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bcat1在肾细胞癌中的作用及机制研究

BCAT1在肾细胞癌中的作用及机制研究

作者：李施清苏州大学

学位级别：硕士

[目的]支链氨基酸转移酶 1(Branched-chain amino transferases 1,bcat1)是一种存在于细胞质内的支链氨基酸转移酶的亚型。在多种肿瘤中被发现异常表达,但目前bcat1对肾细胞癌(RCC)的发生和发展有何影响尚不清楚。因此我们希望探究bcat... 详细信息

[目的]支链氨基酸转移酶 1(Branched-chain amino transferases 1,bcat1)是一种存在于细胞质内的支链氨基酸转移酶的亚型。在多种肿瘤中被发现异常表达,但目前bcat1对肾细胞癌(RCC)的发生和发展有何影响尚不清楚。因此我们希望探究bcat1在肾细胞癌中的作用和机制。[方法]我们从在TISCH2下载的GSE159115数据集中获得了肾透明细胞癌(kidney renal clear cell carcinoma,KIRC)的单细胞转录组测序数据并进行了分析,经筛选后以bcat1为目的基因通过TCGA-GTEx等数据库研究其在KIRC中的表达与基因突变、预后和肿瘤免疫微环境的关系。基因集富集分析(GSEA)、基因本体(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)和单细胞基因集变异分析(scGSVA)等方法被用于探究bcat1的潜在功能和机制。利用免疫组织化学染色法在临床组织样本中检测bcat1的表达情况。构建、筛选稳定过表达和敲降bcat1的细胞株用于进行Western Blot、qRT-PCR和表型实验。[结果]在此项研究中,我们发现bcat1在KIRC中高表达,并与疾病预后和肿瘤免疫微环境有关。cBioPortal在线工具分析显示bcat1发生突变者总生存期(OS)、和无病生存期(DFS)更短。利用Kaplan-Meier方法我们发现bcat1高表达组与低表达组患者相比,OS、无进展间隔期(PFI)和疾病特异性生存期(DSS)更短。基因富集分析(GSEA)显示,bcat1在上皮间质转化(EMT)中显著富集。免疫组化结果显示,在临床组织样本中,bcat1在肾细胞癌中表达高于癌旁组织。体外细胞实验证实bcat1在KIRC细胞中可能促进EMT影响其侵袭,迁移。我们构建了蛋白质互作网络(PPI)推测出可能与bcat1结合的蛋白质。单样本基因集富集分析ssGSEA揭示了 bcat1的免疫浸润环境。表观遗传学分析显示KIRC中bcat1启动子区域的低甲基化可能通过促进bcat1的表达来促进疾病进展。[结论]本研究综合地运用生物信息学预测分析和分子生物学验证等多种技术手段,首次成功地筛选、鉴定了肾细胞癌中的关键一个关键癌基因——bcat1。bcat1与KIRC患者的预后和临床特征密切相关,可能成为一种全新的生物标志物,为肾细胞癌的治疗提供新的靶点。

关键词： bcat1 肾细胞癌 EMT 生物标志物肿瘤免疫微环境

bcat1调控胚胎神经干细胞的增殖与上层神经元的分化

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BCAT1调控胚胎神经干细胞的增殖与上层神经元的分化

作者：张书魁烟台大学

学位级别：硕士

大脑皮层是哺乳动物大脑中最为复杂的区域之一,其神经元网络的形成和发育涉及到多种细胞因子、转录因子和环境因素的调控。在神经元的发育过程中,细胞增殖、迁移、定位、分化、成熟和连接等过程紧密相连,彼此相互影响。神经元发育的细... 详细信息

大脑皮层是哺乳动物大脑中最为复杂的区域之一,其神经元网络的形成和发育涉及到多种细胞因子、转录因子和环境因素的调控。在神经元的发育过程中,细胞增殖、迁移、定位、分化、成熟和连接等过程紧密相连,彼此相互影响。神经元发育的细节和机制受到多种因素的调控,包括基因调控、信号通路的调节、细胞外基质和胶质细胞的支持等。在神经元发育的不同阶段,神经元会表达不同的分子标记和形态特征,形成不同的神经元类型。神经元还可以根据其位置和功能在不同的脑区中被分类。神经递质是一种化学物质,它们在神经元之间传递信息,并在神经网络中调节神经元的活动。神经递质可以分为兴奋性神经递质和抑制性神经递质。兴奋性神经递质如谷氨酸和多巴胺可以刺激神经元产生兴奋作用,而抑制性神经递质如γ-氨基丁酸可以减少神经元的活动。神经递质的类型和数量的改变可以对神经网络的活动产生影响,这与许多神经系统疾病如帕金森病和抑郁症等有关。在大脑皮层不同层的神经元亚型中,谷氨酸是主要的神经递质。bcat1是一个参与谷氨酸代谢的基因,在不同层神经元中的表达模式尚未完全了解。利用单细胞数据,我们确定了七种不同状态的神经干细胞(NSC),发现状态4与投射神经元的发育密切相关。通过从该状态的NSC亚群中推断不同神经元亚型的发育轨迹,我们发现bcat1参与了NSC增殖和分化的调控,并在II/III层和IV层神经元中特异高表达。通过sh RNA抑制bcat1导致NSC增殖减少和II/III层和IV层神经元的异常发育。这些发现提供了关于bcat1在调控NSC行为和神经元发育中作用的新见解。

关键词： bcat1 谷氨酸大脑皮层神经祖细胞上层神经元

bcat1通过调控铁死亡影响食管鳞状细胞癌放疗耐受的研究

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BCAT1通过调控铁死亡影响食管鳞状细胞癌放疗耐受的研究

作者：郭聪南昌大学

学位级别：硕士

目的:放疗(radiotherapy,RT)不仅可以通过损伤DNA直接损伤肿瘤组织,还可以通过引发强烈的铁死亡造成细胞死亡。铁死亡在RT诱导的细胞死亡和肿瘤抑制中发挥重要作用,并介导RT与免疫治疗的协同作用,但辐射诱导肿瘤细胞铁死亡的调控机制目... 详细信息

目的:放疗(radiotherapy,RT)不仅可以通过损伤DNA直接损伤肿瘤组织,还可以通过引发强烈的铁死亡造成细胞死亡。铁死亡在RT诱导的细胞死亡和肿瘤抑制中发挥重要作用,并介导RT与免疫治疗的协同作用,但辐射诱导肿瘤细胞铁死亡的调控机制目前尚不清楚。我们通过生物信息学方法筛选出食管鳞状细胞癌RT前后差异表达的基因,从中选出与铁死亡密切相关的基因支链氨基酸转氨酶1(Branched chain amino acid transaminase1,bcat1),进而通过系列实验确定bcat1对肿瘤细胞生物学行为、RT耐受以及肿瘤细胞铁死亡进行深入研究,本课题旨在阐明bcat1在肿瘤RT耐受中的作用,为深入研究RT对肿瘤细胞的作用机制以及推动RT的联合治疗提供实验数据。方法:1、生物信息学分析(1)差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)的筛选:利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)(https://portal.***.cancer.gov/)以及基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)(https://www.***.nlm.***.gov/geo/)和R包筛选符合要求的数据集并进行RT前后肿瘤组织DEGs分析,qPCR验证并确定候选基因。(2)bcat1相关的生物功能分析:利用Linked Omics数据库(***/login.php)对TCGA-ESCA队列中筛选出的bcat1基因相关功能进行分析,并利用GSEA富集分析对基因本体生物学过程(GOP)、细胞组成(GOC)、分子功能(GOF)以及京都基因与基因组百科(KEGG)途径进行了功能模块化的分析。(3)bcat1与铁死亡关键基因的关系:利用GEPIA网站(http://***/)的Correlation Analysis模块分别分析bcat1与铁死亡关键基因GPX4和SLC7A11的相关性。2、细胞实验验证差异表达基因(1)检测食管鳞状细胞癌TE-1细胞放疗前后bcat1的变化:TE-1细胞在接受5Gy电子射线处理后,RT-qPCR以及Western Blot验证TE-1细胞处理前后bcat1的表达情况。(2)过表达bcat1后对TE-1细胞生物学行为的影响:将TE-1细胞通过Lipofectamine 2000转染bcat1的c DNA质粒;RT-qPCR和Western blot分别检测转染细胞的基因和蛋白表达,运用CCK8实验检测细胞增殖能力的变化,划痕和Transwell侵袭实验验证bcat1过表达后TE-1细胞的侵袭转移能力。RT-qPCR和Western blot检测上皮间充质转化(Epithelial mesenchymal transformation,EMT)相关指标E-Cadherin、N-Cadherin和MMP2表达情况。(3)bcat1过表达对TE-1细胞RT耐受的影响:应用5GY的电子射线处理过表达bcat1的TE-1细胞,免疫荧光检测TE-1细胞中DNA损伤标记物γ-H2AX的表达变化。(4)bcat1与铁死亡之间的关系:利用铁死亡诱导剂(RSL3)处理bcat1转染组和对照组TE-1细胞24h后,利用试剂盒检测细胞内脂质过氧化MDA、铁含量的变化以及活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)含量的变化,RT-qPCR和Western blot检测各组细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione peroxidase 4,GPX4)的表达。(5)bcat1调控RT诱导的铁死亡:RT处理bcat1转染组和对照组TE-1细胞后,检测细胞内MDA和铁含量的变化,ROS含量检测;RT-qPCR和Western blot检测各组细胞中GPX4的表达情况。结果:1.通过对TCGA数据库食管鳞癌病人样本进行差异分析,发现在RT与未RT的食管鳞状细胞癌病人中表达上调的DEGs有272个,下调的DEGs有429个,另外通过与GEO数据库中的数据集整合分析筛选出四个共同DEGs,通过实验验证只有bcat1在RT前后的食管鳞状细胞癌病人中具有显著差异表达,且RT后表达下调(pbcat1在大多数癌症当中表达是增加的。2.GO和KEGG通路富集显示与bcat1相关基因主要富集在巨噬细胞活化、过氧化物酶体转运、细胞外囊泡生物发生、线粒体RNA代谢过程等生物过程,以及主要参与细胞外基质相互作用途径、PI3K-AKT信号通路、癌症中的蛋白聚糖、细胞粘附分子等通路。3.GEPIA网站Correlation Analysis模块分析结果显示bcat1与铁死亡相关基因如GPX4和SLC7A11的相关性,bcat1与GPX4以及SLC7A11呈显著正相关(p<0.05)。4.RT-qPCR和Wes

关键词： bcat1 放射治疗食管鳞状细胞癌铁死亡

bcat1和2在胰腺癌细胞中增殖、迁移与侵袭的研究

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BCAT1和2在胰腺癌细胞中增殖、迁移与侵袭的研究

作者：罗维福建医科大学

学位级别：硕士

目的:胰腺导管腺癌(Pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)是一种恶性程度极高的消化道系统肿瘤。该病起病隐匿,临床症状不明显,尚无有效的早期筛查方法,80%以上的患者在实现临床诊断时已属中晚期,丧失了手术机会。并且,由于胰腺癌在... 详细信息

目的:胰腺导管腺癌(Pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)是一种恶性程度极高的消化道系统肿瘤。该病起病隐匿,临床症状不明显,尚无有效的早期筛查方法,80%以上的患者在实现临床诊断时已属中晚期,丧失了手术机会。并且,由于胰腺癌在分子生物学上的复杂特性,目前仍未找到十分有效的药物治疗方法。支链氨基酸(Branched chain amino acid,BCAA)包括亮氨酸、异亮氨酸以及缬氨酸,是人体必需氨基酸,具备多种生理功能,如促进合成代谢,辅助细胞蛋白合成等。支链氨基酸转氨酶(bcat)包括支链氨基酸转氨酶1(bcat1)和支链氨基酸转氨酶2(bcat2),是支链氨基酸代谢途径中的两种关键酶,可逆行的分解BCAA为相应的酮酸,本研究通过体外实验使用bcat1抑制剂加巴喷丁(Gabapentin)处理胰腺癌细胞,探索其增殖、迁移和侵袭能力的影响,进一步研究bcat1和bcat2两种代谢酶对胰腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭的影响,从而可能为未来胰腺癌临床治疗靶点提供新的研究方向。方法:1.使用抗bcat1抗体、抗bcat2抗体对54例PDAC病人的肿瘤组织和部分的癌旁组织切片进行免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)染色。2.使用bcat1抑制剂加巴喷丁给予不同的药物浓度(0mM,10mM,20mM,40mM,80mM)处理24、48h后,运用CCK-8法对加巴喷丁处理后的胰腺癌细胞的增殖情况改变进行检测。运用划痕修复实验检测不同药物浓度处理后胰腺癌细胞迁移能力的变化,以及运用Transwell小室实验方法检测加巴喷丁对胰腺癌细胞的侵袭能力的影响。3.体外培养人胰腺癌细胞株Panc-1,通过慢病毒转染,然后加以嘌呤霉素筛选出阳性克隆,构建bcat1和bcat2稳定过表达和敲低的胰腺癌细胞株,然后收集癌细胞并提取RNA和蛋白,利用qRT-PCR以及蛋白免疫印迹方法来检测其过表达和敲低效果,用于后续的实验研究。4.利用CCK-8,划痕实验,Transwell实验方法检测其增殖,迁移和侵袭能力的变化研究。结果:1.bcat1在正常胰腺组织中,胰腺腺泡细胞高表达,在胰腺癌组织中,癌细胞普遍表达bcat1,而间质细胞中bcat1表达呈现差异性表达,间质bcat1表达较高的临床患者临床预后相较于表达水平较低者预后较差(平均生存时间10.19月vs 19.92月,P=0.042,图3),提示胰腺癌组织间质细胞bcat1表达水平与预后可能存在显著相关性。bcat2在胰腺癌组织中,癌细胞普遍高表达。而间质细胞中bcat2表达较癌细胞低,均无差异性表达。2.bcat1抑制剂加巴喷丁对多种人胰腺癌细胞株具有明显抑制其细胞增殖作用,并且在一定的浓度范围(0-80mM)内表现出浓度和时间的依赖,随着药物浓度的升高,作用时间的增加,胰腺癌细胞的生存率以及迁移能力逐步降低。使用不同浓度的加巴喷丁干预Panc-1细胞株24h后,与对照组相比,胰腺癌细胞在100×光镜下平均在每个视野中侵袭的细胞数目明显减少(Pbcat1或bcat2过表达Panc-1细胞与对照组Panc-1细胞相比,可以在胰腺癌细胞中增强体外增殖、迁移和侵袭能力,稳定的bcat1或bcat2敲低的Panc-1细胞则表现出相反的结果。结论:1.bcat1在胰腺癌组织间质中呈现差异性表达,表达较高的临床患者临床预后相较于表达水平较低者预后较差,提示胰腺癌组织间质细胞bcat1表达水平与预后可能存在显著相关性。bcat2在胰腺癌组织中,癌细胞普遍高表达。而间质细胞中bcat2表达较癌细胞低。2.bcat1抑制剂加巴喷丁在一定浓度范围内(0-80mM)能够抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,同时这种抑制作用表现出时间和剂量的依赖性。3.bcat1和bcat2分别在胰腺癌细胞中稳定的过表达可以促进细胞的增殖、迁移与侵袭能力,稳定的敲低则表现出抑制细胞的增殖、迁移与侵袭的效果。

关键词： bcat1 bcat2 Gabapentin PDAC

宫颈癌组织中c-myc、bcat1的表达及其临床意义

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四川大学学报（医学版） 2018年第5期49卷 725-730页

作者：乌守恒曾晓峰王萍周颖林卫四川大学华西第二医院妇产科成都610041 出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室(四川大学) 成都610041

目的探究c-myc、bcat1表达与宫颈癌发生发展及临床特征的关系。方法采用免疫组织化学方法半定量检测30例正常宫颈组织、30例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织、80例宫颈癌组织(40例宫颈鳞癌、40例宫颈腺癌)中c-myc及bcat1蛋白的表达情况,并进行S... 详细信息

目的探究c-myc、bcat1表达与宫颈癌发生发展及临床特征的关系。方法采用免疫组织化学方法半定量检测30例正常宫颈组织、30例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织、80例宫颈癌组织(40例宫颈鳞癌、40例宫颈腺癌)中c-myc及bcat1蛋白的表达情况,并进行Spearman秩相关分析,分析两者表达水平与宫颈癌临床病理因素间的关系。结果 c-myc在正常宫颈组织、CIN组织、宫颈癌组织中的阳性表达率分别为16.7%(5/30)、43.3%(13/30)、73.8%(59/80);bcat1阳性表达率分别为10.0%(3/30)、23.3%(7/30)、52.5%(42/80);c-myc与bcat1在宫颈鳞癌及腺癌组织中的秩相关系数rs分别为0.773(P=0.000)、0.369(P=0.019);c-myc阳性表达率与癌组织病理类型(腺癌/鳞癌)、癌组织分化程度、间质浸润深度、有无脉管浸润有关(Pbcat1阳性表达率与癌组织分化程度、有无脉管浸润及Ki67指数有关(Pbcat1的高表达可能促进宫颈癌的增殖、侵袭与转移,两者可能在宫颈癌致病过程中存在协同作用。

关键词： c-myc bcat1 宫颈癌临床病理因素协同作用

bcat1在肝癌中的表达、预后及免疫浸润的生物信息学分析

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中国卫生检验杂志 2023年第13期33卷 1580-1584页

作者：岳明强周艳彩卓亚王昕红新乡医学院第一附属医院感染科河南新乡453100

目的探讨bcat1在肝癌中的表达及其与预后、免疫浸润的关系。方法TCGA数据库分析多种肿瘤组织中bcat1 mRNA的表达水平;GEPIA2数据库、HPA数据、TIMER数据库和LinkedOmics数据库分别分析bcat1 mRNA的表达水平与肝癌患者的生存状态的关系、... 详细信息

目的探讨bcat1在肝癌中的表达及其与预后、免疫浸润的关系。方法TCGA数据库分析多种肿瘤组织中bcat1 mRNA的表达水平;GEPIA2数据库、HPA数据、TIMER数据库和LinkedOmics数据库分别分析bcat1 mRNA的表达水平与肝癌患者的生存状态的关系、bcat1表达定位、bcat1与肝癌组织中免疫细胞浸润程度的相关性及共表达基因,对共表达基因进行GO、KEGG富集分析,Cytoscape软件鉴定肝癌中与bcat1共表达基因的Hub基因。结果bcat1 mRNA在乳腺浸润癌、胆管癌、肝癌等均高表达(Pbcat1在肝癌组织细胞核呈现中等及高表达,在正常组织中呈弱表达或无表达。bcat1 mRNA表达(高表达)是肝癌患者预后的独立危险因素(Pbcat1高表达的肝癌患者中位生存时间降低(P=0.001)。肝癌组织中bcat1 mRNA表达水平与B细胞、CD4+T细胞等浸润程度成正相关性(P1)。共表达基因包括APOH、CD86、SYK、AMBP、C3AR1、CYBB、MSR1、FTCD、SERPINC1和PROC。结论bcat1可作为肝癌患者预后不良的标志物,bcat1可能通过影响免疫细胞浸润及代谢途径调控肝癌的发生发展。

关键词：肝癌 bcat1 预后富集分析信号通路代谢

联合检测外周血游离Septin9、SDC2、bcat1基因甲基化在结直肠癌诊断中的意义

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中华检验医学杂志 2021年第3期44卷 204-211页

作者：谭琪宗明虞珊珊陆柳王岚范列英同济大学附属东方医院检验科上海200120

目的探讨联合检测外周血游离Septin9、SDC2、bcat1基因启动子甲基化对结直肠癌诊断的临床意义。方法回顾性分析2019年1月至9月同济大学附属东方医院消化科收治的患者资料,分为结直肠癌组(结肠癌62例,直肠癌59例)、癌前病变组(结直肠腺... 详细信息

目的探讨联合检测外周血游离Septin9、SDC2、bcat1基因启动子甲基化对结直肠癌诊断的临床意义。方法回顾性分析2019年1月至9月同济大学附属东方医院消化科收治的患者资料,分为结直肠癌组(结肠癌62例,直肠癌59例)、癌前病变组(结直肠腺瘤77例,高级别上皮内瘤变5例)、疾病对照组(结直肠癌与进展期腺瘤阴性但存在其他肠道病变患者61例,非结直肠癌肿瘤患者17例)、健康对照组(94名)。采用荧光PCR法同步检测外周血血浆游离Septin9、SDC2、bcat13种基因甲基化状态,分析联合检测3种基因的阳性率与结直肠临床病理特征的关系,并与癌胚抗原(CEA)阳性率作比较。将结直肠癌组按照临床TNM分期,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期按等级分析计数资料,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析检测方法对疾病的诊断效能,比较ROC曲线下面积(AUC)。结果结直肠癌组血浆游离Septin9、SDC2、bcat1基因甲基化联合检测阳性率86%(104/121),癌前病变组阳性率12%(10/82),疾病对照组阳性率4%(3/78)、健康对照组阳性率4%(4/94)。结直肠癌组血浆Septin9、SDC2、bcat1基因甲基化联合检测阳性率明显高于其他3组(χ^(2)=237.246,P1)。结直肠癌组中血浆Septin9、SDC2、bcat1基因甲基化联合检测阳性率高于CEA阳性率(P1)。血浆Septin9、SDC2、bcat1基因甲基化联合检测在结直肠癌组中Ⅰ~Ⅳ期的阳性率依次分别为73%(16/22)、87%(34/39)、86%(30/35)和96%(24/25),与CEA组相比,血浆Septin9、SDC2、bcat1基因甲基化联合检测在结直肠癌Ⅰ~Ⅲ期阳性率显著高于CEA(P1),Ⅳ期阳性率与CEA相比差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析Septin9、SDC2、bcat1基因检测AUC分别为0.857(95%CI 0.810~0.903)、0.819(95%CI 0.768~0.871)、0.862(95%CI 0.816~0.909),3个基因甲基化联合检测AUC为0.889(95%CI 0.846~0.933),再联合血清CEA检测AUC为0.913(95%CI 0.874~0.951)。结肠癌患者不同性别、年龄和癌变部位与Septin9、SDC2、bcat1基因甲基化联合检测阳性率差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论联合检测外周血血浆游离Septin9、SDC2、bcat1基因启动子甲基化有助于结直肠癌早期诊断,对结直肠癌Ⅰ~Ⅲ期阳性率高于CEA,3个基因联合检测提高了诊断效能。

关键词：结直肠肿瘤 Septin9 SDC2 bcat1 甲基化

结肠镜检出结果之非直肠癌患者外周血甲基化bcat1和IKZF1阳性的影响因素研究

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医药论坛杂志 2023年第8期44卷 43-47页

作者：马志蛟李洪现张旗南阳市第一人民医院消化内镜中心河南南阳473000

目的探讨结肠镜下检出结果非结直肠癌(colorectal cancer, CRC)患者外周血甲基化bcat1和IKZF1阳性的相关影响因素。方法选择2020年5月—2022年1月在南阳市第一人民医院就诊行结肠镜检查的患者712例患者作为研究对象,患者在检查前均进... 详细信息

目的探讨结肠镜下检出结果非结直肠癌(colorectal cancer, CRC)患者外周血甲基化bcat1和IKZF1阳性的相关影响因素。方法选择2020年5月—2022年1月在南阳市第一人民医院就诊行结肠镜检查的患者712例患者作为研究对象,患者在检查前均进行血样检测。根据调查对象外周血检测结果,结肠镜下检出结果非结直肠癌患者分为bcat1和/或IKZF1阳性组与bcat1及IKZF1均阴性组。对比分析两组患者的一般资料,应用logistic回归分析探讨患者甲基化阳性的影响因素。结果单因素和多因素分析均显示:较大的年龄,较高的血浆cfDNA水平均是导致bcat1和/或IKZF1阳性的危险因素。56例非CRC的患者中,生物标志物阳性以bcat1为主且占比最高。统计比较显示,CRC和非CRC患者的bcat1或IKZF1的阳性率有显著性差异(Pbcat1的检测有关,也与年龄≥60岁有关。

关键词： bcat1 IKZF1 结肠镜

bcat1基因在胃腺癌组织的表达及其对SGC-7901细胞增殖、侵袭和迁移影响机制探讨

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药物生物技术 2021年第5期28卷 469-473页

作者：庄利萍周涛原庆会刘瑛瑛郭君何伟李媛媛都江堰市中医医院病理科脾胃病科四川都江堰611830 绵阳市中心医院病理科疼痛科四川绵阳621000 杭州师范大学附属医院转化医学平台浙江杭州310015 深圳市龙岗区第三人民医院病理科广东深圳518116 成都市第一人民医院病理科四川成都610041

探讨bcat1基因在胃腺癌组织的表达及其对SGC-7901细胞增殖、侵袭和迁移的影响。收集2009年10月~2018年1月于都江堰市中医医院和绵阳市中心医院病理科确诊为胃腺癌患者的石蜡组织标本70例,经手术切除的癌组织为观察组,癌旁组织设为对照... 详细信息

探讨bcat1基因在胃腺癌组织的表达及其对SGC-7901细胞增殖、侵袭和迁移的影响。收集2009年10月~2018年1月于都江堰市中医医院和绵阳市中心医院病理科确诊为胃腺癌患者的石蜡组织标本70例,经手术切除的癌组织为观察组,癌旁组织设为对照组。通过免疫组化检测观察组和对照组中bcat1的表达水平,统计学软件分析bcat1表达与患者临床病理特征的相关性。选择SGC-7901细胞作为实验对象,将细胞分为空白对照组、阴性对照组和siRNA bcat1组,采用RT-qPCR法和Western blot检测各组SGC-7901细胞中bcat1 mRNA和蛋白的表达水平,CCK8检测各组SGC-7901细胞的增殖水平,划痕实验检测各组SGC-7901细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测各组细胞Ki-67和MMP-2蛋白表达。bcat1在胃腺癌组织中和癌旁组织中的阳性表达率分别为54.29%(38/70)和8.57%(6/70);bcat1表达与患者年龄、性别、肿瘤大小以及分化程度无关(P>0.05),与淋巴结转移、Lauren分型和TNM分期有关(Pbcat1组bcat1 mRNA和蛋白表达显著降低(Pbcat1在胃腺癌组织中高表达,并与淋巴结转移和TNM分期显著相关,降低其表达能够抑制SGC-7901胃腺癌细胞增殖、侵袭和迁移。

关键词：胃腺癌 bcat1 细胞增殖侵袭迁移 Ki-67 MMP-2