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中国病理生理杂志 2016年第8期32卷 1532-1533页

作者：李晓红杨翔宇吴岳恒单志新潘宇雷和平林秋雄余细勇华南结构性心脏病重点实验室广东省心血管病研究所广东省人民医院广东省医学科学院广州医科大学药学院

目的:组蛋白乙酰化修饰是表观遗传调控中重要的调控方式之一,组蛋白乙酰化与基因活化关系密切,其中一个重要环节是被特定阅读器结构域所识别,从而招募染色质调控因子到特定区域,协同完成基因表达调控。af9是这类阅读器之一,其是否参与... 详细信息

目的:组蛋白乙酰化修饰是表观遗传调控中重要的调控方式之一,组蛋白乙酰化与基因活化关系密切,其中一个重要环节是被特定阅读器结构域所识别,从而招募染色质调控因子到特定区域,协同完成基因表达调控。af9是这类阅读器之一,其是否参与心脏发育分化还未清楚。因此本研究探讨心脏转录因子联合af9是否对心脏祖细胞的产生具有促进作用。方法:采用蛋白重组表达方式获得心脏转录因子GATA4、NKX2.5、TBX5(GNT)及af9,结合纳米转导技术高效转导到目的细胞BMSCs细胞核内,检测细胞毒性,CPCs的生成效率,组蛋白H3K9乙酰化情况,Ch IP-PCR技术检测H3K9ac的作用靶点。结果:心脏转录因子GNT联合af9能提高BMSCs重编程生成CPCs的效率,在200μg/L/蛋白的工作浓度下,细胞生长良好,与GNT组相比,联合af9组的H3K9ac表达明显增加,Ch IP-PCR的结果显示H3K9ac富集在MEF2C的启动子区域。结论:心脏转录因子组合GNT联合表观遗传调控因子af9通过纳米-蛋白转导方式,能高效重编程BMSCs得到CPCs,af9通过上调H3K9ac来促进重编程过程。

关键词：祖细胞 GNT af9 重编程 BMSCs 心脏

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miR-143通过抑制af9调控SKM-1细胞增殖和凋亡

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第三军医大学学报 2018年第20期40卷 1826-1832页

作者：崔佳奇魏春梅邓琳丽王利重庆医科大学附属第一医院血液内科重庆400016

目的探讨miR-143在骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)中的表达情况及af9对人骨髓增生异常综合征细胞株SKM-1增殖和凋亡的影响。方法利用实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测收集的33位MDS/AML患者以及11位健康人(健康对... 详细信息

目的探讨miR-143在骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)中的表达情况及af9对人骨髓增生异常综合征细胞株SKM-1增殖和凋亡的影响。方法利用实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测收集的33位MDS/AML患者以及11位健康人(健康对照)的骨髓标本中miR-143的表达;细胞实验分为过表达组(SKM-1细胞感染含LV-hsa-miR-143的慢病毒载体)、低表达组(SKM-1细胞感染含LV-hsa-miR-143-inhibitors的慢病毒载体)和阴性对照组(SKM-1细胞感染含空病毒LV-control的慢病毒载体),分别采用CCK-8法、流式细胞仪检测各组SKM-1细胞增殖、周期和凋亡情况;双荧光素酶报告基因检测miR-143对下游靶基因af9在转录水平的影响;Western blot测定miR-143对下游靶基因af9蛋白表达水平的影响。结果与健康对照比较,MDS患者的miR-143相对表达水平明显降低(P 9),明显低于阴性对照组(P 94),明显高于阴性对照组(P 92±3. 58)%,明显高于阴性对照组(P 9. 73±2. 44)%,明显低于阴性对照组(P 9. 80±2. 53)%,明显高于阴性对照组(P af9 3’-UTR野生型的报告基因活性;低表达组af9蛋白表达水平显著高于阴性对照组(P af9。

关键词：骨髓增生异常综合征 miR-143 af9 细胞凋亡细胞周期

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抗人乳腺癌单克隆抗体af9的制备及鉴定

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华西医科大学学报 1994年第4期25卷 380-383页

作者：曾文杰蔡桂英蔡美英陈佩珍汪成孝魏大鹏陈国经华西医科大学生物化学教研室

作者用乳腺癌原发灶细胞膜作免疫原，制备出抗人乳腺癌单克隆抗体ＡＦ９（ＩｇＧ＿１）。初步实验结果表明其识别的抗原为糖蛋白，同时含有脂类成分。免疫印迹的结果表明，ＡＦ９识别的抗原有４条带，分子量分别为５１、５６、６７、７... 详细信息

作者用乳腺癌原发灶细胞膜作免疫原，制备出抗人乳腺癌单克隆抗体ＡＦ９（ＩｇＧ＿１）。初步实验结果表明其识别的抗原为糖蛋白，同时含有脂类成分。免疫印迹的结果表明，ＡＦ９识别的抗原有４条带，分子量分别为５１、５６、６７、７３ｋｄ。免疫组化结果显示，ＡＦ９对乳腺癌特异性较高（１９／２０例），与直肠癌、卵巢癌、胃癌、肺癌及肝癌等有一定的交叉反应，但不与所检的正常乳腺、甲状腺、胃、直肠、肛门皮肤及其它肿瘤反应。

关键词：乳腺癌单克隆抗体肿瘤相关抗原 af9 鉴定

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醛固酮对豚鼠耳蜗功能及af9表达的调控作用

醛固酮对豚鼠耳蜗功能及Af9表达的调控作用

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作者：秦丽重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:梅尼埃病(MD)的典型病理特征是内淋巴积水(EH)。醛固酮能诱导EH形成,但其与MD的关系尚未阐明。因此,本实验通过检测豚鼠耳蜗组织中af9蛋白的表达情况,并且分析醛固酮对耳蜗功能及af9表达的调控作用,从而探讨醛固酮与af9分子在内淋... 详细信息

目的:梅尼埃病(MD)的典型病理特征是内淋巴积水(EH)。醛固酮能诱导EH形成,但其与MD的关系尚未阐明。因此,本实验通过检测豚鼠耳蜗组织中af9蛋白的表达情况,并且分析醛固酮对耳蜗功能及af9表达的调控作用,从而探讨醛固酮与af9分子在内淋巴积水中的作用机制。方法:将30只豚鼠随机分为两组,对照组腹腔注射0.05ml生理盐水,实验组腹腔注射醛固酮***-1.d-1(0.05ml),各5天。1月后通过听性脑干反应(ABR)检测内耳的功能学改变;应用苏木素-伊红染色(HE)检测两组内耳组织的形态学改变,利用免疫组织化学(IHC)及免疫荧光(IF)检测af9蛋白在耳蜗组织中的定位表达,采用Western blot和荧光定量PCR方法从蛋白和mRNA水平上检测醛固酮作用前后af9分子表达水平的变化。结果:醛固酮作用后,ABR提示实验组(23.33±2.38 d B SPL)听力阈值较对照组(18.33±2.73 dB SPL)升高(Paf9蛋白在血管纹、前庭膜、螺旋缘、Corti器、螺旋神经节均有表达,并且Western blot显示实验组耳蜗af9蛋白表达量(0.75±0.15)低于对照组(1.06±0.08);荧光定量PCR显示实验组耳蜗af9mRNA(0.36±0.07)表达量低于对照组(1.00±0.00),差异均有统计学意义(Paf9分子的表达。结论:耳蜗组织中存在与Na+代谢相关的af9分子,醛固酮对内淋巴的调控可能与耳蜗af9分子密切相关,即醛固酮通过下调af9的表达来参与内淋巴代谢,形成内淋巴积水,进而影响耳蜗功能。

关键词：醛固酮 af9 内淋巴积水梅尼埃病耳蜗功能

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Etoposide-induced apoptosis results in chromosome breaks within the <i>af</i>9 gene: Its implication in chromosome rearrangement in leukaemia

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Advances in Bioscience and Biotechnology 2012年第6期3卷 686-694页

作者： Cynthia Patricia Nicholas Sai-Peng Sim Faculty of Medicine and Health Sciences Universiti Malaysia Sarawak Kota Samarahan Malaysia

Treatment with etoposide (VP-16) has been associated with translocation of the mixed lineage leukaemia (MLL) gene seen in treatment-related acute myeloid leukaemia (t-AML). Among the different partner genes, af9 is the most common partner gene of MLL. af9 shares similar structural element with the MLL gene. Various mechanisms of translocation have been proposed for the MLL gene, including apoptosis, particularly the apoptotic nuclease. In the current study, we show that VP-16 induced cleavage of the af9 gene in both leukaemic cells and cultured normal blood cell. All the breakpoints were mapped within the BCR1 of the af9 gene. af9 cleavages in leukaemic cells were abolished by pre-treatment with caspase inhibitor (Z-DEVD-FMK), suggesting the involvement of caspase-activated DNase (CAD). The absence of af9 cleavage in K562 cells further supported the involvement of apoptosis. However, af9 cleavages in cultured normal blood cell were not eliminated by caspase inhibitor. The possible role of CAD and other apoptotic nucleases/effectors that could be involved in af9 translocation are discussed.

关键词： Etoposide (VP-16) Apoptosis af9 Chromosome Breaks Leukaemia

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