浆中d-Glc UA浓度不受饮食等因素的干扰,在3天的监测时间内没有显著性变化(P>0.05),是一个相对稳定的指标。结论:(1)野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠血浆中d-Glc UA浓度相比于对照组显著升高,且与肺动脉血管动力学指标(右心室收缩压和右心肥厚指数)和肺动脉重构程度均呈现极强相关;(2)特发性肺动脉高压患者血浆中d-Glc UA浓度相比于健康志愿者显著升高,且其浓度不受高脂饮食等因素的干扰,是一个相对稳定的指标。图12幅,表12个,参考文献75篇

关键词：肺动脉高压 d-葡萄糖醛酸质谱定量技术

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透明质酸综述

大化科技 2001年第2期 1-2页

作者：郭美风李晓玲大化研究院

通过调研有关透明质酸的报导资料，本文从宏观角度上总结了透明酸的市场状况并同时对其未来投资收益前景作以相应分析。

关键词：透明质酸 d-葡萄糖醛酸 N-乙酸氨基葡萄糖生物发酵药用级综述

离子色谱法同时测定阿拉伯胶水解后的单糖和糖醛酸

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今日药学 2018年第11期28卷 727-729,739页

作者：王彩媚宋粉云广东药科大学广东广州510006 广东省药品检验所广东广州510180

目的采用离子色谱法同时测定阿拉伯胶经酸水解后的单糖和糖醛酸含量。方法采用CarboPac PA20色谱柱,流动相为氢氧化钠溶液和醋酸钠溶液,梯度洗脱的方式,流速为0.5 m L·min^(-1),柱温为30℃,积分安培检测器。结果鼠李糖、阿拉伯糖、半... 详细信息

目的采用离子色谱法同时测定阿拉伯胶经酸水解后的单糖和糖醛酸含量。方法采用CarboPac PA20色谱柱,流动相为氢氧化钠溶液和醋酸钠溶液,梯度洗脱的方式,流速为0.5 m L·min^(-1),柱温为30℃,积分安培检测器。结果鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、d-葡萄糖醛酸在0.5～10μg·m L^(-1)范围内与峰面积均呈良好的线性关系(r分别为0.999 3、0.999 4、0.999 5、0.999 8),平均加样回收率分别为99.1%(RSd=1.4%,n=6)、100.3%(RSd=1.1%,n=6)、98.1%(RSd=1.5%,n=6)、98.2%(RSd=1.2%,n=6)。结论本法操作简便、灵敏度高、结果准确可靠,可用于阿拉伯胶中单糖和糖醛酸的含量测定。

关键词：阿拉伯胶鼠李糖阿拉伯糖半乳糖 d-葡萄糖醛酸离子色谱法