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作者：赵唯洁南通大学

学位级别：硕士

目的探索乙酰化8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1(acetylated 8-oxoguanine dna glycosylase 1,Ac-OGG1)与年龄相关性白内障(age-related cataract,ARC)的关系,并探讨在ARC病理过程中,组蛋白乙酰基转移酶p300和组蛋白去乙酰化酶SIRT1对8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1(8-oxoguanine dna glycosylase 1,OGG1)切除8-氧鸟嘌呤(8-oxo-guanine,8-oxoG)能力的影响。方法本实验为临床病例对照研究。ARC组由在南通大学附属医院眼科诊断为ARC并接受白内障手术的患者组成,包括皮质性ARC、核性ARC、后囊下性ARC各80例80眼;对照组包括(1)南通大学附属医院眼科诊断为玻璃体视网膜病,因年龄或手术等因素需在玻璃体切除手术中同时作透明晶状体摘除者;(2)南通大学附属医院红十字眼库接受的中老年人身后捐献的新鲜眼球。对照组共80例80眼。手术显微镜下实施前囊膜连续环形撕囊时获取晶状体前囊膜。免疫荧光法观察8-oxoG,Ac-OGG1,OGG1,p300和SIRT1在人类晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)中的细胞定位及其表达变化。Western blot检测Ac-OGG1和OGG1蛋白质表达水平。免疫共沉淀法分析在LECs中OGG1与p300或SIRT1之间特异性结合的水平变化。结果ARC组LECs中8-oxoG的阳性细胞数明显多于对照组(P8-oxoG的聚集可能与OGG1乙酰化水平的下降有关。(3)OGG1乙酰化水平的下降可能是由于p300与OGG1相互结合能力的减弱和/或SIRT1与OGG1相互结合能力的增强所致。

关键词：年龄相关性白内障乙酰化 p300 SIRT1 表观遗传学 8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1

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汽油尾气致大鼠肺组织氧化损伤机制的研究

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四川大学学报（医学版） 2009年第1期40卷 11-14,47页

作者：车望军王玲罗擎英吴媚张遵真四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室成都610041 昆明市疾病预防控制中心

目的探讨汽油尾气对大鼠肺dna损伤、8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶-1(OGG1)表达和细胞超微结构的影响。方法将汽油尾气的颗粒物、冷凝物和半挥发性有机物的二氯甲烷提取物以0、5.6、16.7和50.0L/kg的剂量经气管滴注染毒SD大鼠,每周一次,共4次,... 详细信息

目的探讨汽油尾气对大鼠肺dna损伤、8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶-1(OGG1)表达和细胞超微结构的影响。方法将汽油尾气的颗粒物、冷凝物和半挥发性有机物的二氯甲烷提取物以0、5.6、16.7和50.0L/kg的剂量经气管滴注染毒SD大鼠,每周一次,共4次,末次染毒24h后处死动物,用彗星实验检测肺组织细胞中dna单链断裂水平,免疫组化检测肺组织中OGG1的含量,并在电镜下观察各型肺细胞超微结构的变化。结果在汽油尾气16.7和50.0L/kg组,肺组织细胞的拖尾率明显高于溶剂对照组(Pdna单链断裂、OGG1蛋白含量增加和线粒体的损伤。

关键词：汽油尾气 dna损伤线粒体 8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1 肺

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OGG1基因在年龄相关性白内障患者晶状体中的表达及甲基化研究

OGG1基因在年龄相关性白内障患者晶状体中的表达及甲基化研究

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作者：王勇南通大学

学位级别：硕士

目的探索参与年龄相关性白内障(age-related cataract,ARC)dna损伤后碱基清除修复途径(base excision repair,BER)的氧化损伤修复基因—8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(8-oxoguanine dna glycosylase 1,OGG1)在正常中老年人、ARC(皮质性)患者的晶状体皮质中的表达及第一外显子区甲基化状态,并分析其表达与dna甲基化的关系。方法本实验设计为临床病例对照研究。病例组为2013年3月-2013年9月在南通大学附属医院眼科诊断为ARC,LOCS III分级晶状体混浊程度为C4,并接受白内障手术的患者,共15例15眼;对照组为本院眼科诊断为玻璃体视网膜疾病,因年龄或手术等因素需要在玻璃体切除手术中同时作透明晶状体摘除者,及本院红十字眼库接受的中老年人身后捐献的新鲜眼球,共15例15眼,于手术中取得晶状体皮质。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)分析OGG1 m RNA表达水平,蛋白质免疫印迹(Western blot)分析蛋白质表达量,免疫荧光分析细胞内的蛋白质定位,甲基化特异性PCR法(BSP)检测OGG1基因的甲基化状态。SPSS17.0统计软件分析数据。结果RT-PCR及Western blot结果表明,与对照组相比,ARC患者晶状体皮质中OGG1 m RNA及蛋白质表达均下调(t=4.39,Pdna的修复功能,可作为ARC防治的新靶点。

关键词： 8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1 年龄相关性白内障晶状体皮质 dna甲基化表观遗传学

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香烟烟雾提取物对大鼠股四头肌细胞氧化损伤的研究

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国际呼吸杂志 2014年第13期34卷 1005-1009页

作者：杨士芳高兴林吴健李静广东省人民医院(广东省医学科学院)呼吸内科广东省老年医学研究所广州510080

目的研究经香烟烟雾提取物（CSE）刺激后大鼠股四头肌细胞8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量的变化以及细胞内活性氧（ROS）水平和8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1（OGG1）表达对8-OHdG含量变化的影响.方法用不同浓度CSE分别刺激大鼠股四头肌细胞2... 详细信息

目的研究经香烟烟雾提取物（CSE）刺激后大鼠股四头肌细胞8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量的变化以及细胞内活性氧（ROS）水平和8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1（OGG1）表达对8-OHdG含量变化的影响.方法用不同浓度CSE分别刺激大鼠股四头肌细胞24 h、48 h和72 h后,采用高效液相色谱-电化学法（HPLC-ECD）检测大鼠股四头肌细胞8-OHdG的含量,流式细胞术检测大鼠股四头肌细胞ROS水平,实时定量PCR（Realtime PCR）检测OGG1 mRNA水平,用Western blot检测OGG1蛋白水平.结果经相同CSE浓度分别刺激大鼠股四头肌细胞24 h、48 h和72 h后,大鼠股四头肌细胞中8-OHdG含量、ROS水平及OGG1 mRNA和蛋白水平差异均无统计学意义.但经不同浓度CSE刺激相同时间后,10.00％ CSE和20.00％CSE刺激组大鼠股四头肌细胞8-OHdG含量明显高于对照组和5.00％ CSE刺激组（P＜0.05）;大鼠股四头肌细胞内ROS水平、OGG1 mRNA和蛋白水平较对照组均明显升高（P＜0.05）;大鼠股四头肌细胞8-OHdG含量与其ROS水平呈明显正相关（r=0.746,P＝0.000）;经CSE刺激后,大鼠股四头肌细胞OGG1 mRNA和蛋白水平均高于对照组（P＜0.05）,但大鼠股四头肌细胞8-OHdG含量与其OGG1 mRNA和蛋白水平无明显相关（r=0.392,P＝0.536;r=0.297,P=0.426）.结论 CSE刺激可引起大鼠股四头肌细胞8-OHdG升高,8-OHdG含量与ROS水平有关,但与其修复酶OGG1表达水平无明显相关.

关键词：慢性阻塞性肺疾病骨骼肌功能障碍 8-羟基脱氧鸟苷 8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1

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香烟烟雾提取物致大鼠膈肌细胞氧化损伤

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中华老年多器官疾病杂志 2013年第10期12卷 774-777页

作者：杨士芳高兴林吴健广东省人民医院、广东省医学科学院、呼吸内科、广东省老年医学研究所广州510080

目的研究经香烟烟雾提取物（CSE）刺激后大鼠膈肌细胞8一羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量的变化以及细胞内活性氧（ROS）水平和8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1（OGGl）表达对***含量变化的影响。方法用不同浓度CSE分别刺激大鼠膈肌细胞24、48和72h... 详细信息

目的研究经香烟烟雾提取物（CSE）刺激后大鼠膈肌细胞8一羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量的变化以及细胞内活性氧（ROS）水平和8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1（OGGl）表达对***含量变化的影响。方法用不同浓度CSE分别刺激大鼠膈肌细胞24、48和72h后，采用高效液相色谱．电化学法（HPLC—ECD）检测大鼠膈肌细胞***的含量，流式细胞术检测大鼠膈肌细胞ROS水平，采用实时定量PCR检~IJOGG!mRNA水平，用Western印迹法检测OGGl蛋白水平。结果经相同CSE浓度分别刺激大鼠膈肌细胞24、48和72h后，大鼠膈肌细胞中8-OHdG含量、ROS水平及OGGlmRNA和蛋白水平均无明显差异。但经不同浓度CSE刺激相同时间后，10．00％CSE和20．00％CSE刺激组大鼠膈肌细胞8-OHdG含量明显高于对照组和5．00％CSE刺激组（P〈0．05）；大鼠膈肌细胞内ROS水平、OGGlmRNA和蛋白水平较对照组均明显升高（P〈0．05）；大鼠膈肌细胞8-OHdG含量与其ROS水平呈明显正相关（r=0．826，P：0．000）；经CSE刺激后，大鼠膈肌细胞OGGlmRNA和蛋白水平均高于对照组（P〈O．05），但大鼠膈肌细胞***含量与其OGGlmRNA和蛋白水平无明显相关（r=0．373，P=0．254；r=0．329，P=0．296）。结论CSE刺激可引起大鼠膈肌细胞8-OHdG升高，8-OHdG含量与ROS水平有关，但与其修复酶OGGl表达水平无明显相关。

关键词：肺疾病,慢性阻塞性膈肌细胞 8-羟基脱氧鸟苷 8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1

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碱基切除修复基因OGG1对紫外线诱导晶状体上皮细胞损伤的保护作用

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眼科新进展 2022年第4期42卷 267-272页

作者：李鹏飞罗家伟康丽华张国伟茅馨木吴安然张文怡管怀进南通大学附属医院眼科研究所江苏省南通市226001

目的探讨碱基切除修复基因8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1(OGG1)对紫外线(UVB)诱导晶状体上皮细胞损伤(LEC)的保护作用。方法通过UVB照射人LEC(SRA01/04细胞株)诱导细胞氧化损伤模型,利用siRNA敲降技术针对靶基因OGG1设计3个siRNA(分别为siOGG... 详细信息

目的探讨碱基切除修复基因8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1(OGG1)对紫外线(UVB)诱导晶状体上皮细胞损伤(LEC)的保护作用。方法通过UVB照射人LEC(SRA01/04细胞株)诱导细胞氧化损伤模型,利用siRNA敲降技术针对靶基因OGG1设计3个siRNA(分别为siOGG1#1、siOGG1#2和siOGG1#3)。同时,为了验证出敲降效率最高的siOGG1,依据转染情况将细胞分为siOGG1#1组、siOGG1#2组、siOGG1#3组、siNC组和空白对照组(不转染)。后续为了验证OGG1的表达下调对氧化损伤环境下细胞的作用,将细胞分为空白对照组、UVB组、UVB+siNC组和UVB+siOGG1#2组,观察各组细胞凋亡相关蛋白的表达变化。采用实时荧光定量-PCR检测各组细胞目的基因mRNA的表达,免疫印迹实验检测各组细胞相关蛋白的表达。免疫荧光法检测UVB+siNC组和UVB+siOGG1#2组中受损dna的标记物15A3的荧光强度变化。采用免疫荧光法检测细胞dna氧化损伤情况,CCK8实验检测细胞活力。结果实时荧光定量-PCR检测结果显示UVB照射时间为10 min时,OGG1的相对表达量最高;免疫印迹实验检测结果显示随着UVB照射时间的延长,细胞内OGG1蛋白相对表达量呈时间依赖性下降。因此,细胞氧化损伤模型采用UVB照射10 min处理细胞。实时荧光定量-PCR检测结果显示与siNC组相比,靶向设计的转染siOGG1组的三个亚组中细胞OGG1 mRNA相对表达量均显著降低(均为P8-oxoG,它是OGG1的修复作用靶点)染色阳性细胞明显增多。CCK8实验结果显示与UVB+siNC组和空白对照组相比,UVB+siOGG1#2组细胞活力均明显降低,差异均有统计学意义(均为Pdna的修复过程,调控LEC内受损dna的修复和细胞凋亡过程。

关键词：年龄相关性白内障氧化损伤紫外线碱基切除修复基因 8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1

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