OGG1基因在年龄相关性白内障患者晶状体中的表达及甲基化研究

作     者：王勇 

作者单位：南通大学 

学位级别：硕士

导师姓名：管怀进

授予年度：2014年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

主      题：8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1 年龄相关性白内障 晶状体皮质 DNA甲基化 表观遗传学 

摘      要：目的探索参与年龄相关性白内障(age-related cataract,ARC)DNA损伤后碱基清除修复途径(base excision repair,BER)的氧化损伤修复基因—8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(8-oxoguanine DNA glycosylase 1,OGG1)在正常中老年人、ARC(皮质性)患者的晶状体皮质中的表达及第一外显子区甲基化状态,并分析其表达与DNA甲基化的关系。方法本实验设计为临床病例对照研究。病例组为2013年3月-2013年9月在南通大学附属医院眼科诊断为ARC,LOCS III分级晶状体混浊程度为C4,并接受白内障手术的患者,共15例15眼;对照组为本院眼科诊断为玻璃体视网膜疾病,因年龄或手术等因素需要在玻璃体切除手术中同时作透明晶状体摘除者,及本院红十字眼库接受的中老年人身后捐献的新鲜眼球,共15例15眼,于手术中取得晶状体皮质。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)分析OGG1 m RNA表达水平,蛋白质免疫印迹(Western blot)分析蛋白质表达量,免疫荧光分析细胞内的蛋白质定位,甲基化特异性PCR法(BSP)检测OGG1基因的甲基化状态。SPSS17.0统计软件分析数据。结果RT-PCR及Western blot结果表明,与对照组相比,ARC患者晶状体皮质中OGG1 m RNA及蛋白质表达均下调(t=4.39,P0.01;t=7.95,P0.01)。免疫荧光结果表明在ARC患者晶状体皮质中OGG1阳性细胞减少(t=5.3,P0.01)。BSP分析表明在ARC患者中OGG1基因第一外显子Cp G岛呈现高甲基化(t=11.64,P0.01)。结论OGG1基因低表达,可能与ARC的发生发展相关;OGG1基因第一外显子CpG岛的甲基化调节OGG1基因的表达,进而影响其DNA的修复功能,可作为ARC防治的新靶点。