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益气养阴方抑制Lewis肺癌及其调节ERα、cyclindl表达的实验研究

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益气养阴方抑制Lewis肺癌及其调节ERα、CyclinDl表达的实验研究

β-catenin up-regulates the expression of cyclinD1, c-myc and MMP-7 in human pancreatic cancer: Relationships with carcinogenesis and metastasis

2009年首届全国中西医肿瘤博士及中青年医师论坛

作者：李春杰孙建立刘苓霜上海市中医肿瘤临床医学中心上海中医药大学附属龙华医院肿瘤科

目的免疫组化法观察益气养阴方对C57BL/6小鼠Lewis肺癌瘤体雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)、CyclinD1蛋白表达的影响,探讨该方抑制肿瘤和抗转移作用的机理,以及ERα和CyclinD1表达的关系。方法24只C57BL/6小鼠随机分为3组,每组... 详细信息

目的免疫组化法观察益气养阴方对C57BL/6小鼠Lewis肺癌瘤体雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)、CyclinD1蛋白表达的影响,探讨该方抑制肿瘤和抗转移作用的机理,以及ERα和CyclinD1表达的关系。方法24只C57BL/6小鼠随机分为3组,每组8只,接种Lewis肺癌瘤株,造模后第二天按如下方案进行干预:荷瘤对照组:生理盐水灌服;中药组:益气养阴方煎汤灌服;顺铂组:顺铂溶液腹腔内注射。第20天处死全部小鼠,称瘤重计算抑瘤率,计数肺转移数,计算抑制肺转移率,免疫组化Envision二步法测定瘤体ERα、CyclinD1蛋白表达情况。结果中药组和顺铂组的抑瘤率分别为35.02%和41.18%,具有统计学意义。中药组和顺铂组的抑制肺转移率分别为54.20%和39.02%,差异显著。荷瘤对照组ERα和CyclinD1阳性率分别为100%和75%,中药组和顺铂组的ERα和CyclinD1阳性表达均显著低于对照组。ERα和CyclinD1的表达与瘤重(r分别为0.501和0.404,P均<0.05)、肺转移数(r分别为0.605和0.535,P均<0.01)均成正相关,两者之间亦成正相关(r=0.542,P<0.01)。结论益气养阴方具有较好的抑瘤和抗肺转移的作用,同时能够明显下调ERα和CyclinD1的表达,这是该方抑制肺癌转移的机理之一;肺癌ERα和CyclinD1蛋白均呈高表达,是促进肺癌细胞增殖和转移的重要原因和判断指标,两者表达间存在一定的调控机制。

关键词：中医药益气养阴方 Lewis肺癌 ERα cyclindl

来源： cnki会议评论

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World Journal of Gastroenterology 2005年第14期11卷 2117-2123页

作者： Yu-JunLi Zhi-MinWei Yun-XiaoMeng Xiang-RuiJi DepartmentofPathology TheAffiliatedHospitalofMedicalCollegeQingdaoUniversityQingdao266003ShandongProvinceChina

AIM:To investigate whether abnormal expression of β-catenin in conjunction with overexpression of cyclinD1, c-myc and matrix metalloproteinase-7 (MMP-7) correlated with the carcinogenesis, metastasis and prognosis of pancreatic cancer, and to analyze the relationship of β-catenin expression with cyclindl, c-myc and MMP-7 expression. METHODS: Using immunohistochemistry,we examined the expression of β-catenin, cyclinD1,c-myc and MMP-7 in 47 pancreatic adenocarcinoma tissues, 12 pancreatic intraepithelial neoplasia (PanIN) and 10 normal pancreases, respectively. Proliferation cell nuclear antigen was also tested as the index of proliferative activity of pancreatic cancer cells. RESULTS: In 10 cases of normal pancreatic tissues, epithelial cells showed equally strong membranous expression of β-catenin protein at the cell-cell boundaries, but the expression of cyclindl, c-myc and MMP-7 was negative. The expression of β-catenin, cyclinD1, c-myc and MMP-7 in PanIN and pancreatic adenocarcinoma tissues had no significant difference [6/12 and 32/47 (68.1%), 6/12 and 35/47 (74.5%), 5/12 and 33/47 (70.2%), 7/12 and 30/47 (63.8%), respectively]. The abnormal expression of β-catenin was significantly correlated to metastasis and one-year survival rate of pancreatic cancer, but had no relation with size, differentiation and cell proliferation. The expression of cyclinD1 was correlated with cell proliferation and extent of differentiation, but not with size, metastasis and one-year survival rate of the pancreatic cancer. The expression of c-myc was not correlated with size, extent of differentiation, metastasis and 1-year survival rate, but closely with cell proliferation of pancreatic cancer. The overexpression of MMP-7 was significantly associated with metastasis and 1-year survival rate of pancreatic cancer,but not with size, extent of differentiation and cell *** was a highly significant positive association between abnormal expression of β-catenin and overexpr

关键词： cyclindl c-myc MMP-7

温下方抑制肺癌A549细胞增殖及对PCNA Rb CyclinD1表达的影响

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中华中医药学刊 2010年第4期28卷 721-723页

作者：季旭明欧阳兵王春燕山东中医药大学山东济南250014

目的:研究温下方对肺癌A549细胞增殖的抑制作用及对PCNA、Rb、CyclinD1表达的影响。方法:正常血清及不同浓度的温下方含药血清作用于A549细胞,MTT法检测含药血清对A549细胞的抑制作用,激光共聚焦显微镜观察PCNA、Rb、CyclinD1的表达。结... 详细信息

目的:研究温下方对肺癌A549细胞增殖的抑制作用及对PCNA、Rb、CyclinD1表达的影响。方法:正常血清及不同浓度的温下方含药血清作用于A549细胞,MTT法检测含药血清对A549细胞的抑制作用,激光共聚焦显微镜观察PCNA、Rb、CyclinD1的表达。结果:温下方大、小剂量含药血清组作用24h抑制率为29.85%、25.90%,作用36h抑制率为42.02%、35.10%;PCNA表达降低至3.08±0.97、3.15±0.88,CyclinD1表达降低至2.65±0.83、2.70±0.79。结论:温下方可明显抑制肺腺癌细胞的增殖,明显降低PCNA、CyclinD1表达。

关键词：温下方 A549 PCNA Rb cyclindl

STAT5、cyclinD1和c-myc蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第12期23卷 1172-1173页

作者：简丽萍王鸿程孔志斌曹兵泸州医学院附属医院呼吸科四川泸州646000

目的:探讨信号转导和转录激活因子-5(STAT5)、细胞周期素D1(cyclinD1)和c-myc蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义。方法:用免疫组化SP法检测38例手术切除的NSCLC和20例正常肺组织中STAT5、cyclinD1和c-myc的表达。结果:STAT5、cyc... 详细信息

目的:探讨信号转导和转录激活因子-5(STAT5)、细胞周期素D1(cyclinD1)和c-myc蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义。方法:用免疫组化SP法检测38例手术切除的NSCLC和20例正常肺组织中STAT5、cyclinD1和c-myc的表达。结果:STAT5、cyclinD1和c-myc在NSCLC中的表达明显高于正常肺组织(P0.05)。在NSCLC中,STAT5和cyclinD1的表达呈正相关(P<0.05),而STAT5与c-myc的表达、cyclinD1和c-myc的表达无相关性。结论:在NSCLC中存在STAT5、cyclinD1和c-myc的过度表达,但与临床病理因素无关。在肿瘤的发生中,STAT5可能是通过上调cyclinD1表达,促进细胞周期进展和细胞转化,诱导肿瘤的形成。

关键词： STATS cyclindl c-myc 非小细胞肺癌

电离辐射对胸腺细胞及脾细胞p16、CyclinD1、CDK4蛋白表达的影响

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中华放射医学与防护杂志 2003年第6期23卷 399-401页

作者：鞠桂芝王晓梅付士波刘树铮吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室长春130021

目的　研究电离辐射对小鼠胸腺细胞及脾细胞中p16、CyclinD1及CDK4蛋白表达的影响。方法　采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测蛋白表达的变化。结果　时效实验证实 ,2 0GyX射线全身照射后 8,2 4及 48h ,胸腺细胞p16蛋白表达... 详细信息

目的　研究电离辐射对小鼠胸腺细胞及脾细胞中p16、CyclinD1及CDK4蛋白表达的影响。方法　采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测蛋白表达的变化。结果　时效实验证实 ,2 0GyX射线全身照射后 8,2 4及 48h ,胸腺细胞p16蛋白表达显著增高 (分别P <0 0 5、P <0 0 1及P <0 0 5) ;照射后 2 4h ,脾细胞p16蛋白表达显著增高 (P <0 0 5)。然而 ,照射后 8～ 2 4h ,胸腺细胞CDK4蛋白表达显著降低 (P <0 0 5～P <0 0 1) ;照射后 8～ 72h ,脾细胞CDK4蛋白表达显著降低(P <0 0 5～P <0 0 1)。量效实验证实 ,1 0 ,2 0及 4 0Gy全身照射后 2 4h ,胸腺细胞及脾细胞p16蛋白表达均显著增高 (P <0 0 5～P <0 0 1)。然而 ,2 0Gy照射后胸腺细胞CDK4蛋白表达显著降低(P <0 0 5) ;0 5～ 6 0Gy照射后脾细胞CDK4蛋白表达显著降低 (P <0 0 5～P <0 0 1)。研究还发现 ,胸腺细胞及脾细胞中CyclinD1蛋白表达于照射后均明显降低。结论　电离辐射可诱导胸腺细胞及脾细胞中p16蛋白表达增高。p16 CyclinD1

关键词：电离辐射胸腺细胞脾细胞 p16 cyclindl CDK4

17β-雌二醇对人涎腺黏液表皮样癌Mc3增殖周期的影响

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解放军医学杂志 2004年第5期29卷 441-442页

作者：李晓霞吴军正李巧青温德升白忠诚第四军医大学口腔医学院北京军区66400部队医院

目的　探讨 17β 雌二醇 (E2 )对体外培养的人涎腺黏液表皮样癌Mc3细胞系增殖周期的影响。方法　以不同浓度、时间的E2 处理Mc3细胞 ,采用MTT法、流式细胞术、免疫组织化学染色法 ,检测E2 对人涎腺黏液表皮样癌Mc3细胞系细胞群体倍增时... 详细信息

目的　探讨 17β 雌二醇 (E2 )对体外培养的人涎腺黏液表皮样癌Mc3细胞系增殖周期的影响。方法　以不同浓度、时间的E2 处理Mc3细胞 ,采用MTT法、流式细胞术、免疫组织化学染色法 ,检测E2 对人涎腺黏液表皮样癌Mc3细胞系细胞群体倍增时间、细胞周期分布以及对CyclinD1、P2 7Kip1阳性表达的影响。结果　浓度分别为 10 -9、10 -8、10 -7mol/L的E2 作用于细胞第 5天时 ,MTT法测得E2 处理组细胞增殖促进率分别为 2 9%、5 4 %、5 9% ,CyclinD1的阳性表达率分别增加了 16 %、9%、2 4 % ,P2 7Kip1的阳性表达率分别减少了33%、30 %、5 5 %。流式细胞术检查结果显示 ,10 -7mol/L的E2 处理 12、18、2 4h后 ,细胞周期中S期细胞比相应对照组分别增加了 11 3%、6 6 %、4 6 7% ,细胞增殖指数分别增加了 6 0 %、3 6 %、2 0 5 5 %。结论　生理浓度的E2 可以促进CyclinD1的表达、降低P2 7Kip1的阳性表达 ,从而促进细胞周期G1/S期转换 ,增加S期细胞数量 ,加速DNA合成 ,刺激肿瘤发生。

关键词：雌二醇黏液表皮样癌 cyclindl P27““ 细胞增殖周期

食管癌中p53、p21、p16、cyclinD_1、CDK_4免疫组化检测

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免疫学杂志 2003年第4期19卷 312-314,321页

作者：张红牛韵韵胡曼平郑州大学第一附属医院病理科河南郑州450052 郑州向阳中西医结合研究所河南郑州450000

目的　探讨p5 3、p2 1、p16、cyclinD1 、CDK4 蛋白在食管癌发生中的意义及其相互间的作用。方法　采用LSAB免疫组化染色法 ,对 4 3例食管癌手术标本的p5 3、p2 1、p16、cyclinD1 、CDK4 蛋白进行标记。结果　在鳞癌组织中 5种抗体的阳... 详细信息

目的　探讨p5 3、p2 1、p16、cyclinD1 、CDK4 蛋白在食管癌发生中的意义及其相互间的作用。方法　采用LSAB免疫组化染色法 ,对 4 3例食管癌手术标本的p5 3、p2 1、p16、cyclinD1 、CDK4 蛋白进行标记。结果　在鳞癌组织中 5种抗体的阳性物质存在于细胞核中和或胞浆中 ,在正常鳞状上皮主要存在于核中 ,且从正常鳞状上皮→癌旁不典型增生→鳞癌组织 ,p5 3的阳性表达逐渐上升 ,p2 1的阳性表达却随之下降 ;cyclinD1 、CDK4 的阳性率则随p2 1的下降而呈上升趋势 ;另外 ,p16的阳性率逐渐下降 ;同样cyclinD1 、CDK4 的阳性率则随p16的下降而逐渐上升。统计学处理 ,正常上皮与癌组织之间五种抗体的阳性率有显著差异性 (P <0 .0 5 ) ;同时 ,随着癌分化程度下降 ,p5 3、p2 1、p16的阳性率在Ⅱ级与Ⅰ级鳞癌之间差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;但未检出cyclinD1 、CDK4 cyclinD1 、CDK4 与癌分化的关系。结论　p5 3、p2 1、p16、cyclinD1 、CDK4 cyclinD1 、CDK4 蛋白表达的变化是食管癌发生中的早期事件。

关键词：食管癌 p53 p21 p16 cyclindl CDK4 免疫组化检测

视黄酸依赖反义cyclinD1 RNA表达载体的构建与鉴定

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免疫学杂志 2004年第1期20卷 20-23,26页

作者：杨剑糜漫天杨志祥韦娜第三军医大学预防医学系营养卫生学教研室重庆400038

目的　构建人细胞周期素D1(CyclinD1)基因的视黄酸 (Retinoicacid ,RA)依赖反义RNA表达载体 ,为进一步在细胞内应用视黄酸诱导其表达从而发挥效应的肿瘤基因治疗奠定基础。方法　运用DNA重组技术构建含有RARE3 TK启动子的反义cyclinD1RN... 详细信息

目的　构建人细胞周期素D1(CyclinD1)基因的视黄酸 (Retinoicacid ,RA)依赖反义RNA表达载体 ,为进一步在细胞内应用视黄酸诱导其表达从而发挥效应的肿瘤基因治疗奠定基础。方法　运用DNA重组技术构建含有RARE3 TK启动子的反义cyclinD1RNA真核表达载体 (pCI neo RARE3 TK AScyclinD1) ,经酶切、PCR以及DNA测序确认后 ,用脂质体方法转染HL 6 0细胞 (人早幼粒白血病细胞系 ) ,RA处理后 ,利用免疫组织化学方法检测细胞内靶基因cyclinD1的表达情况。结果　成功构建重组反义cyclinD1RNA表达载体 ,与预期设计路线相符 ;检测DNA序列与原始片段互补 ,且方向相反。ATRA处理转染和未转染HL 6 0细胞后 ,cyclinD1的表达均有所下降 ,其中转染组细胞的表达量要明显低于未转染组。结论　本实验成功构建了视黄酸依赖反义cyclinD1RNA表达载体 ;转染HL 6 0细胞后 ,反义cyclinD1的表达可受到RA的诱导调控。

关键词： cyclindl 视黄酸反义

Stat3通路相关基因在散发性大肠管状腺瘤癌变中的表达及意义

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肿瘤防治研究 2009年第5期36卷 388-390,418页

作者：吴文新刘惠民张祥宏河北医科大学第二医院病理科石家庄050017 河北工程大学医学院病理教研室

目的探讨Stat3及CyclinD1、Bcl-xL在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中的可能作用。方法采用免疫组化方法检测107例散发性大肠管状腺瘤异型增生及癌变组织中Stat3和CyclinD1、Bcl-xL在蛋白水平的表达情况。结果腺瘤伴异型增生组和癌变组中的... 详细信息

目的探讨Stat3及CyclinD1、Bcl-xL在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中的可能作用。方法采用免疫组化方法检测107例散发性大肠管状腺瘤异型增生及癌变组织中Stat3和CyclinD1、Bcl-xL在蛋白水平的表达情况。结果腺瘤伴异型增生组和癌变组中的Stat3蛋白的表达明显高于正常大肠黏膜组(P=0.000),且癌变组中Stat3蛋白的表达高于腺瘤伴异型增生组(P=0.003);腺瘤伴异型增生组和癌变组中CyclinD1蛋白的表达均明显高于正常大肠黏膜组(P=0.000),且癌变组中CyclinD1蛋白的表达高于腺瘤伴异型增生组(P=0.000);大肠管状腺瘤伴异型增生组和癌变组中Bcl-xL在蛋白水平的阳性表达率均明显高于正常大肠黏膜组(P=0.000),而且癌变组中Bcl-xL的表达明显高于腺瘤伴异型增生组(P=0.000);Stat3、CyclinD1和Bcl-xL均随腺瘤异型增生程度的增高呈递增趋势。Stat3与Cy-clinD1、Bcl-xL的表达存在正相关关系。结论Stat3、CyclinD1和Bcl-xL可能在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中起一定的作用。

关键词： Stat3 cyclindl Bcl-XL 大肠管状腺瘤免疫组织化学