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人cpg-寡脱氧核苷酸对质粒DNA免疫刺激活性的影响

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中华医学杂志 2002年第7期82卷 492-495页

作者：许洪林邓瑶王世峰郭斐陆柔剑阮力中国预防医学科学院病毒学研究所病毒遗传与免疫室北京100052

目的　研究人cpg寡脱氧核苷酸 (cpg ODN)对DNA疫苗质粒骨架免疫刺激活性的影响。方法　将多拷贝对人和小鼠均有免疫刺激活性的cpg2 0 0 6序列导入质粒骨架 ,并在小鼠模型体内外评价重组质粒DNA的免疫刺激活性。结果　首先构建了质粒pMi... 详细信息

目的　研究人cpg寡脱氧核苷酸 (cpg ODN)对DNA疫苗质粒骨架免疫刺激活性的影响。方法　将多拷贝对人和小鼠均有免疫刺激活性的cpg2 0 0 6序列导入质粒骨架 ,并在小鼠模型体内外评价重组质粒DNA的免疫刺激活性。结果　首先构建了质粒pMini,仅含有卡那抗性基因和pUC18复制起点。然后向pMini中导入了多拷贝对小鼠具有交叉免疫刺激活性的人cpg2 0 0 6 ,得到 2个重组质粒pcpg11和pcpg2 6 ,分别含有 9和 16拷贝cpg2 0 0 6。随着插入cpg2 0 0 6拷贝数的增加 ,质粒DNA在体外活化小鼠脾细胞分泌IgM的能力逐渐增强 ,但诱生IFN γ的能力却依次降低。用重组质粒DNA作为HBsAg疫苗佐剂 ,免疫BALB/c小鼠 ,pMini和pcpg11对特异性总抗体以及IgG1亚型抗体水平无明显影响 (P >0 0 5 ) ,但pcpg2 6能够使两类抗体水平分别提高 3倍 (P 0 0 5 )。结论　向质粒骨架中导入一定数量的人cpg ODN能够增强质粒DNA的免疫刺激活性。

关键词： DNA疫苗质粒免疫佐剂 cpg-寡脱氧核苷酸免疫刺激活性

CD40配体和cpg-寡脱氧核苷酸在慢性淋巴细胞白血病染色体研究中的应用

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国际输血及血液学杂志 2008年第1期31卷 54-56页

作者：吴亚芳薛永权苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所

20世纪90年代以来,德国学者分别应用 CD40配体(CD40L)和 cpg-寡脱氧核苷酸(cpgODN)刺激慢性淋巴细胞白血病(CLL)的白血病细胞增殖,明显提高了有丝分裂指数和异常核型检出率,特别是发现新的预后不良亚型一各种平衡和不平衡易位。cpg-ODN ... 详细信息

20世纪90年代以来,德国学者分别应用 CD40配体(CD40L)和 cpg-寡脱氧核苷酸(cpgODN)刺激慢性淋巴细胞白血病(CLL)的白血病细胞增殖,明显提高了有丝分裂指数和异常核型检出率,特别是发现新的预后不良亚型一各种平衡和不平衡易位。cpg-ODN 和 CD40L 相比,技术十分简便,有可能取代间期荧光原位杂交(FISH)技术,从而成为 CLL 染色体研究的标准方法。

关键词：慢性淋巴细胞白血病染色体荧光原位杂交 CD40配体 cpg-寡脱氧核苷酸

D型cpg-寡脱氧核苷酸活化慢性乙型肝炎患者免疫细胞的研究

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临床内科杂志 2005年第4期22卷 252-254页

作者：李宁范学工陈朝晖朱才应若素黄燕中南大学湘雅医院感染病科湖南长沙410008 中南大学湘雅医院医学实验中心湖南长沙410008

目的　研究D型cpg 寡脱氧核苷酸(cpg- ODN)体外对慢性乙型肝炎患者的免疫刺激作用。方法　分离患者外周血单个核细胞(PBMC), cpg- ODN单独或联合重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM -CSF)刺激培养2天后,用ELISA法检测培养液中IFN ... 详细信息

目的　研究D型cpg 寡脱氧核苷酸(cpg- ODN)体外对慢性乙型肝炎患者的免疫刺激作用。方法　分离患者外周血单个核细胞(PBMC), cpg- ODN单独或联合重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM -CSF)刺激培养2天后,用ELISA法检测培养液中IFN α的水平,RT- PCR法检测PBMC中IFN- γ的表达水平。结果　cpg- ODN可有效诱导慢性乙型肝炎患者PBMC分泌IFN -α,高表达IFN -γmRNA。结论　cpg -ODN对慢性乙型肝炎患者有明显的激活作用。

关键词： cpg-寡脱氧核苷酸干扰素-α 慢性乙型肝炎重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子

cpg寡脱氧核苷酸对慢性哮喘小鼠模型气道炎症的预防作用

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复旦学报（医学版） 2007年第3期34卷 358-363页

作者：金美玲揭志军蔡映云袁正宏胡芸文任涛复旦大学附属中山医院呼吸科上海200032 上海交通大学附属新华医院呼吸科上海200072 复旦大学上海医学院医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤(cpg)寡脱氧核苷酸(cpg-oligodeoxynueleotides,cpg- ODN)能否预防或减轻慢性哮喘小鼠气道炎症的发生。方法40只雌性C57BL／6小鼠随机均分为4组,A组(慢性哮喘组)、B组(cpg-ODN干预组)和C组(GpC-... 详细信息

目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤(cpg)寡脱氧核苷酸(cpg-oligodeoxynueleotides,cpg- ODN)能否预防或减轻慢性哮喘小鼠气道炎症的发生。方法40只雌性C57BL／6小鼠随机均分为4组,A组(慢性哮喘组)、B组(cpg-ODN干预组)和C组(GpC-ODN对照组)分别腹腔注射卵蛋白致敏,然后用卵蛋白雾化吸入激发以制作慢性哮喘模型,D组(生理盐水对照组)用生理盐水进行致敏和激发。B组在致敏同时(d1, d14)和激发阶段(每2周1次)分别给予60μg／mLcpg-ODN腹腔注射,共6次。C组将cpg替换为鸟嘌呤-磷酸-胞嘧啶(GpC)作为对照。在末次激发24 h后,取血测嗜酸粒细胞(eosinophil,EOS)数,血清IgE、IgG1和IgG2α;收集支气管肺泡灌洗液(bronehoalveolar lavage fluid,BALF)作细胞分类计数;测定肺组织中白介素-4 (interleukin-4,IL-4)、白介素-13(interleukin-13,IL-13)和γ-干扰素的mRNA(interferon-γ,IFN-γ)表达量;以及肺组织病理学检查。结果A组外周血EOS数[(89±10)×104／mL]、血清IgE值[(279±53)ng／mL)、IgG1(A值2．151±0．628)、IgG2α(A值0．772±0．245)、BALF中EPS(6．3±1．3)]×105／mL)及百分比[(18．1±3．0)％]较D组明显增高(Pcpg-ODN干预后(B组),除IgG2α(A值1．186±0．414)和IFNγmRNA表达量[(18．91±9．85)×10-2]增高外(P0．05)。结论cpg- ODN对小剂量OVA反复激发所致的慢性气道炎症有一定的预防作用。

关键词：慢性哮喘气道炎症 cpg-寡脱氧核苷酸小鼠

胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸对慢性支气管哮喘小鼠气道重塑的影响

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中华结核和呼吸杂志 2006年第9期29卷 612-616页

作者：揭志军金美玲蔡映云袁正宏胡芸文徐扬任涛杨振华上海第二医科大学附属新华医院呼吸科复旦大学附属中山医院呼吸疾病研究所上海200032 复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室

目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤（cpg）寡脱氧核苷酸（cpg-ODN）能否预防或减轻慢性支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道重塑的发生。方法 40只雌性清洁级C57BL／6小鼠按随机数字表法分为4组，每组10只。（1）慢性哮喘组（A组）... 详细信息

目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤（cpg）寡脱氧核苷酸（cpg-ODN）能否预防或减轻慢性支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道重塑的发生。方法 40只雌性清洁级C57BL／6小鼠按随机数字表法分为4组，每组10只。（1）慢性哮喘组（A组）：分别于第1、14天小鼠腹腔注射1ml致敏液[卵蛋白（OVA，10μg）＋氢氧化铝凝胶（100μg）]；从第21天开始雾化吸入2．5％OVA溶液，每次30min，每周3次，连续8周。（2）cpg—ODN干预组（B组）：在OVA致敏的同时给予浓度为60μg／ml的cpg—ODN腹腔注射1ml共2次，以后每2周腹腔注射1次共4次。（3）GpC—ODN对照组（C组）：将cpg替换为鸟嘌呤-磷酸-胞嘧啶（GpC，剂量及用法同cpg-ODN）作为对照。（4）生理盐水（NS）对照组（D组）：给予NS进行致敏（每次1ml腹腔注射）和激发（用NS雾化吸入）。在末次激发24h后所有小鼠取血测嗜酸粒细胞（EOS）数和血清IgE；收集支气管肺泡灌洗液（BALF）做细胞分类计数，用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测上清液中自细胞介素13（IL-13）和转化生长因子β1（TGF—β1）的浓度。取左肺组织行苏木精-伊红（HE）染色和Masson三色染色，用抗α平滑肌肌动蛋白（α—SMA）抗体和抗TGF—β1抗体行免疫组化染色。结果 A组外周血EOS计数为（89±10）×10^4／ml、血清IgE为（279±53）ng／ml，BALF中EOS计数和分类分别为（6．30±1．30）×10^5／ml、0．181±0．030，A组IL-13浓度为（4015±361）pg／ml、TGF—β1浓度为（356±64）pg／ml，以上数值与D组比较差异有统计学意义（t值分别为24．0、15．7、14．7、18．4、12．0和18．9，P均〈0．01）；A组Masson三色染色、α-SMA、TGF-β1阳性染色面积百分比[分别为（29．7±4．2）％、（45±7）％、（34±4）％]与D组比较差异也有统计学意义（t值分别为18．0、15．6和17．9，P均〈0．01）。应用cpg-ODN干预后（B组）的Masson三色染色、α—SMA、TGF—β1阳性染色面积百分比[分别为（13．8±3．2）％、（25±3）％、（18±4）％]与A组比较差异也有统计学意义（t值分别为9．5、8．9、9．8，P均〈0．05）。结论应用cpg-ODN干预慢性哮喘模型，不仅能抑制Th2细胞反应和EOS肺浸润，还能抑制气道重塑的发生和发展，它可能是通过抑制TGF—β1、IL-13等因子而抑制气道重塑的。

关键词：哮喘气道重塑炎症小鼠 cpg-寡脱氧核苷酸

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乙型肝炎

传染病网络动态 2005年第10期 99-110页

D型cpg-寡脱氧核苷酸活化慢性乙型肝炎患者免疫细胞的研究——李宁等（湖南长沙中南大学湘雅医院感染病科410008）；《临床内科杂志》，2005，22（4）：252-254[目的：研究D型cpg-寡脱氧核苷酸（cpg-ODN）体外对慢性乙型肝炎患者的免疫... 详细信息

D型cpg-寡脱氧核苷酸活化慢性乙型肝炎患者免疫细胞的研究——李宁等（湖南长沙中南大学湘雅医院感染病科410008）；《临床内科杂志》，2005，22（4）：252-254[目的：研究D型cpg-寡脱氧核苷酸（cpg-ODN）体外对慢性乙型肝炎患者的免疫刺激作用。

关键词：慢性乙型肝炎患者 cpg-寡脱氧核苷酸中南大学湘雅医院临床内科杂志免疫刺激作用感染病科免疫细胞 D型