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ala-gln improves varicocele-induced testicular injury by increasing HSP70 and antioxidant activity in male rats

BIOCELL 2021年第2期45卷 323-329页

作者： LEI YU ZHEN FAN HONGQIANG WANG WENXIAN LI TAO JING QIANG LI SHENQIAN LI PEITAO WANG XUJUN XUAN Center for Reproductive Medicine Cheeloo College of MedicineShandong UniversityJinan250100China Department of Andrology The Affiliated Hospital of Qingdao UniversityQingdao266003China Department of Ophthalmology Qingdao Hospital of Traditional Chinese Medicine(Qingdao Hiser Hospital)Qingdao266034China Department of Urology The Affiliated Hospital of Qingdao UniversityQingdao266003China

This worked aimed to test the hypothesis that L-alanyl-L-glutamine(ala-gln)improves the varicocele-induced testicular injury,which causes male *** this purpose,fifty adult male Wistar rats received the varicocele(VC)surgery at the left renal *** were determined 2,4,and 8 weeks after VC(n=10/each detection).Four weeks after VC,rats received ala-gln(1.125 g/kg)treatment with and or saline for 1 week(n=10/each group).Rats in the sham group were also detected for biomarkers at 2,4,and 8 weeks(n=10/each detection).VC caused testicular injury detected by hematoxylin–eosin(H&E)staining,immunohistochemistry,and TUNEL ***70 mRNA was detected quantitative RT-PCR,SOD,and CAT by nitroblue tetrazolium(NBT)method and 8-OHDG by *** results showed that varicocele induced injury in the *** weight of the left testes was lower than that of the right testes in VC-bearing rats(pala-gln groups,the apoptosis index was 5.10±1.14,13.22±3.63,33.62±3.56 and 22.33±2.61,relative level of HSP70 mRNA 1.00±0.12,0.53±0.05,0.51±0.04 and 1.62±0.15 fold,SOD 16.4±0.23,13.4±0.17,10.01±1.06 and 19.53±2.26 U/mg protein,CAT 2.16±0.31,1.07±0.28,and 1.31±0.26 and 3.46±0.71 U/mg,8-OHDG 5.23±0.67,6.81±0.78,7.16±1.22 and 4.14±0.73 pg/μg DNA,respectively(pala-gln prevented the VC-induced testicular *** have firstly reported that ala-gln protects against varicocele-induced testicular injuries by up-regulation of HSP70 and antioxidants,SOD and CAT,and down-regulation of oxidant 8-OHDG,resulting in reducing apoptosis in the testis.

关键词： Varicocele ala-gln HSP70 SOD CAT 8-OHDG

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ala-gln和MOS对仔猪断奶应激的调节作用

Ala-Gln和MOS对仔猪断奶应激的调节作用

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作者：平伟强江西农业大学

学位级别：硕士

本研究旨在探讨ala-gln和MOS对断奶仔猪生产性能、肠道形态结构、肠道屏障功能以及血液生化指标的影响,研究结果将为指导ala-gln和MOS在仔猪饲料中的应用提供理论依据。试验一ala-gln和MOS对断奶仔猪生产性能以及腹泻率的影响试验选用16... 详细信息

本研究旨在探讨ala-gln和MOS对断奶仔猪生产性能、肠道形态结构、肠道屏障功能以及血液生化指标的影响,研究结果将为指导ala-gln和MOS在仔猪饲料中的应用提供理论依据。试验一ala-gln和MOS对断奶仔猪生产性能以及腹泻率的影响试验选用162头胎次、体重相近(5.5±0.5 kg)的21日龄杜长大断奶仔猪,随机分为9个处理,每个处理3个重复,每个重复6头仔猪。对照组饲喂基础饲粮,其他处理组饲粮为基础饲粮上分别添加0.10%MOS、0.20%MOS、0.15%ala-gln、0.10%MOS+0.15%ala-gln、0.20%MOS+0.15%ala-gln、0.30%ala-gln、0.10%MOS+0.30%ala-gln、0.20%MOS+0.30%ala-gln,试验期28天。观察并记录每一天仔猪数、投料量、剩料量以及腹泻情况,淘汰和死亡仔猪及时称重并做好记录。试验第1天、14天、28天清晨对仔猪进行空腹称重,并记录每个重复相应的饲料消耗量。计算平均日采食量(ADFI)、日增重(ADG)、料重比(F/G)和腹泻率。结果显示:⑴21～35日龄,基础饲粮中添加0.20%MOS+0.30%ala-gln显著降低断奶应激仔猪料重比(Pala-gln显著提高断奶仔猪平均日增重(Pala-gln、0.20%MOS+0.30%ala-gln显著提高断奶仔猪平均日采食量(Pala-gln对断奶仔猪的生产性能无互作效应。⑶35～49日龄,基础饲粮中添加0.10%MOS、0.20%MOS+0.15%ala-gln、0.20%MOS+0.30%ala-gln显著降低断奶仔猪的腹泻率(Pala-gln对断奶仔猪的生长性能有促进作用,本试验结果显示基础饲粮中添加0.20%MOS+0.30%ala-gln饲喂仔猪效果最佳。试验二ala-gln和MOS对断奶仔猪肠道黏膜形态结构以及肠道屏障功能的影响试验选用162头胎次、体重相近(5.5±0.5 kg)的21日龄杜长大断奶仔猪,随机分为9个处理,每个处理3个重复,每个重复6头仔猪。对照组饲喂基础饲粮,其他处理组饲粮为基础饲粮上分别添加0.10%MOS、0.20%MOS、0.15%ala-gln、0.10%MOS+0.15%ala-gln、0.20%MOS+0.15%ala-gln、0.30%ala-gln、0.10%MOS+0.30%ala-gln、0.20%MOS+0.30%ala-gln,试验期28天。于试验第14天、28天从每个重复随机选取1头仔猪屠宰,剪取其空肠、十二指肠、回肠,经HE染色观察其绒毛形态结构,并用透射电镜观察空肠绒毛超微结构,取盲肠内容物测定菌群结构和多样性,取空肠黏膜测定粘膜Occludin蛋白表达。结果显示:⑴21～35日龄,基础饲粮中添加0.10%MOS+0.30%ala-gln显著提高十二指肠的绒毛高度(Pala-gln显著提高空肠绒毛高度以及绒毛高度/隐窝深度(Pala-gln显著提高回肠的绒毛高度、降低十二指肠的隐窝深度,提高了十二指肠、回肠的绒毛高度/隐窝深度(Pala-gln组显著提高十二指肠绒毛高、降低回肠隐窝深度(Pala-gln组显著提高空肠绒毛高度、降低空肠绒毛高度/隐窝深度(Pala-gln显著降低空肠隐窝深度(Pala-gln组显著提高十二指肠、回肠绒毛高度/隐窝深度(Pala-gln存在互作效应,主要表现为对十二指肠的绒毛高度以及绒毛高度/隐窝深度。⑷各试验组相对对照组仔猪空肠微绒毛较长、整齐、密集,尤其是在饲粮中添加0.10%MOS+0.15%ala-gln组,35～49日龄,在基础饲粮中添加0.20%MOS+0.30%ala-gln,空肠微绒毛较长、整齐、密集。⑸35、49日龄,试验组粘膜Occludin蛋白表达量均显著高于对照组。综上所述,MOS和ala-gln对断奶仔猪的肠道绒毛发育有促进作用,可改善空肠微绒毛结构,促进空肠粘膜Occludin蛋白表达,并且MOS和ala-gln对肠道绒毛形态结构有互作效应。试验三ala-Gl

关键词：断奶应激仔猪 MOS ala-gln 生产性能血清生化指标

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ala-gln通过mTOR/p38MAPK信号通路介导仔猪小肠上皮细胞自噬的研究

Ala-Gln通过mTOR/p38MAPK信号通路介导仔猪小肠上皮细胞自噬的研究

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作者：熊昊江西农业大学

学位级别：硕士

本项目旨在应用现代营养学、细胞系模型、蛋白免疫印迹、实时荧光定量PCR(RT-PCR)等技术手段,从细胞和分子水平探究ala-gln与仔猪小肠上皮细胞自噬之间的内在关系及阐明mTOR/p38MAPK信号通路在仔猪小肠上皮细胞自噬过程中的介导作用。... 详细信息

本项目旨在应用现代营养学、细胞系模型、蛋白免疫印迹、实时荧光定量PCR(RT-PCR)等技术手段,从细胞和分子水平探究ala-gln与仔猪小肠上皮细胞自噬之间的内在关系及阐明mTOR/p38MAPK信号通路在仔猪小肠上皮细胞自噬过程中的介导作用。研究结果将为揭示ala-gln调控仔猪小肠上皮细胞自噬的作用机制提供理论依据,并为ala-gln在仔猪饲料中的科学应用提供理论依据。试验一不同浓度ala-gln对仔猪小肠上皮细胞IPEC-1自噬的影响试验采用单因子设计,共设有6个处理,每个处理4个重复。在体外培养的各组IPEC-1细胞中分别添加终浓度为0、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2mM的ala-gln。采用MTT法制定IPEC-1细胞浓度标准曲线、生长曲线和检测细胞活力及待细胞生长到融合度到达80%-90%时收集细胞样品进行Western blot。结果表明:(1)所有添加ala-gln组的细胞生存率均极显著大于对照组(Pala-gln添加量的增加,LC3-Ⅱ蛋白的表达量呈现先增后减的趋势,当添加量为1.6mM时LC3-Ⅱ蛋白的表达量达到最大值且极显著高于其他组(Pala-gln添加量的增加,p62蛋白表达量呈现逐渐降低的趋势,且各组间差异极显著(Pala-gln添加量的增加,IPEC-1细胞的自噬逐渐增强。以上结果提示:ala-gln能在一定程度上提高IPEC-1细胞的生存率,同时ala-gln能够增强IPEC-1细胞的自噬。试验二ala-gln调节IPEC-1细胞自噬的mTOR和p38MAPK信号通路研究本试验以IPEC-1细胞为体外细胞模型,采用MTT法检测不同浓度mTOR和p38MAPK信号通路特异性抑制剂雷帕霉素(Rapamycin RAPA)和SB203580对IPEC-1细胞活力的影响;然后采用Western blot方法检测添加特异性抑制剂后对mTOR和p38MAPK信号通路相关蛋白及自噬相关蛋白的影响,从而研究mTOR和p38MAPK信号通路介导ala-gln对仔猪小肠上皮细胞自噬的影响。结果显示,(1)添加0.11μM RAPA组与对照组之间的细胞活力无差异(P>0.05),随着RAPA添加量逐渐增加,细胞活力逐渐下降,且各组间差异极显著(Pala-gln浓度增加,mTOR、LC3-Ⅱ蛋白表达量极显著升高(Pala-gln与RAPA对LC3-Ⅱ、p62蛋白表达量的交互作用极显著(Pala-gln添加量的增加,p-p38MAPK、LC3-Ⅱ蛋白表达量极显著增加(Pala-gln与SB203580对LC3-Ⅱ、p62的蛋白表达量分别有极显著交互作用(Pala-gln对IPEC-1细胞自噬的影响,mTOR信号通路能够抑制IPEC-1细胞自噬的发生,p38MAPK信号通路可能促进IPEC-1细胞的自噬的发生。试验三ala-gln对IPEC-1细胞mTOR信号通路下游信号分子及其相关基因表达的影响采用单因子试验设计,共设6个处理,每个处理3个重复。在体外培养的各组IPEC-1细胞中分别添加终浓度为0、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2mM的ala-gln。运用Western blot、荧光定量PCR技术检测不同浓度ala-gln对mTOR信号通路的影响。结果表明:(1)在mTOR信号通路中,添加ala-gln后,p-mTOR蛋白的表达量极显著降低(Pala-gln

关键词： ala-gln IPEC-1 自噬 mTOR信号通路调节作用

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ala-gln对断奶仔猪小肠黏膜屏障功能和吸收功能的调控作用

Ala-Gln对断奶仔猪小肠黏膜屏障功能和吸收功能的调控作用

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作者：邓宸玺江西农业大学

学位级别：硕士

本项目旨在应用现代技术手段，探讨ala-gln调控仔猪小肠黏膜屏障功能和吸收功能的作用机理，研究结果将为指导ala-gln在仔猪饲料中的科学应用提供理论依据。试验一ala-gln对断奶仔猪生长性能、小肠黏膜形态结构与功能的影响试验选取10... 详细信息

本项目旨在应用现代技术手段，探讨ala-gln调控仔猪小肠黏膜屏障功能和吸收功能的作用机理，研究结果将为指导ala-gln在仔猪饲料中的科学应用提供理论依据。试验一ala-gln对断奶仔猪生长性能、小肠黏膜形态结构与功能的影响试验选取100头遗传背景和体重相近的21日龄断奶去势大白公仔猪，采用单因子试验设计，按完全随机区组法分为4个处理，每个处理5个重复，每个重复5头仔猪。各处理仔猪分别饲喂基础饲粮、基础饲粮＋0.15%ala-gln、基础饲粮＋0.30%ala-gln、基础饲粮＋0.45%ala-gln的试验饲粮。从试验开始到结束，每天记录仔猪腹泻头数，每周对各重复的仔猪进行空腹称重，并记录饲料消耗量，计算采食量、日增重以及料重比。同时，于试验第7、14、21天从每个重复选取1头仔猪进行屠宰，采集血清、小肠黏膜、小肠粘液以及小肠肠段，用于测定血清二胺氧化酶（DAO）、小肠黏膜磷脂酶A2（cPLA2）、小肠黏液溶菌酶活性及绒毛形态，并观察空肠绒毛超微结构。结果表明：（1）日粮中添加ala-gln能显著改善断奶仔猪的平均日增重、料重比及腹泻率。与对照组相比，21-28、28-35日龄试验组仔猪日采食量和日增重均获显著提高（Pala-gln极显著提高了21-28日龄仔猪的日增重（Pala-gln，21-28、28-35、35-42日龄仔猪的腹泻率和腹泻指数均显著低于对照组（Pala-gln可有效提高仔猪十二指肠、空肠、回肠的绒毛高度和V/C，降低隐窝深度。其中，0.15%、0.30%ala-gln组的效果最为明显（Pala-gln处理组仔猪空肠绒毛整齐度良好，尤其以0.30%ala-gln组效果最明显。（3）0.30%ala-gln显著降低了35日龄仔猪血清的DAO活性（Pala-gln显著降低了42日龄仔猪的DAO活性（Pala-gln添加水平的增加，42日龄仔猪cPLA2的含量呈线性增加趋势（Pala-gln组cPLA2显著高于对照组（Pala-gln可降低仔猪血清DAO活性、提高小肠黏膜cPLA2和黏液溶菌酶活性，改善小肠绒毛形态结构，进而促进仔猪小肠的黏液屏障功能，并提高仔猪的生长性能。试验二ala-gln对断奶仔猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白Occludin定位与表达的影响本研究旨在应用仔猪小肠上皮细胞系IPEC-1为模型，探讨丙氨酰-谷氨酰胺二肽（ala-gln）对仔猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白Occludin定位与表达的影响，进而为揭示ala-gln促进仔猪小肠黏膜屏障功能的作用机制提供理论依据。试验选取同代IPEC-1细胞接种至6孔细胞培养板，用含0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0mMala-gln的高糖DMEM进行培养，待细胞生长融合达70%以上时进行免疫荧光定位和Western blot。结果表明：（1）不含ala-gln的对照组细胞可见其胞质内团状的阳性荧光染色，而细胞间连接处阳性荧光染色不明显;随着ala-gln含量的增加，细胞间连接处阳性荧光信号逐渐增强，细胞轮廓更加完整，而胞质内荧光信号逐渐减弱。（2）各ala-gln处理组IPEC-1细胞紧密连接蛋白Occludin的表达量均显著高于对照组（Pala-gln含量的升高，Occludin的表达量呈现先增后减的趋势，添加量为2mM时Occludin的表达量达到峰值，显著高于其它处理组（Pala-gln可以增加IPEC-1细胞紧密连接蛋白Occludin的表达，促进小肠上皮细胞间紧密连接结构的形成。试验三ala-gln对断奶仔猪小肠黏膜二糖酶活性及钠葡萄糖转运蛋白SGLT1、GLUT2mRNA表达的影响试验选取100头遗传背景和体重相近的21日龄断奶去势大白公仔猪，采用单因子试验设计，按完全随机区组法分为4个处理，每个处理5个重复，每个重复5头仔猪。各处理仔猪分别饲喂基础饲粮、基础饲粮＋0.15%ala-gln、基础饲粮＋0.30%ala-gln、基础饲粮＋0.45%ala-gln的试验饲粮。于试验第7、14、21天从每个重复选取1头仔猪进行屠宰，取十二指肠、空肠和回肠黏膜样品，分别测定Na+/K+-ATP酶、乳糖酶、麦芽糖酶及蔗糖酶的活性，并采用荧光定量RT-PCR方法测定钠葡萄糖转运蛋白（SGLT1）和葡萄糖转运蛋

关键词：仔猪 ala-gln 小肠屏障功能吸收功能

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ala-gln对断奶仔猪氧化应激的调节作用及其机制初步研究

Ala-Gln对断奶仔猪氧化应激的调节作用及其机制初步研究

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作者：辛向荣江西农业大学

学位级别：硕士

本项研究将通过应用现代营养学、病理学、氧化应激模型、细胞系模型、实时荧光定量PCR（RT-PCR）、免疫荧光等技术，进行体内与体外试验，同时结合现今临床医学研究进展，从细胞与分子水平探讨ala-gln对断奶仔猪机体内抗氧化能力的影响... 详细信息

本项研究将通过应用现代营养学、病理学、氧化应激模型、细胞系模型、实时荧光定量PCR（RT-PCR）、免疫荧光等技术，进行体内与体外试验，同时结合现今临床医学研究进展，从细胞与分子水平探讨ala-gln对断奶仔猪机体内抗氧化能力的影响，掌握ala-gln与仔猪肠上皮细胞自噬关系，进而为初步揭示ala-gln对断奶仔猪氧化应激调节作用机理和研究新思路提供理论依据。试验一ala-gln对氧化应激仔猪机体抗氧化能力的影响试验选取24头健康状况良好、胎次相近、（21±2）日龄断奶仔猪，按照体重相近原则随机分成2个组，每组12个重复，每个重复1头猪。分别饲喂基础日粮、基础日粮＋0.3%ala-gln的试验日粮。饲喂7天后，再将每个日粮处理组仔猪按照体重相近原则随机分成两个组即应激组和非应激组，应激组腹腔注射8mg/kg（BW）Diquat，非应激组注射等量的灭菌生理盐水。应激后继续饲养7天，试验期共14d。试验第14d早上仔猪前腔静脉采血，分离血清，并屠宰所有重复组断奶仔猪，采集空肠、肝脏、脾脏样品。试验结果表明：（1）在氧化应激状态下，断奶仔猪日粮中添加添加0.30%ala-gln提高了血清中gln和GSH含量和T-AOC（Pala-gln增加了7～14d空肠组织中GSH-Px和T-SOD活力和T-AOC（Pala-gln增强了7～14d肝脏组织中GSH-Px（Pala-gln使7～14d空肠绒毛高度提高（Pala-gln能够通过提高抗氧化物酶活，改善氧化应激对空肠、肝脏和脾脏的损伤。（6）0.30%ala-gln使肝脏中GPx4mRNA表达量提高了166.7%（Pala-gln可以通过提高机体组织中gln和GSH含量，增强抗氧化物酶GSH-Px、SOD活力及其相应表达水平，提高组织总抗氧化能力，降低过氧化产物MDA含量，减缓氧化应激对断奶仔猪机体组织的损伤。试验二ala-gln对氧化应激状态下仔猪淋巴细胞抗氧化作用试验采用单因子试验设计，分离培养仔猪外周血淋巴细胞，向细胞培养基中添加6个ala-gln水平（0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0mM），之后加入终浓度为400μM H2O2诱导氧化应激，试验共设6个处理，每个处理至少8个重复。结果表明：（1）氧化应激条件下，添加ala-gln能够提高淋巴细胞GSH-Px和T-SOD活力（Pala-gln添加水平的提高而提高（Pala-gln添加水平增加而提高（Pala-gln能够提高氧化应激状态淋巴细胞转化率，同时提高外周血淋巴细胞中抗氧化物酶GSH-Px、SOD活力，增强抗氧化能力，降低MDA产生，促进细胞因子分泌，减缓氧化应激对外周淋巴系统的损伤，提高免疫力。试验三H2O2对猪小肠上皮细胞氧化应激的诱导作用采用单因子试验设计，试验共7个处理，即在离体培养的猪小肠上皮细胞（Intestinal Porcine Epithelial Cells，IPEC-1）中分别加入终浓度0、50、100、200、400、800、1600μM的H2O2，每个处理6个重复。结果表明：（1）当H2O2浓度为400μM时，细胞活力仅为对照组的49.2%（P0.05）。（2）添加H2O2诱导氧化应激降低了IPEC-1GSH-Px和SOD活性（P0.05）。通过本试验得出H2O2能通过降低IPEC-1活力和抗氧化酶活性，提高MD

关键词： ala-gln 氧化应激断奶仔猪调节作用机制

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ala-gln对断奶仔猪体液免疫及肠黏膜细胞免疫的调控作用

Ala-Gln对断奶仔猪体液免疫及肠黏膜细胞免疫的调控作用

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作者：叶亚玲江西农业大学

学位级别：硕士

本研究以21日龄早期断奶仔猪为试验对象，研究了ala-gln对仔猪体液免疫及肠黏膜细胞免疫的调节作用，并以仔猪小肠上皮细胞（IPEC-1）为模型探讨了ala-gln对仔猪小肠上皮细胞增殖与凋亡的调控机制。试验一：ala-gln对断奶仔猪外周血细... 详细信息

本研究以21日龄早期断奶仔猪为试验对象，研究了ala-gln对仔猪体液免疫及肠黏膜细胞免疫的调节作用，并以仔猪小肠上皮细胞（IPEC-1）为模型探讨了ala-gln对仔猪小肠上皮细胞增殖与凋亡的调控机制。试验一：ala-gln对断奶仔猪外周血细胞因子、免疫器官细胞因子及T淋巴细胞亚群的调节作用本试验采用单因子试验设计，选用遗传背景和体重相近（6.7±0.9kg）、21±2日龄断奶的长白×大白去势仔猪100头，按完全随机区组设计分为4处理，每个处理设5个重复，每个重复5头仔猪。各处理仔猪饲粮为在基础饲粮基础上分别添加0%、0.15%、0.30%和0.45%ala-gln。试验期为21d。于试验第7、14、21d从每个重复随机选取1头接近平均体重的仔猪进行前腔静脉采血并屠宰。采集外周血液及免疫器官用于测定细胞因子含量和外周T淋巴细胞亚群分布表达以探讨ala-gln对断奶仔猪体液免疫的影响。结果显示，（1）饲粮中添加0.15%、0.30%ala-gln提高了仔猪断奶后第7d血液中ALB、TP、免疫球蛋白IgA、IgG的含量（Pala-gln组仔猪在断奶后第14d TP、IgA、IgG含量也显著高于对照组（Pala-gln均可显著降低血清中细胞因子IL-6水平（Pala-gln显著提高了仔猪IL-2、TNF-α水平，0.15%ala-gln显著降低IL-5的水平（Pala-gln添加量呈二次曲线变化规律，0.45%ala-gln组IL-5显著高于对照组（Pala-gln使仔猪脾脏、胸腺中IL-10水平大幅提高（Pala-gln添加组脾脏、胸腺中的TNF-α水平显著低于对照组（Pala-gln可在一定程度上增加外周血T淋巴细胞亚群CD4+表达并降低CD8+的表达。各试验处理组仔猪在断奶后第7dCD4+/CD8+比值显著高于对照组（Pala-gln在断奶后第14、21天显著提高仔猪CD4+/CD8+比值（Pala-gln可提高仔猪血液中免疫球蛋白、抗炎因子的水平同时降低炎性因子的水平，增强仔猪的免疫功能，进而缓解早期断奶应激。试验二：ala-gln对断奶仔猪小肠黏膜固有层SIgA浆细胞数量、SIgA及黏膜中细胞因子的含量的影响试验设计同试验一。于试验第7、14、21d，从每个重复选取1头接近平均体重的仔猪屠宰。采集小肠肠段、小肠黏膜以分析小肠黏膜固有层SIgA浆细胞表达及SIgA、黏膜中细胞因子的含量。结果显示，（1）饲粮中添加0.15%.45%ala-gln均显著提高仔猪断奶后第7、14、21d十二指肠以及空肠黏膜固有层SIgA浆细胞数量（Pala-gln组仔猪在断奶第14d空肠SIgA浆细胞数比对照组增加22.6%（Pala-gln显著提高断奶后第7、14d仔猪SIgA细胞数（Pala-gln添加量呈二次曲线增长规律。在断奶后第7天，0.30%ala-gln组仔猪SIgA含量与对照组相比极显著提高了70.4%（Pala-gln和0.30%ala-gln显著提高了SIgA的分泌量（Pala-gln添加0.15%和0.30%可显著性提高仔猪早期断奶后第7天黏膜细胞因子IL-2、IL-5的水平（Pala-gln添加量的增加，各组IL-6的含量呈线性增长趋势，且显著高于对照组（Pala-gln添加呈线性降低变化，以0.30%和0.45%添加组最低（Pala-gln可提高肠黏膜固有层SIgA浆细胞数量，黏膜SIgA分泌量及IL-2、IL-6含量，降低TNF-α水平，增强黏膜免疫应答，提高断奶仔猪肠道黏膜细胞免疫。试验三：ala-gln对仔猪小肠上皮细胞凋亡的影响本试验以仔猪小肠上皮细胞（IPEC-1）为体外细胞模型，在营养性缺乏gln条件下体外培养IPEC-1细胞以模拟断奶应激。经含0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0mMala-gln的培养基处理IPEC-1后，用流式细胞仪分析测定IPEC-1的凋亡率，采用Western Blot方法检测Caspa

关键词： ala-gln 断奶仔猪血液肠道黏膜免疫功能

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有氧运动联合ala-gln对2型糖尿病的干预作用及其机制

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中国运动医学杂志 2018年第4期37卷 323-327页

作者：盛卓娴金其贯刘霞武倩倩扬州大学体育学院扬州225127 湖南师范大学体育学院长沙410012 苏州丝绸中等专业学校苏州215228

目的:探讨有氧运动或/和ala-gln对2型糖尿病(T2DM)的干预作用、交互作用及其生化机制。方法:将SD大鼠在喂饲高脂膳食的基础上腹腔注射小剂量的STZ复制T2DM大鼠模型后,对T2DM大鼠进行8周的运动训练和/或补充ala-gln,检测空腹血糖(FBG)、... 详细信息

目的:探讨有氧运动或/和ala-gln对2型糖尿病(T2DM)的干预作用、交互作用及其生化机制。方法:将SD大鼠在喂饲高脂膳食的基础上腹腔注射小剂量的STZ复制T2DM大鼠模型后,对T2DM大鼠进行8周的运动训练和/或补充ala-gln,检测空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(INS)、C肽和胰高糖素样肽-1(GLP-1)含量。结果:(1)与正常大鼠相比,2型糖尿病鼠FBG含量和HOMA-IR显著升高(Pala-gln使FBG含量显著降低(Pala-gln对降低FBG含量和HOMA-IR以及升高血清C肽和GLP-1含量均无显著性的交互作用(P>0.05),但对升高血清INS含量具有显著性的交互作用(Pala-gln通过促进胰岛素的分泌降低T2DM大鼠的血糖水平,且有氧运动联合补充ala-gln对促进T2DM胰岛素的分泌具有协同效应。

关键词： 2型糖尿病有氧运动 ala-gln C肽胰高糖素样肽-1

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有氧运动联合ala-gln对2型糖尿病大鼠NAFLD形成的干预作用及其机制研究

有氧运动联合Ala-Gln对2型糖尿病大鼠NAFLD形成的干预作用及其机...

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作者：王海南扬州大学

学位级别：硕士

目的:(1)探讨有氧运动和ala-gln对T2DM大鼠非酒精性脂肪肝形成的干预作用与交互作用。(2)从肝组织中SREBP-1c/Cidea通路及其相关miRNA的变化,探讨运动和ala-gln干预T2DM大鼠脂肪肝形成的生物学机制。方法:选用雄性SD大鼠80只,随机抽取1... 详细信息

目的:(1)探讨有氧运动和ala-gln对T2DM大鼠非酒精性脂肪肝形成的干预作用与交互作用。(2)从肝组织中SREBP-1c/Cidea通路及其相关miRNA的变化,探讨运动和ala-gln干预T2DM大鼠脂肪肝形成的生物学机制。方法:选用雄性SD大鼠80只,随机抽取10只作为正常对照组(NC,n=10),平时不运动,标准饲料饲养。其余70只大鼠喂饲高脂膳食,6周后,在空腹状态下,注射小剂量的STZ(40mg/Kg),7天后,测试空腹血糖,当血糖达到11.1mmo1/L为建模成功,共52只符合T2DM的模型标准。再将建模成功的T2DM大鼠随机4组:糖尿病对照组(DMC,n=10)、糖尿病运动组(DME,n=10)、糖尿病+ala-gln组(DMAG,n=10)和糖尿病+ala-gln+运动组(DMEAG,n=10)。DMC组平时不运动,标准饲料饲养;运动锻炼采用60min无负重的游泳运动,每周6次;ala-gln在每次训练结束30min后灌服,补充剂量为1.5g/Kg体重,每周6次。8周后,检测各组大鼠血清中FBG、INS、TG、TC、LDL、GLP-1的含量及ALT活性,肝组织SREBP-1c和CideamRNA及其miR-122、miR-34a的表达,肝组织MDA、GSH的含量以及分别观察肝组织切片的形态结构和超微结构来判断脂肪肝的形成情况。结果:(1)与NC组相比,DMC组FBG、LDL显著升高(P0.05),血清GLP-1含量极显著降低(P0.05),血清INS、GLP-1含量有所升高,但无显著性差异(P>0.05);补充AJa-gln可使T2DM大鼠FBG含量显著降低(Pala-gln对升高T2DM大鼠血清INS含量有显著的交互作用(P0.05)。(2)光镜下与电镜下与NC组比较,DMC表现出不同程度的脂肪性空泡样变,部分肝小叶结构紊乱,肝窦变窄。DME大鼠肝细胞出现的脂滴空泡较少,肝细胞索紊乱变轻。DMAG组脂肪变性程度明显降低,肝小叶结构趋于正常。DMEAG大鼠较DME和DMAG大鼠的肝组织形态结构的改善更为明显,肝细胞窦趋向于正常,但仍可见少量脂滴空泡。同时,与NC组相比,DMC大鼠血清中ALT的活性显著升高(Pala-gln能显著降低ALT的活性(Pala-gln对降低血清中ALT的活性无显著的交互作用(P>0.05)。(3)与NC组相比,DMC大鼠肝组织中SREBP-1 c的mRNA表达量显著升高(P0.05),miR-122的表达量显著升高(Pala-gln使T2DM大鼠肝组织SREBP-1c mRNA、miR-34a的表达量极显著降低(P0.05),miR-122的表达量极显著升高(Pala-gln对降低T2DM大鼠肝组织Cidea mRNA、miR-34a和升高miR-122的表达无显著交互作用(P>0.05),但对降低肝中SREBP-1cmRNA的表达有显著的交互作用(P0.05),GSH含量极显著升高(Pgln使T2DM肝组织GSH含量极显著升高(P0.05);有氧运动联合ala-gln对降低T2DM肝组织MDA和升高GSH的含量均无显著性的交互作用(P>0.05)。结论:(1)本研究所复制的T2DM大鼠模型是成功的,单纯有氧运动或补充ala-gln可以促进T2DM大鼠胰岛素的分泌,降低FBG,而有氧运动联合ala-

关键词： 2型糖尿病脂肪肝有氧运动 ala-gln

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ala-gln对断奶仔猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白Occludin定位与表达的影响

Ala-Gln对断奶仔猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白Occludin定位与表达...

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中国畜牧兽医学会2013年学术年会

作者：邓宸玺叶亚玲游金明江西农业大学动物科技学院

本研究旨在应用仔猪小肠上皮细胞系IPEC-1为模型,探讨丙氨酰-谷氨酰胺二肽(ala-gln)对仔猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白Occludin定位与表达的影响,进而为揭示ala-gln促进仔猪小肠黏膜屏障功能的作用机制提供理论依据。试验选取同代IPEC-1... 详细信息

本研究旨在应用仔猪小肠上皮细胞系IPEC-1为模型,探讨丙氨酰-谷氨酰胺二肽(ala-gln)对仔猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白Occludin定位与表达的影响,进而为揭示ala-gln促进仔猪小肠黏膜屏障功能的作用机制提供理论依据。试验选取同代IPEC-1细胞接种至6孔细胞培养板,用含0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0mMala-gln的高糖DMEM进行培养,待细胞生长融合达70%以上时进行免疫荧光定位和Western blot。结果表明:(1)不含ala-gln的对照组细胞可见其胞质内团状的阳性荧光染色,而细胞间连接处阳性荧光染色不明显;随着ala-gln含量的增加,细胞间连接处阳性荧光信号逐渐增强,细胞轮廓更加完整,而胞质内荧光信号逐渐减弱。(2)各ala-gln处理组IPEC-1细胞紧密连接蛋白Occludin的表达量均显著高于对照组(Pala-gln含量的升高,Occludin的表达量呈现先增后减的趋势,添加量为2 mM时Occludin的表达量达到峰值,显著高于其它处理组(Pala-gln可以增加IPEC-1细胞紧密连接蛋白Occludin的表达,促进小肠上皮细胞间紧密连接结构的形成。

关键词： ala-gln 仔猪上皮细胞紧密连接 Occludin

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ala-gln对仔猪生长性能、肝脏及肌肉蛋白合成影响的研究

Ala-Gln对仔猪生长性能、肝脏及肌肉蛋白合成影响的研究

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中国畜牧兽医学会动物营养学分会第七届中国饲料营养学术研讨会

作者：张柏林林猛于长宁付亚楠李蛟龙高峰张林周光宏南京农业大学动物科技学院/江苏省动物源食品生产与安全保障重点实验室

本文旨在研究饲粮添加丙氨酰谷氨酰胺二肽(ala-gln)及游离丙氨酸(ala)+谷氨酰胺(gln)联合添加对仔猪生长性能、肝脏及肌肉蛋白合成的影响。选用初始体重为10.01 kg的杜×长×大三元杂交仔猪180头,随机分为3个处理,每个处理3个重复,每个... 详细信息

本文旨在研究饲粮添加丙氨酰谷氨酰胺二肽(ala-gln)及游离丙氨酸(ala)+谷氨酰胺(gln)联合添加对仔猪生长性能、肝脏及肌肉蛋白合成的影响。选用初始体重为10.01 kg的杜×长×大三元杂交仔猪180头,随机分为3个处理,每个处理3个重复,每个重复20头猪,试验期为28天。基础饲粮为玉米-豆粕型,饲粮参照NRC(2012)猪营养标准进行设计。为使饲粮氮平衡,对照组在基础饲粮的基础上添加0.62%的ala,而试验组分别在基础饲粮的基础上添加0.5%ala-gln及0.21%ala+0.34%gln。在试验结束当天,每个处理选取6头仔猪进行宰杀,分别采集血液、肝脏及骨骼肌样品。结果表明:(1)与对照组相比,饲粮添加ala-gln显著增加了仔猪的平均日增重(ADG,P0.05)。与此相反,与对照组相比,ala+gln并没有影响仔猪ADG,ADFI及F/G(P>0.05)。(2)在血液生化及激素水平方面,饲粮添加ala-gln及ala+gln对血浆葡萄糖(Glu)、胰岛素(insulin)及胰岛素样生长因子1(IGF-1)含量均没有影响(P>0.05)。(3)机体的蛋白合成受到insulin及IGF-1信号通路的调控。饲粮添加alagln显著增加了仔猪肝脏胰岛素受体(insulin receptor,IR)、胰岛素受体底物(insulin receptor substrate1,IRS-1)及Akt(又称蛋白激酶B)的mRNA表达水平(P0.05)。与肝脏中的结果不同,饲粮添加ala-gln不仅增加了骨骼肌中IR、IRS-1及Akt的mRNA表达水平(Pala+gln添加仅显著增加了骨骼肌中IGF-1及IGF-1R mRNA表达水平(P0.05)。这提示我们,ala-gln对肝脏及骨骼肌中IGF-1及胰岛素信号的作用存在部位表达的差异。(4)利用Western-blot技术对肝脏及肌肉中与蛋白合成相关靶蛋白表达的研究表明,饲粮添加ala-gln显著增加了肝脏及肌肉中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mFOR)的磷酸化水平(Pala+gln对于mTOR,4E-BP1及S6K1的磷酸化水平均没有影响(P>0.05)。结果提示,饲粮添加ala-gln能够提高仔猪的ADG及降低F/G,并且ala-gln通过调控mTOR通路促进了肝脏及肌肉的蛋白合成,但对肝脏及肌肉中蛋白合成的调控机制不同。

关键词： ala-gln 生长性能胰岛素 IGF-1 蛋白合成仔猪

来源： cnki会议 cnki会议评论

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