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JAK激酶抑制剂AG490对鼻咽癌cne-2z细胞增殖和凋亡的影响

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癌症 2009年第1期28卷 33-38页

作者：吴民华陈小毅蔡康荣广东医学院组织学与胚胎学教研室广东湛江524023 广东医学院病理学教研室广东湛江524023 广东医学院分析中心广东湛江524023

背景与目的:目前研究表明,JAK-STAT3信号通路的异常激活与细胞恶性转化密切相关。本实验观察JAK激酶抑制剂AG490对鼻咽癌cne-2z细胞增殖、凋亡及凋亡相关基因Survivin、Mcl-1表达的影响,探讨JAK-STAT3信号通路在cne-2z细胞凋亡调控中的... 详细信息

背景与目的:目前研究表明,JAK-STAT3信号通路的异常激活与细胞恶性转化密切相关。本实验观察JAK激酶抑制剂AG490对鼻咽癌cne-2z细胞增殖、凋亡及凋亡相关基因Survivin、Mcl-1表达的影响,探讨JAK-STAT3信号通路在cne-2z细胞凋亡调控中的作用。方法:AG490作用于体外培养的cne-2z细胞。MTT法检测细胞增殖,Hoechst33342荧光活染、流式细胞术检测细胞凋亡,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测STAT3、Survivin和Mcl-1 mRNA表达,Western blot检测STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、Survivin和Mcl-1蛋白表达。结果:100μmol/LAG490作用24、48h后对cne-2z细胞增殖抑制率分别为37.95%和52.99%。流式细胞术显示,经50μmol/L和100μmol/LAG490作用24h后,细胞凋亡率由处理前的1.37%分别提高到9.30%和9.00%(P细胞凋亡形态学改变。细胞STAT3活化程度降低,Survivin、Mcl-1基因表达下调。结论:阻断JAK-STAT3信号通路可抑制cne-2z细胞增殖,并可能通过下调凋亡抑制基因Survivin、Mcl-1表达诱导细胞凋亡。

关键词：鼻咽肿瘤 cne-2z细胞信号转导与转录活化因子3 凋亡生存素 Mcl-1 AG490

芹菜素对人鼻咽癌cne-2z细胞化疗敏感性的增强作用

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中国药理学通报 2012年第1期28卷 88-92页

作者：李明勇黄培春广东医学院病理生理学教研室广东湛江524023

目的观察芹菜素(AP)能否增强人鼻咽癌cne-2z细胞对顺铂(DDP)的化疗敏感性。方法采用MTT法对cne-2z细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术和PI/Ho-echst33258荧光双染法检测细胞凋亡;RT-... 详细信息

目的观察芹菜素(AP)能否增强人鼻咽癌cne-2z细胞对顺铂(DDP)的化疗敏感性。方法采用MTT法对cne-2z细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术和PI/Ho-echst33258荧光双染法检测细胞凋亡;RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2、bax mRNA表达的改变。结果 AP、DDP单用及合用均明显抑制cne-2z细胞的生长,且呈剂量依赖性关系,两药合用时在中、高浓度呈协同效应;流式细胞术和荧光双染法结果表明低浓度AP联合DDP更能明显促进肿瘤细胞的凋亡;与单独用药组比较,RT-PCR结果显示联合用药组bcl-2 mRNA表达明显降低,而bax mRNA表达明显增高。结论芹菜素可增强顺铂对cne-2z细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用,其机制可能与上调bax和下调bcl-2的表达,导致Bcl-2/Bax比值下降有关。

关键词：芹菜素顺铂鼻咽癌中效原理增殖凋亡 cne-2z细胞

蛋白激酶C对鼻咽癌cne-2z细胞蛋白酪氨酸磷酸化的影响

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基础医学与临床 2002年第4期22卷 330-332页

作者：鲍波陈南岳黄培春董传仁何志巍广东医学院病理生理学教研室湛江524023 武汉大学医学院病理生理学教研室武汉430071

利用细胞培养、蛋白激酶C(PKC)的抑制剂和免疫细胞化学法 ,探讨PKC对人低分化鼻咽癌细胞cne 2z中磷酸化酪氨酸蛋白分布的影响。结果发现 :磷酸化酪氨酸蛋白主要在胞膜 (6 5 2 % )与胞浆 (85 % )表达。作用于PKC调节区的抑制剂sphingosi... 详细信息

利用细胞培养、蛋白激酶C(PKC)的抑制剂和免疫细胞化学法 ,探讨PKC对人低分化鼻咽癌细胞cne 2z中磷酸化酪氨酸蛋白分布的影响。结果发现 :磷酸化酪氨酸蛋白主要在胞膜 (6 5 2 % )与胞浆 (85 % )表达。作用于PKC调节区的抑制剂sphingosine(SS) (2× 10 -5mol/L)与作用于催化区的staurosporine(ST) (2× 10 -6mol/L)使其表达减弱、胞膜阳性率分别降低至 12 8%和 9 0 %。提示PKC对cne

关键词：蛋白激酶C 鼻咽癌 cne-2z细胞蛋白酪氨酸磷酸化影响免疫细胞化学法

三氧化二砷诱导鼻咽癌cne-2z细胞凋亡及其作用机制的初步研究

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癌症 2001年第10期20卷 1061-1064页

作者：陈扬超张月飞周克元中山医科大学生物化学教研室广东广州510089 广东医学院生物化学与分子生物学研究所广东湛江524023

目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人鼻咽癌cne2z细胞的生物学效应及其作用机制。方法:台盼蓝计数法计算As2O3的IC50;cne-2z细胞经As2O3处理后,通过流式细胞仪、荧光染色及DNA电泳检测细胞凋亡;流式细胞仪测定bcl2和bax阳性细胞百分率;罗丹... 详细信息

目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人鼻咽癌cne2z细胞的生物学效应及其作用机制。方法:台盼蓝计数法计算As2O3的IC50;cne-2z细胞经As2O3处理后,通过流式细胞仪、荧光染色及DNA电泳检测细胞凋亡;流式细胞仪测定bcl2和bax阳性细胞百分率;罗丹明123染色后进行线粒体膜电位分析。结果:As2O3在一定浓度范围内以浓度依赖的方式抑制cne2z细胞生长,其IC50为(1.35±0.30)μmol/L;0.5～2.0μmol/LAs2O3处理cne2z细胞后,流式细胞仪检测出凋亡峰,荧光显微镜下可见明显的细胞凋亡形态特征,琼脂糖凝胶电泳出现DNA梯形条带;As2O3对bcl2的表达没有影响(P>0.05),但能显著增加bax的表达(Pcne2z细胞凋亡,其机制可能与上调bax表达和降低线粒体膜电位有关。

关键词：三氧化二砷鼻咽肿瘤细胞凋亡 cne-2z细胞

蛋白激酶C对鼻咽癌cne-2z细胞端粒酶活性的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2002年第2期31卷 148-149,152页

作者：鲍波黄培春董传仁陈锦广东医学院病理生理学教研室湛江524023 武汉大学医学院病理生理学教研室武汉430071

为进一步探讨蛋白激酶 C(PKC)调控人低分化鼻咽癌 cne- 2 z细胞生长的机制 ,观察了 PKC对 cne- 2 z端粒酶活性的影响。结果显示 :cne- 2 z细胞有较高的端粒酶活性 ;PKC的抑制剂 Staurosporine显著降低细胞端粒酶活性 (P<0 .0 0 1)。提... 详细信息

为进一步探讨蛋白激酶 C(PKC)调控人低分化鼻咽癌 cne- 2 z细胞生长的机制 ,观察了 PKC对 cne- 2 z端粒酶活性的影响。结果显示 :cne- 2 z细胞有较高的端粒酶活性 ;PKC的抑制剂 Staurosporine显著降低细胞端粒酶活性 (Pcne- 2 z细胞的端粒酶活性 ,PKC可能通过调控端粒酶活性从而影响 cne- 2

关键词：蛋白激酶C 鼻咽癌端粒酶 cne-2z细胞

PKC-α、PKA-Ⅰ反义核酸对鼻咽癌cne-2z细胞生长增殖的影响

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中国病理生理杂志 2003年第4期19卷 494-498页

作者：祝葆华黄培春鲍波陈锦广东医学院病理生理教研室广东湛江524023

目的 :探讨PKC -α和PKA -Ⅰ反义核酸 (asODN)对鼻咽癌cne - 2z细胞生长增殖的影响。方法 :分别用脂质体 (lipofectin ,LP)介导asODN转染鼻咽癌cne - 2z细胞。实验组 :① 0 0 1- 1 0 0 μmol/LPKC -αasODN ;②0 0 1- 1 0 0 μmol/LPK... 详细信息

目的 :探讨PKC -α和PKA -Ⅰ反义核酸 (asODN)对鼻咽癌cne - 2z细胞生长增殖的影响。方法 :分别用脂质体 (lipofectin ,LP)介导asODN转染鼻咽癌cne - 2z细胞。实验组 :① 0 0 1- 1 0 0 μmol/LPKC -αasODN ;②0 0 1- 1 0 0 μmol/LPKA -ⅠasODN ;③ 0 5 0 μmol/LPKC -αasODN +0 5 0 μmol/LPKA -ⅠasODN。对照组 :相应浓度的随机序列 (rODN)。用免疫组化法检测cne - 2z细胞PKC -α和PKA -Ⅰ的表达 ,MTT法检测其生长指数 (growthin dex ,GI) ,软琼脂克隆形成率检测其体外增殖能力。结果 :PKC -αasODN或 /和PKA -ⅠasODN均可阻断其相应PKC-α或PKA -Ⅰ的表达 (P cne - 2z细胞GI和软琼脂克隆形成率 (P cne - 2z生长抑制作用强于PKC -αasODN或PKA -Ⅰa sODN(P 0 0 5 )。结论 :PKC -αasODN和PKA -ⅠasODN均可抑制cne - 2z细胞体外生长和增殖 ,两者具有协同作用。

关键词： PKC-α PKA-I 反义核酸鼻咽癌 cne-2z细胞蛋白激酶C 免疫组化法

一个编码4个不同基因RNAi的shRNA质粒的构建及其对cne-2z细胞增殖、凋亡和小鼠鼻咽癌移植瘤的影响

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郑州大学学报（医学版） 2010年第6期45卷 972-977页

作者：宋英董明敏杨海峰郑州大学第一附属医院耳鼻喉科郑州450052 郑州市管城区疾病预防控制中心疾病控制科郑州450000

目的:构建同时表达VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因的shRNA真核表达质粒,研究其对人鼻咽癌细胞系cne-2z的干扰作用。方法:根据VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因序列,各设计2条寡核苷酸序列,合成互补DNA链,插入真核表达质粒pGenesil-1... 详细信息

目的:构建同时表达VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因的shRNA真核表达质粒,研究其对人鼻咽癌细胞系cne-2z的干扰作用。方法:根据VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因序列,各设计2条寡核苷酸序列,合成互补DNA链,插入真核表达质粒pGenesil-1中,同时构建单基因(VEGF)质粒pGenesil-2。分别转染cne-2z细胞,分为多基因质粒(P-1)组和单基因质粒(P-2)组,并设空白对照(BC)组和阴性对照(NC)组。采用MTT法检测细胞增殖活性。采用实时定量PCR和Western-blot检测4种基因在人鼻咽癌细胞系cne-2z中的表达。体内裸鼠成瘤实验观察单基因和多基因质粒干预对肿瘤的抑制作用。结果:通过酶切和测序证实重组真核表达载体构建正确。MTT显示细胞增殖受到抑制,且多基因质粒对细胞增殖的抑制作用明显强于单基因质粒。目的基因在mRNA和蛋白水平上表达均下降。裸鼠实验显示P-1组抑制肿瘤细胞增长的作用要强于P-2组。结论:成功构建一个载体编码4个不同基因的shRNA质粒载体系统。转染鼻咽癌细胞后,与单独沉默VEGF相比,同时干扰VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因可以更好地抑制细胞增殖。

关键词：质粒构建与鉴定短发卡RNA 鼻咽癌 cne-2z细胞小鼠

蝎毒抗癌多肽对cne-2z细胞膜电位的影响

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河南医科大学学报 2001年第6期36卷 635-655页

作者：孔天翰董伟华王永奎韩雪飞陈华艳河南医科大学生物毒素中心郑州450052

目的 :观察蝎毒多肽 (APBMV)对鼻咽癌cne 2z细胞株细胞膜电位的影响。方法 :细胞经培养传代 ,分组处理。空白对照组加生理盐水 ,其他 3组分别加入浓度为 8,12和 16mg/L的APBMV。采用玻璃微电极细胞内记录法测定cne 2z细胞膜电位 ,MTT法... 详细信息

目的 :观察蝎毒多肽 (APBMV)对鼻咽癌cne 2z细胞株细胞膜电位的影响。方法 :细胞经培养传代 ,分组处理。空白对照组加生理盐水 ,其他 3组分别加入浓度为 8,12和 16mg/L的APBMV。采用玻璃微电极细胞内记录法测定cne 2z细胞膜电位 ,MTT法观察APBMV对cne 2z细胞的毒性作用。结果 :cne 2z细胞经APBMV处理48h后 ,细胞膜负电位 (13 0 0± 3.5 8)mV明显小于空白对照组 (2 3 0 0± 8.2 1)mV ,P 细胞膜呈去极化状态 ;cne 2z细胞代谢MTT的能力下降 ,显示明显的毒性反应。结论 :APBMV可能具有膜毒素的作用 ,通过降低cne 2z细胞膜电位。

关键词：蝎毒抗癌多肽鼻咽癌细胞膜电位 cne-2z细胞 APBMV

口虾蛄提取物对鼻咽癌cne-2z细胞增殖及凋亡的影响

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重庆医学 2010年第20期39卷 2710-2712,2849页

作者：李明勇黄培春广东医学院病理生理学教研室湛江524023

目的探讨口虾蛄乙酸乙酯提取物对鼻咽癌cne-2z细胞的增殖及凋亡相关蛋白表达的影响。方法用MTT比色法检测药物对细胞增殖的作用,流式细胞术和PI/Hoechst33258荧光双染法检测细胞凋亡,Western Blot法检测用药前后凋亡相关基因Bcl-2、Bax... 详细信息

目的探讨口虾蛄乙酸乙酯提取物对鼻咽癌cne-2z细胞的增殖及凋亡相关蛋白表达的影响。方法用MTT比色法检测药物对细胞增殖的作用,流式细胞术和PI/Hoechst33258荧光双染法检测细胞凋亡,Western Blot法检测用药前后凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的改变。结果口虾蛄乙酸乙酯提取物对cne-2z细胞的增殖有显著抑制作用,且可诱导细胞凋亡;随着口虾蛄乙酸乙酯提取物浓度升高,Bax蛋白的表达逐渐增多,而Bcl-2蛋白表达改变不明显。结论口虾蛄乙酸乙酯提取物对cne-2z细胞有显著抗增殖及诱导凋亡作用,其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制与凋亡相关基因Bcl-2/Bax蛋白比值下降有关,但诱导凋亡不是主要机制。

关键词：口虾蛄鼻咽癌凋亡 cne-2z细胞