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The long-term immunological effects of alloferon and its analogues in the mealworm Tenebrio mofitor

Insect Science 2018年第3期25卷 429-438页

作者： Elzbieta Czarniewska Arkadiusz Urbanski Szymon Chowanski Mariola Kuczer Department of Animal Physiology and Development Adam Mickiewicz University Umultowska 89 61-614 Poznan Poland Faculty of Chemistry Wroclaw University Joliot-Curie 14 50-383 Wroctaw Poland

The subject of this article is a search for the long-term immunological effects of alloferon and 3 structural analogues of alloferon, which were earlier characterized by the highest pro-apoptotic activity in Tenebrio molitor. The differences in the actions of these peptides on immune response were observed. alloferon increased nodulation and significantly phenoloxidase activity in the hemolymph of experimentally infected T. molitor. However, [Phe（p-NH2）^1 ]- and [Phe（p-OMe） ^1 ]-alloferon strongly inhibited cellular and humoral defense of the mealworm against Staphylococcus aureus infection. One day after injection of these peptides, the specific biochemical and morphological hallmarks of apoptosis in bacteria-challenged hemocytes were visible; in contrast, 3 days after peptides injection in all hemocytes, caspase activation was not observed. However, these new, circulating hemocytes differed from the control and the peptide-untreated bacteria-challenged hemocytes. They had an increased adhesion that led to a separation of viable, anucleated fragments of hemocytes that retain the ability to adhere and to form long filopodia. The peptide-induced separation ofhemocyte fragments may resemble the formation ofplatelets in mammals and perhaps play a role in sealing wounds in insects. The results of in vivo studies may suggest a long half-life of studied peptides in the hemolymph of mealworm. Moreover, we showed the importance of the N-terminal histidine residues at position one of the alloferon molecule for its immunological properties in insects. The results obtained here show that alloferon plays pleiotropic functions in insects.

关键词： alloferon analogue hemocyte's apoptosis immune response nodulation phenoloxidase activity

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alloferon的抗犬瘟热病毒和犬细小病毒作用研究

Alloferon的抗犬瘟热病毒和犬细小病毒作用研究

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作者：沈晓鹏扬州大学

学位级别：硕士

alloferon1和alloferon2是原先从丽蝇提取的两种抗病毒肽,分别由13和12个氨基酸组成,其氨基酸序列分别是HGVSGHGQHGVHG和GVSGHGQHGVHG,具有激活NK细胞、诱发干扰素产生、抗病毒和抗肿瘤功能。为了研究alloferon抗犬源病毒感染作用,本试... 详细信息

alloferon1和alloferon2是原先从丽蝇提取的两种抗病毒肽,分别由13和12个氨基酸组成,其氨基酸序列分别是HGVSGHGQHGVHG和GVSGHGQHGVHG,具有激活NK细胞、诱发干扰素产生、抗病毒和抗肿瘤功能。为了研究alloferon抗犬源病毒感染作用,本试验将不同剂量的alloferon1和alloferon2添加于病毒感染前、病毒感染同时、病毒感染后的细胞培养液,根据培养细胞的病变出现与否判定结果,结果显示两种抗病毒肽对犬瘟热病毒和犬细小病毒感染均有抑制作用,且在一定浓度范围内具有剂量依赖性,其中以病毒感染前或同时添加的抑制效果较好。在体外抗病毒试验基础上,以颅内注射法建立BALB/c小鼠犬瘟热病毒感染模型,用不同途径注射抗病毒肽,结果表明颅内注射alloferon1或alloferon2可使小鼠发病率、死亡率显著降低(Palloferon1和alloferon2具有抗犬瘟热病毒感染作用。最后以非免疫犬为研究对象,证明alloferon1对犬瘟热病毒感染具有保护作用。这些研究结果表明,alloferon1和alloferon2具有抗犬瘟热病毒、犬细小病毒感染作用,可以作为两种犬病的治疗药物。

关键词： alloferon 犬瘟热病毒犬细小病毒抗病毒作用

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抗微生物肽alloferon的研究进展

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江苏农业科学 2012年第12期40卷 14-15页

作者：洪伟鸣左伟勇吴双王健朱善元江苏畜牧兽医职业技术学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室江苏泰州225300

alloferon-1和alloferon-2是分离自昆虫细胞的2个小肽,研究结果表明alloferon-1和alloferon-2具有抗病毒和抗肿瘤的活性。本文就alloferon-1和alloferon-2的抗病毒、抗肿瘤的作用效果及其在兽医临床上的应用进行了综述。

关键词：多肽 alloferon 抗病毒抗肿瘤

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基于多肽alloferon衍生物的结构与功能研究

基于多肽Alloferon衍生物的结构与功能研究

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作者：郑炳义厦门大学

学位级别：硕士

alloferon是一类从细菌感染的果蝇分离得到的十三肽,其氨基酸序列为His-Gly-Val-Ser-Gly-His-Gly-Gln-His-Gly-Val-His-Gly(HGVSGHGQHGVHG),因具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎症、免疫调控的多重生物活性被应用于病原体感染治疗用药,其主要通... 详细信息

alloferon是一类从细菌感染的果蝇分离得到的十三肽,其氨基酸序列为His-Gly-Val-Ser-Gly-His-Gly-Gln-His-Gly-Val-His-Gly(HGVSGHGQHGVHG),因具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎症、免疫调控的多重生物活性被应用于病原体感染治疗用药,其主要通过激发机体自然杀伤细胞NK的细胞毒杀作用及促进干扰素IFN的合成来发挥作用。2003年,alloferon成功在俄罗斯上市(商品名:Allokin-alpha),临床适应症为女性人乳头瘤病毒HPV感染。鉴于alloferon的独特优势,无细胞毒性、无免疫原性、无突变或致癌效应、无胚胎毒性、无生殖毒性,因此对于其衍生物的结构与功能研究甚为重要,旨在于创造出更高效、安全的抗菌肽(AMP)、抗肿瘤多肽(ACP)、抗炎症多肽(AIP)。本课题根据文献报道及查询抗菌肽数据库APD3和抗肿瘤多肽数据库CancerPPD,对alloferon进行修饰,如聚乙二醇修饰(PEG)、糖基化修饰(Glycosylation),设计了具有潜在治疗或预防功能的多肽库(alloferon-X)。理论研究方面,利用多肽的生物学信息分析工具ProtParam、APD3、Immunomedicine Group、NPS@、TMHMM分析预测alloferon-X多肽库的物理化学性质、二级结构、跨膜螺旋;利用 Hyperchem 软件模拟搭建 alloferon-Cu(Ⅱ)、alloferon-Zn(Ⅱ)复合物,辅助验证金属离子Cu(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)对多肽alloferon结构的影响(ΔEalloferon衍生物做定量构效关系QSAR研究,构建模型以用于预测多肽的生物活性(Q2>0.5)。实验研究方面,从alloferon-X多肽库中筛选出N端聚乙二醇修饰肽(PEG)、糖基化唾液酸修饰肽(Sialic acid)衍生物来开展其抗肿瘤活性、免疫调控活性、抗菌活性研究。实验结果分析表明:alloferon、PEG-alloferon系列衍生物(0-500 mg/L)不能对Hela肿瘤细胞产生直接细胞毒杀作用,且alloferon(100 μM)作用于PBMC与Hela肿瘤细胞共培养体系,也无明显间接细胞毒杀作用,而唾液酸-alloferon(100 μM)作用于PBMC免疫细胞与Raji、THP-1肿瘤细胞共孵育体系,于E:T=1:1时其肿瘤细胞杀伤率达到最大,分别达21%、34%;PEG2-alloferon、PEG6-alloferon(100μM)在THP-1诱导巨噬细胞模型中,表现出较强的促TNF-α分泌作用,而唾液酸-alloferon作用于PBMC、NK免疫细胞与Raji肿瘤细胞的共培养体系,其IFN-γ的分泌水平并无明显增加;另外,在KB滤纸片法中,alloferon(100 mg/mL)却无抗大肠杆菌的抗菌活性。

关键词： alloferon 多肽修饰抗菌肽抗肿瘤多肽

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