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肺挫伤患者血清人克拉拉细胞蛋白（cc16）水平变化及临床意义

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肺挫伤患者血清人克拉拉细胞蛋白（CC16）水平变化及临床意义

作者：吴峰皖南医学院

学位级别：硕士

目的:研究人克拉拉细胞蛋白(16kDa Clara cell protein,cc16)在肺挫伤患者血清中的水平变化,从分子生物学角度探讨cc16在肺挫伤的发生机制中的作用及临床意义。方法:选取2013年10月至2014年10月在皖南医学院第一附属医院弋矶山医院胸心... 详细信息

目的:研究人克拉拉细胞蛋白(16kDa Clara cell protein,cc16)在肺挫伤患者血清中的水平变化,从分子生物学角度探讨cc16在肺挫伤的发生机制中的作用及临床意义。方法:选取2013年10月至2014年10月在皖南医学院第一附属医院弋矶山医院胸心外科就诊的42例肺挫伤患者为实验组(采用CT积分法测量将24例轻-中度肺挫伤患者分为实验I组,将18例重度肺挫伤患者分为实验Ⅱ组),同期选取16名健康体检者为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法检测实验组患者伤后24h内及治疗1d、3d、7d、14d(分别标记为T1-T5)的血清cc16水平及对照组清晨(标记为T0)空腹血清cc16的水平。结果:1.实验组肺挫伤患者T1-T5各时间点血清cc16水平均高于对照组T0时间点cc16水平,差异具有统计学意义(Pcc16水平之间均有差异(Pcc16水平均较实验I组同时间点偏高,差异具有统计学意义(Pcc16水平与肺挫伤范围呈正相关(实验I组rs=0.912,P0.05)。结论:肺挫伤患者伤后早期血清cc16水平明显上升,且上升程度与肺挫伤程度及范围呈正相关。而随治疗进程及肺部症状改善,患者血清中cc16水平逐渐下降。血清cc16水平变化可为肺挫伤诊断提供生物学指标。

关键词：人克拉拉细胞蛋白 cc16 肺挫伤临床意义

急性肺损伤大鼠肺组织cc16的表达及其对肺局部炎症反应的调控

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现代免疫学 2005年第6期25卷 502-506页

作者：罗佛全傅华群江西医学院第一附属医院ICU 南昌330006 江西医学院第二附属医院普通外科南昌33006

研究cc16在内毒素急性肺损伤(ALI)发病中的作用。取56只雄性SD大鼠随机分为对照组、内毒素致伤后0.5、1、2、4、6、24h组。用体视学方法测定大鼠肺泡隔面积密度(PASAD)和肺泡隔中性粒细胞(PMN)数。大鼠肺组织匀浆液中cc16蛋白含量测定用... 详细信息

研究cc16在内毒素急性肺损伤(ALI)发病中的作用。取56只雄性SD大鼠随机分为对照组、内毒素致伤后0.5、1、2、4、6、24h组。用体视学方法测定大鼠肺泡隔面积密度(PASAD)和肺泡隔中性粒细胞(PMN)数。大鼠肺组织匀浆液中cc16蛋白含量测定用Westernblot法,促炎因子TNF和IL-6含量测定用放免分析法。肺组织cc16mRNA表达水平测定用半定量RT-PCR法。大鼠肺组织中核因子NF-κB的表达与活化用免疫荧光和Westernblot法。结果显示静脉注射内毒素后6h内,大鼠PASAD逐渐增大,于6h达最大,24h基本恢复至正常,肺泡隔PMN数进行性增多,于6h达峰值,24h恢复。伤后各时相点cc16蛋白水平分别为(0.740±0.212)、(0.630±0.148)、(0.603±0.111)、(0.570±0.125)、(0.529±0.124)、(0.614±0.185),均明显低于对照组(1.000),差异有高度统计学意义(Pcc16mRNA表达水平均明显低于对照组水平,差异有统计学意义。致伤后各时相点肺组织中NF-κB阳性细胞数均明显多于对照组。致伤后各时相点大鼠肺匀浆液中IκB-α含量明显低于对照组。肺匀浆液中促炎因子TNF水平于致伤后0.5h开始迅速升高,于伤后1h达峰值,其后维持在一种高水平状态,于6h后开始恢复。肺匀浆液中IL-6水平于伤后1h开始明显升高,于伤后4h达峰值,6h后开始恢复。cc16与上述多种指标显著相关,提示cc16对肺局部炎症反应有调控作用。cc16表达变化在内毒素致急性肺损伤的发病中有重要作用。

关键词：急性肺损伤 cc16 内毒素

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不同通气模式对老年开腹手术患者血清cc16、IL-8、TNF-α的影响

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不同通气模式对老年开腹手术患者血清CC16、IL-8、TNF-α的影响

作者：胡斌华北理工大学

学位级别：硕士

目的观察不同通气模式对老年开腹手术患者血清中Clara细胞分泌蛋白(cc16)、白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度水平及氧合指数(O1)的影响,探讨适合老年患者的机械通气模式,以减轻肺损伤,减少术后肺部并发症的发生。方法 ... 详细信息

目的观察不同通气模式对老年开腹手术患者血清中Clara细胞分泌蛋白(cc16)、白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度水平及氧合指数(O1)的影响,探讨适合老年患者的机械通气模式,以减轻肺损伤,减少术后肺部并发症的发生。方法选择择期在全身麻醉下行开腹手术的老年患者40例,性别不限,年龄65～75岁,ASAⅡ～Ⅲ级,体重指数19～23kg/m2,采用随机数字表法,将患者分为肺保护性通气策略组(L组)和传统机械通气策略组(H组)两组,每组20例。L组VT设定为6～8ml/kg,PEEP设定为5cmH20,每30min用20～30 cmH20的压力行一次肺复张30s;H组VT设定为10～12ml/kg,不使用PEEP及肺复张。两组吸入氧浓度(:FiO2)均为60%,通过调整RR维持所有患者PETCO2在35～45mmHg。患者术前均在术前禁食、禁饮8小时,入室前30min肌注阿托品0.5mg,入室后开放外周静脉通路,监测心电图(ECG)、血压(BP)、心率(HR)、脉搏血氧饱和度(SPO2)、呼气末二氧化碳分压(PETC02)、脑电双频谱指数(BIS)。局部麻醉下行桡动脉穿刺置管术。两组均采用全凭静脉麻醉,麻醉诱导和麻醉维持药物使用种类一致。标本采集:分别在在麻醉诱导前(TQ)、机械通气后1h(T1)、机械通后2h(T2)、拔管后30min(T3)4个时间点经烧动脉抽取动脉血5ml,其中1ml用于血气分析,并计算氧合指数(OI),4ml保存至真空采血管标好序号送至实验室,离心后取上层血清,再次标号保存于-80℃低温冰箱待测。用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中cc16、IL-8和TNF-α的浓度水平。结果 1两组患者一般情况的比较差异均无统计学意义(P>0.05)。2两组患者OI的比较。组间比较,在T0时间点两组之间差异无统计学意义(P>0.05);在T1、T2、T3三个时间点L组的OI明显高于H组,差异均有统计学意义(P0.05);T3、T4时间点H组的血清TNF-α浓度显著高于L组,差异有统计学意义(P0.05);两组患者T2、T3时间点血清TNF-α的浓度显著增高,与T0时间点相比差异有统计学意义(Pcc16、IL-8浓度的比较。组间比较,在T0时间点两组血清cc16、IL-8的浓度差异均无统计学意义(P>0.05);相较于L组,H组在T1、T2、T3三个时间点的血清cc16、IL-8浓度水平明显升高,差异有统计学意义(Pcc16、IL-8浓度明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺保护性通气策略相较于传统通气策略,可以改善老年开腹手术患者氧合、减轻炎症反应,从而减轻肺损伤。图8幅;表3个;参117篇。

关键词：通气模式老年肺保护 cc16 炎性因子

大气混合污染物对大鼠血清及肺组织cc16表达的影响

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大气混合污染物对大鼠血清及肺组织CC16表达的影响

作者：李可军吉林大学

学位级别：硕士

目的目前城市大气污染问题已经严重威胁着人类的健康,为了探索大气污染物对肺组织损伤的毒性作用机制,我们通过大气混合污染物的染尘染毒实验,了解大气混合污染物作用后的大鼠血清及肺组织cc16的表达水平,为预防大气污染对人体的损害提... 详细信息

目的目前城市大气污染问题已经严重威胁着人类的健康,为了探索大气污染物对肺组织损伤的毒性作用机制,我们通过大气混合污染物的染尘染毒实验,了解大气混合污染物作用后的大鼠血清及肺组织cc16的表达水平,为预防大气污染对人体的损害提供依据。方法本研究在乙醚麻醉下,通过将实验组大鼠注入含有PM2.5的生理盐水混悬液和吸入含有SO2、NO2、CO的空气混合气来建立动物染尘染毒模型。应用ELISA法测定血清和BALF中cc16水平,实时荧光定量RT-PCR检测肺组织cc16mRNA的表达,免疫组化法测定cc16在肺组织中的表达。结果染毒1d组和30d组大鼠肺组织中cc16的含量明显高于对照组,染毒7d组大鼠肺组织中cc16的表达明显低于对照组和染毒1d组(Pcc16的表达明显高于染毒1d组和7d组(Pcc16mRNA的表达高于对照组、染毒1d组和30d组(Pcc16的含量明显高于对照组、染毒1d组和7d组(Pcc16的含量无明显变化。结论 1.大气混合污染物早期炎症反应中(1 d),大鼠肺组织cc16明显高于对照组,而血清及BALF中cc16含量无明显变化,说明在早期炎症中有导致肺组织cc16增高趋势。 2.染毒7d时,大鼠肺组织当中的cc16明显低于对照组,说明肺组织细胞和毛细血管内皮细胞损伤严重。而cc16mRNA表达明显高于对照组,说明在损伤7d的过程当中cc16mRNA代偿性表达增强,cc16mRNA水平变化可作为早期肺损伤的敏感性生物学指标。 3.染毒30d时,血清中cc16含量明显升高,说明染毒后期肺泡组织自我修复过程及代偿性cc16合成增加导致血清中cc16含量明显增多。 4.肺组织中cc16含量降低可作为肺早期损伤的一个重要指标。血清cc16含量增高说明肺组织已进入一个修复期过程。BALF中cc16变化不明显说明BALF中cc16的含量不能作为判定肺组织损伤的一个参考指标。

关键词：大气混合污染物大鼠血清肺组织 cc16

大气混合污染物所致大鼠肺IFN-γ与cc16水平变化的研究

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大气混合污染物所致大鼠肺IFN-γ与CC16水平变化的研究

作者：程阳中国医科大学

学位级别：硕士

前言大气污染一直是世界各国关注的环境问题,但对于大气混合污染物导致肺损伤机制的研究在国内还很少。随着工业的快速发展和人民生活水平的不断提高,工业、生活、交通和建筑等各类排放源排放了大量的烟尘和粉尘粒子,导致大气中可吸... 详细信息

前言大气污染一直是世界各国关注的环境问题,但对于大气混合污染物导致肺损伤机制的研究在国内还很少。随着工业的快速发展和人民生活水平的不断提高,工业、生活、交通和建筑等各类排放源排放了大量的烟尘和粉尘粒子,导致大气中可吸入颗粒物(particular matter,PM)的含量逐年增加,其中烟气或工业废气排出的可吸入颗粒物是大气主要的污染源,尤其是直径小于10μm的悬浮颗粒物(PM),因其直径较小而不受人的鼻腔阻挡,可直接进入呼吸道并存留在肺的深部,不易排出体外。另外,由于燃煤排放的SO、NO等有毒有害的污染物质也急剧增多。PM、SO、NO等混合污染物会随着呼吸进入人体支气管和肺泡,严重损害人体健康。探讨大气污染物导致肺损伤的机制逐渐成为热点问题之一。目前大多数学者认为,大气污染导致的急性肺损伤与机体炎症反应失衡有关。T辅助细胞1(Th-1)以分泌干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)等促炎因子为主,Th-2细胞以分泌白介素4(interleukin,IL-4)等抗炎因子为主,Th1/Th2类细胞因子的失衡实际上反映了促炎与抗炎的失衡。IFN-γ是由Th-1细胞分泌的一种高活性多功能的糖蛋白,主要介导与细胞毒和局部炎症有关的免疫应答。在免疫应答中,IFN-γ可促使Th-1细胞向Th-2细胞分化,抑制Th-2细胞因子的产生,因而可以调节急性炎症发展的方向与转归。克拉氏细胞分泌蛋白(Clara cell secretory 16-kD protein,cc16)是Clara细胞最主要的分泌物,在肺和支气管的表达水平最高,支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中浓度也较高。本研究以大气颗粒物PM、SO、NO、CO为综合处理因素,模拟大气混合污染物导致肺损伤的动物模型,通过测定BALF中cc16与IFN-γ水平,探讨大气混合污染物所致肺损伤的机制。

关键词：大气混合污染物 BALF IFN-γ cc16

哮喘cc16表达及糖皮质激素和白三烯受体拮抗剂影响的实验研究

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哮喘CC16表达及糖皮质激素和白三烯受体拮抗剂影响的实验研究

作者：孙惠泉苏州大学

学位级别：硕士

目的观察哮喘小鼠气道Clara细胞主要分泌蛋白cc16表达以及布地奈德和孟鲁司特干预后对其的影响,探讨cc16在哮喘发病中的作用。方法取96只BALB/C小鼠,随机分为4组:哮喘模型组(A组),布地奈德干预组(B组),孟鲁司特干预组(C组),正常对照组(D... 详细信息

目的观察哮喘小鼠气道Clara细胞主要分泌蛋白cc16表达以及布地奈德和孟鲁司特干预后对其的影响,探讨cc16在哮喘发病中的作用。方法取96只BALB/C小鼠,随机分为4组:哮喘模型组(A组),布地奈德干预组(B组),孟鲁司特干预组(C组),正常对照组(D组),每组24只。除对照组外,其余3组小鼠分别在第0、7d腹腔注射卵清蛋白(OVA)混悬液0.5 mL(含OVA 100μg,氢氧化铝凝胶400μg)致敏,第14d起以10g/L OVA溶液50mL超声雾化激发,每日30min,连续7d。孟鲁司特组在雾化吸入后1小时按6 mg/kg口服孟鲁司特4周;布地奈德组在雾化吸入后1小时吸入布地奈德混悬液30 min(布地奈德原液2ml+NS3ml),连续4周;正常对照组:小鼠第0和第7d腹腔注射生理盐水0.5 mL,第14d起以生理盐水50mL溶液超声雾化,每天30min,连续7d。每周各组各处死6只小鼠,连续4周。4组小鼠眼球摘除采血,取血清,采用ELISA(酶联免疫)法测分泌类蛋白(cc16)。左肺组织用10%甲醛固定后常规石蜡包埋切片,部分行苏木精-伊红(HE)染色观察炎症细胞的浸润;部分行免疫组化观察肺组织cc16表达;右肺组织RT-PCR检测cc16mRNA表达。结果1、各组小鼠外周血cc16蛋白表达第1、2、3周A、B、C三组cc16蛋白OD值均显著低于D组(P＜0.05),第4周cc16蛋白OD值四组比较无统计学意义(P＞0.05):B组、C组与A组比较仅第1周有统计学意义(P＜0.05);A、B、C三组随时间延长cc16蛋白OD值均显著升高(P＜0.05),D组随时间延长cc16蛋白OD值无显著变化(P＞0.05)。2、各组小鼠肺组织cc16蛋白免疫组化第1、2、3、4周A、B、C三组cc16蛋白免疫组化灰度值均显著高于D组(P＜0.05);B组各周灰度值均显著低于A组(P＜0.05);C组与A组比较仅第4周有统计学意义(P＜0.05),而C组与B组比较仅第4周无统计学意义(P＞0.05);A、B、C三组随时间延长cc16蛋白免疫组化灰度值均显著降低(P＜0.05),D组随时间延长cc16蛋白免疫组化灰度值无显著变化(P＞0.05)。3、各组小鼠肺组织cc16mRNA表达第1、2、3、4周A、B、C三组cc16mRNA表达量均显著低于D组(P＜0.05);B组各周cc16mRNA表达量均显著高于A组(P＜0.05);C组cc16mRNA表达量仅第1、第4周显著高于A组(P＜0.05),而C组与B组比较仅第1周无统计学意义(P＞0.05);A、B、C三组随时间延长cc16mRNA表达量均显著增加(P＜0.05),D组随时间延长cc16mRNA表达量无显著变化(P＞0.05)。4、小鼠外周血cc16蛋白与肺组织cc16mRNA表达总体相关性外周血cc16蛋白与肺组织cc16mRNA表达总体呈正相关(r=0.777,p＜0.0001)。结论1、哮喘小鼠肺组织内cc16mRNA表达水平和外周血cc16蛋白浓度均降低,且随肺部炎症细胞增多而逐渐降低,因此cc16可作为反映哮喘气道炎症的指标。2、吸入性糖皮质激素(布地奈德)干预可以显著增加哮喘小鼠cc16蛋白的表达,且随治疗时间延长cc16表达增加更加明显,抗哮喘气道炎症的作用更强。3、自三烯受体拮抗剂(孟鲁司特)干预4周以上可以增加cc16蛋白表达水平;起效较布地奈德慢,到4周后效果与布地奈德相似。4、外周血cc16和肺组织cc16 mRNA表达情况呈正相关,故其能反映肺组织cc16 mRNA表达,可间接反映哮喘炎症的严重程度。

关键词：哮喘小鼠 cc16 mRNA 布地奈德孟鲁司特

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cc16蛋白质与肺部疾病

国际呼吸杂志 2014年第16期34卷 1254-1259页

作者：庞敏杜永成山西医科大学第一医院呼吸科太原030001 山西医科大学附属山西省人民医院太原030012

cc16蛋白质是由细支气管、终末细支气管黏膜上的无纤毛柱状上皮细胞——clara细胞分泌产生。cc16为组织特异性蛋白，主要表达在肺组织，它是一种肺的内源性抗炎因子。其抗炎作用可能非常复杂，机制之一是抑制磷脂酶A2的活性。由于其在... 详细信息

cc16蛋白质是由细支气管、终末细支气管黏膜上的无纤毛柱状上皮细胞——clara细胞分泌产生。cc16为组织特异性蛋白，主要表达在肺组织，它是一种肺的内源性抗炎因子。其抗炎作用可能非常复杂，机制之一是抑制磷脂酶A2的活性。由于其在肺部高表达，cc16与许多肺部疾病的发生发展有关，例如支气管哮喘、COPD、间质性肺疾病、肺癌、ALI等。

关键词： cc16 肺部疾病

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cc16在呼吸机相关性肺损伤兔肺组织中表达

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国际呼吸杂志 2013年第20期33卷 1522-1524+1601页

作者：刘伯毅郑晓丽郑翔刘培方志成李海涛湖北医药学院附属太和医院重症医学科

目的探讨cc16在呼吸机相关性肺损伤(ventilator induced lung injury,VILI)发生机制中的作用。方法将20只健康成年雄性日本大白兔随机分为对照组(插管后不进行机械通气)及实验组(插管后机械通气:潮气量20 ml/kg,频率为30次/min,吸呼比为... 详细信息

目的探讨cc16在呼吸机相关性肺损伤(ventilator induced lung injury,VILI)发生机制中的作用。方法将20只健康成年雄性日本大白兔随机分为对照组(插管后不进行机械通气)及实验组(插管后机械通气:潮气量20 ml/kg,频率为30次/min,吸呼比为1:3,吸入氧浓度为21%,通气时间为24 h),观察实验前后动脉血氧分压变化。取左肺中央部分肺组织,制备肺组织匀浆,采用双抗体夹心ELISA法检测肺组织上清液中cc16含量。取左肺组织一块,石蜡包埋,HE染色,制备石蜡组织切片,在显微镜下观察肺组织病理学变化。结果两组大白兔动脉血氧分压差异无统计学意义(P>0.05)。对照组肺组织cc16为1.108±0.072,实验组肺组织cc16为0.621±0.056,两组差异有统计学意义(Pcc16在VILI大白兔肺组织中表达下降,cc16可能在VILI发病机制中起重要作用。

关键词： cc16 机械通气肺损伤机制

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cc16:一种新的肾小管性蛋白尿的指标

国外医学（泌尿系统分册） 1997年第2期17卷 55-56页

作者：毛建华浙江医科大学附属儿童医院肾内科 310006

cc16是由呼吸道Clara细胞分泌的、分子量为15.8KDa的蛋白质,呼吸道内的cc16吸收人血后可迅速从肾小球滤过膜滤过,并在肾近端小管上皮细胞重吸收,肾近端小管功能障碍时其尿浓度可明显升高。由于cc16在正常血清及尿液中浓度较低;其表面所... 详细信息

cc16是由呼吸道Clara细胞分泌的、分子量为15.8KDa的蛋白质,呼吸道内的cc16吸收人血后可迅速从肾小球滤过膜滤过,并在肾近端小管上皮细胞重吸收,肾近端小管功能障碍时其尿浓度可明显升高。由于cc16在正常血清及尿液中浓度较低;其表面所带负电荷较多,不易与肾小管上皮细胞表面相结合,因此其敏感度比β_2-微球蛋白、视黄醇结合蛋白等指标更高。尿cc16检测可用于糖尿病肾病、重金属盐中毒及肾间质疾病等患者的早期病情检测。

关键词： cc16 低分子蛋白尿肾小管功能肾小球疾病

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