检索结果-南通市图书馆

龙蛭汤含药血清联合3-MA、白藜芦醇对氧化应激环境下血管内皮细胞自噬及管腔形成的影响

中华中医药学刊 2020年第10期38卷 59-63,I0023-I0025页

作者：黄显雯刘启华陈永斌罗捷李南方邹玲罗燕萍广西医科大学第一附属医院中医科广西南宁530021 广西医科大学广西南宁530021

目的观察龙蛭汤含药血清联合3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)、白藜芦醇(Resveratrol,Res)对过氧化氢(H2O2)诱导的氧化应激环境下血管内皮细胞(HUVECs)自噬及管腔形成的影响。方法SPF级SD大鼠分别予生理盐水、龙蛭汤水煎液灌胃7 d,... 详细信息

目的观察龙蛭汤含药血清联合3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)、白藜芦醇(Resveratrol,Res)对过氧化氢(H2O2)诱导的氧化应激环境下血管内皮细胞(HUVECs)自噬及管腔形成的影响。方法SPF级SD大鼠分别予生理盐水、龙蛭汤水煎液灌胃7 d,取腹主动脉血制备含药血清,分装备用。通过建立H2O2诱导的HUVECs氧化应激自噬模型,分别加入正常对照组(Control组)、生理盐水含药血清组(空白血清组)、3-MA(3-MA组)、3-MA+10%龙蛭汤含药血清(3-MA+LZD组)、Res(Res组)、Res+10%龙蛭汤含药血清(Res+LZD组);CCK8、划痕实验、基质胶管型形成实验分别检测HUVECs增殖、迁移及管型形成能力,细胞免疫荧光检测自噬表达强度,Western Blot比较各组细胞Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、VEGF的蛋白表达水平。结果与空白血清组相比,Res组与Res+LZD组的细胞增殖数、迁移距离及管型形成数均明显增多,LC3荧光表达增强,Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、VEGF蛋白水平升高,3-MA组的自噬、VEGF蛋白水平均降低;与3-MA组、Res组相比,加入龙蛭汤含药血清后的细胞增殖、迁移、管型形成数增多,3-MA+LZD组自噬荧光表达增强,Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、VEGF蛋白水平升高;Res+LZD组下调Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白水平,与自噬荧光表达趋势一致,同时VEGF蛋白表达水平上调。结论龙蛭汤含药血清通过调节Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ自噬蛋白水平调控自噬通路,提高血管内皮细胞活力,促进内皮细胞迁移及管型形成,可能是血管内皮细胞氧化应激损伤后的血管新生的重要作用机制。

关键词：龙蛭汤含药血清 3-MA Resveratrol 自噬血管管型形成

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基于自噬的龙蛭汤含药血清抗SH-SY5Y氧化损伤的机制研究

基于自噬的龙蛭汤含药血清抗SH-SY5Y氧化损伤的机制研究

引用

作者：罗燕萍广西医科大学

学位级别：硕士

目的:龙蛭汤可有效改善缺血性脑卒中患者的神经功能和临床症状,前期研究表明其对缺血性脑损伤大鼠神经元有保护作用,但其对神经元的保护作用机制尚未明确。通过过氧化氢(HO)诱导神经母细胞瘤(SH-SY5Y)氧化损伤,研究龙蛭汤含药血清对受损... 详细信息

目的:龙蛭汤可有效改善缺血性脑卒中患者的神经功能和临床症状,前期研究表明其对缺血性脑损伤大鼠神经元有保护作用,但其对神经元的保护作用机制尚未明确。通过过氧化氢(HO)诱导神经母细胞瘤(SH-SY5Y)氧化损伤,研究龙蛭汤含药血清对受损的SH-SY5Y的保护作用,进一步探讨龙蛭汤含药血清对神经元保护作用可能的机制。方法:依据中药血清药理学和药物代谢动力学方法制备龙蛭汤含药血清(LZD)和丁苯酞含药血清(NBP),应用自噬抑制剂氯喹(Chloroquine,CQ)、自噬诱导剂雷帕霉素(Rapamycin,RAP)干预体外构建的HO诱导的SH-SY5Y氧化损伤模型。将SH-SY5Y细胞株进行培养、传代,取处于生长对数期的SH-SY5Y与含药血清及有关药物共孵。采用CCK-8法检测不同浓度(梯度分别为0umol/L、100umol/L、200umol/L、400umol/L、800umol/L、1600umol/L)HO处理2h、4h、8h、12h、24h后对SH-SY5Y增殖的影响,选择最佳作用浓度及合适作用时间。分组设置:1.正常对照组(Control组);2.空白血清组(BS组);3.模型组(HO组);4.龙蛭汤含药血清组(LZD组);5.丁苯酞含药血清组(NBP组);***+HO组(CQ组);***+HO+LZD组(CQ+LZD组);***+HO组(RAP组);***+HO+LZD组(RAP+LZD组)。通过光学显微镜观察细胞形态学变化;CCK-8检测各组SH-SY5Y增殖能力;透射电子显微镜观察细胞的自噬体和超微结构;采用免疫印迹法比较各组Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ的蛋白表达水平;q RT-PCR比较各组Beclin1、LC3的m RNA表达水平。阐释龙蛭汤含药血清通过调控自噬对HO诱导的SH-SY5Y细胞的氧化损伤的保护作用机制。结果:(1)当HO浓度在400umol/L时,对SH-SY5Y的细胞活性有显著抑制作用,处理4h时,细胞活力下降50%左右可通过一定条件逆转细胞状态,因此后续实验采用400umol/L浓度的HO处理4h。(2)与Control组、BS组比较,HO组细胞形态发生较大改变,细胞已经己经明显受到抑制,细胞突触大部分消失,细胞圆缩,出现聚集倾向,少数细胞尚有清晰的突触,呈片平棱形或星形。(3)与HO组比较,LZD组细胞存活率显著提高,可降低HO造成的细胞损害,维持细胞形态。较NBP组,龙蛭汤具有更高增殖能力。(4)LZD组细胞胞质内双层膜样结构增多,弯曲延展,包裹部分线粒体,而HO组细胞胞质内双层膜样结构和空泡数量相对较低,Control组与BS组细胞可见少量双层膜结构,但结构不明显,无明显变化。(5)与HO组比较,LZD组Beclin1、LC3 m RNA表达增强,Beclin1蛋白表达及LC3-II/LC3-I比值升高。(6)与HO组比较,CQ组细胞活力增强,RAP组细胞活力下降;与CQ组比较,CQ+LZD组细胞活力上升;与RAP组比较,RAP+LZD组细胞活力升高。(7)龙蛭汤含药血清协同CQ、RAP干预SH-SY5Y细胞,与CQ组相比,加入龙蛭汤后CQ+LZD组Beclin1、LC3 m RNA表达水平显著升高;与RAP组相比,RAP+LZD组的Beclin1、LC3m RNA表达水平降低。其LC3Ⅱ/Ⅰ的比值及Beclin1的蛋白含量趋势与m RNA一致。结论:龙蛭汤含药血清通过调控细胞自噬水平促进SH-SY5Y细胞增殖,减轻HO引起的细胞氧化损伤,维持细胞完整、减轻细胞老化,对神经元细胞有重要的保护作用。

关键词：龙蛭汤含药血清自噬神经母细胞瘤细胞神经元保护

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

基于自噬探讨龙蛭汤含药血清对H_(2)O_(2)诱导SH-SY5Y神经细胞氧化损伤的保护作用

引用

广西医科大学学报 2021年第5期38卷 905-911页

作者：罗燕萍陈永斌刘启华黄显雯李南方范俊逸张保德广西医科大学第一附属医院南宁530021

目的:基于自噬探讨龙蛭汤(LZD)含药血清对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的神经母细胞瘤(SH-SY5Y)氧化损伤的保护作用。方法:采用H_(2)O_(2)诱导SH-SY5Y构建氧化应激损伤模型,观察LZD含药血清对细胞的保护作用。加入自噬激动剂雷帕霉素(RAP)... 详细信息

目的:基于自噬探讨龙蛭汤(LZD)含药血清对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的神经母细胞瘤(SH-SY5Y)氧化损伤的保护作用。方法:采用H_(2)O_(2)诱导SH-SY5Y构建氧化应激损伤模型,观察LZD含药血清对细胞的保护作用。加入自噬激动剂雷帕霉素(RAP)、抑制剂氯喹(CQ)干预SH-SY5Y细胞,观察自噬在SH-SY5Y损伤中的作用,实验分为8组:正常对照组、空白血清(BS)组、模型组、LZD组、RAP组、RAP+LZD组、CQ组、CQ+LZD组。CCK-8法检测各组细胞活力,实时荧光定量PCR(qPCR)法检测自噬相关基因Beclin1、LC3 mRNA相对表达量,Western blotting法比较细胞Beclin1蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值。结果:与模型组比较,LZD组细胞存活率显著提高,LZD组Beclin1、LC3 mRNA表达增强,Beclin1蛋白表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高(均P含药血清协同RAP、CQ干预SH-SY5Y细胞,与CQ组比较,CQ+LZD组Beclin1、LC3 mRNA相对表达量和细胞活力显著升高(均P含药血清能够提高神经母细胞瘤细胞活力,并且可能通过调控自噬发挥神经元保护功能。

关键词：龙蛭汤含药血清自噬神经母细胞瘤细胞神经元保护

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：