检索结果-南通市图书馆

基于TGF-β1信号通路研究小檗碱联合芒柄花黄素抑制鼻咽癌细胞迁移的作用机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中草药 2022年第10期53卷 3053-3060页

作者：刘洁史红健范婧莹周芳亮罗晶婧程博王贤文何迎春湖南中医药大学湖南长沙410208 中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南省中医药防治眼耳鼻咽喉疾病与视功能保护工程技术研究中心湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410021

目的研究小檗碱联合芒柄花黄素对鼻咽癌细胞迁移的影响,探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)信号通路在其效应中的作用。方法采用实时无标记细胞功能分析仪监测小檗碱和芒柄花黄素单用及联合使用对鼻咽癌5-8F... 详细信息

目的研究小檗碱联合芒柄花黄素对鼻咽癌细胞迁移的影响,探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)信号通路在其效应中的作用。方法采用实时无标记细胞功能分析仪监测小檗碱和芒柄花黄素单用及联合使用对鼻咽癌5-8F、6-10B细胞增殖的影响;采用划痕实验和Transwell实验检测TGF-β1信号通路激活后,小檗碱联合芒柄花黄素抑制细胞迁移效应的变化;采用Western blotting检测TGF-β1信号通路关键蛋白和迁移相关蛋白的表达。结果与对照组比较,小檗碱和芒柄花黄素单用可抑制5-8F和6-10B细胞增殖,小檗碱(5、10μmol/L)和芒柄花黄素(5、10μmol/L)联合作用于5-8F和6-10B细胞后,显示小檗碱联合芒柄花黄素抑制鼻咽癌细胞增殖以协同效应为主;小檗碱联合芒柄花黄素显著降低鼻咽癌细胞TGF-β1和Smad3蛋白表达水平(P鼻咽癌细胞迁移的效应显著降低(P细胞TGF-β1、Smad3、磷酸化细胞外调节激酶1/2(phosphorylated extracellular signal regulated kinase 1/2,p-ERK1/2)蛋白表达水平显著上调(P鼻咽癌细胞迁移,其作用机制可能与抑制TGF-β1信号通路有关。

关键词：鼻咽癌细胞小檗碱芒柄花黄素细胞迁移转化生长因子-β1信号通路协同效应

鼻咽癌细胞株中标记滞留细胞(LRGs)的建立与检测(英文)

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Chinese Journal of Cancer 2010年第5期29卷 572-574页

作者：江庆萍姚开泰 Cancer Institute Basic MedicineSouthern Medical University Department of Pathology The Third Affiliated HospitalGuangzhou Medical University

Background and Objective:Detection of label-retaining cells(LRCs) has been a method to confirm existence of stem cells,and bromodeoxyuridine(BrdU) has commonly been used for labeling.In this study,to verify stem cells in nasopharyngeal carcinoma(NPC),LRCs were established and detected in NPC cell line 5-8F.Methods:The 5-8F cells were cultured with BrdU and inoculated subcutaneously into nude mice.By immunohistochemistry,immunocytochemistry,and immunofluorescence,BrdU was detected in 5-8F cells and xenograft tumors.Results:BrdU was strongly positive in cells on the 2nd and the 7th day after being added BrdU,while negative when cells were cultured without BrdU.However,only sporadic cells were positive on the 14th day after BrdU being washed-out,and these cells were thought to be LRCs.The average percentage of LRCs was(0.67 ± 0.32)%.After being cultivated with BrdU for 48 h,5-8F cells were inoculated into nude mice subcutaneously.After chasing 8 weeks,only sporadic LRCs were detected in xenograft tumors,with a proportion of(0.55 ± 0.36)%,and these LRCs were located at cancer margin.Conclusion:The existence of LRCs in 5-8F cells indicates the existence of cancer stem cells in NPC.

关键词：鼻咽癌细胞细胞检测标签细胞株孤立免疫细胞化学培养细胞 BrdU

抑制单羧酸转运蛋白1可增强鼻咽癌细胞HNE1/DDP对顺铂诱导凋亡的敏感性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南方医科大学学报 2017年第7期37卷 883-888页

作者：张配刘芳高娇马琳艳孙小锦郑海伦刘浩赵素容蚌埠医学院药学院//安徽省生化药物工程技术研究中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院骨科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院第一附属医院消化科安徽蚌埠233004

目的探讨siRNA沉默单羧酸转运蛋白1(MCT1)增强鼻咽癌细胞HNE1/DDP对顺铂诱导凋亡的敏感性及其可能机制。方法 Western blot检测HNE1和HNE1/DDP细胞中MCT1的表达及siRNA转染沉默MCT1在HNE1/DDP细胞中MCT1的表达;MTT法检测不同浓度顺铂和M... 详细信息

目的探讨siRNA沉默单羧酸转运蛋白1(MCT1)增强鼻咽癌细胞HNE1/DDP对顺铂诱导凋亡的敏感性及其可能机制。方法 Western blot检测HNE1和HNE1/DDP细胞中MCT1的表达及siRNA转染沉默MCT1在HNE1/DDP细胞中MCT1的表达;MTT法检测不同浓度顺铂和MCT1 siRNA联合顺铂对HNE1/DDP细胞的增殖抑制作用;PI单染流式细胞术检测细胞凋亡;线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测细胞线粒体膜电位;Western blot检测Mcl-1、Bak、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果 MCT1在HNE1/DDP细胞中高表达,抑制MCT1的表达可增加HNE1/DDP细胞对顺铂的敏感性(P鼻咽癌细胞对顺铂的耐药。此外,抑制MCT1的表达可增强HNE1/DDP细胞对顺铂诱导凋亡的作用,MCT1 siRNA与8μmol/L顺铂联合作用于HNE1/DDP细胞24 h的凋亡率为(51.23±2.86)%,较单用MCT1 siRNA、顺铂的凋亡率明显升高(P细胞线粒体膜电位降低,下调Mcl-1、Bcl-2的表达和上调Bax的表达。结论抑制MCT1的表达可增强鼻咽癌HNE1/DDP细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性,其机制可能与下调Mcl-1、Bcl-2和上调Bax有关。

关键词：鼻咽癌细胞顺铂耐药性单羧酸转运蛋白1 小干扰RNA

红景天苷通过miR-99a-5p/IGF-1R信号通路调节鼻咽癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

现代肿瘤医学 2022年第24期30卷 4438-4445页

作者：吉杨松王晓光苟国兰王晓兰徐前容遵义医科大学第三附属医院(遵义市第一人民医院)耳鼻喉科贵州遵义563000

目的:探讨红景天苷调节微小RNA-99a-5p(microRNA-99a-5p,miR-99a-5p)/胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF-1R)信号通路对鼻咽癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测人鼻咽上皮细胞(NP69)、鼻咽癌细胞系(CNE-2Z、HONE1、6-10B、HNE2)中miR-99a-5p、IGF-1R信使RNA(mRNA)表达水平;将对数期HNE2细胞分为对照组(常规培养HNE2细胞)、红景天苷低浓度组(含HNE2细胞的培养基中加入0.5μg/mL的红景天苷)、红景天苷中浓度组(含HNE2细胞的培养基中加入1μg/mL的红景天苷)、红景天苷高浓度组(含HNE2细胞的培养基中加入2μg/mL的红景天苷)、模拟物(mimics)-NC组(HNE2细胞转染miR-99a-5p mimics阴性对照)、miR-99a-5p mimics组(HNE2细胞转染miR-99a-5p mimics)、红景天苷高浓度+抑制剂(inhibitor)NC组(含HNE2细胞的培养基中加入2μg/mL的红景天苷并转染miR-99a-5p inhibitor阴性对照)、红景天苷高浓度+miR-99a-5p inhibitor组(含HNE2细胞的培养基中加入2μg/mL的红景天苷并转染miR-99a-5p inhibitor)。qRT-PCR法检测各组HNE2细胞中miR-99a-5p、IGF-1R mRNA表达水平;细胞计数试剂盒-8、流式细胞术、Transwell小室、划痕实验、蛋白免疫印迹法分别检测HNE2细胞增殖能力、凋亡率、侵袭能力、迁移能力、IGF-1R蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-99a-5p与IGF-1R的靶向关系。结果:与NP69细胞相比,CNE-2Z、HONE1、6-10B、HNE2细胞系中miR-99a-5p表达水平降低,IGF-1R mRNA表达水平升高(P细胞中miR-99a-5p、IGF-1R mRNA表达水平与NP69细胞差异更明显(P细胞数目、划痕愈合率依次降低(P细胞数目、划痕愈合率降低(P细胞数目、划痕愈合率升高(P细胞增殖、侵袭、迁移,并促进HNE2细胞凋亡。

关键词：红景天苷微小RNA-99a-5p 胰岛素样生长因子1受体鼻咽癌细胞

miR-129-1-3p通过靶向抑制WEE1蛋白激酶表达逆转HNE1/CDDP人鼻咽癌细胞顺铂耐药

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞与分子免疫学杂志 2019年第11期35卷 1014-1019页

作者：张浩轩陆进蒋成义卢伟蚌埠医学院人体解剖学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院组织移植安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院安徽蚌埠233030 中国科学技术大学安徽合肥230026

目的探讨miR-129-1-3p对人鼻咽癌耐药细胞HNE1/顺铂(CDDP)敏感性的影响及相关作用机制。方法培养人鼻咽癌HNE1细胞及耐CDDP的HNE1/CDDP细胞,噻唑蓝(MTT)法检测HNE1/CDDP细胞对于CDDP的耐药指数;采用反转录PCR检测miR-129-1-3p和WEE1蛋... 详细信息

目的探讨miR-129-1-3p对人鼻咽癌耐药细胞HNE1/顺铂(CDDP)敏感性的影响及相关作用机制。方法培养人鼻咽癌HNE1细胞及耐CDDP的HNE1/CDDP细胞,噻唑蓝(MTT)法检测HNE1/CDDP细胞对于CDDP的耐药指数;采用反转录PCR检测miR-129-1-3p和WEE1蛋白激酶在两种细胞的表达水平。采用脂质体法将miR-129-1-3p模拟物(miR-129-1-3p mimics)和阴性对照RNA(miR-NC)转染HNE1/CDDP细胞,并设立对照组。MTT法检测转染后HNE1/CDDP细胞对CDDP的半数抑制浓度(IC50)变化,Western blot法检测转染后各组细胞WEE1蛋白水平,双荧光素酶实验评价miR-129-1-3p对WEE1的靶向调控作用。结果HNE1/CDDP细胞对于CDDP的耐药指数为5.29。HNE1细胞中的miR-129-1-3p水平高于耐CDDP的HNE1/CDDP细胞,WEE1 mRNA水平低于耐CDDP的HNE1/CDDP细胞,miR-129-1-3p水平与WEE1 mRNA水平呈负相关(r=-0.9784)。与其余两组相比,miR-129-1-3p mimics转染后,HNE1/CDDP细胞对CDDP的IC50明显降低,WEE1的蛋白水平也明显降低。双荧光素酶实验结果显示miR-129-1-3p靶向调控WEE1的3'非翻译区(3'-UTR)。结论miR-129-1-3p通过靶向抑制WEE1表达逆转HNE1/CDDP鼻咽癌细胞CDDP耐药。

关键词： miR-129-1-3p WEE1蛋白激酶鼻咽癌细胞顺铂(CDDP) 耐药

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

鼻咽癌细胞来源外泌体的提取和鉴定

广东医学 2016年第2期37卷 191-193页

作者：黄雪琴崔仲宜蒋东辉张月飞罗国庆广东医学院附属医院耳鼻咽喉科广东湛江524001 广东医学院生物化学与分子生物学研究所广东湛江524023

目的从鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1中分离外泌体，并对CNE-2所得外泌体进行鉴定。方法使用ExoQuick—TC（SBI）试剂盒法从鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1培养上清液分离出外泌体，使用透射电镜观察其形态特征，BCA法进行蛋白... 详细信息

目的从鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1中分离外泌体，并对CNE-2所得外泌体进行鉴定。方法使用ExoQuick—TC（SBI）试剂盒法从鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1培养上清液分离出外泌体，使用透射电镜观察其形态特征，BCA法进行蛋白定量，Westernblot进行外泌体特异性抗原分子CD63及筏蛋白-1鉴定。结果3种鼻咽癌细胞系培养上清液中均分离出大量泡状物，透射电镜下观察呈圆形的囊泡，直径为40～130nm，具有完整胞膜。且CNE-2来源的此种泡状物表达外泌体特异性膜筏蛋白-l、CD63。10mL对数生长期CNE-2培养上清液得到487μg／mL（以蛋白计）的外泌体200μL。结论本实验室保存的3种鼻咽癌细胞系很可能均能产生外泌体，ExoQtfick—TC（SBI）法能够简便快速地从鼻咽癌细胞系中提取到外泌体，不需要超速离心，为鼻咽癌的防治研究提供了新的研究方法和靶点。

关键词：鼻咽癌细胞外泌体分离鉴定

潜伏膜蛋白2A嵌合抗原受体-T细胞的制备及对鼻咽癌细胞杀伤作用的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2018年第12期53卷 925-930页

作者：陈渊陈仁杰黄骁辰汤根兄蒯兴旺章明炯张大为唐奇朱进冯振卿南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉头颈外科 200031

目的制备靶向潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein2A,LMP2A)的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-T细胞,观察LMP2ACAR-T细胞体内外对鼻咽癌细胞的杀伤作用。方法2016年9月至2017年12月,本研究以基因工程技术构建抗LMP2A慢病毒表达载体,测序鉴定并通过Western blot法验证抗LMP2ACAR在293T细胞中的表达;通过质粒包装体系制备LMP2ACAR慢病毒,并感染人T细胞,制备LMP2ACAR-T细胞;CCK-8法检测LMP2ACAR-T细胞对鼻咽癌细胞的杀伤作用。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测LMP2A抗原激活后的LMP2ACAR-T细胞白细胞介素(IL)-2与干扰素(IFN)-γ的分泌水平。体内实验观察LMP2ACAR-T细胞对鼻咽癌移植瘤的抑瘤作用。SPSS21.0统计学软件用于统计分析。结果PCR结果显示抗LMP2ACAR片段大小约为1500bp,与理论值相一致,测序显示序列正确;Westernblot结果显示抗LMP2A慢病毒表达载体能在293T细胞中表达;CCK-8法结果发现在效靶比为20∶1、10∶1与5∶1时,LMP2ACAR-T细胞对LV-LMP2A-CNE1细胞的杀伤率分别为(72.11±9.75)%、(54.65±5.42)%与(36.68±3.80)%,与CD19CAR-T细胞、T细胞相比差异有统计学意义(P细胞的杀伤作用与CD19CAR-T细胞和T细胞相比差异无统计学意义;ELISA法结果发现LMP2ACAR-T细胞与LV-LMP2A-CNE1细胞共培养上清中IL-2与IFN-γ的含量,显著高于与CNE1细胞共培养上清,差异具有统计学意义(P细胞组瘤体体积为(80.3±10.0)mm3,显著小于各对照组,差异具有统计学意义(P细胞对LMP2A阳性的鼻咽癌细胞具有显著靶向杀伤效应。

关键词： 293T细胞细胞杀伤作用潜伏膜蛋白2A 鼻咽癌细胞抗原受体制备 Westernblot 嵌合

下调miR-205-5p增强鼻咽癌细胞HNE1/DDP对顺铂诱导凋亡的敏感性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

药学学报 2019年第7期54卷 1200-1206页

作者：赵伟曼董智勇时宗芬鲁星月刘浩张配蚌埠医学院药学院

探讨下调miR-205-5p增强鼻咽癌耐药细胞HNE1/DDP对顺铂诱导凋亡的敏感性及其可能机制。qRT-PCR检测HNE1、HNE1/DDP细胞中miR-205-5p的表达差异及HNE1/DDP细胞转染miR-205-5p抑制剂后miR-205-5p的变化;MTT法检测顺铂(DDP)和miR-205-5p抑制剂对HNE1/DDP或HNE1细胞的增殖抑制作用;PI单染流式技术检测细胞凋亡情况;DAPI染色观察细胞核的形态;Western blot检测Bax、Bak、Mcl-1、Bcl-2蛋白的表达水平。结果显示,相比于HNE1细胞,HNE1/DDP高表达miR-205-5p,转染miR-205-5p抑制剂后其表达明显下降。下调miR-205-5p可显著提高HNE1/DDP细胞对顺铂的敏感性(P细胞对顺铂的诱导凋亡作用。miR-205-5p抑制剂联合DDP (8μmol·L^-1)作用HNE1/DDP细胞24 h的凋亡率为(28.93±2.50)%,相比单用miR-205-5p抑制剂(9.83±1.31)%或DDP的凋亡率(10.83±1.70)%显著升高(P细胞表现为细胞核明显皱缩浓集呈碎片状。miR-205-5p抑制剂与DDP合用能上调Bax的表达和下调Bcl-2的表达。提示下调miR-205-5p可增强HNE1/DDP细胞对DDP的敏感性,其作用机制可能是促凋亡蛋白Bax的升高和抗凋亡蛋白Bcl-2的下降。

关键词：鼻咽癌细胞顺铂 miR-205-5p 耐药性凋亡

吴茱萸碱调控PI3K/AKT信号通路抑制鼻咽癌细胞增殖和诱导凋亡

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

湖南中医药大学学报 2023年第4期43卷 612-618页

作者：郭利培刘洁张文青史红健范婧莹王贤文何迎春湖南中医药大学湖南长沙410208 中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南省中医药防治眼耳鼻咽喉疾病与视功能保护工程技术研究中心湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007

目的研究吴茱萸碱对鼻咽癌5-8F细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法(1)将5-8F细胞分为溶剂对照组、不同浓度吴茱萸碱组(0.5、1.0、2.0、4.0μmol·L^(-1))、顺铂组(cisplatin,4.0μg·mL^(-1));(2)将5-8F细胞设为5组:溶剂对... 详细信息

目的研究吴茱萸碱对鼻咽癌5-8F细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法(1)将5-8F细胞分为溶剂对照组、不同浓度吴茱萸碱组(0.5、1.0、2.0、4.0μmol·L^(-1))、顺铂组(cisplatin,4.0μg·mL^(-1));(2)将5-8F细胞设为5组:溶剂对照组、SC792.5μmol·L^(-1)组、SC79+吴茱萸碱2.0μmol·L^(-1)组、吴茱萸碱2.0μmol·L^(-1)组、LY29400250μmol·L^(-1)组。采用实时无标记细胞功能分析仪(real time cellular analysis technology,RTCA)监测细胞增殖的情况;Annexin V-FITC/PI双荧光染色法检测细胞凋亡率,Hoechest 33342染色法观察细胞凋亡形态;Western blot法检测磷酸肌醇3-激酶蛋白(phosphatidylinositol 3-kiases,PI3K)、磷酸化蛋白质激酶蛋白B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)、增殖细胞核抗原蛋白(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis,XIAP)、存活蛋白(Survivin)的表达水平。结果与溶剂对照组相比,不同浓度吴茱萸碱组(0.5、1.0、2.0、4.0μmol·L^(-1))显著抑制5-8F细胞增殖(P细胞核荧光染色增强,凋亡率明显升高(P细胞增殖和诱导凋亡的效应降低(P鼻咽癌细胞增殖和诱导凋亡。

关键词：鼻咽癌细胞吴茱萸碱增殖凋亡 PI3K/AKT信号通路