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miR-181a及其靶基因atg5在胃癌中的表达及临床意义

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胃肠病学和肝病学杂志 2016年第3期25卷 276-278页

作者：周艺聂玉强林泳杜艳蕾广州医科大学附属广州市第一人民医院消化内科广东广州510180

目的研究miR-181a及其靶基因atg5在人胃癌细胞株和胃癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系。方法体外培养人胃癌细胞株(MGC-803、SGC-7901、BGC-823)和正常胃黏膜细胞株(GSE-1),收集30例胃癌血清和手术切除的癌组织及癌旁正常组织,并... 详细信息

目的研究miR-181a及其靶基因atg5在人胃癌细胞株和胃癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系。方法体外培养人胃癌细胞株(MGC-803、SGC-7901、BGC-823)和正常胃黏膜细胞株(GSE-1),收集30例胃癌血清和手术切除的癌组织及癌旁正常组织,并以30名正常人血清标本为对照,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测血清、细胞株、组织中miR-181a及细胞株、组织中atg5 mRNA的表达情况。结果胃癌细胞株、组织、血液中miR-181a的表达较正常细胞、癌旁正常组织及正常人血清明显升高(P5);atg5 mRNA相对表达量在胃癌细胞株和胃癌组织中均分别低于正常胃黏膜细胞株和癌旁正常组织(P5)。在胃癌组织和癌旁正常组织中,miR-181a与atg5 mRNA表达呈负相关。结论 miR-181a在胃癌细胞株、胃癌组织和血清中显著高表达,提示其有望成为潜在的胃癌标志物。atg5在胃癌中低表达并与miR-181a表达呈负相关,提示其可能是miR-181a在胃癌中的潜在作用靶基因。

关键词：胃癌 miR-181a atg5 RT-PCR

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浙江医学 2018年第16期40卷 1807-1810页

作者：王钱虎杭州市第一人民医院中心实验室 310006

目的探讨自噬相关蛋白Beclin1、LC3-Ⅱ、atg5在前列腺腺癌(PCa)中的表达情况及其临床意义。方法收集60例PCa标本(观察组)和15例良性前列腺增生(BPH)标本15例(对照组)。应用免疫组化法检测PCa组织和BPH组织中Beclin1、LC3-Ⅱ、atg5的表... 详细信息

目的探讨自噬相关蛋白Beclin1、LC3-Ⅱ、atg5在前列腺腺癌(PCa)中的表达情况及其临床意义。方法收集60例PCa标本(观察组)和15例良性前列腺增生(BPH)标本15例(对照组)。应用免疫组化法检测PCa组织和BPH组织中Beclin1、LC3-Ⅱ、atg5的表达情况,比较两组间的差异;分析PCa组织中Beclin1、LC3-Ⅱ、atg5蛋白的表达情况与PCa的Gleason评分、血清PSA水平、淋巴结转移、骨转移等临床参数之间的关系。结果 PCa组织中Beclin1、LC3-Ⅱ阳性表达率(38.3%、33.3%)明显低于BPH组织(60.0%、53.3%),而PCa组织中atg5阳性表达率(83.3%)显著高于BPH组织(6.7%),差异均有统计学意义(均P5)。Beclin1与LC3-Ⅱ的表达呈正相关,两者与Gleason评分、血清PSA水平、淋巴结转移、骨转移有关(均P5),而与年龄无关(P>0.05)。atg5的表达与年龄、Gleason评分、血清PSA水平、淋巴结转移、骨转移均无关(均P>0.05)。结论自噬相关蛋白Beclin1、LC3-Ⅱ、atg5在PCa中的异常表达,提示自噬活动增强和自噬体形成增多在PCa发展过程中起着重要作用。

关键词：前列腺腺癌自噬 Beclin1 LC3-Ⅱ atg5

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中华内分泌外科杂志 2016年第4期10卷 329-332页

作者：王幼辉王锡恩彭敏张静浙江省宁波市鄞州人民医院中西医结合肿瘤科宁波315040

目的探讨自噬相关蛋白Bechnl、p62、atg5在浆液性卵巢癌中的表达及临床意义。方法选择2014年1月至2015年12月在浙江省宁波市鄞州人民医院中西医结合肿瘤科行手术切除并经病理确诊的浆液性卵巢癌标本50例为观察组，同期因子宫肌瘤需切除... 详细信息

目的探讨自噬相关蛋白Bechnl、p62、atg5在浆液性卵巢癌中的表达及临床意义。方法选择2014年1月至2015年12月在浙江省宁波市鄞州人民医院中西医结合肿瘤科行手术切除并经病理确诊的浆液性卵巢癌标本50例为观察组，同期因子宫肌瘤需切除正常卵巢标本10例为对照组，应用免疫组化法检测自噬相关蛋白Beclinl、p62、atg5蛋白表达水平结合卵巢癌临床参数分析。结果浆液性卵巢癌组织中Beclinl、atg5蛋白阳性表达率分别为38．0％、32．O％，均显著低于正常卵巢组织80．0％、70．O％；但浆液性卵巢癌组织中其p62蛋白阳性表达率72．0％，显著高于正常卵巢组织10．0％，差异有统计学意义（P〈0．05）。Beclinl、Ats5的表达与浆液性卵巢癌临床分期、细胞分化程度之间均显著相关（P〈0．05），而p62蛋白的表达与临床分期、淋巴结转移相关（P〈0．05）。结论自噬相关蛋白Beclinl、p62、atg5在浆液性卵巢癌中的异常表达，可致自噬功能减低和自噬体形成减少，可能在浆液性卵巢癌的发生、发展发挥重要作用。

关键词：浆液性卵巢癌自噬 Beclinl p62 atg5

自噬相关基因5(atg5)标签单核苷酸多态性与帕金森病的相关性研究

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中国实用神经疾病杂志 2010年第9期13卷 4-7页

作者：刘良芳陈煜森刘洲冼文川钟望涛赵斌许志恩刑永前广东医学院附属医院神经内科湛江524001

目的探讨中国粤西地区汉族人群自噬相关基因5(autophagy-related gene 5,atg5)标签单核苷酸多态性(TagSNP)rs17587319C/G多态性与帕金森病(PD)的关系。方法采用病例-对照研究,应用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性分析方法(PCR-RF... 详细信息

目的探讨中国粤西地区汉族人群自噬相关基因5(autophagy-related gene 5,atg5)标签单核苷酸多态性(TagSNP)rs17587319C/G多态性与帕金森病(PD)的关系。方法采用病例-对照研究,应用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性分析方法(PCR-RFLP)检测80例PD患者(病例组)和87例健康对照者(对照组)的atg5基因Tag SNP rs17587319C/G多态。结果病例组CC基因型为78.7%,对照组为58.6%,差异有统计学意义(P=0.005,OR=2.62,95%CI:1.32～5.19);C等位基因频率在病例组和对照组分别为89.4%和74.7%,差异有统计学意义(P=0.001,OR=2.85,95%CI:1.55～5.23);对照组中发现8例atg5基因Tag SNP rs17587319C/G的GG纯合子,而在病例组中未发现。结论 atg5基因TagSNP rs17587319C/G的C等位基因与CC基因型可能是PD的危险因素。

关键词： atg5 标签单核苷酸多态性(Tag SNP) 帕金森病

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抗人atg5单克隆抗体的制备与鉴定

西部医学 2013年第3期25卷 329-332页

作者：张现伟李志广章崇杰张小洪蒋小梅旷兴林魏大鹏罗志娟毕建虹四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室四川成都610041

目的制备抗人atg5单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法以人atg5重组蛋白作为免疫原免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗人atg5单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA、Western Blot、免... 详细信息

目的制备抗人atg5单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法以人atg5重组蛋白作为免疫原免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗人atg5单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA、Western Blot、免疫组化鉴定单克隆抗体的特性,并测定其效价、亚型及亲和力常数。结果成功筛选到一株能稳定分泌抗人atg5单抗的细胞株1E7B3H9,亚型鉴定重链为IgG2b,轻链为kappa链。ELISA法测定腹水抗体效价为1:4.096×105,抗体亲和力常数为7.309×108 mol/L;Western blot显示此单抗能特异性识别人子宫颈癌Hela细胞系中的天然人atg5蛋白;细胞免疫组化进一步显示atg5表达在细胞质中。结论成功制备了抗人atg5单克隆抗体,为进一步研究其与宫颈癌关系及在临床上的应用奠定了基础。

关键词： atg5 单克隆抗体 Hela细胞株宫颈癌

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自噬基因atg5的缺失对精子成熟的影响

中国药理学通报 2021年第2期37卷 227-233页

作者：张雪娣丁宁穆云萍李芳红赵子建广东工业大学生物医药学院广东广州510006

目的探讨自噬蛋白atg5在维持附睾生理功能及精子的成熟过程中发挥的作用。方法通过基因敲除技术构建附睾头4-5段主细胞atg5特异性敲除小鼠模型,根据基因型分为三组:对照组(野生型)、杂合敲除组以及纯合敲除组。8周龄时,做合笼实验并记... 详细信息

目的探讨自噬蛋白atg5在维持附睾生理功能及精子的成熟过程中发挥的作用。方法通过基因敲除技术构建附睾头4-5段主细胞atg5特异性敲除小鼠模型,根据基因型分为三组:对照组(野生型)、杂合敲除组以及纯合敲除组。8周龄时,做合笼实验并记录致孕率和产仔数,14周龄时通过精子动力分析仪检测小鼠精子活力和数量的变化,并通过病理组织染色观察小鼠附睾组织的形态学变化,以及通过Western blot和免疫荧光技术检测三组模型鼠中atg5蛋白表达和自噬通路变化情况。结果与对照组、杂合敲除组相比,纯合敲除组小鼠的附睾头4-5段主细胞atg5特异性敲除后,自噬标记蛋白LC3-Ⅰ以及p62得到积累,自噬过程成功阻断;但纯合敲除组小鼠的附睾组织形态、精子活力、精子数目、产仔率和致孕率均无变化。结论在正常条件下(无外界刺激),atg5特异性敲除导致附睾头4-5段的自噬过程阻断后,对小鼠附睾的生理功能和精子成熟过程没有影响。

关键词： atg5 自噬附睾精子不育生殖

大量摄入乙醇对大鼠海马区自噬相关蛋白atg5及LC3Ⅰ/Ⅱ的影响

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齐齐哈尔医学院学报 2019年第17期40卷 2113-2116页

作者：田华李公启张奇苑家鑫宋娟王明崔红霞齐齐哈尔医学院临床药理教研室黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院病理教研室黑龙江齐齐哈尔161006

目的探讨大量乙醇灌胃1~4天大鼠海马区内自噬相关蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ及atg5表达的动态过程。方法利用连续大量灌胃给予乙醇1~4天建立大鼠模型,分别为对照组、D1、D2、D3、D4共5组。D1、D2、D3、D4组用乙醇(25%W/V,5 g/kg)灌胃,D1组大鼠给予乙... 详细信息

目的探讨大量乙醇灌胃1~4天大鼠海马区内自噬相关蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ及atg5表达的动态过程。方法利用连续大量灌胃给予乙醇1~4天建立大鼠模型,分别为对照组、D1、D2、D3、D4共5组。D1、D2、D3、D4组用乙醇(25%W/V,5 g/kg)灌胃,D1组大鼠给予乙醇灌胃1天,D2组大鼠给予乙醇灌胃2天,D3组大鼠给予乙醇灌胃3天,D4组大鼠给予乙醇灌胃4天。每8小时灌胃一次。对照组给予等体积纯净水灌胃。利用血液乙醇浓度测定试剂盒检测各组大鼠血液中乙醇浓度后,采用Western Blot技术检测各组大鼠大脑海马区LC3Ⅰ/Ⅱ,atg5蛋白的表达情况并进行统计学分析。结果 D1~D4组大鼠血液乙醇浓度均大于300 mg/d L,说明大鼠均处于严重醉酒状态。D1~D4组大鼠海马区的LC3Ⅱ蛋白的相对灰度值分别为(0.63±0.03)、(1.30±0.07)、(1.26±0.07)和(1.24±0.07),与对照组(0.46±0.02)相比,D2、D3、D4组均显著性上调(Patg5蛋白的相对灰度值分别为(1.12±0.06)、(0.54±0.08)、(0.55±0.16)和(0.75±0.04),与对照组(0.60±0.07)相比,D1组显著性上调(Patg5蛋白的表达激活自噬,从而增加自噬小体LC3Ⅱ的积累,是亚慢性乙醇脑损伤大鼠海马脑区自噬活性增强的可能机制之一。

关键词：乙醇血液乙醇浓度自噬 LC3Ⅰ/Ⅱ atg5

基于自噬基因atg5和Beclin1探讨益气活血方对大鼠心肌缺血损伤的保护作用

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现代中药研究与实践 2021年第3期35卷 21-24页

作者：顾媛媛陈媚王连芝张淑香尚艳琦梁慧周忠光黑龙江中医药大学中医药研究院黑龙江哈尔滨150040

目的探讨益气活血方是否通过调节自噬相关基因Beclin1和atg5的表达调控发挥对心肌缺血的保护作用。方法将60只健康SD大鼠随机分成空白组、模型组、地奥心血康组、益气活血方高、中、低剂量组,通过腹腔注射异丙肾上腺素制备急性心肌缺血... 详细信息

目的探讨益气活血方是否通过调节自噬相关基因Beclin1和atg5的表达调控发挥对心肌缺血的保护作用。方法将60只健康SD大鼠随机分成空白组、模型组、地奥心血康组、益气活血方高、中、低剂量组,通过腹腔注射异丙肾上腺素制备急性心肌缺血损伤模型。观察心肌梗死面积、心肌细胞超微结构,检测自噬基因atg5、Beclin1 mRNA和凋亡基因Caspase-3 mRNA的表达。结果益气活血方高、中剂量组各项指标均明显高于模型组,益气活血方各剂量组大鼠心肌组织中atg5、Beclinl mRNA表达量均升高(P5),Caspase-3mRNA表达量降低(P5)。结论益气活血方可以通过上调自噬相关基因atg5、Beclin1 mRNA表达,增强细胞自噬,下调Caspase-3mRNA表达,从而发挥对心肌缺血的保护作用。

关键词：益气活血方心肌缺血自噬 Beclin1 atg5

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实用癌症杂志 2021年第10期36卷 1601-1604,1613页

作者：薛小芳岳会珠何涯丽南阳南石医院 473000

目的探讨自噬相关蛋白atg5和Beclin-1在宫颈癌组织中的表达及与临床病理的相关性。方法选取60例宫颈癌患者作为研究对象,将其分为恶性组,取同期60例良性子宫肌瘤或子宫腺肌瘤行全子宫切除手术的患者作为良性组,另取同期60例健康者的子... 详细信息

目的探讨自噬相关蛋白atg5和Beclin-1在宫颈癌组织中的表达及与临床病理的相关性。方法选取60例宫颈癌患者作为研究对象,将其分为恶性组,取同期60例良性子宫肌瘤或子宫腺肌瘤行全子宫切除手术的患者作为良性组,另取同期60例健康者的子宫颈组织标本进行分析,将其分为对照组。分析三组患者自噬相关基因5及Beclin1两种蛋白的表达情况、阳性率以及临床病理情况;应用回归分析,分析自噬相关基因5及Beclin1两种蛋白与宫颈癌病理的相关性。结果三组患者atg5 mRNA及Beclin-1 mRNA表达情况对比差异显著,恶性组明显低于良性组和对照组(P5);三组患者atg5阳性与阴性患者例数对比差异显著,Beclin1阳性与阴性患者例数对比差异显著(P5);60例宫颈癌患者中,atg5阳性与atg5阴性患者月经状态、年龄、肿瘤大小对比无明显差异(P>0.05),两组患者的临床分期、淋巴结转移、组织分化程度对比差异显著(P5),Beclin1阳性与Beclin1阴性患者月经状态、年龄、肿瘤大小对比无明显差异(P>0.05),两组患者的临床分期、淋巴结转移、组织分化程度对比差异显著(P5);Spearman相关分析显示,月经状态、年龄、肿瘤大小与自噬相关基因Beclin1和atg5不相关(P>0.05),临床分期、淋巴结转移和组织分化程度与自噬相关基因Beclin1和atg5呈负相关(P5)。结论自噬相关基因5(atg5)及Beclin-1两种蛋白在宫颈癌患者的癌组织中表达低于良性肿瘤患者和健康人士,随着患者病情加重,自噬相关基因5(atg5)及Beclin-1两种蛋白表达明显降低,自噬相关基因5(atg5)及Beclin-1与宫颈癌患者的临床分期、淋巴结转移和组织分化程度呈负相关,因此可以应用自噬相关基因5(atg5)及Beclin1来判断宫颈癌患者病情的严重程度。

关键词：宫颈癌自噬相关基因 atg5 Beclin-1 临床病理