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生长激素对大鼠心肌缺血/再灌注后心肌细胞凋亡及凋亡相关基因Caspase-3 Cleaved caspase-3蛋白表达的影响

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中国急救医学 2008年第6期28卷 527-530页

作者：黄瑞健李萌孙培吾福建医科大学第一临床医学院心外科福州350005 中山大学第一附属医院心外科广州510080

目的研究生长激素(Growth hormone,GH)对大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia reperfusion,I/R)后心肌细胞凋亡及相关基因Caspase-3、Cleaved caspase-3蛋白表达的影响。方法24只大鼠随机分为三组,假手术组(sham-operated group,n=8,仅手术24h)、心肌缺血/再灌注(I/R)组(n=8)、GH组(n=8),后两组均缺血30min,再灌注24h,GH组于建立模型前7d每天给予人重组生长激素(reconbination human growth hormone,rhGH)针剂皮下注射(1U/kg体质量),其他二组等量生理盐水注射。以TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,DAB免疫组化法检测心肌细胞Caspase-3、Cleaved caspase-3蛋白表达并进行心肌组织病理学检查。结果大鼠心肌I/R24h后心肌细胞凋亡指数明显上升(对照于假手术组,PCleaved caspase-3蛋白表达呈阳性染色指数明显升高(PCleaved caspase-3蛋白表达呈阳性染色指数明显好于I/R组(PCleaved caspase-3染色阳性指数,说明GH对I/R后的心肌具有保护作用。

关键词：缺血/再灌注生长激素凋亡 Caspase-3 Cleaved caspase-3

促红细胞生成素对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及对Cleaved Caspase-3蛋白表达的影响

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岭南心血管病杂志 2017年第2期23卷 209-214页

作者：伍金雷许卫陈永权谢文杰陈晞明陈盛强张银霞广州医科大学附属第三医院心内科广州510150 广州医科大学附属第二医院广州510150 广州医科大学金域检验学院广州510150

目的观察促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌细胞的抗凋亡作用及对活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达的影响。方法将36只雄性成年SD大鼠随机分为3组,分别为假手术(Sham)组(n=12)... 详细信息

目的观察促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌细胞的抗凋亡作用及对活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达的影响。方法将36只雄性成年SD大鼠随机分为3组,分别为假手术(Sham)组(n=12)、EPO组(n=12)和对照(Control)组(n=12);其中EPO组和Control组大鼠使用腹主动脉缩窄术建立慢性心力衰竭模型,术后第8周EPO组经腹腔注射3 000 U/kg EPO,3次/周,连续4周;Sham组、Control组经腹腔注射等量等次0.9%氯化钠溶液。术后第4周、8周、12周行超声心动图检测大鼠心功能。术后第12周末全部大鼠禁食24 h后处死,取心肌组织切片采用苏木精-伊红(HE)染色法观察心肌组织细胞形态,采用Tunel法观察心肌细胞凋亡及计算凋亡指数(apoptosis index,AI);采用Western blot法检测心肌Cleaved Caspase-3蛋白表达情况。结果超声心动图结果显示,造模大鼠术后第4周时出现心室肥厚,术后第8周时出现左心室射血功能减退;EPO组干预4周后较Control组左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)明显升高(PCleaved Caspase-3 OD值明显增加(0.3 145±0.0 308 vs.0.9 007±0.0 339,PCleaved Caspase-3蛋白表达相关。

关键词：促红细胞生成素心力衰竭心肌凋亡 Cleaved caspase-3蛋白

血管内皮生长因子和Cleaved Caspase-3在宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义

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中国肿瘤临床与康复 2015年第11期22卷 1306-1310页

作者：朱金萍王丽华王啸上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院上海200030

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和Cleaved Caspase-3在宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学法、荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot法分别检测在46例慢性宫颈炎和52例宫颈鳞癌组织中VEGF和Cleaved Caspas... 详细信息

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和Cleaved Caspase-3在宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学法、荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot法分别检测在46例慢性宫颈炎和52例宫颈鳞癌组织中VEGF和Cleaved Caspase-3的表达情况。结果VEGF和Cleaved Caspase-3在不同组织中的相对表达量均不同,慢性宫颈炎组的VEGF基因和蛋白表达量明显低于宫颈鳞癌组(PCleaved Caspase-3基因和蛋白表达呈相反趋势。VEGF和Cleaved Caspase-3表达均与淋巴结转移、国际妇产科联盟(FIGO)分期有关,差异均有统计学意义(PCleaved Caspase-3呈低表达,两者均参与了宫颈鳞癌的发生发展,其联合检测有助于判断患者的预后。

关键词：子宫肿瘤血管内皮生长因子 Cleaved Caspase3

Livin、Cleaved caspase-3在尖锐湿疣中的表达

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中国麻风皮肤病杂志 2011年第6期27卷 394-397页

作者：皮庆友郭淑兰山东大学齐鲁医院皮肤科济南250012

目的:确定livin和Cleaved caspase-3在尖锐湿疣(condyloma acuminatum,CA)组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化SP法检测livin和Cleaved caspase-3在34例CA组织和15例正常皮肤组织中的表达。结果:正常皮肤中livin与Cleaved caspase-3均无表达,CA组织中二者表达的阳性率分别为82.4%和38.2%;两种蛋白在CA组织中的表达呈负相关(r=-5.25,P<0.001)。结论:Livin抑制caspase-3的激活,两者共同参与CA的发病过程,可能与CA的发生、发展相关。

关键词： livin Cleaved caspase-3 尖锐湿疣

癫痫大鼠海马硫氧还蛋白还原酶活性及Cleaved caspase-3表达检测

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检验医学与临床 2011年第22期8卷 2695-2696页

作者：魏学文张晓伟江苏省徐州市第一人民医院体检中心 221002

目的研究海人酸诱导癫痫大鼠海马组织硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活性及Cleaved caspase-3表达变化。方法 Sprague-Dawley大鼠随机分为癫痫对照组(NS组)和癫痫组(KA组)。采用脑室注射海人酸制作大鼠癫痫模型。海人酸注射6h取海马组织匀浆,应... 详细信息

目的研究海人酸诱导癫痫大鼠海马组织硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活性及Cleaved caspase-3表达变化。方法 Sprague-Dawley大鼠随机分为癫痫对照组(NS组)和癫痫组(KA组)。采用脑室注射海人酸制作大鼠癫痫模型。海人酸注射6h取海马组织匀浆,应用5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)还原法对海马TrxR活性进行测定,采用western blotting法检测Cleaved caspase-3表达。结果 NS组、KA组TrxR活性分别为:(71±19)、(116±40)U/mg;KA组Cleaved caspase-3的表达较NS组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论癫痫大鼠海马组织TrxR活性明显增加,引起caspase-3裂解,导致神经元凋亡。

关键词：癫痫海人酸硫氧还蛋白还原酶 Cleaved caspase-3

Differential RNA Editing of Mitochondrial Genes in WA-Cytoplasmic Based Male Sterile Line Pusa 6A, and Its Maintainer and Restorer Lines

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Rice science 2019年第5期26卷 282-289页

作者： Umakanta NGANGKHAM Swarup Kumar PARIDA Ashok Kumar SINGH Trilochan MOHAPATRA National Research Centre on Plant Biotechnology New Delhi 110012India Indian Council of Agricultural Research-Research Complex for North East Hill Region Indian Council of Agricultural ResearchUmiam 793103India National Institute of Plant Genome Research New Delhi 110067India Division of Genetics Indian Agricultural Research InstituteNew Delhi 110012India Indian Council of Agricultural Research New Delhi 110001India

RNA editing changes the nucleotides at the transcript level of mitochondrial genes which results in synthesis of functional proteins.This study was designed to find the editing sites which could be implicated in male fertility restoration and to develop editing based markers for differentiation of cytoplasmic male sterility and maintainer lines from each other.DNA and RNA from young panicles were isolated from three-line system of hybrid rice PRH10,wild abortive(WA)cytoplasm based male sterile(A line Pusa 6A),maintainer(B line Pusa 6B)and restorer(R line PRR78)lines.Pusa 6A and PRR78 having the same WA cytoplasm are allo-nuclear and iso-cytpolasmic lines.The genomic and cDNA amplicons for eight mitochondrial genes(18SrRNA,atp6,atp9,cobII,coxI,coxIII,nadI and rps3)were sequenced and compared.Differences in genomic and cDNA sequences were considered as editing.Two hundred and thirty editing sites having base substitution or insertion/deletion were identified with the highest in 18SrRNA(5.74%)and the lowest in coxI(0.60%).The highest editing sites were observed in fertile maintainer Pusa 6B followed by PRR78 and Pusa 6A,of which random five editing sites in five different rice mitochondrial transcripts namely atp9,cobII,coxIII,rps3 and 18SrRNA were chosen and validated through Cleaved amplified polymorphism sequence(CAPS)analysis and found to be partially edited in four genes.The identical editing sites of different mitochondrial genes from maintainer and restorer lines might reflect their possible contribution to fertility restoration of sterile WA cytoplasm.

关键词： Cleaved amplified polymorphism sequence cytoplasmic male sterility hybrid rice RNAediting mitochondrial gene wild abortive nucleotide

大蒜素对KG-1细胞增殖和凋亡的影响及分子机制

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中国中药杂志 2018年第12期43卷 2612-2617页

作者：娄诤魏庆庆王大维谷焕鹏浙江中医药大学第二临床医学院浙江杭州310053 浙江中医药大学口腔医学院浙江杭州310053 浙江中医药大学基础医学院浙江杭州310053

大蒜素是大蒜中主要的生物活性物质,具有抗菌、降血脂等多种药理作用。该研究通过凋亡相关指标的检测,来探讨大蒜素对KG-1细胞增殖抑制的分子生物学机制。采用流式细胞术检测大蒜素诱导KG-1细胞的凋亡率;采用RT-q PCR法检测大蒜素对KG-... 详细信息

大蒜素是大蒜中主要的生物活性物质,具有抗菌、降血脂等多种药理作用。该研究通过凋亡相关指标的检测,来探讨大蒜素对KG-1细胞增殖抑制的分子生物学机制。采用流式细胞术检测大蒜素诱导KG-1细胞的凋亡率;采用RT-q PCR法检测大蒜素对KG-1细胞Bax,Bcl-2,survivin,ERK基因mRNA表达水平的影响;通过Western blot法检测大蒜素对KG-1细胞caspase 3,Cleaved caspase 3,ERK1/2,p-ERK1/2,survivin蛋白表达水平的变化。结果表明,与对照组相比,大蒜素能够显著抑制KG-1细胞的增值活性,并且呈显著浓度依赖性和时间依赖性;流式细胞术检测显示大蒜素能够诱导KG-1细胞的凋亡,并且主要是晚期凋亡。RT-q PCR结果显示,大蒜素作用于KG-1细胞后,与凋亡相关的基因Bax的mRNA表达升高,Bcl-2,survivin,ERK基因的mRNA表达降低;Western blot法结果显示,大蒜素作用于KG-1细胞后执行凋亡的蛋白caspase 3及其活性形式Cleaved caspase 3升高,促生存的相关蛋白survivin,ERK1/2和其活性形式p-ERK1/2表达下降,其中p-ERK1/2的下调呈剂量依赖性。以上结果提示,大蒜素主要通过诱导KG-1细胞的晚期凋亡来抑制其增殖;凋亡的执行有Cleaved caspase 3的参与;凋亡的诱导涉及到蛋白水平,ERK1/2,survivin表达的降低和p-ERK1/2剂量依赖性的减弱;mRNA水平涉及到Bax的升高,survivin,Bcl-2,ERK1/2的下调。

关键词：大蒜素 KG-1细胞凋亡 Cleaved caspase 3 p-ERK

积雪草酸对人舌癌TCA-8113细胞增殖、凋亡的影响

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中国药理学通报 2019年第11期35卷 1596-1601页

作者：董易褚冬青马春宇黄建华王一锦州医科大学附属第一医院检验科辽宁锦州121000 锦州医科大学附属第一医院外科重点实验室辽宁锦州121000

目的探究积雪草酸(asiatic acid,AA)体外对人舌癌TCA-8113细胞增殖、凋亡、细胞周期阻滞的作用及其可能的作用机制。方法 MTT法检测不同浓度的AA(0、20、30、40、50 μmol·L -1 )作用于TCA-8113细胞24 h的增殖抑制作用;集落形成实验检... 详细信息

目的探究积雪草酸(asiatic acid,AA)体外对人舌癌TCA-8113细胞增殖、凋亡、细胞周期阻滞的作用及其可能的作用机制。方法 MTT法检测不同浓度的AA(0、20、30、40、50 μmol·L -1 )作用于TCA-8113细胞24 h的增殖抑制作用;集落形成实验检测AA对TCA-8113细胞集落形成率的影响;Hoechst 33342染色法、Annexin V-FITC/PI法检测AA对TCA-8113细胞凋亡的影响;流式细胞术分析细胞周期变化;Western blot检测AA对TCA-8113细胞中Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3及p53、p21蛋白表达的影响。结果 AA对TCA-8113细胞抑制率呈浓度依赖性( P <0.05),其IC 50 值为42.13 μmol·L -1 ,细胞集落形成能力降低;随AA浓度的增大,细胞凋亡率增加( P <0.05);当AA浓度达到30 μmol·L -1 时,细胞周期逐渐阻滞在G 2/M期;Western blot显示,p53、p21及Bax表达升高,Bcl-2表达降低( P <0.05),呈浓度依赖性。结论 AA明显抑制TCA-8113细胞的增殖,诱导其凋亡,其机制可能与调控p53通路相关蛋白p53、p21、Bax,以及抑制Bcl-2的表达有关,同时AA能使TCA-8113细胞周期阻滞在G 2/M期。

关键词：积雪草酸舌癌 TCA-8113 凋亡 Bcl-2 Cleaved caspase-3 p53

氯化两面针碱对人食管癌Eca109细胞抑制作用及机制研究

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中草药 2019年第20期50卷 4969-4973页

作者：袁翠林娄诤谢璐迪王大维杭州市萧山区中医院浙江杭州311201 浙江中医药大学第二临床医学院浙江杭州310053 浙江中医药大学基础医学院浙江杭州310053

目的探讨氯化两面针碱对人食管癌Eca109细胞的抑制作用及其诱导凋亡的分子机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度的氯化两面针碱不同的干预时间对Eca109细胞的增殖抑制率。依据CCK-8法的结果将实验设4组,各组氯化两面针碱的终浓度分别为0、... 详细信息

目的探讨氯化两面针碱对人食管癌Eca109细胞的抑制作用及其诱导凋亡的分子机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度的氯化两面针碱不同的干预时间对Eca109细胞的增殖抑制率。依据CCK-8法的结果将实验设4组,各组氯化两面针碱的终浓度分别为0、5、10、15μmol/L,药物作用时间为48 h。以AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞术检测凋亡率;以实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测Caspase-3、Caspase-9和Noxa的m RNA表达;采用Westernblotting法检测Cleaved Caspase-3、Bcl-2、p53和Noxa的蛋白表达水平。结果氯化两面针碱对Eca109细胞具有增殖抑制作用,一定范围内呈时间和浓度依赖性。流式细胞术结果显示,5μmol/L的氯化两面针碱主要诱发早期凋亡(PCleaved Caspase-3、p53和Noxa的蛋白水平均随氯化两面针碱浓度的增加而升高(P<0.01),但Noxa的升高在5μmol/L组不显著,在10、15μmol/L组升高明显(P<0.01);Bcl-2蛋白的表达随着氯化两面针碱浓度的升高而降低,10、15μmol/L组较为显著(P<0.05、0.01)。结论氯化两面针碱对Eca109细胞的增殖抑制作用主要是通过诱导凋亡实现的,氯化两面针碱诱导Eca109细胞的凋亡与p53和Noxa的表达升高和Bcl-2的下调以及Caspase-3的活化有关。

关键词：氯化两面针碱 Eca109细胞 Cleaved Caspase-3 Bcl-2 p53 Noxa