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小尾寒羊bmf基因在发情不同阶段卵巢及卵泡发育过程中的表达分析

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华北农学报 2023年第2期38卷 217-223页

作者：李营营张昊堃贾皓帆郭婧瑶杨喜喜王志亮李明娜王欣荣甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃兰州730070

旨在初探bmf基因在小尾寒羊卵泡发育过程中的生物学功能,为将来深入探索其调控机理提供理论依据。对小尾寒羊实施同期发情,采用实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,RT-qPCR)、蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)及免疫荧光染色(IF... 详细信息

旨在初探bmf基因在小尾寒羊卵泡发育过程中的生物学功能,为将来深入探索其调控机理提供理论依据。对小尾寒羊实施同期发情,采用实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,RT-qPCR)、蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)及免疫荧光染色(IF)方法检测bmf基因及其编码蛋白在不同生理阶段卵巢中的表达量;随后分离不同直径的卵泡,分析目的基因在大、中、小卵泡中的表达差异。结果显示,bmf mRNA在撤栓后42 h卵巢中的表达量显著高于撤栓后18 h(Pbmf蛋白主要表达于卵泡颗粒细胞和卵泡膜细胞中;进一步分离卵泡,发现bmf基因及其编码蛋白表达量均在中卵泡中显著高于大卵泡和小卵泡(Pbmf基因可能参与卵巢周期性活动,在卵泡发育过程中发挥重要作用。

关键词：小尾寒羊 bmf 卵泡卵巢繁殖

MiR-125b Expression Affects the Proliferation and Apoptosis of Human Glioma Cells by Targeting bmf

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MiR-125b Expression Affects the Proliferation and Apoptosis ...

一种基于bmf的新型气动微型伺服阀及控制系统研究

“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者： Hong-Fei Xia,Tian-Zhu He,Yi Cui,Xu Ma Reproductive and Genetic Center of National Research Institute for Family Planning,Beijing,100081

Background:MicroRNAs(miRNAs) are small noncoding RNAs whose function as modulators of gene expression is crucial for the proper control of cell *** many microRNAs were found to express in central nervous system(CNS),the role of the regulatory networks in which they are involved and their function in the pathological process of nerve cells are only just *** the present study,the possible mechanisms by which one neuronal miRNAs,miR-125b,affected the growth of nervous cells were investigated using in vitro cell line ***:The expression pattern of miR-125b in ATRA-treated human glioma cell lines was detected by Northern blotting and in situ *** effect of miR-125b on the proliferation and apoptosis of human glioma cells was analyzed by MTS assay,TUNEL and Flow cytometry *** addition,the identification of target gene of miR-125b was studied by dualluciferase activity assay and Immunoblot ***:We found differential expression of miR-125b in 1.0 uM all-trans-retinoic acid(ATRA)-treated human glioma cell ***-regulation of miR-125b partially restored cell viability and inhibited cell apoptosis in U343 cells treated by ***-regulation of miR-125b decreased human glioma cells proliferation and enhanced the sensitivity of human glioma cells to ATRA-induced *** addition,we found an inverse relationship between the expression of miR-125b and the cell apoptosis-related protein Bcl-2 modifying factor(bmf),and miR-125b can interact with 3c-untranslated region(UTR) of ***:These findings indicate that overexpression of miR-l25b promotes human glioma cell proliferation and inhibits ATRA-induced cell apoptosis and low expression of miR-125b sensitizes cells to ATRAinduced *** may play an important role in the process of miR- 125b influencing cell apoptosis.

关键词： miR-125b Human glioma cells Proliferation Apoptosis bmf

来源： cnki会议评论

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一种基于BMF的新型气动微型伺服阀及控制系统研究

作者：徐现荣吉林大学

学位级别：硕士

本论文在分析新型形状记忆合金bmf(BioMetal Fiber)特性的基础上,提出了一种基于bmf的新型气动微型伺服阀,并对这种新型气动微型伺服阀进行了设计计算、仿真研究和控制研究。该伺服阀使用新型形状记忆合金bmf作为驱动元件,在施加一定... 详细信息

本论文在分析新型形状记忆合金bmf(BioMetal Fiber)特性的基础上,提出了一种基于bmf的新型气动微型伺服阀,并对这种新型气动微型伺服阀进行了设计计算、仿真研究和控制研究。该伺服阀使用新型形状记忆合金bmf作为驱动元件,在施加一定的控制电压时,bmf开始动作,带动阀芯移动,从而可以实现新型气动微型伺服阀的开启和关闭,达到对bmf的一种实际应用。在论文中研究了新型气动微型伺服阀的整体结构图,对偏压弹簧和锥阀芯进行了设计计算,论述了这种伺服阀的工作原理,并绘出了伺服阀的三维模型图并对结构进行了受力分析。同时用理论分析的方法推导了新型气动微型伺服阀的线性数学模型和传递函数,并分析了被控对象的基本特性;利用Simulink模块表达状态方程,通过PID控制器的控制策略对伺服阀进行了仿真分析。研究了伺服阀的单片机伺服控制系统,对伺服阀的出口流量和压力进行实时数据采集和数据处理。从压力传感器和流量传感器出来后的信号送入A/D进行转换和数据处理,处理后的数据送到控制器AT89C52;同时,该数据与设定的压力和流量值进行比较求出偏差值,通过PID算法获取调控值,通过D/A转换,施加控制电压给伺服阀的驱动元件bmf,使阀门开启,从而实现对伺服阀出口压力和流量大小的控制。该系统具有控制精度高、速度快、控制质量可靠等优点,能够达到预想的控制效果。

关键词： bmf 气动微型伺服阀单片机伺服控制数学建模 PID

基于临床研究探索miR-221-3p/222-3p及bmf与大肠癌中医证型、病理因素的相关性

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基于临床研究探索miR-221-3p/222-3p及BMF与大肠癌中医证型、病理...

作者：韩秀秀南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:1.探讨miR-221-3p/222-3p及bmf与大肠癌病理因素以及预后之间的关系,寻找预测大肠癌预后的标志物;2.搜集患者证型进行统计分析,使得临床医师辨证论治更加客观。方法:1.使用miRNA在线靶点预测数据库对miR-221-3p/222-3p进行靶基因预... 详细信息

目的:1.探讨miR-221-3p/222-3p及bmf与大肠癌病理因素以及预后之间的关系,寻找预测大肠癌预后的标志物;2.搜集患者证型进行统计分析,使得临床医师辨证论治更加客观。方法:1.使用miRNA在线靶点预测数据库对miR-221-3p/222-3p进行靶基因预测;2.选取江苏省中医院2010-05-31至2015-05-31手术切除并经病理组织学证实的大肠癌组织及癌旁正常组织石蜡包埋标本,通过查阅既往病历,收集患者性别、年龄、中医证型以及术后病理资料;3.使用实时荧光定量PCR以及免疫组织化学法检测肿瘤组织以及对应正常组织miR-221-3p/222-3p及bmf的表达水平,最后建立数据库进行统计学分析。结果:1.在miRDB、TargetScan、miRTarBase、miRWalk四个数据库中均预测到的靶基因为bmf。2.与癌旁组织进行对比,miR-221-3p和miR-222-3p在大肠癌组织中的表达对比正常组织显示明显升高,表现出显著的统计学意义（P＜0.05）。另外,bmf在大肠癌组织和癌旁正常组织阳性率先后为13.64%、81.82%,存在统计学意义。（χ2=25.624,P＜0.05）。***-221-3p与大肠癌患者性别（P=0.620）、年龄（P=0.096）、发生位置（P=0.804）无明显相关性（P＞0.05）。miR-221-3p与大肠癌的分化程度、临床TNM分期、浸润深度、淋巴结转移存在相关性（P＜0.05）。miR-222-3p与大肠癌患者性别（P=0.746）、年龄（P=0.152）、发生位置（P=0.971）不相关（P＞0.05）。miR-222-3p与大肠癌的分化程度、临床TNM分期、浸润深度、淋巴结转移存在相关性（P＜0.05）。bmf与大肠癌病人性别（P=0.531）、年龄（P=0.531）、发生位置（P=0.798）、淋巴结转移（P=0.348）、浸润深度（P=0.371）无明显相关性（P＞0.05）。与大肠癌的分化程度、临床分期存在相关性,差异具有显著的统计学意义（P＜0.05）。4.中医证候分型与miR-221-3p、miR-222-3p 表达相关,miR-221-3p、miR-222-3p 表达上调多表现为脾虚湿滞证,其次证候分布由高到低顺序是瘀毒内阻证、肝肾阴虚证、湿毒下注证,其差异存在显著的统计学意义（P＜0.05）。与此同时,还发现bmf与中医证候分型不具有相关性（P＞0.05）。***-221-3p、miR-222-3p在癌组织中表达增加的病人通常生存率相对较低,差异存在统计学意义（P＜0.05）。bmf表达为阴性的病人生存率相对较低,并且明显小于阳性表达的病人,其差异存在显著的统计学意义（P＜0.05）。***-221-3p与bmf在大肠癌组织中的表达主要表现为负相关（r=-0.708,P＜0.05）,同样的,miR-222-3p与bmf表达也表现为负相关（r=-0.659,P＜0.05）。结论:***-221-3p和miR-222-3p在大肠癌组织中的表达对比正常组织显示增高,相反的,bmf在大肠癌组织表达水平减少。***-221-3p、miR-222-3p和大肠癌病人性别、年龄、肿瘤位置不存在相关性,与分化程度、临床TNM分期、浸润深度、淋巴结转移等存在相关性。bmf和大肠癌病人性别、年龄、发生位置、淋巴结转移、浸润深度不存在相关性,与大肠癌的分化水平、临床分期相关。***-221-3p、miR-222-3p、bmf可能发展为预测大肠癌病人预后的重要标志物。4.表达异常升高的miR-221-3p、miR-222-3p可能通过靶向抑制bmf的表达影响大肠癌细胞增殖和凋亡,这可能与大肠癌的发病机制有关。5.大肠癌患者中医证型与bmf没有明显相关性,和miR-221-3p、miR-222-3p存在相关性,miR-221-3p、miR-222-3p可作为辨证分型的客观参考依据。

关键词： miR-221-3p miR-222-3p bmf 大肠癌病理因素中医证型

bmf参与氧化应激致心肌细胞损伤的机制研究

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1802-1802页

作者：李玉珍宋丹丹刘秀华中国人民解放军总医院病理生理研究室

目的:观察Bcl-2-modifying factor(bmf)在氧化应激致心肌细胞损伤中的作用和机制。方法:在培养的乳鼠心肌细胞氧化应激模型上,采用LDH活性检测和TUNEL法观察细胞损伤,荧光染色技术观察线粒体分裂和bmf在细胞中定位,RT-PCR和Western blo... 详细信息

目的:观察Bcl-2-modifying factor(bmf)在氧化应激致心肌细胞损伤中的作用和机制。方法:在培养的乳鼠心肌细胞氧化应激模型上,采用LDH活性检测和TUNEL法观察细胞损伤,荧光染色技术观察线粒体分裂和bmf在细胞中定位,RT-PCR和Western blot方法观察bmf mRNA和蛋白表达。结果:正常生理状态下,bmf定位在胞浆的细胞骨架,当用过氧化氢处理心

关键词：心肌细胞损伤胞浆线粒体细胞质粒线体氧化应激 bmf

MiRNA-125b抑制食管鳞癌细胞增殖并诱导细胞凋亡的相关机制研究

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MiRNA-125b抑制食管鳞癌细胞增殖并诱导细胞凋亡的相关机制研究

作者：樊琰鑫南京医科大学

学位级别：硕士

研究目的:探讨微小 RNA-125b(miR-125b)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)增殖及细胞凋亡中的作用。明确miR-125b与候选靶点bcl-2修饰因子(bcl-2 modification factor,bmf)之间的调控关系。探讨miR-125b/bmf途径对食管癌诊断的意义。材料与方法:1.根据研究要求选择66例ESCC癌组织和对应癌旁组织,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-125b在组织中的表达水平,同时结合临床病理资料及预后行相关性分析。2.检测miR-125b在人食管癌细胞109(EC109)和人食管癌细胞9706(EC9706)2种食管癌细胞系及正常食管上皮细胞中的本底表达。3.将合成miR-125b阴性对照(NC)或miR-125b模拟物或相应抑制物转染进入EC109和EC9706食管癌细胞系,用细胞计数Kit-8(CCK8)检测miR-125b模拟物和抑制物转染ESCC细胞系后发生的变化。流式细胞术检测转染后细胞周期和凋亡的变化。4.体外实验验证miR-125b在ESCC中的作用,将EC 109细胞转染miR-125b模拟物及NC并注射到裸鼠中,注意观察它们的变化,定期称重,注意瘤块变化,了解生长状况。根据结果绘制瘤体体积增长曲线和体质量曲线。采用组织学和免疫组织化学法检测裸鼠瘤块体积、重量以及肿瘤组织Ki-67表达等情况。5.通过生物信息学软件Target Scan寻找miR-125b的潜在靶基因。鉴定bmf为候选靶基因。6.使用沉默bmf(si-bmf)转染EC109和EC9706细胞,采用qRT-PCR和western blot检测转染后bmf表达,并用CCK-8检测细胞增殖情况,Western blot分析bmf沉默与细胞凋亡的关系。评估ESCC患者组织和ESCC细胞系中bmf的表达情况,分析miR-125b与bmf水平之间的关系。结果:1.在ESCC癌组织和细胞系中,miR-125b表达显著降低,并且miR-125b的降低与患者淋巴转移明显相关。***-125b过表达显著抑制细胞生长,诱导细胞凋亡,增加人食管癌细胞109和人食管癌细胞9706细胞周期的G1期。3.过表达miR-125b显著抑制体内肿瘤生长。***是miR-125b调控人食管癌细胞109和人食管癌细胞9706细胞增殖、凋亡和细胞周期的功能靶点。结论:***-125b在ESCC中显著下调,具备成为ESCC具有淋巴结转移的诊断潜能。***-125b通过靶向bmf显著抑制食管鳞癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。

关键词：食管鳞癌 MiR-125b 增殖凋亡 bmf

中国OEM企业特征分析及路径选择的实证研究

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中国OEM企业特征分析及路径选择的实证研究

作者：杨薇武汉科技大学

学位级别：硕士

本文的研究内容可以归纳为三个方面:第一,中国OEM行业发展过程及其特征分析;第二,OEM Supplier、Brand Marketing Firm及市场循环模型;第三,现阶段OEM Supplier的SWOT分析。其主要工作归纳如下: 在第一部分中,通过从企业规模、企业各个... 详细信息

本文的研究内容可以归纳为三个方面:第一,中国OEM行业发展过程及其特征分析;第二,OEM Supplier、Brand Marketing Firm及市场循环模型;第三,现阶段OEM Supplier的SWOT分析。其主要工作归纳如下: 在第一部分中,通过从企业规模、企业各个环节、企业产品线、企业核心竞争力等方面研究企业发展的过程,从而研究中国OEM企业的产生,分析中国OEM企业发展的三个阶段以及中国OEM企业面临的现状。此部分重点是从企业的核心竞争力和产品的角度研究中国OEM的特征。在第二部分中,首先提出OEM Supplier、Brand Marketing Firm及市场循环模型,描述该模型当中存在的诉求路径和供给路径。主要运用微观经济学的需求供给理论和生产者行为理论分析OEM Supplier、Brand Marketing Firm及市场模型稳定的条件:OEM生产制造该产品的成本

关键词： OEM bmf 核心竞争力市场循环现代SWOT

布鲁氏菌fliC影响巨噬细胞基因表达谱的初步研究

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布鲁氏菌fliC影响巨噬细胞基因表达谱的初步研究

作者：聂鑫海南大学

学位级别：硕士

布鲁氏菌病是在世界广泛流行的传染性人畜共患病。布鲁氏菌是其致病菌,革兰氏染色为阴性,属于胞内菌。鞭毛蛋白FliC是布鲁氏菌鞭毛丝的主要组成部分,参与细菌对宿主的致病过程,是重要的病原相关分子模式之一（PAMPs）。有研究将缺失fli... 详细信息

布鲁氏菌病是在世界广泛流行的传染性人畜共患病。布鲁氏菌是其致病菌,革兰氏染色为阴性,属于胞内菌。鞭毛蛋白FliC是布鲁氏菌鞭毛丝的主要组成部分,参与细菌对宿主的致病过程,是重要的病原相关分子模式之一（PAMPs）。有研究将缺失fliC基因后的布鲁氏菌通过腹腔注射感染小鼠,发现其毒力增强。但fliC缺失株感染后引发宿主细胞基因表达的变化机制还有待研究。本研究利用PCR技术及T4 DNA连接酶,通过重叠延伸PCR反应及T4 DNA连接酶连接平末端,成功构建同源重组质粒pGEM-7Zf（+）-ΔfliC。然后利用电转化手段将该重组质粒转化到布鲁氏菌M5-90株,通过PCR验证及连续传代确定其遗传稳定性,最终成功获得M5-90-ΔfliC基因缺失株。将布鲁氏菌M5-90与布鲁氏菌M5-90ΔfliC缺失株分别感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,TRIzol法提取总RNA。应用miRNA Microarray-Single芯片检测miRNAs表达谱变化,通过Agilent芯片检测基因表达谱变化。芯片实验结果发现了 15个差异倍数≥2的miRNAs及388个差异倍数≥2的mRNAs。经qRT-PCR验证后,发现10个下调的miRNAs表达量变化与芯片结果一致,分别为:mmu-miR-6965-3p、mmu-miR-328-5p、mmu-miR-7683-3p、mmu-miR-7072-5p、mmu-miR-691、mmu-miR-3070-2-3p、mmu-miR-7056-5p、mmu-miR-1907、mmu-miR-486a-3p、mmu-miR-409-3p。利用TargetScan和miRDB数据库对差异miRNA及差异mRNA表达谱进行联合分析,发现39个靶基因,再经qRT-PCR验证后,确认38个靶基因表达量与芯片结果一致,并且最终预测得到80对miRNA与靶基因的对应关系。之后选取与免疫、细胞凋亡相关基因:白细胞介素17受体Il17ra、卷曲蛋白Fzd7和促凋亡蛋白bmf基因为研究对象。根据预测的miRNA-mRNA关系,利用miRNAmimics转染RAW264.7,通过qRT-PCR验证确定miRNAs与靶基因的对应关系,结果初步得到miRNA-预测靶基因的对应关系mmu-miR-7056-5p与bmf、mmu-miR-328-5p与bmf、mmu-miR-691 与Il17ra、mmu-miR-328-5p 与Fzd7。本研究为发现fliC在布鲁氏菌感染RAW264.7过程中的作用提供理论支持。

关键词：布鲁氏菌鞭毛蛋白FliC RAW264.7 miRNAs-mRNAs 联合表达分析 Il17ra Fzd7 bmf

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蛋白质柔性对接中计算技术研究

蛋白质柔性对接中计算技术研究

作者：陈荣苏州大学

学位级别：硕士

蛋白质复合物在生物体内起到信号传导、物质输送等很多生理功能。由于蛋白质的三维结构决定其功能，故通过计算手段预测蛋白质结构可以帮助在实验结构未知的情况下对其功能的理解。但目前复合物结构预测仍是一项艰巨的任务。由于蛋白质... 详细信息

蛋白质复合物在生物体内起到信号传导、物质输送等很多生理功能。由于蛋白质的三维结构决定其功能，故通过计算手段预测蛋白质结构可以帮助在实验结构未知的情况下对其功能的理解。但目前复合物结构预测仍是一项艰巨的任务。由于蛋白质在复合过程中常发生局部结构变化，所以预测复合物结构时柔性处理就变得异常困难。本文研究一个柔性区域识别问题以及应用图概率模型到柔性对接问题中。首先研究了GPCR结构中柔性区域的识别问题，因为GPCR在制药领域中占有极其重要的地位。跨膜螺旋结构是GPCR非常显著的特征之一，然而螺旋结构往往存在柔性形变。这些柔性形变会导致GPCR结构预测精度不高，那么对螺旋柔性形变识别预测至关重要。本文根据螺旋序列相似度矩阵进行聚类，用连续型vonMises概率分布来对每个类中柔性形变角度集建模。训练后的概率模型只需十五次采样，就有采样结果接近天然螺旋的形变角度，能够很好的帮助螺旋的柔性识别预测。提高柔性形变识别预测精度，能够帮助GPCR结构预测和对接过程中的柔性处理。其次在蛋白质-蛋白质对接协议Rosetta Dock基础上加入了骨架柔性运动来加大采样空间以提高对接精度。要提高复合物的预测精度，不仅要提高柔性对接的采样能力，还要提升能量打分函数对对接结果的挑选能力。由于大量柔性的引入导致对接结果采样空间变大而使得能量分布宽度加大，给能量函数提出了更大的挑战。本文采用概率模型matrix Bingham-von Mises-Fisher对残基交互图建模，后使用该概率模型回归对候选结构进行概率打分。由于残基交互图可以把生化知识在结构上定性化表达，能够作为结构挑选的依据。本文的模型方法在能量函数挑选效果不好的对接案例中，能够作为能量函数进行柔性对接结构筛选的辅助手段。

关键词：柔性形变蛋白质-蛋白质柔性对接残基交互图结构挑选 bmf