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黑龙江两种林蛙吸虫鉴定及感染调查

黑龙江两种林蛙吸虫鉴定及感染调查

作者：姜岩黑龙江八一农垦大学

学位级别：硕士

林蛙是一类具有重要的经济价值的两栖动物。野生林蛙作为国家规定的保护动物,目前已经被禁止非法捕捉利用,因此,人工养殖成为林蛙增殖利用的一个重要途径。然而,林蛙养殖过程中的一些疾病给养殖业带来了很大影响,寄生虫病就是重要的疫... 详细信息

林蛙是一类具有重要的经济价值的两栖动物。野生林蛙作为国家规定的保护动物,目前已经被禁止非法捕捉利用,因此,人工养殖成为林蛙增殖利用的一个重要途径。然而,林蛙养殖过程中的一些疾病给养殖业带来了很大影响,寄生虫病就是重要的疫病之一,特别是吸虫感染已成为影响林蛙养殖的重要因素。关于蛙类寄生吸虫的研究较多,国内报道复殖吸虫有12科24属60余种,但是关于林蛙吸虫感染详细情况还未见报道。本实验从2019年9月至2020年12月,在黑龙江省13个地市19个实验点采集人工养殖林蛙1376只,包括黑龙江林蛙1150只和东北林蛙226只。剖检林蛙收集肺脏、膀胱、肠道的吸虫及肌肉中吸虫囊蚴,应用活体观察和装片制作的方式进行形态学初步鉴定,然后进一步应用核糖体ITS和28S序列进行分子生物学鉴定,并对获得的序列进行序列和进化分析。最后对林蛙感染吸虫的情况进行统计分析。结果共检出吸虫1912条,吸虫囊蚴若干,隶属于7科7属,吸虫成虫6种,囊蚴2种,分别是嗜血吸虫（Haematoloechus variegatus）、刻体吸虫（Glypthelmins quieta）、日本重盘吸虫（Diplodiscus japonicus）、短肠重盘吸虫（Diplodiscus mehrai）、敦化发状吸虫（Gorgodera dunhua）、拟侧殖属吸虫未定种（Pleurogenoides sp.）、咽口属吸虫囊蚴（Pharyngostomum sp.）和缺咽属吸虫囊蚴（Apharyngostrigea sp.）。吸虫成虫寄生在肺脏、肠道和膀胱,吸虫囊蚴寄生于腿部肌肉和肠壁肌肉。其中嗜血吸虫（Haematoloechus variegatus）和刻体吸虫（Glypthelmins quieta）及咽口属吸虫（Pharyngostomum sp.）囊蚴和缺咽属吸虫（Apharyngostrigea sp.）囊蚴为国内首次检出。调查结果显示林蛙吸虫的总感染率是35.9%,黑龙江林蛙和东北林蛙吸虫的感染率分别是36%和35.84%。最大感染强度为83条。统计学分析显示不同地点林蛙吸虫感染率不同,差异极显著性（P＜0.001）,其中双鸭山林蛙感染率最高为62.5%,讷河市的林蛙中未检出吸虫虫体。体重是影响林蛙吸虫感染的重要因素,黑龙江林蛙和东北林蛙不同体重间存在极显著（P＜0.001）或显著性（P＜0.05）的差异,但不同品种和性别间却没有差异。蛙感染吸虫大多为混合感染,最多一只蛙感染4种吸虫,其中以日本重盘吸虫和短肠重盘吸虫为最主要的混合感染方式。短肠重盘吸虫、日本重盘吸虫两种吸虫在两种林蛙体内均有寄生,除讷河外所有地区均被检出,感染率分别为26.6%和13.15%,因此这两种吸虫为林蛙的优势吸虫虫种。本研究首次对黑龙江省林蛙吸虫感染情况进行初步调查,共检出6种吸虫和2种吸虫囊蚴,其中2种吸虫和2囊蚴为国内首次检出。日本重盘吸虫和短肠重盘吸虫是黑龙江省林蛙的优势虫种,本研究为黑龙江省养殖林蛙吸虫病的防控提供科学数据。

关键词：吸虫鉴定感染调查黑龙江林蛙东北林蛙黑龙江省

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黑龙江省发展林蛙产业的初步探讨

林业实用技术 2006年第11期 34-35页

作者：张传辉李超东北林业大学哈尔滨150040

中国林蛙(Rana chensinensis),俗称田鸡,又叫哈士蟆,属于两栖纲无尾目蛙科蛙属.据《中药大辞典》记载, 哈士蟆包括2个亚种,即中国林蛙和黑龙江林蛙,主产于黑龙江、辽宁、吉林3省,属国家保护的有重要经济、科学研究价值的两栖动物.它不... 详细信息

中国林蛙(Rana chensinensis),俗称田鸡,又叫哈士蟆,属于两栖纲无尾目蛙科蛙属.据《中药大辞典》记载, 哈士蟆包括2个亚种,即中国林蛙和黑龙江林蛙,主产于黑龙江、辽宁、吉林3省,属国家保护的有重要经济、科学研究价值的两栖动物.它不仅在保护森林方面有很大的作用,而且是一种名贵的滋补保健食品,是食药两用的珍贵蛙种,具有明显的润肺养阴、补肾益精、补脑益智等功能.

关键词：中国林蛙黑龙江省产业科学研究价值滋补保健食品保健功能因子国家保护黑龙江林蛙

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黑龙江省两种林蛙的分布及保护现状

哈尔滨师范大学自然科学学报 2009年第3期25卷 101-103页

作者：佘宽刘鹏哈尔滨师范大学

通过对黑龙江省林蛙资源的调查,确定了东北林蛙(Rana dybowskii)和黑龙江林蛙(Rana amurensis)在黑龙江省的分布范围和栖息生境,同时对黑龙江省林蛙资源的保护现状进行分析,提出种群管理和资源合理利用的建议.

关键词：东北林蛙黑龙江林蛙分布保护

瘦素及LepROT在两种林蛙抗感染中的作用研究

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瘦素及LepROT在两种林蛙抗感染中的作用研究

作者：吴彤哈尔滨师范大学

学位级别：硕士

为了获得瘦素(Leptin,LEP)和瘦素受体叠加转录蛋白(Leptin receptor overlapping transcript,LepROT)以及核转录因子(Nuclear transcription factor kappa B,NF-κB)信号通路在两栖类抗感染中的作用及其机制的相关信息,本研究采用RTPCR技术克隆黑龙江林蛙(Rana amurensis)及东北林蛙(R.dybowskii)的Leptin和LepROT基因并进行生物信息学分析;构建嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)与细菌脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)胁迫下黑龙江林蛙及东北林蛙的感染模型,观察病理解剖变化特征;应用荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Leptin、LepROT和NF-κB的动态表达规律;应用免疫荧光检测技术获得Leptin、LepROT和NF-κB的蛋白表达变化,其主要结果如下:1.克隆黑龙江林蛙和东北林蛙的Leptin、LepROT基因全长编码区,瘦素基因产物长度分别为857 bp和845 bp,均编码173个氨基酸残基,二者核苷酸同源性为96.36%;LepROT基因产物长度均为396 bp,可编码131个氨基酸,核苷酸同源性为96.72%。LepROT在不同物种间保守程度较高,而Leptin基因相对较低。2.构建瘦素基因的重组原核表达载体,诱导重组蛋白的大小为37 KD,免疫家兔后获得多克隆抗体效价为1:20000。3.成功构建Ah和LPS感染模型,对黑龙江林蛙炎症模型的组织切片进行HE染色。发现随着感染时间的延长,心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、皮肤、肌肉和胃组织均出现组织病变现象。4.采用qRT-PCR技术检测实验组和对照组两种林蛙各组织中Leptin、LepROT、NF-κB、IKKα和IKKβm RNA相对表达量的变化。5.免疫荧光检测技术分析发现在Ah和LPS胁迫下两种林蛙肺脏、肾脏、肌肉和胃中瘦素、LepROT和NF-κB分子的表达与qRT-PCR各时间点表达量的趋势基本一致。

关键词：黑龙江林蛙东北林蛙瘦素瘦素受体叠加转录蛋白嗜水气单胞菌

温度对两种林蛙肠道菌群、免疫能力和氧化应激的影响

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温度对两种林蛙肠道菌群、免疫能力和氧化应激的影响

作者：周爽哈尔滨师范大学

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温度作为一种重要的环境因子,可以改变气流、降水,从而直接或者间接的作用于广泛分布的动物,并对动物个体的健康和群体的稳定产生持续的影响。目前,全球气候变暖导致的温度升高是两栖类面临的主要威胁,但不同物种对温度升高的响应策略... 详细信息

温度作为一种重要的环境因子,可以改变气流、降水,从而直接或者间接的作用于广泛分布的动物,并对动物个体的健康和群体的稳定产生持续的影响。目前,全球气候变暖导致的温度升高是两栖类面临的主要威胁,但不同物种对温度升高的响应策略和响应机制尚不明确。本文以东北地区寒冷气候条件下的东北林蛙（Ranadybowskii）和黑龙江林蛙（Ranaamurensis）为研究对象,分析不同温度（低温、常温和高温）环境下两种林蛙肠道菌群、免疫能力和氧化应激的变化,为两种林蛙的养殖和保护提供重要科学依据。本研究的主要结果如下:1.温度能够改变两种林蛙的肠道主要菌群的种类和丰度。例如低温和高温都会减少东北林蛙和黑龙江林蛙的丛毛单胞菌属（Comamonas）的丰度,高温还会增加假单胞菌属（Pseudomonadaceaeseudomonas）的丰度。但与东北林蛙不同,高温还会导致黑龙江林蛙肠道菌群中瘤胃球菌属（Ruminococcus）和脱硫弧菌属（Desulfovibrio）丰度的降低。但温度并不会改变两种林蛙肠道菌群的整体的多样性。2.高温会导致两种林蛙免疫能力的提高,两者的溶菌酶含量和淋巴细胞百分比均有所提高。同时,与东北林蛙相比,高温还会导致黑龙江林蛙嗜酸性粒细胞减少,对嗜水气单胞菌的血清杀菌能力下降,植物血球凝集素反应峰值提前（从12 h提前到到6 h）,表明黑龙江林蛙的免疫能力对高温更敏感。3.温度升高导致两种林蛙氧化损伤增加,抗氧化系统被破坏。两种林蛙的CAT随着温度的升高而降低,SOD活性均是先随着温度的升高而升高,再随着温度的升高而降低,MDA含量在处理开始时随着温度的升高而降低,但随着处理时间的延长,MDA含量随着温度的升高而上升,而且黑龙江林蛙MDA含量开始增加的时间比东北林蛙更早。说明黑龙江林蛙要比东北林蛙更早的出现了氧化损伤。由此可知,温度的改变均可以对东北林蛙和黑龙江林蛙的肠道菌群、免疫学参数和氧化应激水平产生一定的影响,且黑龙江林蛙要比东北林蛙更容易受到高温的诱导并做出反应,推测该物种在高温环境下会面临着更加严峻的生存压力,更容易受到寄生虫、嗜水气单胞菌等致病菌的感染,因此,应进一步加大有关研究力度。

关键词：东北林蛙黑龙江林蛙肠道菌群免疫氧化应激

黑龙江省林蛙产业发展座谈会在黑龙江水产研究所召开

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科学养鱼 2021年第1期43卷 85-85页

作者：无黑龙江水产研究所

为全面落实农业农村部和国家林业与草原局联合发布的将"黑斑蛙、棘胸蛙、棘腹蛙、中国林蛙(东北林蛙)、黑龙江林蛙等相关蛙类列入水生动物管理"的有关决定,进一步促进黑龙江省林蛙产业"政、产、学、研"协同创新和高质量发展,日前,由黑... 详细信息

为全面落实农业农村部和国家林业与草原局联合发布的将"黑斑蛙、棘胸蛙、棘腹蛙、中国林蛙(东北林蛙)、黑龙江林蛙等相关蛙类列入水生动物管理"的有关决定,进一步促进黑龙江省林蛙产业"政、产、学、研"协同创新和高质量发展,日前,由黑龙江水产研究所组织的"黑龙江省林蛙产业发展座谈会"在所本部召开。会议围绕林蛙产业发展形势与政策、黑龙江省林蛙产业现状、林蛙生态保护和健康养殖等内容进行了深入研讨和交流。

关键词：协同创新水产研究所形势与政策黑龙江林蛙生态保护东北林蛙中国林蛙健康养殖

东北产中国林蛙——哈士蟆的染色体组型的初步报道

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Current Zoology 1982年第1期28卷 23-27页

作者：吴政安中国科学院发育生物学研究所

东北产的中国林蛙——即哈士蟆,是具有重要经济价值的两栖类动物之一。其输卵管可加工制成富含蛋白质、脂肪、糖类、多种维生素和激素的哈士蟆油,是一种享有盛誉的滋补强壮剂,能治精力耗损及神经衰弱等疾病。然而,对于哈士蟆本身的生物... 详细信息

东北产的中国林蛙——即哈士蟆,是具有重要经济价值的两栖类动物之一。其输卵管可加工制成富含蛋白质、脂肪、糖类、多种维生素和激素的哈士蟆油,是一种享有盛誉的滋补强壮剂,能治精力耗损及神经衰弱等疾病。然而,对于哈士蟆本身的生物学,从它的分类学地位乃至其他基本的生物学资料,至今仍然缺乏了解。

关键词：中国林蛙北京染色体组型哈士蟆黑龙江林蛙东北

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生物化学与生物物理进展 1990年第4期 295-301+310-329页

动物饲养,投资少,见效快,是农村致富的有效途径。本培训班由养殖专家授课辅导,理论与实践相结合。通过学习,学员可掌握所学动物的饲养、繁殖、加工、疾病防治等一整套养殖技术,达到独立饲养水平。一、白玉蜗牛养殖技术:蜗牛肉是高蛋白... 详细信息

动物饲养,投资少,见效快,是农村致富的有效途径。本培训班由养殖专家授课辅导,理论与实践相结合。通过学习,学员可掌握所学动物的饲养、繁殖、加工、疾病防治等一整套养殖技术,达到独立饲养水平。一、白玉蜗牛养殖技术:蜗牛肉是高蛋白低脂肪的美味佳肴,不仅可出口创汇,而且内脏可提取蜗牛酶,壳可做饲料添加剂,投资600元,年获利万元以上。每只蜗牛年繁殖600—1000只,半年即可出售,包销价每公斤4O元,引种处签订1—3年包销合同。面授80元,函授40元。

关键词：邮政编码技术研究所资料费哈士蟆黑龙江林蛙信箱北京市李群群论白玉蜗牛包销合同

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中国林蛙养殖高产技术 1