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细胞焦亡在黄病毒致病机制中的作用

微生物学报 2022年第2期62卷 476-488页

作者：张琛宋正然王培刚首都医科大学基础医学院病原生物学系微生物教研室北京100069

黄病毒(flavivirus)是一类具有包膜的单股正链RNA病毒,经蚊虫叮咬传播,是新发突发传染性疾病的重要病原体,严重威胁着人类健康。尽管不同黄病毒引起的临床疾病不同,但是它们的临床症状却有一些相似之处,发热是黄病毒感染后最常见的症状... 详细信息

黄病毒(flavivirus)是一类具有包膜的单股正链RNA病毒,经蚊虫叮咬传播,是新发突发传染性疾病的重要病原体,严重威胁着人类健康。尽管不同黄病毒引起的临床疾病不同,但是它们的临床症状却有一些相似之处,发热是黄病毒感染后最常见的症状,而且往往表现为高热。研究发现,寨卡病毒和日本脑炎病毒感染中存在胱天蛋白酶1(caspase1)依赖的炎性反应,而这一过程与细胞焦亡(pyroptosis)的部分机制相吻合。细胞焦亡是一种依赖于胱天蛋白酶(caspases)的炎性细胞程序性死亡类型,其特征有焦孔素(gasdermin)介导的孔形成、细胞肿胀破裂和炎性细胞因子释放。本文对黄病毒感染引起的固有免疫中巨噬细胞的焦亡现象进行综述,对细胞焦亡的分子机制、细胞焦亡的重要组分作用进行总结,分析了细胞焦亡与代表性黄病毒之间的关系,以期为细胞焦亡在黄病毒致病机制的后续研究提供参考,为抗病毒感染治疗提供新的思路。

关键词：黄病毒病毒感染细胞焦亡半胱天冬酶焦孔素D

2011和2019年甘肃省库蚊黄病毒分子遗传进化特征

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中华实验和临床病毒学杂志 2022年第2期36卷 183-188页

作者：李彬查冰付士红徐学平应思超聂凯李兴洲王环宇梁国栋佳木斯大学公共卫生学院佳木斯154007 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所虫媒室传染病预防控制国家重点实验室北京100052

目的揭示2011年和2019年甘肃蚊虫中库蚊黄病毒的分子遗传差异。方法使用逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)获得甘肃2011年和2019年蚊虫中库蚊黄病毒基因组核苷酸序列,利用病毒分子生物学和... 详细信息

目的揭示2011年和2019年甘肃蚊虫中库蚊黄病毒的分子遗传差异。方法使用逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)获得甘肃2011年和2019年蚊虫中库蚊黄病毒基因组核苷酸序列,利用病毒分子生物学和生物信息学方法分析病毒基因差异。结果共获得10株库蚊黄病毒基因核苷酸序列,包括2011年8株(均来自于淡色库蚊)、2019年2株(来自三带喙库蚊和中华按蚊)。病毒E基因核苷酸与氨基酸序列同源性分析结果显示,甘肃2019年分离的病毒与2011年分离病毒核苷酸序列相似性98.4%~100%,氨基酸相似性95.4%~97.3%。库蚊黄病毒E基因序列系统进化分析结果显示,2019年甘肃分离的2株库蚊黄病毒(GS1975和GS1976)与2011年的8株库蚊黄病毒均属于基因1型B组库蚊黄病毒;2019年分离的GS1975病毒与我国辽宁(2010年和2011年)和内蒙(2018年)分离病毒处在共同的进化簇,而2019年分离的GS1976病毒与我国内蒙(2018年)和甘肃2011年分离病毒形成共同进化簇。结论甘肃2011年和2019年分离的库蚊黄病毒均属于基因1型病毒,2019年分离的2株病毒分布在不同的进化簇,随着时间的推移当地库蚊黄病毒基因组在发生变化,为此需要开展当地库蚊黄病毒分子差异的长期监测。

关键词：库蚊黄病毒系统进化分析

五种蚊媒黄病毒荧光定量检测方法的建立与应用

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五种蚊媒黄病毒荧光定量检测方法的建立与应用

作者：金鑫沈阳农业大学

学位级别：硕士

蚊(Mosquito)作为一种重要的医学昆虫,其种类繁多、分布范围广。我国从南至北几乎均有蚊类分布,全国已发现的蚊共有400余种。蚊可携带并传播多种人兽共患病病原,严重威胁人与动物的健康。近30年来以西尼罗病毒、登革病毒、基孔肯雅病毒... 详细信息

蚊(Mosquito)作为一种重要的医学昆虫,其种类繁多、分布范围广。我国从南至北几乎均有蚊类分布,全国已发现的蚊共有400余种。蚊可携带并传播多种人兽共患病病原,严重威胁人与动物的健康。近30年来以西尼罗病毒、登革病毒、基孔肯雅病毒等为代表的蚊媒病毒在世界范围内广泛流行。我国每年都有乙型脑炎病毒、登革病毒的感染病例发生,还曾于新疆自治区分离到西尼罗病毒,于贵州省分离到寨卡病毒,这也反映了我国存在这几种病毒的传播风险。此外,不同蚊种所携带的病原区别较大,伊蚊主要传播登革热、黄热病,而乙型脑炎主要由库蚊传播。因此了解我国蚊种分布及蚊所携带病原情况具有重要意义。为了了解近年来我国部分地区蚊登革病毒、寨卡病毒、乙型脑炎病毒、西尼罗病毒、黄热病毒五种黄病毒属病毒的携带情况,本研究选定登革病毒3’UTR基因、寨卡病毒E基因、乙型脑炎病毒NS1基因、黄热病毒NS5基因、西尼罗病毒E基因作为荧光定量检测所用靶基因。针对选定的靶基因,基于现有研究及序列分析比对结果,设计特异性引物及探针并构建阳性质粒参考品、假病毒阳性质控品。经反应条件优化及引物、探针的浓度筛选建立了多重荧光定量RT-PCR检测方法。经试验证明针对五种病原的多重检测方法各引物、探针之间无非特异扩增;最低检测限均不高于100copies/μL;组内、组间变异系数均低于0.5%;线性关系良好,标准曲线R均大于0.99。本研究于2020至2022年在辽宁、内蒙古、吉林、黑龙江、山西、广东、云南、上海等八省(市)自治区92个采样点采用灯诱法及人诱法采集蚊样本共计14663只。通过形态学及分子生物学方法共计鉴定出包括里海伊蚊、刺扰伊蚊、背点伊蚊、白纹伊蚊、丛林伊蚊、凶小库蚊、三带喙库蚊、迷走库蚊、淡色库蚊、库态按蚊、米赛按蚊、中华按蚊、骚扰阿蚊在内的4属13种。应用已建立的多重荧光定量检测方法对所采集的蚊核酸样本进行抽样检测,共计检测471份蚊核酸样本。结果显示寨卡病毒、黄热病毒、乙型脑炎病毒、西尼罗病毒均呈阴性,在2020年采集于云南省的白纹伊蚊中检测出1例登革病毒阳性样本,提示该地区可能存在登革热病毒感染风险。综上,该多重荧光定量RT-PCR检测方法的建立为五种病毒的快速检测增加了可供选择的新方案,具有较高的应用价值。所获得的流行病学数据为我国五种病毒的防控提供了一定参考。

关键词：黄病毒蚊蚊媒病毒荧光定量RT-PCR

CODEHOP RT-PCR技术在黄病毒属病毒筛查中应用

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病毒学报 2014年第2期30卷 171-176页

作者：胡群郑剑宁马思杰韩辉孙肖红大榭出入境检验检疫局宁波315812 中国检验检疫科学研究院北京100123

为了探讨CODEHOP RT-PCR技术在黄病毒属病毒筛查中的应用效果,根据GenBank发表的不同黄病毒多聚蛋白氨基酸序列,利用CODEHOP方法设计合成一对简并引物,用一步RT-PCR对乙型脑炎病毒株JEV1201、登革热病毒株JKD001和黄热疫苗YV6161进行检... 详细信息

为了探讨CODEHOP RT-PCR技术在黄病毒属病毒筛查中的应用效果,根据GenBank发表的不同黄病毒多聚蛋白氨基酸序列,利用CODEHOP方法设计合成一对简并引物,用一步RT-PCR对乙型脑炎病毒株JEV1201、登革热病毒株JKD001和黄热疫苗YV6161进行检测,扩增产物测序后进行BLAST同源性比对和系统分生分析。结果显示该方法可以特异的对黄病毒进行扩增,目的片段的大小和序列与预期结果相符,JEV1201与乙脑病毒株YL2009-4/YC2009-3同源性最为接近,位于乙脑病毒株进化树分支。JKD001与登革热病毒株DENV-2/ID/1022DN/1975同源性最为接近,位于登革热病毒株进化树分支。YV6161与黄热病病毒株17D同源性最为接近,位于黄热病病毒株进化树分支。由此可知CODEHOP RT-PCR技术可以被有效的用于对黄病毒属病毒的筛查、种类鉴定和分子溯源。

关键词：黄病毒检测 CODEHOP RT-PCR

黄病毒NS2B-NS3pro蛋白酶的结构研究进展

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微生物学报 2019年第4期59卷 601-611页

作者：武晨杨海涛王泽方天津大学生命科学学院天津300072

黄病毒能引起严重的人类疾病,但是并无特定药物来治疗病毒感染。黄病毒非结构蛋白NS3的N端区域及其辅因子NS2B构成蛋白酶,该酶切割病毒的多聚蛋白形成成熟的结构蛋白和非结构蛋白来帮助病毒完成增殖过程。NS2B-NS3pro蛋白酶在黄病毒生... 详细信息

黄病毒能引起严重的人类疾病,但是并无特定药物来治疗病毒感染。黄病毒非结构蛋白NS3的N端区域及其辅因子NS2B构成蛋白酶,该酶切割病毒的多聚蛋白形成成熟的结构蛋白和非结构蛋白来帮助病毒完成增殖过程。NS2B-NS3pro蛋白酶在黄病毒生命周期中起关键的作用,使之成为抗病毒药物研发的重要靶标。本文综述了黄病毒属中寨卡病毒、登革热病毒、西尼罗病毒的NS2B-NS3pro蛋白酶结构的研究进展,并介绍了相关抑制剂与蛋白酶形成的复合物结构,以期为研发抗黄病毒药物提供必要的参考。

关键词：黄病毒蛋白酶抑制剂晶体结构

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主要黄病毒E蛋白抗原表位分析与初步鉴定

中华流行病学杂志 2009年第5期30卷 489-492页

作者：徐晓立杨建军任瑞文刘建伟马四辈白志军方美玉华南农业大学测试中心广州510642 塔里木大学动物科学学院广州军区疾病预防控制中心

目的对主要黄病毒结构蛋白的抗原表位情况进行系统分析，鉴别共同及特异性抗原表位并对可能的特异性抗原表位进行原核表达。方法分别利用DNAStar及ANTHEPROT软件对登革病毒1～4型、流行性乙型脑炎（乙脑）病毒及黄热病毒E蛋白的亲水性... 详细信息

目的对主要黄病毒结构蛋白的抗原表位情况进行系统分析，鉴别共同及特异性抗原表位并对可能的特异性抗原表位进行原核表达。方法分别利用DNAStar及ANTHEPROT软件对登革病毒1～4型、流行性乙型脑炎（乙脑）病毒及黄热病毒E蛋白的亲水性、抗原性、可塑性、表面可及性和Gamier-Robson的二级结构进行分析，预测可能的抗原表位。在此基础上，根据表位位置和氨基酸序列的相似性，分析6种病毒的共有及特异性抗原表位，并参考GenBank中的序列信息，对预测的抗原表位进行比对，进一步分析抗原表位在不同病毒株中的保守性。然后利用pET32及pMAL-c2x系统对可能的特异性抗原表位进行高效原核表达、Westernblot验证其抗原性。结果经系统的生物信息学分析，共预测获得登革病毒1～4型、乙脑病毒及黄热病毒共有抗原表位15个，病毒特异性抗原表位47个。利用pET32及pMAL-c2x系统对6种病毒部分可能的特异性抗原表位进行了高效表达。Westemblot结果显示登革病毒1型及2型表达抗原片段表现良好的抗原反应原性，并与试验中所用其他黄病毒及甲病毒多克隆抗体无明显的交叉反应。而所表达的登革病毒3型和4型、乙脑病毒及黄热病毒片段无抗原反应原性。结论6条原核表达抗原片段经Westernblot验证，获得登革病毒1型和2型特异性抗原片段。

关键词：黄病毒抗原表位原核表达

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家禽黄病毒疫病流行现状与防控

兽药市场指南 2022年第8期 27-32页

作者：陈巨清安志猛石家庄市牧工商望都县动物疫病预防控制中心2

一、概念家禽黄病毒疫病(Tembusu virus disease)是由坦布苏病毒引起的的一种传染病,是一种急性、热性传染病,主要危害鸭、鹅,鸡也可发病。感染该病的蛋鸭通常会引起严重的产蛋率下降、共济失调,卵巢出血、发炎等现象。此外,从发病麻雀... 详细信息

一、概念家禽黄病毒疫病(Tembusu virus disease)是由坦布苏病毒引起的的一种传染病,是一种急性、热性传染病,主要危害鸭、鹅,鸡也可发病。感染该病的蛋鸭通常会引起严重的产蛋率下降、共济失调,卵巢出血、发炎等现象。此外,从发病麻雀中也可分离到坦布苏病毒。蚊虫在本病的传播上起重要作用,但不是唯一传播途径媒介,本病在夏季的发病率显著高于其他季节。

关键词：热性传染病疫病流行坦布苏病毒共济失调黄病毒产蛋率下降蛋鸭家禽

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黄病毒对细胞凋亡的调控作用

病毒学报 2019年第4期35卷 685-692页

作者：潘钰虹张兴翠贾仁勇四川农业大学禽病防治研究中心成都611130 四川农业大学预防兽医研究所成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室成都611130

细胞凋亡是一种程序性细胞死亡方式,主要通过清除受损或不必要的细胞来维持细胞稳态。黄病毒对细胞凋亡的调节十分复杂,一方面病毒通过抑制细胞凋亡实现病毒在体内的有效增殖,另一方面宿主又能促进细胞凋亡抑制病毒增殖,进而阻断病毒传... 详细信息

细胞凋亡是一种程序性细胞死亡方式,主要通过清除受损或不必要的细胞来维持细胞稳态。黄病毒对细胞凋亡的调节十分复杂,一方面病毒通过抑制细胞凋亡实现病毒在体内的有效增殖,另一方面宿主又能促进细胞凋亡抑制病毒增殖,进而阻断病毒传播。目前黄病毒与细胞凋亡的关系受到学者高度关注,本文对黄病毒的流行概况、结构与功能、黄病毒感染细胞及黄病毒与相关蛋白对细胞凋亡的调控进行了综述,以期为研究黄病毒的致病机理提供理论依据。

关键词：黄病毒细胞凋亡信号通路

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黄病毒入侵中枢神经系统的分子机制研究进展

华中农业大学学报 2021年第4期40卷 85-93页

作者：陈浩威崔旻华中农业大学动物医学院/农业微生物学国家重点实验室武汉430070

临床上黄病毒可以引起中枢神经系统(central nervous system,CNS)疾病,易造成神经系统的后遗症。黄病毒可以通过血源性途径、特洛伊木马途径和神经轴突转运的方式跨越血脑屏障(blood brain barrier,BBB)。病毒穿越BBB进入CNS后,被病毒... 详细信息

临床上黄病毒可以引起中枢神经系统(central nervous system,CNS)疾病,易造成神经系统的后遗症。黄病毒可以通过血源性途径、特洛伊木马途径和神经轴突转运的方式跨越血脑屏障(blood brain barrier,BBB)。病毒穿越BBB进入CNS后,被病毒激活的内皮细胞、胶质细胞和神经细胞会释放大量的炎性因子和上调表达黏附分子,将白细胞募集到CNS,白细胞浸润携带更多病毒进入CNS。普遍认为胶质细胞和神经细胞产生的炎性因子是导致BBB通透性增大的主要诱因。本文对黄病毒破坏BBB入侵CNS的分子机制研究进展进行综述,以便更好地了解黄病毒的致病机制,更有效地防范黄病毒的蔓延。

关键词：黄病毒血脑屏障内皮细胞血液途径特洛伊木马途径神经炎症嗜神经性病毒虫媒传播疾病