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环孢素A治疗对儿童肾病cyp基因表达的影响

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山西医科大学学报 1999年第1期30卷 8-10页

作者：夏正坤刘光陵高远赋王晓燕樊忠民张连丰李世军南京军区总医院儿科

目的探讨环孢素Ａ（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡ，ＣｓＡ）治疗前后对肾病患儿的环孢素亲和素ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ（ＣｙＰ）ｍＲＮＡ表达的影响，ＣｓＡ与ＣｙＰ基因表达之间的关系及临床意义。方法通过逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－Ｐ... 详细信息

目的探讨环孢素Ａ（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡ，ＣｓＡ）治疗前后对肾病患儿的环孢素亲和素ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ（ＣｙＰ）ｍＲＮＡ表达的影响，ＣｓＡ与ＣｙＰ基因表达之间的关系及临床意义。方法通过逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）测定肾病患儿经ＣｓＡ治疗前后血白细胞中ＣｙＰｍＲＮＡ的表达，并以正常儿童作对照及应用荧光偏振免疫法测定ＣｓＡ的浓度。结果表明肾病患儿经ＣｓＡ治疗前血白细胞中ＣｙＰｍＲＮＡ基因表达明显高于ＣｓＡ治疗后及对照组，而ＣｓＡ血浓度与ＣｙＰｍＲＮＡ表达成负相关。结论ＣｓＡ治疗前肾病患儿血白细胞中ＣｙＰｍＲＮＡ高水平的表达，应用ＣｓＡ后与ＣｙＰ形成ＣｓＡ－ＣｙＰ免疫复合物，反馈性的ＣｙＰ表达水平下降，而ＣｓＡ血浓度与ＣｙＰ表达成负相关。说明低浓度的ＣｓＡ与高水平表达的ＣｙＰ对肾病不能起到治疗作用，而合适浓度ＣｓＡ（１００～２００μｇ／Ｌ）与低水平ＣｙＰ表达有助于肾病的缓解。

关键词：肾小球肾炎儿童药物疗法环孢素A cyp基因

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作者：刘洁山东大学

学位级别：硕士

目的：研究雌激素代谢酶基因cyp1A1、cyp17和COMT，雌激素受体α基因单核苷酸多态性与子宫内膜腺癌的发病风险的关系，以期为子宫内膜腺癌的病因学研究和高危人群的筛查积累资料。方法：以病例-对照研究，采用聚合酶链反应-限制性片段... 详细信息

目的：研究雌激素代谢酶基因cyp1A1、cyp17和COMT，雌激素受体α基因单核苷酸多态性与子宫内膜腺癌的发病风险的关系，以期为子宫内膜腺癌的病因学研究和高危人群的筛查积累资料。方法：以病例-对照研究，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)及等位基因特异扩增(ASA-PCR)方法检测87例子宫内膜腺癌患者和180例正常对照组的cyp1A1基因MspⅠ位点和Ile-Val位点，cyp17基因MspAI1位点，COMT基因VIaⅢ位点及ERα基因PvuⅡ、XbaⅠ位点多态性。采用SPSS13.0软件Chi-Square(x)和logistic回归方法分析数据。结果：(1)cyp1A1 Ile-Val位点Ile／Ile、Ile／Val、Val／Val三种基因型，cyp17 A1／A1、A1／A2、A2／A2三种基因型在对照组和子宫内膜腺癌组中的分布差异有显著性(P＜0.05)，其中cyp17 A1／A1、A1／A2基因型，cyp1A1 Ile-Val位点Val／Val、Ile／Val基因型在子宫内膜腺癌组中的分布频率高于对照组。 (2)cyp17，cyp1A1，COMT及ERα多态性的相对危险度分析结果表明，cyp17 A1／A1、A1／A2基因型，cyp1A1 Ile-Val位点Ile／Val基因型，cyp1A1 MspⅠ位点wt／vt基因型以及ERa xx基因型为子宫内膜腺癌的高危基因型。 (3)多因素logistic回归结果：cyp17，cyp1A1 MspⅠ，Ile-Val多态位点及ERαXbaⅠ多态位点的高危基因型(cyp17 A1／A1、A1／A2基因型，cyp1A1 Ile-Val位点Ile／val基因型，cyp1A1 MspⅠ位点wt／vt基因型以及ERa xx基因型)与子宫内膜腺癌的发生的相关性较高，其相对危险度(multivariate-OR)分别为3.08，3.45 3.42和2.52。结论：cyp1A1 MspⅠ位点，cyp1A1 Ile-Val位点，cyp17 MspA1Ⅰ位点，ERαXbaⅠ位点的基因多态性与子宫内膜腺癌的易感性相关。而ERαPvuⅡ多态位点和COMT基因NIaⅢ多态位点的基因多态性与子宫内膜腺癌发病风险无相关性。

关键词：子宫内膜癌 cyp基因 COMT基因雌激素受体基因多态性

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肝移植患儿术后生长发育及心理状况调查

护理研究 2022年第23期36卷 4248-4252页

作者：陆晔峰金晶胡美琴上海交通大学医学院附属仁济医院(护理部) 上海200127 上海市第一人民医院(护理部)

目的:了解肝移植患儿的生长发育及心理情况。方法:选取2006年1月—2021年6月在上海交通大学医学院附属仁济医院肝脏外科进行肝移植手术的患儿56例作为研究对象。应用疾病认知量表(BIPQ)、病人健康问卷(PHQ⁃9)、焦虑量表(GAD⁃7)及简要疲... 详细信息

目的:了解肝移植患儿的生长发育及心理情况。方法:选取2006年1月—2021年6月在上海交通大学医学院附属仁济医院肝脏外科进行肝移植手术的患儿56例作为研究对象。应用疾病认知量表(BIPQ)、病人健康问卷(PHQ⁃9)、焦虑量表(GAD⁃7)及简要疲惫感量表(FAS)对其进行调查。结果:肝移植患儿年龄14.0(13.0,16.0)岁;术后时间为5.0(3.0,6.0)年;移植物与受体重量比(GRWR)为1.69(1.29,2.30);身高Z值为-0.27(-0.44,0.79);体质指数Z值为-0.31(-0.95,0.82)。肝移植患儿BIPQ得分为51.0(40.5,60.8)分,PHQ⁃9得分为6.0(0.0,11.8)分,GAD⁃7得分为3.0(0.0,9.0)分,FAS得分为16.0(10.0,22.0)分。cyp基因表达组和不表达组患儿的身高、体重、体质指数、身高Z值及体质指数Z值比较差异均无统计学意义。结论:肝移植患儿生长发育情况中等,患儿疾病认知一般,抑郁、焦虑及疲惫感中等水平,未发现cyp基因表达对肝移植患儿生长发育有明显影响。

关键词：肝移植患儿生长发育疾病认知抑郁焦虑疲惫感 cyp基因

不同激素诱导对华重楼皂苷合成关键酶基因表达的影响

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浙江农业科学 2023年第4期64卷 856-863页

作者：田晓黎江丽洁崔琦刘巨钊浙江中医药大学药学院浙江杭州311402

以华重楼的叶为实验材料,经不同外源激素诱导后,用UPLC测定延龄草苷、薯蓣次皂苷A、重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量,通过叶片RNA提取,并结合实时荧光定量PCR分析得到关键酶基因表达的规律。结果表明,7种不同的外源激素诱导后,重楼皂苷含... 详细信息

以华重楼的叶为实验材料,经不同外源激素诱导后,用UPLC测定延龄草苷、薯蓣次皂苷A、重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量,通过叶片RNA提取,并结合实时荧光定量PCR分析得到关键酶基因表达的规律。结果表明,7种不同的外源激素诱导后,重楼皂苷含量均有显著提高,得到茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)作为最适合促进叶片中甾体皂苷积累的植物激素,处理效果最佳;用不同浓度MeJA诱导不同时间后,测定cyp90B52、cyp72A616、cyp94D108、cyp94D 109的相对表达量,均表现为随时间增长先上升后下降的趋势,且大部分在36 h达到峰值,72 h急速降低之后缓慢下降。cyp90B 52基因的相对表达量是4个基因中最高的;可以通过喷洒MeJA增加叶片中甾体皂苷等有效成分的积累,实现华重楼资源的合理开发利用。

关键词：华重楼重楼皂苷 cyp基因茉莉酸甲酯植物激素

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家蚕cypA基因的克隆、表达谱及进化分析

昆虫学报 2008年第4期51卷 349-356页

作者：李春峰刘文明黄科范晓东周泽扬西南大学蚕学与系统生物学研究所

cyp蛋白家族在蛋白质折叠过程中起着重要作用。本研究克隆了家蚕Bombyx mori cypA基因(BmcypA),该基因由2个外显子和1个内含子组成,推导开放阅读框编码165个氨基酸,分子量为19.4kD,等电点为8.79。序列分析表明BmcypA在不同物种间具有高... 详细信息

cyp蛋白家族在蛋白质折叠过程中起着重要作用。本研究克隆了家蚕Bombyx mori cypA基因(BmcypA),该基因由2个外显子和1个内含子组成,推导开放阅读框编码165个氨基酸,分子量为19.4kD,等电点为8.79。序列分析表明BmcypA在不同物种间具有高度的保守性,含有肽酰脯氨酸顺反异构酶活性位点及与CsA侧链结合的氨基酸,提示BmcypA可能具有肽酰脯氨酸顺反异构酶活性和与CsA结合的特性。组织表达谱及EST数据分析显示,BmcypA在丝腺中高丰度表达。通过对不同物种来源的cyp基因的进化分析,进一步预测了Bmcyp基因的功能,Bmcyp可能与丝蛋白的正确折叠相关。

关键词：家蚕 cyp基因丝腺基因克隆系统进化表达谱

对松材线虫胁迫响应的哈茨木霉细胞色素P450家族基因的生物信息学分析

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吉林农业大学学报 2021年

作者：张锴逯昕明周贺焦宁赫俊阳宋瑞清东北林业大学林学院

通过对哈茨木霉（Trichoderma harzianum）E15在松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus）胁迫下的转录组数据中筛选得到10个细胞色素P450（cyp）基因，依次命名为Thcyp1～Thcyp10，通过基因理化性质、系统发育进化关系、氨基酸多序列比... 详细信息

通过对哈茨木霉（Trichoderma harzianum）E15在松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus）胁迫下的转录组数据中筛选得到10个细胞色素P450（cyp）基因，依次命名为Thcyp1～Thcyp10，通过基因理化性质、系统发育进化关系、氨基酸多序列比对、基因结构分析、保守基序分析和启动子分析等生物信息学的方法对哈茨木霉E15 cyp基因进行研究。在理化性质上10个cyp基因基本相似，亚细胞定位主要在线粒体膜上。通过将绿木霉（Trichoderma virens）和里氏木霉（Trichoderma reesei）的cyp基因同哈茨木霉E15 cyp基因建立系统发育树，发现亲缘关系非常接近。在氨基酸多序列比对上，10个cyp基因有多个保守位点共同组成保守结构域，其中包括氧结合结构域、K-螺旋序列、血红素结合位点保守结构序列。在基因结构上，CDS区域完整，并且基因长度基本相似。在保守基序上分析，发现10个cyp基因保守基序高度相似，拥有大部分相同的保守基序来发挥抗逆的关键作用。在启动子区域分析上，10个cyp基因有7个顺势作用元件中在启动子区域都有分布，主要是ABRE和CGTCA-motif，这些对松材线虫的抗逆发挥了巨大作用，其中Thcyp2有TC-rich repeats在启动子区域有分布，这也进一步增加了对松材线虫的抗逆。

关键词：哈茨木霉E15 松材线虫 cyp基因生物信息学分析

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微小隐孢子虫20K亲环蛋白基因克隆及分析

中国公共卫生 2013年第1期29卷 58-61页

作者：孙小会杨光王穗湘张丽菊付芹芹郭志云陈川荆春霞暨南大学医学院流行病学教研室广东广州510632 暨南大学医学院人体寄生虫学系

目的克隆微小隐孢子虫(Cp)南京株(NJ)的20K亲环蛋白(cyp)基因,并对其核苷酸和氨基酸序列进行分析。方法采用昆明种小鼠建立微小隐孢子虫NJ株感染模型,根据微小隐孢子虫Iowa II株20K cyp基因序列设计合成2对引物,应用巢式PCR技术从微小... 详细信息

目的克隆微小隐孢子虫(Cp)南京株(NJ)的20K亲环蛋白(cyp)基因,并对其核苷酸和氨基酸序列进行分析。方法采用昆明种小鼠建立微小隐孢子虫NJ株感染模型,根据微小隐孢子虫Iowa II株20K cyp基因序列设计合成2对引物,应用巢式PCR技术从微小隐孢子虫NJ株基因组DNA中扩增20K cyp基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,将阳性克隆重组质粒进行菌落PCR及双酶切鉴定;应用生物信息学方法分析微小隐孢子虫NJ株20K cyp基因与其他虫株核苷酸和氨基酸序列差异,并分析该基因蛋白结构域。结果巢式PCR扩增得到特异的20K cyp基因,经PCR及双酶切鉴定获得了正确的pMD18-T-20K cyp重组质粒;测序结果显示,微小隐孢子虫NJ株20K cyp基因全长519 bp,编码173个氨基酸,该基因已登录GenBank,登录号为JQ284431;氨基酸序列分析表明,微小隐孢子虫NJ株与Iowa II株20K cyp基因编码的氨基酸序列具有100%同源性;对20K cyp基因进行蛋白结构域分析,显示该基因序列所编码的蛋白具有特异性类亲环蛋白A、B、H的肽脯氨酰顺反异构酶(PPIase)区域,该区域与人的亲环蛋白A、B、H具有相似性。结论成功克隆微小隐孢子虫NJ株20K cyp基因,该基因具有高度保守性。

关键词：微小隐孢子虫(Cp) cyp基因克隆生物信息学

啶虫脒对萼花臂尾轮虫生理生态特征和相关基因表达的影响

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啶虫脒对萼花臂尾轮虫生理生态特征和相关基因表达的影响

作者：白琰安徽师范大学

学位级别：硕士

啶虫脒(acetamiprid)作为一种应用广泛且水溶性佳的杀虫剂,在全球多国水体中存在。植食性的萼花臂尾轮虫(Brachionus calyciflorus)作为初级消费者在水生态系统中处于关键的位置,被认为是外源污染物通过水体进入食物网的重要途径之一,... 详细信息

啶虫脒(acetamiprid)作为一种应用广泛且水溶性佳的杀虫剂,在全球多国水体中存在。植食性的萼花臂尾轮虫(Brachionus calyciflorus)作为初级消费者在水生态系统中处于关键的位置,被认为是外源污染物通过水体进入食物网的重要途径之一,是毒理学研究中重要的模式生物。因此,本文以萼花臂尾轮虫为受试生物,实验室内研究了啶虫脒对萼花臂尾轮虫的急性毒性和慢性毒性(生活史特征、个体大小、摄食行为、消化酶活性和抗氧化解毒酶活性和相关基因的表达)效应。研究主要方法和结果总结如下:在(24±1)℃、无光照、不投喂饵料的条件下,啶虫脒对萼花臂尾轮虫的24-h LC50为1341.915mg/L(95%置信区间为1275.122～1407.180 mg/L)。采用生命表和3天种群增长实验等方法,在(24±1)℃、1.5×10个细胞/m L斜生栅藻(Scenedesmus obliquus)条件下,研究了亚致死浓度(0、30、80、130、180、230、280和330 mg/L)啶虫脒对萼花臂尾轮虫生命表统计学参数和种群增长率的影响。结果显示,啶虫脒浓度对萼花臂尾轮虫的生命期望、净生殖率、种群内禀增长率和种群增长率均有显著性影响(P0.05)。与对照组相比,180～330 mg/L啶虫脒处理组中轮虫的生命期望显著降低(P基因做相对定量检测,研究了不同浓度啶虫脒(0、0.3、3和30 mg/L)对萼花臂尾轮虫28个细胞色素P450(cytochrome P450,cyp)基因表达的影响。结果显示,啶虫脒浓度对萼花臂尾轮虫的5个CY

关键词：新烟碱类杀虫剂啶虫脒轮虫生命表统计学参数种群增长个体大小摄食酶活性 cyp基因

赤拟谷盗保护酶和细胞色素P450酶介导磷化氢抗性的机理研究

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赤拟谷盗保护酶和细胞色素P450酶介导磷化氢抗性的机理研究

作者：王亚洲南京财经大学

学位级别：硕士

磷化氢(PH)是世界范围内使用最普遍的储粮害虫熏蒸剂,具有穿透性强、扩散性好、成本低廉、使用方便、残留少等优点。然而由于长期、单一的使用以及使用过程中一些不规范的操作,导致储粮害虫对磷化氢产生了严重的抗药性。本文针对储粮害... 详细信息

磷化氢(PH)是世界范围内使用最普遍的储粮害虫熏蒸剂,具有穿透性强、扩散性好、成本低廉、使用方便、残留少等优点。然而由于长期、单一的使用以及使用过程中一些不规范的操作,导致储粮害虫对磷化氢产生了严重的抗药性。本文针对储粮害虫磷化氢抗性越来越强,严重危害储粮安全,以及造成巨大经济损失的现实问题,以重要储粮害虫赤拟谷盗作为研究对象,测定来自我国不同地区的储粮害虫对磷化氢和空仓熏蒸剂(敌敌畏)的抗性水平,通过酶活性测定方法研究超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和细胞色素P450酶与磷化氢抗性的关系,最后利用基因定量技术研究赤拟谷盗2条P450基因(cyp345A1和cyp345A2)介导磷化氢抗性的分子机理,其研究结果如下:1.我国不同地区赤拟谷盗的磷化氢和敌敌畏抗性测定及分析采用联合国粮食及农业组织(FAO)推荐的磷化氢抗性测定方法,对来自不同地区的赤拟谷盗的磷化氢抗性水平进行测定,结果表明,16个品系的磷化氢抗性系数范围为1.7-44.4。结合实验室已有赤拟谷盗磷化氢抗性数据(12个品系),从不同地区和不同场所两个方面进行数据分析,结果表明,赤拟谷盗高抗性品系多发生于我国南方地区。就不同场所而言,赤拟谷盗高抗性的品系多发生于加工厂(面粉加工厂、大米加工厂等)和粮库,而采自农户的品系抗性水平普遍较低。采用药膜法对来自不同地区的赤拟谷盗的敌敌畏抗性水平进行测定,结果表明,16个赤拟谷盗品系的致死中浓度(LC)值在0.044 g/L-0.110 g/L之间,相对抗性系数在2.50倍以内,表明这些赤拟谷盗对于敌敌畏的抗药性差异不大。2.赤拟谷盗超氧化物歧化酶和过氧化氢酶酶活性测定及分析采用NBT光还原法对不同品系赤拟谷盗的超氧化物歧化酶(SOD)酶活性进行测定,结果表明,25个品系的赤拟谷盗超氧化物歧化酶酶活性范围为4439.13U/μg-9098.67 U/μg。数据分析结果表明,SOD酶活性与磷化氢抗性水平之间没有显著相关性(P>0.05)。磷化氢胁迫之后,SOD酶活性随着胁迫时间延长逐渐增加,胁迫20 h后,6个品系SOD酶活性增加0.90-2.08倍。采用钼酸铵显色法对不同品系赤拟谷盗过氧化氢酶(CAT)酶活性进行测定,结果表明,CAT酶活性范围为45.51 U/μg-416.35 U/μg。数据分析结果表明,CAT酶活性与磷化氢抗性水平之间没有显著相关性(P>0.05)。磷化氢胁迫之后,CAT酶活性随着胁迫时间延长,胁迫20 h后,6个品系CAT酶活性下降为原来的0.09-0.42倍。3.赤拟谷盗细胞色素P450比活力测定及分析测定了16个赤拟谷盗品系的P450酶比活力,并结合实验室已有的12个赤拟谷盗品系P450酶比活力数据分析,结果表明,28个赤拟谷盗品系P450比活力的范围为0.81 EU of P450/μg-3.30 EU of P450/μg,抗性品系的P450比活力显著高于敏感品系(P基因的表达量测定及与磷化氢抗性的相关性分析通过实时荧光定量PCR技术测定了不同磷化氢抗性的赤拟谷盗的cyp345A1和cyp345A2基因的表达量,结果表明,cyp345A1基因的表达量范围为1.00-16.60,cyp345A2基因的表达量范围为1.00-12.05,且随着磷化氢抗性的提高,基因的表达量也随之提高。

关键词：赤拟谷盗磷化氢抗性超氧化物歧化酶过氧化氢酶细胞色素P450 cyp基因