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2,4-二硝基氟苯柱前衍生化法测定普瑞巴林

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高校化学工程学报 2010年第2期24卷 350-353页

作者：巫婷景秋芳叶波沈永嘉华东理工大学精细化工研究所结构可控先进功能材料及其制备教育部重点实验室上海200237 华东理工大学药学院上海200237 浙江三门腾龙化工有限公司浙江三门317100

利用2,4-二硝基氟苯为柱前衍生剂,建立了用高效液相色谱法测定普瑞巴林的方法。考察了光、反应温度、摩尔比和反应时间对衍生化反应的影响,确定了最佳衍生反应条件:在65℃水浴中避光反应75min。色谱柱为C18,流动相为50mmol·L-1KH2PO4(p... 详细信息

利用2,4-二硝基氟苯为柱前衍生剂,建立了用高效液相色谱法测定普瑞巴林的方法。考察了光、反应温度、摩尔比和反应时间对衍生化反应的影响,确定了最佳衍生反应条件:在65℃水浴中避光反应75min。色谱柱为C18,流动相为50mmol·L-1KH2PO4(pH=3.0)/乙腈(30/70,v/v),检测波长为360nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为35℃。实验结果:在8～48μg·mL-1范围内呈较好的线性关系(r=0.9998),回收率(100.03±1.10)%(n=9),不同浓度下日内精密度0.82%、0.77%和1.87%,8h内稳定性良好(RSD=1.92%),检测限低至0.8ng·mL-1。实验表明该方法简便、快速、准确、灵敏。通过对该方法的实际应用,三批样品测定值的RSD分别为0.59%、0.68%和1.04%,表明该方法能够用于测定普瑞巴林的含量。

关键词：普瑞巴林 2,4-二硝基氟苯高效液相色谱柱前衍生化

2,4-二硝基氟苯柱前衍生法测定植物中谷氨酸脱羧酶的活力

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分析化学 2009年第3期37卷 347-350页

作者：吕莹果张晖孟祥勇王立郭晓娜陶冠军江南大学食品学院

建立了2,4-二硝基氟苯(FDNB)柱前衍生反相高效液相色谱紫外检测法测定植物中谷氨酸脱羧酶(GAD)活力的方法。利用GAD催化L-谷氨酸脱羧转变成γ-氨基丁酸(CABA)的性质,用FDNB柱前衍生GABA,HPLC Lichrospher C18色谱柱分离,在360nm下检测... 详细信息

建立了2,4-二硝基氟苯(FDNB)柱前衍生反相高效液相色谱紫外检测法测定植物中谷氨酸脱羧酶(GAD)活力的方法。利用GAD催化L-谷氨酸脱羧转变成γ-氨基丁酸(CABA)的性质,用FDNB柱前衍生GABA,HPLC Lichrospher C18色谱柱分离,在360nm下检测衍生物,从而得到生成GABA的含量,及不同植物组织中的GAD活力。本方法的线性范围0.2～5g/LGABA(r=0.9954),精密度RSD为0.21%、回收率高,且衍生化产物在一个月内都能保持稳定。用本方法测定得出稻米和茶叶中均有一定的GAD活力。在稻米组织中,GAD主要分布在米胚芽中,米糠也具有相对较高的GAD活性,为开发富含GABA的糙米食品提供了依据。

关键词：柱前衍生化高效液相色谱 2,4-二硝基氟苯谷氨酸脱羧酶 γ-氨基丁酸

2,4-二硝基氟苯柱前衍生测定植物样中的甲硫氨酸

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福建分析测试 2023年第2期32卷 5-10页

作者：尚颖颖杨玲娟平凉职业技术学院甘肃平凉744000 天水师范学院甘肃天水741000

利用2,4-二硝基氟苯(FDNB)为柱前衍生剂,建立了高效液相色谱法测定植物样中甲硫氨酸的方法。考察了衍生剂用量、温度、时间对衍生化反应的影响,确定最佳衍生条件为60℃的水浴中避光反应30 min。采用Luna-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙... 详细信息

利用2,4-二硝基氟苯(FDNB)为柱前衍生剂,建立了高效液相色谱法测定植物样中甲硫氨酸的方法。考察了衍生剂用量、温度、时间对衍生化反应的影响,确定最佳衍生条件为60℃的水浴中避光反应30 min。采用Luna-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈和醋酸钠缓冲溶液为流动相(PH=4.73,25:75),检测波长为360nm,柱温40℃,20μL进样。实验结果表明,在0.01 mg/mL-0.31 mg/mL范围内有良好的线性关系,回归方程为y=12765x-30.63,相关系数R=0.996,甲硫氨酸的线性回归系数为0.996,RSD=2.3%,苜蓿加标回收率=105.6%,山黧豆加标回收率=110.1%。实验表明该方法选择性好、准确、灵敏,适合植物样中甲硫氨酸的测定。

关键词：甲硫氨酸 2,4-二硝基氟苯柱前衍生 HPLC

2,4-二硝基氟苯柱前衍生-高效液相色谱法测定牡蛎中牛磺酸

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理化检验（化学分册） 2014年第5期50卷 611-613页

作者：陈向明滨州医学院药学院烟台264003

取一定量牡蛎样品的匀浆,用水和乙腈提取;分取部分乙腈提取液,按给定条件用2,4-二硝基氟苯对溶液中牛磺酸进行柱前衍生。将反应后的溶液用乙腈稀释10倍,分取20μL进行高效液相色谱分析。用Ultimate C18色谱柱为固定相,以不同体积比混合... 详细信息

取一定量牡蛎样品的匀浆,用水和乙腈提取;分取部分乙腈提取液,按给定条件用2,4-二硝基氟苯对溶液中牛磺酸进行柱前衍生。将反应后的溶液用乙腈稀释10倍,分取20μL进行高效液相色谱分析。用Ultimate C18色谱柱为固定相,以不同体积比混合的乙腈和0.2%(φ)三乙胺(用磷酸调节其酸度至pH 4.0)混合液作为流动相进行梯度淋洗,所用检测波长为360nm。经衍生后牛磺酸浓度在4.68×10-10~4.25×10-5 mol·L-1范围内与其相应的峰面积呈线性关系。方法的检出限(3S/N)为5.5×10-11 mol·L-1。用标准加入法做回收试验,测得平均回收率为97.4%,测定值的平均相对标准偏差(n=6)为2.1%。

关键词：高效液相色谱法柱前衍生 2,4-二硝基氟苯牛磺酸牡蛎

2,4-二硝基氟苯衍生法测定发酵液中组氨酸方法的优化

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现代化工 2007年第S2期27卷 347-349页

作者：张昌伟徐庆阳刘淑云陈宁天津科技大学生物工程学院天津300457

在氨基酸分析仪2,4-二硝基氟苯柱前衍生法测量复合氨基酸方法的基础上,优化了色谱柱、洗脱梯度、pH值、温度等条件,使组氨酸的测量时间从40 min减少到20 min。实验证明,在优化条件下组氨酸浓度在5~25μg/mL内与峰面积之间的线性关系良好... 详细信息

在氨基酸分析仪2,4-二硝基氟苯柱前衍生法测量复合氨基酸方法的基础上,优化了色谱柱、洗脱梯度、pH值、温度等条件,使组氨酸的测量时间从40 min减少到20 min。实验证明,在优化条件下组氨酸浓度在5~25μg/mL内与峰面积之间的线性关系良好,平均回收率98.93%。

关键词： 2,4-二硝基氟苯组氨酸优化

2,4-二硝基氟苯柱前衍生HPLC检测树莓中游离氨基酸

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食品科学 2015年第6期36卷 178-182页

作者：赵英莲牟德华李艳河北科技大学生物科学与工程学院河北石家庄050018 河北省发酵工程技术研究中心河北石家庄050018

目的:建立一种简单、快速、可同时检测22种氨基酸的色谱方法,并利用此方法对树莓中的游离氨基酸进行检测和分析,为树莓的开发提供科学依据。方法:以2,4-二硝基氟苯为柱前衍生试剂,Hypersil ODS2色谱柱,流动相A为40 mmol/L p H 6.4乙酸... 详细信息

目的:建立一种简单、快速、可同时检测22种氨基酸的色谱方法,并利用此方法对树莓中的游离氨基酸进行检测和分析,为树莓的开发提供科学依据。方法:以2,4-二硝基氟苯为柱前衍生试剂,Hypersil ODS2色谱柱,流动相A为40 mmol/L p H 6.4乙酸钠溶液,流动相B为体积分数50%乙腈-水溶液,梯度洗脱,反相高效液相色谱,二极管阵列检测器,检测波长360 nm。结果:22种氨基酸线性方程的相关系数范围为0.993 1~1.000 0,相对标准偏差在0.95%~4.98%之间,加标回收率为97.10%~103.39%,最低检出限为0.39~2.87μg/m L,定量限为1.29~9.47μg/m L。利用所建方法检测出树莓中含有14种游离氨基酸,其中6种人体必需氨基酸,占总氨基酸含量的29.36%。结论:所建方法操作简便、重复性好,树莓氨基酸含量丰富,有开发价值。

关键词：树莓游离氨基酸高效液相色谱法柱前衍生 2,4-二硝基氟苯

2,4-二硝基氟苯柱前衍生RT-HPLC法测定γ-氨基丁酸

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中国粮油学报 2011年第4期26卷 104-106,111页

作者：郑洪健叶立斌励建荣韩晓祥浙江省食品安全重点实验室浙江工商大学食品与生物工程学院杭州310035

以富含γ-氨基丁酸（GABA）的大豆胚芽乳、黄酒、有机糙米、绿茶和杨梅为研究对象,采用2,4-二硝基氟苯（FDNB）柱前衍生和等度洗脱,建立一种快速测定γ-氨基丁酸含量的RT-HPLC方法。该方法简便,分析时间短（〈7 m in）,灵敏度高,稳定性... 详细信息

以富含γ-氨基丁酸（GABA）的大豆胚芽乳、黄酒、有机糙米、绿茶和杨梅为研究对象,采用2,4-二硝基氟苯（FDNB）柱前衍生和等度洗脱,建立一种快速测定γ-氨基丁酸含量的RT-HPLC方法。该方法简便,分析时间短（〈7 m in）,灵敏度高,稳定性和重现性好。优化后色谱条件如下：HypersilODS2 C18,流动相为乙腈∶水∶磷酸盐缓冲液（pH=7.2,体积比为20∶20∶60）,检测波长为360 nm。在最适条件下,γ-氨基丁酸的线性检测范围为0.016~1.000 mg/mL,线性关系良好,回收率为96.5%~104.0%。

关键词： γ-氨基丁酸反相高效液相色谱 2,4-二硝基氟苯检测方法

低聚甘露糖对2,4-二硝基氟苯致小鼠特异性皮炎的改善作用研究

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食品科技 2020年第3期45卷 206-212页

作者：童杨黎敏施璐方振峰张涛曹晓琴江汉大学医学院湖北武汉430056

目的:建立小鼠特异性皮炎(Atopic dermatitis,AD)模型,观察低聚甘露糖(Mannose oligosaccharide,MOS)对小鼠AD的改善作用,并初步探讨其在免疫方面的作用机制。方法:将32只雄性昆明小鼠,随机分为正常组、AD模型组、MOS治疗组以及地塞米松... 详细信息

目的:建立小鼠特异性皮炎(Atopic dermatitis,AD)模型,观察低聚甘露糖(Mannose oligosaccharide,MOS)对小鼠AD的改善作用,并初步探讨其在免疫方面的作用机制。方法:将32只雄性昆明小鼠,随机分为正常组、AD模型组、MOS治疗组以及地塞米松(Dexamethasone,DEX)阳性对照组。采用2,4-二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB)反复诱导建立小鼠AD模型,共造模2周。造模第1天分别用纯水、MOS和DEX灌胃,1次/d。造模期间,动态观察并记录各组小鼠背部皮损变化以及瘙痒次数。于给药第15天处死小鼠,计算小鼠脾脏指数、胸腺指数,检测血清免疫球蛋E(Immunoglobulin-E,IgE)以及全血白细胞含量,同时取背部皮肤进行HE(Hematoxylin-Eosin,HE)染色、甲苯胺蓝染色观察其病理变化情况。免疫组化检测皮肤组织CD4^+T浸润情况。ELISA法测定各组小鼠血清以及皮损中白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)和γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)水平。结果:MOS能有效减轻AD小鼠引起的免疫器官肿大,减轻皮损炎症程度,减少皮肤组织肥大细胞及CD4+T浸润数量,调节AD小鼠血清和皮损中IL-4和IFN-γ水平。结论:MOS可能通过调控Th1/Th2免疫细胞因子平衡,从而抑制了AD模型小鼠的炎症反应。

关键词：低聚甘露糖 2,4-二硝基氟苯特异性皮炎白细胞介素-4 干扰素-γ

敷和汤对特应性皮炎小鼠Toll样受体4/核因子-κB通路调控辅助性T细胞1/辅助性T细胞2的作用及机制研究

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安徽医药 2024年第8期28卷 1507-1511,I0001页

作者：青千裕赵乐赵子苇姜楚洋王兆南李艳彦山西中医药大学山西晋中030619 山西中医药大学附属医院山西太原030024

目的基于Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路探讨敷和汤对特应性皮炎(AD)小鼠模型的作用及辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)免疫平衡的机制。方法将40只BALB/c小鼠采用随机数字表法分为四组:对照组、模型组、地氯雷他定... 详细信息

目的基于Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路探讨敷和汤对特应性皮炎(AD)小鼠模型的作用及辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)免疫平衡的机制。方法将40只BALB/c小鼠采用随机数字表法分为四组:对照组、模型组、地氯雷他定组、敷和汤组,每组10只,除正常组外,其余各组均用2,4-二硝基氟苯(DNFB)刺激。在DNFB刺激后的第14天各组给予相应药物治疗14 d。治疗后观察各组小鼠皮损变化;记录10 min内小鼠搔抓次数;测量胸腺、脾脏指数;苏木精-伊红(HE)染色观察皮肤组织病理形态学改变;免疫组化检测TLR4阳性蛋白;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)和瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测小鼠皮肤组织中核因子-κB P65(NF-κB P65)、TLR4、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)的mRNA水平变化。结果与正常组相比,模型组小鼠皮损严重、表皮明显增生、角化过度、大量炎性细胞浸润;小鼠搔抓次数(12.80±1.32)次/10分钟和皮损评分(4.00±0.67)分、脾脏和胸腺指数分别为42.53±2.04和35.76±2.01,免疫组化检测TLR4阳性蛋白为97.20±12.19;血清IgE、IL-4、IL-6和TNF-α水平分别为(302.39±46.60)μg/L、(239.54±29.23)ng/L、(249.94±33.62)ng/L、(310.01±50.09)ng/L,皮损NF-κB P65、TLR4、IL-2、IL-10、IFN-γ、IL-1β的mRNA表达分别为(6.70±0.38、7.45±0.30、4.03±0.57、3.35±0.35、5.31±0.12、41.21±1.17)显著升高(均P4 d后小鼠搔抓次数(4.30±0.67)次/10分钟和皮损评分(1.40±0.52)分、脾脏和胸腺指数分别为29.11±1.61和22.02±1.15,免疫组化检测TLR4阳性蛋白为70.85±7.76;血清IgE、IL-4、IL-6和TNF-α水平分别含量为(183.89±11.74)μg/L、(112.67±9.233)ng/L、(121.88±10.84)ng/L、(153.24±12.78)ng/L,皮损NF-κB P65、TLR4、IL-2、IL-10、IFN-γ、IL-1β的mRNA表达分别为(2.87±0.15、2.23±0.31、2.57±0.46、2.39±0.19、2.35±0.21、23.27±2.44)低于模型组(均P4 d后小鼠搔抓次数(5.30±0.67)次/10分钟和皮损评分(1.80±0.63)分、脾脏和胸腺指数分别为27.23±1.19和20.10±1.20,免疫组化检测TLR4阳性蛋白为77.28±5.77;血清IgE、IL-4、IL-6和TNF-α水平含量分别为(175.97±13.12)μg/L、(116.07±9.48)ng/L、(112.11±8.89)ng/L、(143.90±10.83)ng/L,皮损NF-κB P65、TLR4、IL-2、IL-10、IFN-γ、IL-1β的mRNA表达分别为(2.53±0.08、3.46±0.28、2.03±0.11、1.52±0.22、2.15±0.19、23.52±1.24)低于敷和汤组(均P2发挥免疫稳定的作用,促进皮损修复,从而达到治疗的作用。

关键词：皮炎,特应性敷和汤 2,4-二硝基氟苯 Toll样受体4 炎症因子