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膝骨性关节炎中医证型与X线、超声影像学及血清col-ⅱ、CTX-Ⅱ、col10A1水平的相关性研究

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膝骨性关节炎中医证型与X线、超声影像学及血清COL-Ⅱ、CTX-Ⅱ、C...

作者：马涛甘肃中医药大学

学位级别：硕士

目的:观察膝骨性关节炎（Knee osteoarthritis,KOA）患者X线、超声影像学具体改变及血清col-ⅱ、CTX-Ⅱ以及col10A1表达水平,进而探讨KOA中医证型与上述指标与之间的关联性,为KOA辨证分型研究提供客观依据。方法:按照纳入标准选取甘肃... 详细信息

目的:观察膝骨性关节炎（Knee osteoarthritis,KOA）患者X线、超声影像学具体改变及血清col-ⅱ、CTX-Ⅱ以及col10A1表达水平,进而探讨KOA中医证型与上述指标与之间的关联性,为KOA辨证分型研究提供客观依据。方法:按照纳入标准选取甘肃中医药大学附属医院骨伤门诊KOA患者96例,对其四诊资料进行收集后按中医证候标准进行辨证分型,行患膝X线、超声检查进行阅片后记录相关改变,应用ELISA法检测受试者血清col-ⅱ、CTX-Ⅱ及col10A1表达水平,进行统计学分析后分析其相关性。结果:本研究各项标准筛选后共选择96例KOA病例,中医证型出现频率由高到低排列,第一是肝肾亏虚型（42.71%）;第二是瘀血闭阻型（25%）;第三是风寒湿痹型（18.75%）;第四是风湿热痹型（13.54%）;比较不同证型与病程发现,肝肾亏虚型病程最长且对比其他证型有统计学意义（P＜0.01）;而与年龄、性别、发病关节之间的比较无统计学意义。各证型在X线K-L分级具有明显差异,Ⅰ级中风湿热痹型占比最高（46.2%）,Ⅱ级中风寒湿痹型占比最高（44.4%）,Ⅲ级中肝肾亏虚型占比最高（48.8%）,其次为瘀血闭阻型（41.7%）,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）。而在中医证型与X线具体改变的对比中,在髌股关节骨赘分级0级（正常）中,占比最高的两型是风寒湿痹（55.6%）和风湿热痹（53.8%）,在1级（骨棘变尖）中,占比最高的两型是瘀血闭阻（62.5%）和肝肾亏虚（46.3%）,差异较其余两型有统计学意义（P＜0.05）;在胫骨髁间骨赘分级0级（正常）中,占比最高的两型是风寒湿痹（55.6%）和风湿热痹（53.8%）,在2级（明显）中,占比最高的两型是瘀血闭阻（37.5%）和肝肾亏虚（34.1%）,差异较其余两型有统计学意义（P＜0.05）;KOA患者出现软骨下骨硬化占比最高的是肝肾亏虚型（68.3%）,其次是风寒湿痹型（55.6%）（P＜0.05）;肝肾亏虚型KOA膝关节半脱位占比较风寒湿痹型和风湿热痹型高,最低的是风寒湿痹型（P＜0.05）;而不同证型与内外侧胫股、髌骨关节狭窄情况、内外侧胫股关节骨赘情况、髌骨Wiberg分型、胫骨角、胫股角、软骨下骨囊性改变、局部骨质疏松以及关节内游离体情况对比均无统计学差异（P＞0.05）;分析证型与超声相关性,不同中医证型髌上囊积液前后径由大到小依次排列为瘀血闭阻、风湿热痹、肝肾亏虚、风寒湿痹,且有显著差异（P＜0.01）;不同中医证型滑膜厚度由大到小依次排列为瘀血闭阻、肝肾亏虚、风湿热痹、风寒湿痹,且有显著差异（P＜0.01）;从三部位软骨厚度来看,肝肾亏虚型KOA患者三部位软骨厚度均较其余三型变薄,差异有显著性意义（P＜0.001）。在col-ⅱ水平,肝肾亏虚型较风寒湿痹及风湿热痹型高（P＜0.05）;在CTX-Ⅱ水平,风寒湿痹型较其余三型均低（P＜0.001）;在col10A1水平,瘀血闭阻型最高,风寒湿痹型最低（P＜0.001）。col-ⅱ水平在K-L分级上由小到大排列为Ⅰ＜Ⅱ＜Ⅳ＜Ⅲ,CTX-Ⅱ、col10A1水平排列则为Ⅰ＜Ⅳ＜Ⅱ＜Ⅲ（P＜0.001）。结论:1、KOA中医证型和X线等级及其具体改变存在关联性,其中风湿热痹型与风寒湿痹型多见于Ⅰ、Ⅱ级,肝肾亏虚型和瘀血闭阻型多见于Ⅲ、Ⅳ级;瘀血闭阻型和肝肾亏虚型KOA更容易出现胫骨髁间骨赘及髌股关节骨赘;肝肾亏虚型KOA最易于出现软骨下骨硬化,其次是风寒湿痹型;膝关节半脱位最容易发生于肝肾亏虚型KOA。2、超声检查为KOA辨证分型提供一定依据,髌上囊积液增多常见于瘀血闭阻型和风湿热痹型KOA,在风寒湿痹型中少见;滑膜增厚多见于瘀血闭阻型和肝肾亏虚型KOA;而肝肾亏虚型KOA更容易出现软骨厚度变薄。3、血清col-ⅱ、CTX-Ⅱ以及col10A1水平可为KOA辨证分型提供客观依据,col-ⅱ可作为肝肾亏虚型KOA的参考指标;CTX-Ⅱ可作为风寒湿痹型KOA的参考指标;col10A1可作为瘀血闭阻型KOA的参考指标。4、血清col-ⅱ、CTX-Ⅱ以及col10A1水平结合K-L分级可以有效反映KOA的严重程度,即在K-L分级Ⅰ到Ⅳ级呈现出先上升,在Ⅲ级时浓度达到顶峰后再开始下降的趋势。

关键词：膝骨性关节炎中医证型影像学 col-ⅱ CTX-Ⅱ col10A1

益气养血方对兔膝关节软骨col-II、MMP13表达的影响及其治疗KOA的临床研究

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益气养血方对兔膝关节软骨COL-II、MMP13表达的影响及其治疗KOA的...

作者：钱富艳云南中医学院

学位级别：硕士

目的：探讨益气养血方对软骨组织、软骨细胞中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、Ⅱ型胶原(col-ⅱ)的影响,揭示其治疗骨关节炎(OA)部分药理效应及部分作用机制,并通过临床研究探讨其治疗膝骨关节炎的临床疗效和安全性,为益气养血方治疗膝骨关... 详细信息

目的：探讨益气养血方对软骨组织、软骨细胞中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、Ⅱ型胶原(col-ⅱ)的影响,揭示其治疗骨关节炎(OA)部分药理效应及部分作用机制,并通过临床研究探讨其治疗膝骨关节炎的临床疗效和安全性,为益气养血方治疗膝骨关节炎(KOA)提供理论依据。方法：1.以改良Hulth法建立右膝OA模型,分为假手术组、KOA模型组、阳性药(硫酸氨基葡萄糖钾胶囊)组、益气养血方组各10只,药物干预6周后,采用HE染色观察软骨退变情况,免疫组化检测软骨中MMP13、col-ⅱ的表达;2.临床研究按纳入及排除标准将所选膝骨关节炎病例60例,随机分为治疗组对照组各30例。治疗组给予益气养血颗粒,对照组给予硫酸氨基葡萄糖钾胶囊,疗程为4周。疗程结束后,观察两组临床症状、体征、症候积分、SF-36生活量表以及血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)的变化。结果：1.实验研究显示：与KOA模型组相比,益气养血方组与阳性药物组膝关节软骨表面相对平整,HE染色观察软骨细胞排例相对整齐,软骨层变薄较轻,两组软骨细胞内MMP-13、col-ⅱ表达与模型组相比差异有统计学意义(P0.05)。2.两组的疾病疗效、中医证候疗效、WOMAC指数积分、SF-36生活质量、CRP均有改善(P0.05)。结论：1.益气养血方对兔膝关节软骨具有保护作用,推断其可能调节兔膝关节软骨细胞中MMP-13、col-ⅱ的表达,来延缓关节软骨退变。 2.益气养血方是治疗膝骨关节炎安全有效的药物,值得进一步研究。

关键词：益气养血方膝骨关节炎软骨组织 MMP-13 col-ⅱ 临床疗效

ECM相关基因在兔膝关节软骨细胞损伤后的表达变化

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ECM相关基因在兔膝关节软骨细胞损伤后的表达变化

作者：白笙君蚌埠医学院

学位级别：硕士

目的:检测MMP-2、MMP-3、MMP-9、TIMP-3及col-ⅱ细胞外基质因子在兔关节软骨细胞划伤后不同时间点的表达变化。方法:从成年的新西兰大白兔的膝关节股骨下端关节面分离出关节软骨组织,进行原代六孔板培养。待细胞长出基本完全融合时,将... 详细信息

目的:检测MMP-2、MMP-3、MMP-9、TIMP-3及col-ⅱ细胞外基质因子在兔关节软骨细胞划伤后不同时间点的表达变化。方法:从成年的新西兰大白兔的膝关节股骨下端关节面分离出关节软骨组织,进行原代六孔板培养。待细胞长出基本完全融合时,将培养的细胞分成4组。分别为正常组,损伤后1、3、7天组。第1组不做任何处理,留作正常对照;第2至4组细胞使用无菌10μl枪头在六孔板中呈“#”字划伤,在划痕过程中,力度与速度一致,其中,间距为0.5 cm。采用实时PCR检测1、3、7和0天时间点基质金属蛋白酶-2、3和9,基质金属蛋白酶抑制物-3及Ⅱ型胶原相对表达水平。结果:成功获取软骨,经原代培养后成功建立损伤细胞模型。MMP-2 mRNA表达水平在损伤后1,3,7天均比正常组升高,其中第7天最高(Pcol-ⅱ mRNA表达水平在损伤后第1,3,7天均比正常组升高,第1天达到最高(P<0.05)。结论:ECM相关基因在细胞损伤后的不同时间点存在不同表达行为,这可为调节细胞外基质基因选择合适的靶基因与时间窗,促进受损的关节软骨愈合奠定实验基础。

关键词：软骨细胞损伤 MMP-2 MMP-3 MMP-9 TIMP-3 col-ⅱ

瘦素对三维培养大鼠关节软骨细胞活性及其相关基因（Aggrecan、TGF-β1）表达的影响

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瘦素对三维培养大鼠关节软骨细胞活性及其相关基因（Aggrecan、TG...

作者：张磊华北煤炭医学院

学位级别：硕士

瘦素首次证明存在时在1994年美国洛克菲勒大学实验室利用位点克隆技术分别克隆小鼠和人类的同源序列(ob基因)而证实的[1],并证明了其基因、分子结构及其生理作用。瘦素主要由白色脂肪产生,但是其他组织也可以产生,例如软骨、骨、棕色脂... 详细信息

瘦素首次证明存在时在1994年美国洛克菲勒大学实验室利用位点克隆技术分别克隆小鼠和人类的同源序列(ob基因)而证实的[1],并证明了其基因、分子结构及其生理作用。瘦素主要由白色脂肪产生,但是其他组织也可以产生,例如软骨、骨、棕色脂肪等等。近年来人们对瘦素的研究涉及许多领域,发现其与很多疾病多有关联,这些疾病包括肥胖、糖尿病、骨质疏松等等[2]。尤其发现,在软骨内成骨的过程中,瘦素也起着一定的作用[3],可能通过促进软骨细胞的增殖使得生长板增高,而最终使得长骨增长。有研究证实[4、5]人类关节软骨细胞表面存在瘦素受体,并且瘦素可以增加成年小鼠关节软骨的厚度。瘦素在骨性关节炎的发病中也有一定的作用,有人发现骨性关节炎病人关节液中含有瘦素,并且与关节炎的严重程度成正比,但是关于两者之间具体的影响关系还需要进一步研究证实[6]。关节软骨为覆盖关节面的一层光亮的低摩擦、富有弹性、高渗透性的特异化结缔组织,主要由软骨细胞和细胞基质构成,其功能是传导及分布载荷、维持和承受关节面的接触应力。关节软骨是无血管、淋巴管和神经的组织,所以自我修复能力相当有限,轻微伤害就有可能导致渐进式的损伤[7]。正是如此,许多年来软骨损伤修复一直是临床和基础研究的重点、难点。现如今人们研究出许多方法来修复受损的软骨,如用支架代替受损区域、用一些药物促进软骨组织的重建等等,虽然取得了一些效果,但是由于种种原因而不能普及治疗。软骨组织内含有多种生长因子并分泌一些基质成分,主要包括转化生长因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)、胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor, IGF)、骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein, BMP)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor, FGF)、II型胶原(type II collagen)、蛋白多糖(aggrecan)等,它们通过自分泌、旁分泌等方式,共同作用于软骨细胞分裂、生长、成熟、老化的各个阶段。我们先前实验已经研究了平面培养的软骨细胞在不同浓度瘦素干预下无论是细胞的活性、II型胶原的分泌还是TGF-β1、IGF-I表达量均较空白组明显增加;但体外三维立体条件下,瘦素对软骨细胞干预情况还未做研究。本实验旨在体外三维环境中研究瘦素对软骨细胞干预情况,为将来软骨细胞回植体内、临床修复软骨损伤提供借鉴。目的本实验旨在研究瘦素对体外三维培养大鼠关节软骨细胞的活性、增殖、细胞表型及功能的影响,并探讨其对软骨修复及基质降解相关的关键基因col-II、aggrecan、TGF-β1表达的影响,从而以得出的结果来更好的指导临床关于软骨组织修复及软骨组织工程学的发展。方法 1取3-4周龄大鼠,处死后无菌条件下取膝关节软骨细胞,用机械法和酶消法制成细胞悬液,单层培养扩增后进行体外三维培养;2对培养的大鼠关节软骨细胞进行形态观察及鉴定;3试验分组:按试验方法分为两组单纯三维条件下培养的软骨细胞,瘦素(浓度为10ng/ml)作用条件下三维培养的软骨细胞;4用MTT法及流式细胞仪测定软骨细胞经瘦素刺激不同时间的细胞增殖情况;5采用PCR法检测软骨细胞经瘦素刺激不同时间表达TGF-β1、aggrecan的情况;6用SPSS13.0软件对结果进行统计学分析。结果 1采用细胞体外培养方法成功培养出大鼠关节软骨细胞,并通过形态观察和特殊染色得到证实。 2瘦素组细胞增殖明显高于空白组,最佳作用时间为作用24h时,继续瘦素刺激细胞增殖不明显,并有抑制作用的趋势。 3瘦素组aggrecan、TGF-β1基因表达明显高于空白组,最佳时间为作用24h时。结论 1与空白组对比,瘦素组可以显著提高软骨细胞的活性;2与空白组对比,瘦素组可促进体外三维培养大鼠关节软骨细胞增殖 3与空白组对比,瘦素可加强TGF-β1 mRNA表达,以防止细胞外基质降解,有修复软骨的潜能。 4与空白组对比,瘦素可加强aggrecan mRNA表达,可促进细胞外基质的生成,给软骨细胞提供良好的生存环境。

关键词：瘦素关节软骨 col-ⅱ aggrecan TGF-β1

捏脊疗法对颈椎病模型大鼠椎间盘软骨细胞外基质及基质金属蛋白酶的影响

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捏脊疗法对颈椎病模型大鼠椎间盘软骨细胞外基质及基质金属蛋白酶...

作者：黄萍萍福建中医药大学

学位级别：硕士

目的：观察捏脊疗法对颈椎病模型大鼠椎间盘软骨细胞外基质代谢及MMPs/TIMPs的影响。方法：40只健康的SD大鼠,雌雄各半,随机分为假手术对照组(简称假手术组)10只,造模组30只。造模组参照动静力失衡性颈椎间盘退变的造模方法进行造模;假... 详细信息

目的：观察捏脊疗法对颈椎病模型大鼠椎间盘软骨细胞外基质代谢及MMPs/TIMPs的影响。方法：40只健康的SD大鼠,雌雄各半,随机分为假手术对照组(简称假手术组)10只,造模组30只。造模组参照动静力失衡性颈椎间盘退变的造模方法进行造模;假手术组仅是将皮肤切开后直接缝合,并没有切断肌肉组织,仅当作空白对照。造模后的大鼠常规给予饲养3个月,再采用甲苯胺蓝进行染色,通过观察椎间盘组织的形态学结构改变,来判断造模的成功与否。确定造模成功后将造模组的大鼠,按照随机数字表法,分成模型对照组(简称模型组)、模型捏脊组(捏脊组)、模型莫比可组(简称莫比可组),每组各8只。捏脊组大鼠采用自制的松紧带进行固定,捏脊治疗手法如下：用一只手固定好大鼠而另一只手的示指与拇指的指腹同时轻轻地将大鼠脊柱两侧的皮肤提起,从脊中线的尾根部交替地捻动向前一直至“大椎”穴处为一次,总共14次;从第8次开始,用双手拇指的桡侧缘顶住大鼠的皮肤,示指与中指向前按,三指需同时提拿大鼠皮肤,双手从脊中线的尾根部交替地捻动向前一直至“大椎”穴,并且要做到捏三提一,力量要以大鼠较为平静且不吵闹为度,每天捏脊治疗一次,连续2周为一个疗程,间隔2天后,再开始进行下一个疗程,总共有2个疗程。莫比可组每天给予莫比可片按0.7878 mg/kg进行灌胃干预,治疗的疗程与捏脊组一致;假手术组与模型组只做固定不予其它的治疗处理,其固定的时间与捏脊组一致。治疗结束后,取椎间盘,通过免疫组织化学法检测颈椎间盘软骨细胞内MMP-1、MMP-3、MMP-13,TIMP-1, col-ⅱ的表达,采用Western blot半定量检测法检测椎间盘软骨细胞内的ECM蛋白表达水平。结果：(1)甲苯胺蓝染色：在假手术组中,软骨终板的染色呈深蓝紫色,软骨的终板厚度较厚,软骨细胞的数目较多,软骨细胞的细胞外基质也较丰富。而在造模组中,软骨终板的染色变淡,厚度变薄,软骨细胞的数目以及细胞外基质变少。(2)免疫组织化学检测：与假手术组的相比,模型组中MMP-1、MMP-3、MMP-13表达均升高,col-ⅱ、 TIMP-1表达均降低,差异均有统计学意义(Pcol-ⅱ、 TIMP-1表达均升高,差异均有统计学意义(Pcol-ⅱ蛋白的表达。(3)捏脊疗法可能是通过调节了MMPs/TIMPs的平衡从而影响椎间盘软骨细胞外基质的代谢,进而达到延缓颈椎间盘退变的目的。

关键词：捏脊疗法颈椎病 col-ⅱ MMPs/TIMPs ECM

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白芍木瓜汤防治大鼠骨性关节炎的实验研究

白芍木瓜汤防治大鼠骨性关节炎的实验研究

作者：徐丽静浙江中医药大学

学位级别：硕士

目的:建立骨性关节炎大鼠模型,用白芍木瓜汤治疗干预,观察白芍木瓜汤对OA大鼠一般情况、体重、抓力、影像学和病理学表现的影响,验证白芍木瓜汤对OA大鼠防治作用,并探讨其对骨性关节炎的可能作用机制。方法:清洁级雄性SD大鼠,共50只,将... 详细信息

目的:建立骨性关节炎大鼠模型,用白芍木瓜汤治疗干预,观察白芍木瓜汤对OA大鼠一般情况、体重、抓力、影像学和病理学表现的影响,验证白芍木瓜汤对OA大鼠防治作用,并探讨其对骨性关节炎的可能作用机制。方法:清洁级雄性SD大鼠,共50只,将其随机分成5组:正常对照组(A组)、模型对照组(B组)、阳性对照组(C组)、白芍木瓜汤高剂量组(D组)、白芍木瓜汤低剂量组(E组),每组10只。其中正常对照组不予任何处理,其余4组大鼠均采用双侧膝关节腔内注射碘乙酸法,成功建立OA大鼠模型。术后第二天,A、B组给予生理盐水灌胃,C组给予布洛芬灌胃,D、E两组采用不同剂量的中药汤剂灌胃,持续灌胃6周,在此期间,每周称量各组大鼠的体重及测定其抓力程度。至第6周末,对各组大鼠行腹腔麻醉,用X-ray影像观察膝关节结构与状态;心脏采血,并分离血清,用酶联免疫(Elisa)法测定各组大鼠的血清中基质金属蛋白酶13(MMP-13)、软骨蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原(col Ⅱ)含量;并截取膝关节,剔除皮肤与肌肉,EDTA脱钙后分别进行HE染色与SO染色,光镜下观察各组大鼠膝关节病理变化。结果:(1)体重:造模成功后,B组的大鼠体重相对于A组,始终存在显著性差异(P0.05)。(3)膝关节影像:造模成功后,相对于A组,B组大鼠的双膝关节破坏严重,干预治疗6周后,C、D、E组大鼠双膝关节的影像学表现均明显改善,以D组的改善情况最为明显。(4)膝关节病理:造模成功后,相比于A组,B组的大鼠双膝关节破坏程度高;干预治疗6周后,相比于B组,C、D、E组膝关节软骨的病理学均明显改善,以D组的改善情况最为明显。(5)血清含量:造模成功后,相对于A组,B组大鼠血清中的MMP-13含量呈显著性升高(Pcol-ⅱ、Aggrecan含量呈显著性降低(Pcol-ⅱ、Aggrecan含量均呈显著性升高(Pcol Ⅱ合成,从而达到修复软骨有关。

关键词：骨性关节炎大鼠白芍木瓜汤碘乙酸 MMP-13 col-ⅱ Aggrecan

膝关节肢段封闭式熏洗仪的研发及其在老年食蟹猴退变KOA的实验应用及研究

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膝关节肢段封闭式熏洗仪的研发及其在老年食蟹猴退变KOA的实验应...

作者：何浩西南医科大学

学位级别：硕士

目的:膝关节骨性关节炎(KOA)是最常见的退行性骨关节疾病,熏洗疗法在KOA的治疗中越来越受到关注,但传统熏洗法存在空间开放,时间、温度不可控等缺点,针对以上问题,我科研发膝关节肢段封闭式熏洗仪,并使其联合独活寄生汤熏洗治疗自然退变... 详细信息

目的:膝关节骨性关节炎(KOA)是最常见的退行性骨关节疾病,熏洗疗法在KOA的治疗中越来越受到关注,但传统熏洗法存在空间开放,时间、温度不可控等缺点,针对以上问题,我科研发膝关节肢段封闭式熏洗仪,并使其联合独活寄生汤熏洗治疗自然退变KOA的老年食蟹猴,检测其对老年食蟹猴KOA关节软骨中Notch1、MMP-13、col-ⅱ水平表达的影响,探讨膝关节肢段封闭式熏洗仪对KOA的治疗效果,以及独活寄生汤熏洗治疗KOA的治疗效果及作用机制。方法:第一部分,进行膝关节肢段封闭式熏洗仪的设计与研发,并生产出样机,申请专利。第二部分,选取自然退变患有KOA的老年食蟹猴12只,随机分为实验组、对照组、空白对照组,每组各4只。实验组用膝关节肢段封闭式熏洗联合独活寄生汤熏洗,对照组运用传统熏洗法联合独活寄生汤熏洗,空白组用生理盐水进行传统熏洗处理。干预8周后处死动物,制作老年食蟹猴膝关节退变软骨细胞病理切片,镜下观察其病变后行mankin评分,最后对退变软骨细胞Notch1、MMP-13、col-ⅱ免疫组化染色,观察其表达。结果:(1)在继承传统熏洗法的基础上结合现代最新的生物科学技术完成膝关节肢段式熏洗仪的初步设计以及实体模型的制造,已生产出一台样机,申报了国家专利,专利号(ZL 2013 2 0763945.X)。(2)HE染色观察中,实验组、对照组Mankin评分均值低于空白对照组,组间比较差异具有统计学意义(Pcol-ⅱ的阳性表达率均较空白对照组明显升高,组间比较差异有统计学意义(Pcol-ⅱ阳性表达率较对照组显著升高,组间比较差异有统计学意义(Pcol-ⅱ的水平,抑制关节软骨的破坏,有效延缓膝关节退变,达到其治疗作用,膝关节肢段封闭式熏洗仪较传统熏洗法对KOA具有更好的治疗效果。

关键词： KOA 膝关节肢段封闭式熏洗仪独活寄生汤软骨细胞Notch1 MMP-13 col-ⅱ

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降钙素对豚鼠椎间盘退变的治疗作用

降钙素对豚鼠椎间盘退变的治疗作用

作者：刘彬彬河北联合大学

学位级别：硕士

目的Hartley豚鼠是具有自发性椎间盘退变（disc degeneration）的动物模型，通过本实验，可以了解治疗骨质疏松经典药物降钙素（Calcitonin, CT）是否对豚鼠自发性椎间盘退变具有预防和治疗作用。方法将健康1月龄SPF级雌性Hartley豚鼠3... 详细信息

目的Hartley豚鼠是具有自发性椎间盘退变（disc degeneration）的动物模型，通过本实验，可以了解治疗骨质疏松经典药物降钙素（Calcitonin, CT）是否对豚鼠自发性椎间盘退变具有预防和治疗作用。方法将健康1月龄SPF级雌性Hartley豚鼠32只用染料编号并称重记录，随后随机分为4组：基线组（G1）8只，实验开始时即处死;对照组（G2）8只，正常饲养至实验周期3个月时处死;生理盐水给药组（G3）8只，正常饲养至实验周期3个月时开始皮下注射生理盐水16IU/Kg/2d，生理盐水给药组于9个月后处死;降钙素给药组（G4）8只，正常饲养至实验周期3个月时开始皮下注射鲑鱼降钙素16IU/Kg/2d，降钙素给药组于9个月后处死。动物处死时留取完整腰椎椎体与腰椎间盘，腰椎间盘行VG染色并用腰椎间盘组织学评分系统进行评分;骨密度仪分别测量豚鼠腰椎3、4、5椎体骨密度，以及腰椎3-5椎体及其间盘的骨密度;应用免疫组织化学法测量col-ⅱ、MMP-1及MMP-3在腰椎间盘的表达情况并作定量分析。结果1骨密度检查结果显示：与G1组相比，G2组骨密度明显升高，G3组骨密度较G1与G2组高（P＜0.05）;经降钙素治疗的G4组骨密度明显高于G3组（P＜0.05）。2组织学染色观察：与G1组相似，G2组没有出现腰椎间盘退变，G3组较G1与G2组腰椎间盘退变显著，表现为：髓核内出现粘液样变性且脊索细胞外基质较G1组与G2组明显下降。软骨终板细胞数量明显减少，同时终板骨化程度增加。腰椎间盘组织学评分结果显示：与G1组相比，G2组评分结果相近，G3组评分结果显著高于G1与G2组（P＜0.05）;G4组评分结果较G3组低（P＜0.05），并且高于G1组与G2组（P＜0.05）。3免疫组织化学染色结果： G3组MMP-3及MMP-1阳性表达显著高于G1组和G2组(P＜0.05)，G4组阳性表达明显低于G3组;G3组col-ⅱ阳性表达均显著低于G1组与G2组（P＜0.05），G4组col-ⅱ阳性表达明显高于G3组。结论19月龄Hartley豚鼠椎间盘退变显著，Hartley豚鼠作为自发性椎间盘退变模型科学合理。2鲑鱼降钙素（16IU/kg隔日,皮下注射6个月)能够明显降低Hartley豚鼠腰椎间盘细胞内MMP-1与MMP-3的表达，增加Ⅱ型胶原的表达，从而缓解Hartley豚鼠腰椎间盘退变。

关键词：椎间盘退变降钙素 col-ⅱ 基质金属蛋白酶-1 基质金属蛋白酶-3

血清软骨代谢标志物水平与膝关节骨性关节炎患者病情严重程度的关系

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临床医学研究与实践 2019年第31期4卷 103-104页

作者：蒋淑娟郑州市第一人民医院

目的探讨血清Ⅱ型胶原(col-ⅱ)与Ⅹ型胶原α1链(col10A1)水平与膝关节骨性关节炎(KOA)严重程度的关系。方法选取我院收治的96例KOA患者为KOA组,并按照双膝关节负重位X线平片KL分级分组,另选取同期健康体检者25例作为对照组。比较KOA各... 详细信息

目的探讨血清Ⅱ型胶原(col-ⅱ)与Ⅹ型胶原α1链(col10A1)水平与膝关节骨性关节炎(KOA)严重程度的关系。方法选取我院收治的96例KOA患者为KOA组,并按照双膝关节负重位X线平片KL分级分组,另选取同期健康体检者25例作为对照组。比较KOA各亚组患者入院时的关节炎状况;比较KOA各亚组患者及对照组的血清col-ⅱ、col10A1水平。结果WOMAC骨关节炎指数评分随KL等级升高而升高(Pcol-ⅱ、col10A1水平高于对照组(Pcol-ⅱ、col10A1水平高于KL-1、KL-4级组及对照组,KL-4级组明显高于对照组(Pcol-ⅱ和col10A1水平作为软骨代谢标志物,在KOA的早期检测中具有一定的诊断意义,结合影像学KL分级能对疾病进展作出更精准的预测。

关键词：膝关节骨性关节炎 col-ⅱ col10A1