检索结果-南通市图书馆

bcl-xl和p53在人肝癌bel7402细胞中的表达及中药的干预作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

牡丹江医学院学报 2007年第6期28卷 12-14页

作者：吕秀芳孟庆宇王桂云牡丹江医学院生化教研室黑龙江牡丹江157011

目的:从基因水平探讨白花蛇舌草多糖对体外培养的人肝癌bel7402细胞凋亡诱导的作用及机制。方法:水提醇沉法提取白花蛇舌草多糖,人肝癌bel7402细胞常规体外细胞培养,设定空白对照组、5-氟尿嘧啶阳性对照组、白花蛇舌草多糖组。HE染色法... 详细信息

目的:从基因水平探讨白花蛇舌草多糖对体外培养的人肝癌bel7402细胞凋亡诱导的作用及机制。方法:水提醇沉法提取白花蛇舌草多糖,人肝癌bel7402细胞常规体外细胞培养,设定空白对照组、5-氟尿嘧啶阳性对照组、白花蛇舌草多糖组。HE染色法光镜下观察细胞形态改变,计算凋亡指数,采用MTT法检测白花蛇舌草多糖对癌细胞的生长抑制作用,RT-PCR法检测原癌基因bc l-xl、抑癌基因p53基因mRNA表达的变化。结果:白花蛇舌草多糖体外抑制人肝癌bel7402细胞生长、促进细胞凋亡,凋亡指数达16.97(,以MTT显色法检测细胞抑制率达到61.5(,以RT-PCR半定量法检测,上调p53基因mRNA表达,降低bc l-xl基因mRNA表达,以上各指标与空白对照组相比均有显著差异。结论:白花蛇舌草多糖抑制人肝癌bel7402细胞增长,诱导细胞凋亡,其分子机制可能与激活抑癌基因p53基因、抑制原癌基因bc l-xl基因表达有关。

关键词：原癌基因抑癌基因基因表达 bel7402细胞细胞凋亡

甲胎蛋白对NIH3T3细胞和人肝癌bel7402细胞增殖的促进作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

海南医学院学报 2002年第3期8卷 129-133页

作者：李孟森李平风杨非易杜国光李刚海南医学院生物化学教研室海口571101 北京大学医学部生物化学及分子生物学系北京100083

目的:观察甲胎蛋白对细胞增殖的影响。方法:用从人脐带血清中提取的甲胎蛋白,作用于体外培养的NIH3T3细胞和人肝癌bel7402细胞,运用MTT染色计数法,细胞周期时相测定和3H脱氧胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)参入法等指标检测细胞增殖状况。结果:甲... 详细信息

目的:观察甲胎蛋白对细胞增殖的影响。方法:用从人脐带血清中提取的甲胎蛋白,作用于体外培养的NIH3T3细胞和人肝癌bel7402细胞,运用MTT染色计数法,细胞周期时相测定和3H脱氧胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)参入法等指标检测细胞增殖状况。结果:甲胎蛋白(10～80mg·L-1)作用24h后,对NIH3T3细胞、人肝癌bel7402细胞均有不同程度的促增殖作用,甲胎蛋白的单克隆抗体能阻断这种作用。结论:甲胎蛋白是促进某些新生细胞或肿瘤细胞增殖的内源性物质。

关键词：甲胎蛋白 NIH3T3细胞肝癌 bel7402细胞细胞增殖 MTT法

肝癌细胞bel7402中神经元特异性烯醇化酶的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

世界华人消化杂志 2005年第18期13卷 2193-2196页

作者：朱爱萍张青云王雅明徐建军孙丽山西医科大学第二医院检验科山西省太原市030001 北京大学临床肿瘤学院北京市肿瘤防治研究所免疫研究室北京肿瘤医院检验科北京市100036 北京大学临床肿瘤学院北京市肿瘤防治研究所免疫研究室北京市100036

目的:分别从转录水平、蛋白水平及细胞水平检测人神经元特异性烯醇化酶(NSE)在肝癌细胞bel7402中的表达情况.方法:利用NSE特异引物,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从人肝癌细胞bel7402中扩增人NSE基因的转录产物,采用免疫印迹(Wester... 详细信息

目的:分别从转录水平、蛋白水平及细胞水平检测人神经元特异性烯醇化酶(NSE)在肝癌细胞bel7402中的表达情况.方法:利用NSE特异引物,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从人肝癌细胞bel7402中扩增人NSE基因的转录产物,采用免疫印迹(Westernblot)、免疫细胞化学(ICC)染色技术检测NSE在肝癌细胞中的表达.结果:通过RT-PCR方法可以从bel7402中扩增1305bp的NSE产物;Westernblot方法证实bel7402细胞可以表达Mr50000的NSE蛋白;免疫细胞化学染色显示bel7402与抗NSE单抗呈阳性反应,这说明从转录水平、蛋白水平及细胞水平均检测到了NSE在肝癌细胞bel7402中的表达.结论:NSE可在肝癌细胞bel7402转录和表达.

关键词：神经元特异性烯醇化酶肝癌细胞 bel7402细胞

小干扰RNA抑制肝癌细胞株bel7402 ICAM-1基因表达的研究

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国现代医学杂志 2006年第20期16卷 3065-3068页

作者：廖维甲梅铭惠徐静向秋覃理灵范才文桂林医学院附属医院肝胆外科研究室广西桂林541001 桂林医学院科学中心广西桂林541000

目的研究小干扰RNA(siRNA)抑制肝癌细胞系bel7402基因ICAM-1表达的可行性。方法根据ICAM-1基因设计shRNA片断,构建pGenesil-1/ICAM-1表达载体,转染bel7402细胞,实时定量PCR和免疫组织化学方法检测肝癌细胞中ICAM-1基因表达抑制情况。结... 详细信息

目的研究小干扰RNA(siRNA)抑制肝癌细胞系bel7402基因ICAM-1表达的可行性。方法根据ICAM-1基因设计shRNA片断,构建pGenesil-1/ICAM-1表达载体,转染bel7402细胞,实时定量PCR和免疫组织化学方法检测肝癌细胞中ICAM-1基因表达抑制情况。结果该实验已成功构建了针对I-CAM-1基因的pGenesil-1/ICAM-1质粒。实时定量PCR检测结果显示,bel7402细胞经特异性siRNA作用后ICAM-1基因的表达受抑制,其Ct值由28.8降低到21.6,免疫组织化学结果显示:RNA干扰(RNAi)能特异而有效地抑制bel7402细胞中ICAM-1基因的表达。结论构建的pGenesil-1/ICAM-1重组质粒能有效抑制ICAM-1基因在肝癌细胞株bel7402中的表达,为肿瘤的生物学治疗提供了新的方法和材料。

关键词：小干扰RNA ICAM-1 bel7402细胞基因表达

表没食子儿茶素没食子酸酯对两株不同肝癌耐药细胞株基因表达谱的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

癌症 2008年第10期27卷 1056-1064页

作者：唐海桦周铭梁钢广西医科大学药学院药理教研室广西南宁530021

背景与目的:绿茶中的儿茶素单体表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)在体内外能逆转肝癌细胞多药耐药性。鉴于多药耐药机制的复杂性,本研究拟采用高通量基因芯片技术进一步探讨EGCG逆转人肝癌细胞bel7404/ADM、bel... 详细信息

背景与目的:绿茶中的儿茶素单体表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)在体内外能逆转肝癌细胞多药耐药性。鉴于多药耐药机制的复杂性,本研究拟采用高通量基因芯片技术进一步探讨EGCG逆转人肝癌细胞bel7404/ADM、bel7402/5-FU多药耐药的可能机制。方法:MTT法检测药物敏感性,基因芯片技术分析EGCG作用于两株不同肝癌耐药细胞的基因表达谱差异,RT-PCR和Western blot法分别检测相同处理条件下两株肝癌耐药细胞的基因MDR1、LRP和Cyclin G1蛋白表达变化以验证基因芯片技术结果。结果:EGCG对bel7404/ADM、bel7402/5-FU细胞的IC10分别为24.76mg/L、20.60mg/L。20mg/L EGCG联合0.05mg/L ADM、100μmol/L 5-FU对bel7404/ADM、bel7402/5-FU的逆转倍数分别为9.66、2.36倍。EGCG作用bel7404/ADM双荧光通路显著差异基因210个,上调表达38个,下调表达172个。与耐药机制相关的可能基因有ABCB10(MDR/TAP)、TOP2A、TOP2B、CCNG1上调,ABCB1、MVP、ARHD、HDAC5、GSS、GSTPI、HSPA1B、HSPB7、CDKN1A、RAB11B、RAB9P40下调。作用bel7402/5-FU双荧光通路显著差异基因179个,上调表达31个,下调表达148个。与耐药机制相关的可能基因有ABCG(BCRP)、CCNG2、GADD34、RB1、RBBP4上调,DTYMK、GPX1、USP5、BAX、BAK1、HSPA1L下调等。相同处理条件下两组肝癌耐药细胞的MDR1、LRP基因表达均减少,CyclinG1蛋白表达均增加。结论:EGCG对肝癌多药耐药细胞bel7404/ADM、bel7402/5-FU具逆转作用,但作用于不同肝癌多药耐药细胞的基因表达谱变化不完全相同。

关键词：基因芯片表没食子儿茶素没食子酸酯肝细胞癌 bel 7404细胞 bel7402细胞多药耐药耐药逆转

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

RhoC在肝癌细胞生长中的作用及分子机制

中华肿瘤杂志 2011年第4期33卷 270-275页

作者：谢淑丽朱明光吕国悦王广义吉林大学第一医院普外科长春 130021 吉林大学基础医学院免疫教研室

目的研究RhoC在肝癌细胞生长中的作用及分子机制，为抑制肝癌细胞生长寻找分子靶点。方法构建***载体，建立RhoC基因沉默的肝癌细胞株。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞生长，硝酸银染色检测细胞增殖，平板克隆实验检测细胞克隆形... 详细信息

目的研究RhoC在肝癌细胞生长中的作用及分子机制，为抑制肝癌细胞生长寻找分子靶点。方法构建***载体，建立RhoC基因沉默的肝癌细胞株。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞生长，硝酸银染色检测细胞增殖，平板克隆实验检测细胞克隆形成能力，流式细胞术（FACS）检测细胞周期，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞周期蛋白表达。PcDNA3-RhoC转染肝细胞，建立RhoC高表达细胞株，检测RhoC基因对正常肝细胞生长的影响。结果siRNA-RhoC载体转染bel7402细胞后，RhoC基因表达的抑制效率为82．3％。细胞培养第4天，RNAi组吸光度（A）值为0．4 ±sO．10，显著低于bel7402细胞组（0．73±0．11，P〈0．05）和阴性对照组（0．71±0．07，P〈0．05）。此后，RNAi组的细胞增殖速度持续低于bel7402细胞组和阴性对照组，直到第7天实验结束。RNAi组的细胞核平均银染颗粒数明显少于bel7402细胞组和阴性对照组（分别为1．23±0．35、3．47±0．93和3．17±0．78，均P〈0．01）；Go／G，期细胞显著升高[分别为（73．14±5．93）％、（57．05±5．97）％和（52．99±4．80）％，均P〈0．05]；cyclinD1表达下降（分别为0．45±0．21、1．25±0．24和1．12±0．15，均p〈0．05）；CDK4表达下降（分别为0．55±O．08、1．18±0．32和1．10±0．29，均P〈0．05）；p16表达升高（分别为1．07±0．23、0．36±0．12和0．35±0．13，均P〈0．01）；p21表达升高（分别为0．42±0．12、0．174±0．06和0．19±0．08，均P〈0．05）。HL7702细胞转染PcDNA3-RhoC质粒后，Rhoc高表达，至转染的第3天，RhoC转染组A值为0．83±0．10，显著高于HL7702细胞组（0．54±0．11，P〈0．05）和空载体对照组（0．58±0．55，P〈0．05）。其后，RhoC转染细胞生长速度持续高于HL7702细胞组和空载体对照组，直至第7天实验结束。结论RhoC是调控肝癌细胞生长的关键分子，是抑制肝癌细胞生长的良好分子靶点。

关键词： RhoC基因肝肿瘤 bel7402细胞 HL7702细胞 RNA干扰细胞生长细胞周期

肿瘤细胞基因转导载体聚乙烯亚胺的合成及筛选

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

癌症 2007年第7期26卷 790-794页

作者：姚元虎刘永彪冯永冯霞徐冬梅姚思德徐州医学院肿瘤研究所江苏徐州221002 南京医科大学第一附属医院肿瘤科江苏南京210029 徐州医学院附属医院中心实验室江苏徐州221002 中国科学院上海应用物理研究所上海201800

背景与目的:选择合适的载体是基因治疗成功的关键之一,近年来一种新型多聚阳离子化合物——聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)作为高效低毒的基因转导载体得到广泛重视。本研究应用光化学法制备系列不同粒径的PEI纳米凝胶,初步探讨其转... 详细信息

背景与目的:选择合适的载体是基因治疗成功的关键之一,近年来一种新型多聚阳离子化合物——聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)作为高效低毒的基因转导载体得到广泛重视。本研究应用光化学法制备系列不同粒径的PEI纳米凝胶,初步探讨其转导效率与粒径之间的关系,筛选理想的肿瘤基因转导载体。方法:光化学法制备PEI,光相干光谱仪测定粒径,并用扫描电子显微镜和原子力显微镜表征;以PEI为载体将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)报告基因分别转入bel7402细胞和A549细胞,荧光显微镜下计数和流式细胞仪检测转染率。结果:光相干光谱仪检测PEI粒径38～200nm,扫描电子显微镜和原子力显微镜检测其形貌多为球形。荧光显微镜下计数和流式细胞仪检测86.9nmPEI(4μg)介导EGFP基因(2μg)时转染率最高,bel7402细胞分别为(32.75±1.01)%、(32.40±1.41)%,A549细胞分别为(29.81±1.84)%、(30.00±1.86)%;与脂质体相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:光化学法合成的PEI是有效的基因转导载体,PEI粒径为86.9nm转染最为有效。

关键词：聚乙烯亚胺光化学基因转导 bel7402细胞 A549细胞

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

特异性抗肝癌单味中草药提取物的高通量筛选

中国药理学与毒理学杂志 2016年第3期30卷 243-247页

作者：杨秀颖张莉杨海光李莉方莲花杜冠华中国医学科学院北京协和医学院药物研究所药物靶点研究与新药筛选北京市重点实验室北京100050

目的利用高通量筛选分析技术评价单味中草药提取物对肝癌细胞及成纤维细胞的作用,以期获得具有特异性抗肝癌作用的中草药提取物。方法将242种常用单味中草药分别应用石油醚、乙醇或水进行提取,共获得554个中草药提取物。采用MTT来评价... 详细信息

目的利用高通量筛选分析技术评价单味中草药提取物对肝癌细胞及成纤维细胞的作用,以期获得具有特异性抗肝癌作用的中草药提取物。方法将242种常用单味中草药分别应用石油醚、乙醇或水进行提取,共获得554个中草药提取物。采用MTT来评价提取物对人肝癌细胞bel7402和小鼠成纤维细胞NIH3T3存活的作用。结果提取物对人肝癌细胞bel7402及成纤维细胞NIH3T3生长抑制作用>50%的样品分别占总样品数的7.4%和14.8%,对2种细胞抑制率同时>50%的样品占总数的4.4%,对bel7402抑制率为对NIH3T3抑制率2倍以上且对bel7402抑制率>50%的样品占总样品数的1.6%。复筛结果显示,防己乙醇提取物(DF173)对肝癌细胞的细胞毒作用特异性较好,具有良好的量效关系。DF173对bel7402细胞毒作用IC50为8.27 mg·L-1,对NIH3T3的细胞毒作用IC50为19.48 mg·L-1。结论肿瘤细胞联合正常成纤维细胞筛选评价中草药提取物特异性抗肿瘤作用,有利于发现高效、低毒抗肿瘤中草药提取物。

关键词：高通量筛选分析中草药提取物抗肝癌药(中药) bel7402细胞 NIH3T3细胞防己

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

鱼头多糖的分离提取、纯化及功能鉴定

鱼头多糖的分离提取、纯化及功能鉴定

作者：刘晓宁天津科技大学

学位级别：硕士

在鱼等水产品加工过程中产生的下脚料约占原料鱼的40%-45%。开展水产品加工下脚料和废弃物的综合利用,可变废为宝,生产出各种农业、轻工、医药、环保和食品行业所需的新产品,大大提高水产品的附加值,降低主导产品的成本,取得较高的经济... 详细信息

在鱼等水产品加工过程中产生的下脚料约占原料鱼的40%-45%。开展水产品加工下脚料和废弃物的综合利用,可变废为宝,生产出各种农业、轻工、医药、环保和食品行业所需的新产品,大大提高水产品的附加值,降低主导产品的成本,取得较高的经济、生态和社会效益。因此,鱼加工废弃物的开发利用越来越受到重视。本课题以淡水鱼鱼头为原料,研究了鱼头多糖的不同提取方法和最佳提取条件,进行了鱼头多糖的体外抗氧化实验的研究,还进行了一系列细胞培养的实验来进一步研究其功能。采用单因素实验,均匀设计和聚丙烯酰胺凝胶电泳实验确定了鱼头多糖的最佳提取方法以及最优提取条件,即提取温度30℃,乙醇浓度75%,料液比1:5.5,提取时间13h和提取液浓度1mol/L。通过体外抗氧化实验证明:鱼头多糖对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基都有一定的清除作用,且能达到较高的清除率。鱼头多糖对超氧阴离子自由基和羟自由基的半数清除浓度分别为0.41mg/mL和1.98 mg/mL。 MTT实验表明,鱼头多糖对白血病细胞K562和肝癌细胞bel7402都有抑制作用。通过对K562细胞和bel7402细胞的形态观察可知,鱼头多糖对K562细胞和bel7402细胞的确有杀伤作用,但是细胞的死亡方式不是凋亡。鱼头多糖作用于K562细胞后,随着多糖作用时间的增加,S期比例增加,G/G和G/M比例减少;鱼头多糖作用的bel7402细胞则无明显周期变化,仅仅出现凋亡细胞数增多的现象。在多糖作用72h后,凋亡细胞的比例分别为K562细胞21.28%,bel7402细胞11.80%。这表明,鱼头多糖对bel7402细胞周期分布无显著影响,且凋亡现象不明显,并伴有明显的坏死现象。

关键词：鱼头多糖 SDS-PAGE K562细胞 bel7402细胞体外抗氧化 MTT法细胞周期