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运动镇痛效应的丘脑调控作用及5-HT1A受体机制研究

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运动镇痛效应的丘脑调控作用及5-HT1A受体机制研究

作者：卢雅梦延安大学

学位级别：硕士

运动疗法是临床实践中对各类急慢性疼痛进行治疗和管理的有效手段,一定时长和强度的运动干预能够产生痛觉感受的继发性变化。然而,有关不同时间与不同强度组合的运动对健康机体痛觉内源性调控作用的影响及其性别差异的机制尚不清楚。本... 详细信息

运动疗法是临床实践中对各类急慢性疼痛进行治疗和管理的有效手段,一定时长和强度的运动干预能够产生痛觉感受的继发性变化。然而,有关不同时间与不同强度组合的运动对健康机体痛觉内源性调控作用的影响及其性别差异的机制尚不清楚。本课题组前期研究发现,丘脑MD核团和VM核团作为丘脑“伤害性反应辨别器”能够分辨外周Aδ和C-纤维的伤害性传入,并分别介导伤害性机械性刺激引起的下行易化和热刺激诱发的下行抑制作用。因此,本研究将使用不同强度和不同时间组合的跑台运动,通过其对大鼠机械/热刺激缩足反射的影响,探究不同强度和不同时间组合的运动处方对丘脑介导的痛觉内源性下行调控作用的影响,以及丘脑内5-羟色胺能受体在运动镇痛效应中的角色。研究目的:1.探究不同运动强度与不同运动时间组合的跑台运动对雄性大鼠痛觉内源性调控作用的影响;2.探究不同运动强度与不同运动时间组合的跑台运动对雌性大鼠痛觉内源性调控作用的影响;3.探究跑台运动对健康大鼠痛觉内源性调控作用影响的丘脑VM核团内5-羟色胺1A受体机制。研究方法:本研究纳入总计104只雄性与80只雌性Sprague-Dawley大鼠,对其按照跑台运动的时间和速度组合进行随机分组。在第一阶段中,对大鼠进行连续6周的跑台运动干预,在运动前和每周运动后进行行为学指标测试。在第二阶段中,采用脑内微量注射的方式对雄性大鼠进行丘脑VM核团注射模型的建立,并在建模后进行连续5天的运动干预和行为学测试。具体方法如下:1.行为学测试:大鼠运动前以及运动后1～6周每周一次进行双侧后肢机械刺激缩足反射阈值(Paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和热刺激缩足反射潜伏期(Paw withdrawal thermal latency,PWTL)测试。2.跑台运动:大鼠随机分为9组,在跑步机上0坡度以15cm/s,25cm/s或35cm/s的速度每天运动15min,30min或45min,每周连续运动五天,持续六周。3.脑内微量注射:大鼠以35cm/s-30min的强度时间连续跑台运动5天,每天在进行跑台运动前1h,丘脑双侧VM核团内分别微量注射0.5μl 0.5nmol和1.5nmol 5-HT1A受体拮抗剂WAY-100635,观察健康大鼠(性别)运动前、后机械缩足阈值与热刺激缩足潜伏期变化。研究结果:1.雌性大鼠在15cm/s-45min及25cm/s-45min的强度时间组合下,运动2周后;25cm/s-30min的强度时间组合下运动3周后;35cm/s-30min及35cm/s-45min的强度时间组合下运动1周后,双侧后肢机械缩足反射阈值显著升高,热缩足反射潜伏期显著延长(P5)。35cm/s-15min组大鼠运动3周后,只出现了机械缩足反射阈值的显著升高(P5)。2.雄性大鼠在15cm/s-30min,15cm/s-45min,25cm/s-30min,25cm/s-45min,35cm/s-15min的强度时间组合下运动1周后;25cm/s-15min及35cm/s-30min组大鼠运动3周后,双侧后肢机械缩足反射阈值显著升高,热缩足反射潜伏期显著延长(P5)。3.双侧VM核团微量注射不同剂量的5-HT1A受体拮抗剂WAY-100635能够剂量依赖性的抑制35cm/s-30min时间-强度组合的跑台运动引起的健康大鼠双侧后肢热缩足反射潜伏期延长现象(P5)。研究结论:1.一定强度和时长的运动能够减弱健康个体痛觉内源性下行易化作用,增强健康个体痛觉内源性下行抑制作用,从而发挥运动镇痛作用。2.运动强度一定的情况下,运动对痛觉内源性调控作用的影响随着运动时间的延长增强。3.运动时间一定的情况下,运动对痛觉内源性调控作用的影响随着运动强度的增加增强。4.运动对健康个体痛觉内源性调控的影响具有性别差异,相同强度和时长的运动在雄性大鼠更容易产生对痛觉内源性调控的影响。5.丘脑VM核团5-HT1A受体参与运动诱发的痛觉下行抑制作用增强现象。

关键词：跑台运动痛觉内源性调控丘脑 5-HT1A受体

跑台运动对攻击行为大鼠内侧下丘脑和中脑导水管周围灰质5-HT1A受体、5-ht2A受体蛋白表达的影响

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中国应用生理学杂志 2021年第3期37卷 272-275页

作者：张换鸽胡柏平重庆市体育科学研究所国家体育总局体质评价与运动机能监控重点实验室重庆401331 陕西师范大学体育学院西安710062

目的:探讨跑台运动对攻击行为大鼠内侧下丘脑(MH)和中脑导水管周围灰质(PAG)5-HT1A受体、5-ht2A受体蛋白表达的影响,为研究运动对攻击行为改善的神经生物学机制提供实验基础。方法:3月龄雄性SD大鼠40只,体重160~180 g,随机分为4组:安静... 详细信息

目的:探讨跑台运动对攻击行为大鼠内侧下丘脑(MH)和中脑导水管周围灰质(PAG)5-HT1A受体、5-ht2A受体蛋白表达的影响,为研究运动对攻击行为改善的神经生物学机制提供实验基础。方法:3月龄雄性SD大鼠40只,体重160~180 g,随机分为4组:安静组(A)、攻击模型组(G)、攻击跑台组(GP)、入侵组(R)。A组和R组分别群居饲养,其中R组在建造攻击模型时作为外来入侵鼠,从开始造模到实验结束,入侵G组和GP组诱导攻击行为发生,在结果中不作处理。G组和GP组单笼饲养一周后,采用单笼喂养+入侵鼠入侵建造攻击模型,大鼠攻击模型建立后,GP组进行跑台训练干预8周,每周5 d,每天30 min,17:00~20:00进行训练,训练负荷按照适应性低强度(15 m/min×10 min)→大强度(20 m/min×10 min)→恢复性低强度(15 m/min×10 min)这三个阶段连续完成,训练中的大强度每两周增加一次,每次增加5 m/min,直到强度达到30 m/min不再增加。免疫组化检测MH和PAG中5-HT1A受体、5-ht2A受体蛋白表达的变化。结果:与A组相比,G组MH和PAG中5-HT1A受体蛋白表达均明显降低(P5),5-ht2A受体蛋白表达在MH和PAG中均明显增加(P5)。与G组相比,GP组MH中5-HT1A受体蛋白表达明显增加(P5),PAG中5-HT1A受体蛋白表达差异无显著性(P>0.05),5-ht2A受体蛋白表达在MH和PAG中均明显降低(P5)。结论:跑台运动使攻击行为大鼠MH中5-HT1A受体蛋白表达增高,MH和PAG中5-ht2A受体蛋白表达降低。

关键词：攻击行为跑台运动 5-HT1A受体 5-ht2A受体大鼠

背侧海马齿状回5-HT1A受体在帕金森病大鼠焦虑行为中的作用

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西安交通大学学报（医学版） 2017年第3期38卷 402-409页

作者：刘椰姜依凡刘鑫焦思睿胡伟彭伟谢雯王君张莉西安交通大学医学部2013级临床医学系西安交通大学医学部生理学与病理生理学系陕西省肿瘤医院麻醉科陕西西安710061

目的研究背侧海马齿状回5-ht_(1A)受体在制备帕金森病(PD)大鼠焦虑行为中的作用。方法采用盐酸6-羟基多巴(6-OHDA)单侧内侧前脑束(MFB)完全损毁制备PD模型大鼠。免疫组织化学法观察假手术组和MFB毁损大鼠黑质致密部(SNc)和腹侧被盖区(V... 详细信息

目的研究背侧海马齿状回5-ht_(1A)受体在制备帕金森病(PD)大鼠焦虑行为中的作用。方法采用盐酸6-羟基多巴(6-OHDA)单侧内侧前脑束(MFB)完全损毁制备PD模型大鼠。免疫组织化学法观察假手术组和MFB毁损大鼠黑质致密部(SNc)和腹侧被盖区(VTA)酪氨酸羟化酶免疫反应阳性(TH-ir)神经元的数量;采用旷场试验和高架十字迷宫实验观察背侧海马齿状回(DG)局部给予5-ht_(1A)受体激动剂8-OH-DPAT或拮抗剂WAY-100635对假手术组和MFB毁损组大鼠焦虑行为的影响;采用高效液相色谱-电化学检测法检测其焦虑相关脑区单胺类神经递质含量的变化。结果 PD组损毁侧SNc中的TH-ir神经元完全缺失,而VTA中TH-ir神经元的数目则显著减少到未损毁侧的(34±2)%;在旷场实验中大鼠的自发运动,包括垂直运动和水平运动能力较假手术组显著降低,并且在旷场实验中央区停留时间和高架十字迷宫实验中的开放臂进入次数百分比和开放臂停留时间百分比均明显缩短,即诱发大鼠的焦虑样行为。背侧海马DG内注射5-ht_(1A)受体激动剂或拮抗剂对大鼠的自发运动均无影响。假手术组大鼠背侧海马DG内微量注射5-ht_(1A)受体激动剂8-OH-DPAT或拮抗剂WAY-100635,均对其焦虑样行为没有影响;而MFB毁损大鼠的背侧海马DG内微量注射8-OH-DPAT,其在旷场试验中央区停留时间显著延长,高架十字迷宫实验开放臂进入次数百分比和开放臂停留时间百分比均显著增加,即改善焦虑样行为;MFB毁损大鼠的背侧海马DG内注射5-ht_(1A)受体拮抗剂WAY-100635,对其焦虑样行为无影响;6-OHDA单侧完全损毁MFB组损伤侧的纹状体、mPFC、杏仁核和腹侧海马内DA神经递质含量明显降低,而5-ht和NA含量没有变化。结论6-OHDA单侧完全损毁MFB导致SNc的DA能神经元完全损毁,VTA DA能神经元部分损毁;损伤侧的纹状体、mPFC、杏仁核和腹侧海马内DA神经递质含量明显降低,且出现焦虑样行为;背侧海马DG内注射5-ht_(1A)受体激动剂8-OH-DPAT可改善MFB毁损大鼠的焦虑样行为,但对假手术组无影响。

关键词：帕金森病海马焦虑 5-HT1A受体多巴胺盐酸6-羟基多巴(6-OHDA)

5-ht_(1A)受体激动剂对青春期大鼠病理性攻击行为和前额叶皮质、海马内脑源性及胶质细胞源性神经营养因子的影响

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第二军医大学学报 2017年第7期38卷 885-890页

作者：蔡亚兰陈竹赵媛屈远秦光成陈力学胡华重庆医科大学附属第一医院精神科重庆400016 重庆医科大学附属第一医院实验研究中心重庆400016

目的探索5-羟色胺1A(5-ht1a)受体激动剂8-OH-DPAT对青春期大鼠病理性攻击行为及对前额叶皮质、海马内脑源性神经营养因子(BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的影响。方法出生后21d的雄性SD大鼠42只随机分为6组(n=7):模型组、正常... 详细信息

目的探索5-羟色胺1A(5-ht1a)受体激动剂8-OH-DPAT对青春期大鼠病理性攻击行为及对前额叶皮质、海马内脑源性神经营养因子(BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的影响。方法出生后21d的雄性SD大鼠42只随机分为6组(n=7):模型组、正常组、模型+药物组、模型+生理盐水(NS)组、正常+药物组、正常+NS组。模型组、模型+药物组及模型+NS组采用早年慢性应激建立病理性攻击模型,余3组正常饲养。建模成功后对模型+药物组、正常+药物组及模型+NS组、正常+NS组分别行2周的8-OH-DPAT(0.5 mg/kg)或生理盐水(2mL/只)腹腔注射。用居住-入侵实验检测大鼠攻击行为,蛋白质印迹分析检测大鼠脑前额叶皮质及海马内BDNF、GDNF蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组攻击潜伏期缩短(P5);模型+药物组攻击持续时间较正常+药物组增加(P5);药物干预后攻击总数组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组前额叶皮质、海马内BDNF及GDNF表达水平均低于正常组(P5,P5,P5-HT1A受体激动剂可上调前额叶皮质及海马内BDNF、GDNF的蛋白表达,并在一定程度上减轻早年慢性应激所致青春期大鼠病理性攻击行为。

关键词：青春期病理性攻击行为 5-HT1A受体前额叶皮质海马脑源性神经营养因子胶质细胞源性神经营养因子

激活或阻断内侧隔斜角带复合体中5-ht_(1A)受体对帕金森病模型大鼠认知功能的影响

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西安交通大学学报（医学版） 2018年第4期39卷 488-493,497页

作者：李立博李坤颖郭方圆李文娟席悦乔鸿飞杨峰张巧俊西安交通大学医学院第二附属医院康复医学科陕西西安710004

目的探讨内侧隔斜角带复合体(medial septum-diagonal band of Broca complex,MS-DB)中5-HT1A受体在帕金森病(Parkinson's disease,PD)认知功能中的作用及机制。方法以6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)损毁单侧内侧前脑束(medial forebrain bundle,MFB)的PD模型大鼠为对象,采用行为学和电生理学方法,观察激活或阻断MS-DB中5-HT1A受体对PD认知功能和海马theta节律的影响。结果 (1)单侧MFB损毁降低了大鼠在T-迷宫实验中的选择正确率,MS-DB局部注射5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT进一步降低模型组大鼠在T-迷宫实验中的选择正确率,而MS-DB局部注射选择性5-HT1A受体拮抗剂WAY100635升高模型组大鼠的选择正确率;(2)单侧MFB损毁使海马theta节律的峰频率降低,MS-DB局部注射8-OH-DPAT抑制海马theta节律,降低theta节律的标准化功率,而MS-DB局部注射WAY100635诱发海马theta节律,并使theta节律的标准化功率升高。结论阻断MS-DB中的5-HT1A受体可改善模型组大鼠的工作记忆,这可能是通过兴奋海马theta节律来实现的。

关键词：帕金森病内侧隔斜角带复合体 5-HT1A受体认知功能海马(theta节律)

疏肝健脾清热方对功能性消化不良大鼠胃黏膜组织5-HT1A受体及CREB蛋白表达的影响

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中华中医药杂志 2020年第8期35卷 4105-4108页

作者：郎晓猛王亚利杨倩刘建平河北省中医院石家庄050000 河北医科大学中西医结合学院石家庄050000

目的:观察疏肝健脾清热方对功能性消化不良(FD)模型大鼠胃黏膜组织五羟色胺1A(5-ht1a)受体及环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)表达的影响,探讨本方治疗FD可能的作用机制。方法:将40只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组(N组)、模型组(M组)、... 详细信息

目的:观察疏肝健脾清热方对功能性消化不良(FD)模型大鼠胃黏膜组织五羟色胺1A(5-ht1a)受体及环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)表达的影响,探讨本方治疗FD可能的作用机制。方法:将40只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组(N组)、模型组(M组)、西药组(WM组)、中药组(TM组),每组各10只。除N组外,其余各组大鼠采用夹尾刺激+不规则饮食的复合造模方法制备FD模型,造模成功后N组自然饲养,M组予0.9%氯化钠溶液灌胃,WM组给予莫沙必利灌胃,TM组给予疏肝健脾清热颗粒灌胃,连续治疗14d。光镜下观察各组大鼠胃窦组织病理学表现;每日观察大鼠一般情况并记录大鼠体质量变化;免疫荧光法检测大鼠胃窦5-HT1A受体含量,Western Blot法检测大鼠胃CREB蛋白表达。结果:光镜下观察各组大鼠胃窦组织病理学变化未见明显异常,疏肝健脾清热方能有效改善FD模型大鼠一般情况,增加FD大鼠体质量;降低FD大鼠胃黏膜组织5-HT1A受体含量,增加其CREB蛋白表达。结论:疏肝健脾清热方能降低胃黏膜组织5-ht1a的含量、增加CREB蛋白表达,这可能是本方治疗FD的作用机制之一。

关键词：功能性消化不良疏肝健脾清热方 5-HT1A受体 CREB 作用机制

5-ht_(1A)受体对抑郁焦虑行为的调节作用及其机制

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上海交通大学学报（医学版） 2015年第9期35卷 1403-1406页

作者：苏晖施慎逊上海交通大学医学院附属精神卫生中心上海200030 复旦大学附属华山医院精神医学科上海200040

5-羟色胺(5-ht)水平异常引起的神经递质-受体信号通路的适应性改变涉及大脑功能紊乱和神经精神疾病产生,与抑郁症、焦虑症的发病机制密切相关。5-HT1A受体是脑内分布最广的5-ht受体亚型,已是临床抑郁焦虑障碍药物治疗的重要靶点。本文... 详细信息

5-羟色胺(5-ht)水平异常引起的神经递质-受体信号通路的适应性改变涉及大脑功能紊乱和神经精神疾病产生,与抑郁症、焦虑症的发病机制密切相关。5-HT1A受体是脑内分布最广的5-ht受体亚型,已是临床抑郁焦虑障碍药物治疗的重要靶点。本文从电生理学、转基因动物学、信号通路、药理学角度综述5-HT1A受体对抑郁焦虑的调节作用及其机制,有助于深入理解5-HT1A受体功效。

关键词： 5-HT1A受体抑郁焦虑调节

海马齿状回的5-ht_(1A)受体在大鼠主动回避学习中的作用

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中国应用生理学杂志 2015年第1期31卷 44-48页

作者：蒋丰泽吕晶王丹姜海英李英顺金清华延边大学医学院生理学与病理生理学教研室吉林延吉133002

目的:探讨海马齿状回(DG)的5-HT1A受体在大鼠主动回避学习中的作用。方法:SD雄性大鼠36只,随机分为训练组、阻断剂组和激动剂组及相应的对照组(n=6)。在清醒自由状态下,用脑部微量透析法和高效液相色谱法观察海马DG的5-羟色胺(5-ht)含... 详细信息

目的:探讨海马齿状回(DG)的5-HT1A受体在大鼠主动回避学习中的作用。方法:SD雄性大鼠36只,随机分为训练组、阻断剂组和激动剂组及相应的对照组(n=6)。在清醒自由状态下,用脑部微量透析法和高效液相色谱法观察海马DG的5-羟色胺(5-ht)含量在主动回避学习过程中的变化;向海马DG微量注射5-HT1A受体阻断剂WAY-100635或激动剂8-OH-DPAT,观察其对大鼠主动回避学习的影响。结果:1大鼠主动回避学习过程中,DG区细胞外液中的5-ht含量在条件反射建立过程中无显著变化,但实验性消退开始时出现明显升高,达到训练前的(164.90±26.07)%(P5);2每轮训练前,向DG微量注射WAY-100635对大鼠主动回避学习未产生显著影响;3每轮训练前向DG微量注射5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT,能促进条件反射的建立,并抑制条件反射的消退(均P5)。结论:激活海马DG区的5-HT1A受体可易化主动回避学习并巩固相关记忆。

关键词：海马齿状回 5-羟色胺 5-HT1A受体主动回避学习大鼠

基于TREK-1通道探讨5-HT1A受体调节自噬参与肝郁脾虚型抑郁症形成及逍遥散的干预研究

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基于TREK-1通道探讨5-HT1A受体调节自噬参与肝郁脾虚型抑郁症形成...

作者：万小敏湖北中医药大学

学位级别：硕士

研究目的本实验以慢性不可预知温和应激(Chronic Unpredictable Mild Stress,CUMS)方法复制肝郁脾虚型抑郁症模型,结合核酸及蛋白的转录、表达等方面检测结果,在生理、组织、细胞及分子水平证实肝郁脾虚型抑郁症与5-羟色胺1A(5-ht)受体... 详细信息

研究目的本实验以慢性不可预知温和应激(Chronic Unpredictable Mild Stress,CUMS)方法复制肝郁脾虚型抑郁症模型,结合核酸及蛋白的转录、表达等方面检测结果,在生理、组织、细胞及分子水平证实肝郁脾虚型抑郁症与5-羟色胺1A(5-ht)受体蛋白、双孔钾离子(TREK-1)通道及自噬的相关性,阐明逍遥散是否可以影响5-ht受体,再经TREK-1通道抑制自噬反应、减少神经元凋亡,进而研究逍遥散治疗肝郁脾虚型抑郁症的潜在作用机制。研究方法1.理论研究:开展相关文献调研,了解抑郁症的中医病因病机、中医证型分类、西医发病机制、逍遥散治疗抑郁症的研究进展,为本论文的实验研究提供充足的理论依据。2.实验研究:选取SPF级别雄性SD大鼠40只,分成正常组、模型组、逍遥散组及氟西汀组。采用CUMS造模方法复制肝郁脾虚型抑郁症模型,造模为期7周。运用大鼠一般生理指标、糖水偏好实验及旷场实验评价模型是否构建成功及逍遥散的功效。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测分析中医名方逍遥散对大鼠海马区TREK-1通道及自噬标记蛋白Beclin-1、LC3等基因转录的干预作用。用蛋白印迹法(Western-blot)检测逍遥散对5-ht受体、Beclin-1、LC3的蛋白表达的调控作用。用DNA断裂原位末端标记法(TUNEL)染色技术测定逍遥散对大鼠海马区神经元凋亡的改善作用。实验结果1.在用CUMS造模法成功复制肝郁脾虚型抑郁症模型后,大鼠出现了毛发凌乱枯黄、食欲降低、体重增长减缓、独处活动减少及大便不成形。旷场实验中,大鼠移动的总路程、中央停留时间降低,休息时间延长;糖水实验中糖水偏好率降低,上述证据表明CUMS方法成功复制肝郁脾虚型抑郁症模型,而逍遥散和氟西汀对上述病理表现均有不同程度的改善作用。2.RT-qPCR结果显示:与正常组比较,模型组、逍遥散组及氟西汀组的TREK-1通道、Beclin-1及LC3转录水平皆升高且具有显著差异(P1);与模型组比较,逍遥散组及氟西汀组的TREK-1通道、Beclin-1及LC3转录水平降低(P1;P5)。3.Western-blot结果显示:与正常组比较,模型组、逍遥散组及氟西汀组Beclin-1及LC3蛋白的相对灰度值明显升高,而5-ht受体蛋白的相对灰度值降低(P1;P5);与模型组比较,逍遥散组及氟西汀组可降低大鼠的Beclin-1及LC3蛋白表达(P1;P5),而5-ht受体蛋白的相对灰度值明显升高(P1)。相关性分析显示,TREK-1通道与Beclin-1、LC3呈正相关(P1),而与5-ht受体呈负相关(P1)。4.TUNEL结果显示:与正常组比较,模型组、逍遥散组及氟西汀组凋亡的神经细胞百分率增多(P1;P5);与模型组对比,逍遥散组凋亡的神经细胞百分率明显减少(P1),优于氟西汀组。结论1.文献调研发现抑郁症发病中肝郁脾虚型占据非常重要地位。2.肝郁脾虚型抑郁症的发生可能与5-ht受体蛋白经TREK-1通道影响自噬,调控自噬标志蛋白Beclin-1及LC3,最后导致神经元凋亡有关。3.逍遥散可以调节5-ht受体蛋白,5-ht受体蛋白再经TREK-1通路影响自噬,调控自噬标记蛋白Beclin-1及LC3,减少神经元凋亡,从而治疗肝郁脾虚型抑郁症。

关键词：抑郁症肝郁脾虚证 5-HT1A受体 TREK-1通道 Beclin-1 LC3 逍遥散