检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

黄瓜疫霉菌生防菌的筛选与培养基优化

黄瓜疫霉菌生防菌的筛选与培养基优化

作者：张涛湖南农业大学

学位级别：硕士

本实验采用平板稀释法从土壤中分离到106株放线菌,采用平板对峙法和菌丝生长速率法相结合,筛选到7株放线菌对黄瓜疫霉病菌（Phytophthra melonis）有拮抗作用,其中以N039的抑菌作用最强,其发酵液稀释5倍对黄瓜疫霉病菌菌丝生长的抑制率... 详细信息

本实验采用平板稀释法从土壤中分离到106株放线菌,采用平板对峙法和菌丝生长速率法相结合,筛选到7株放线菌对黄瓜疫霉病菌（Phytophthra melonis）有拮抗作用,其中以N039的抑菌作用最强,其发酵液稀释5倍对黄瓜疫霉病菌菌丝生长的抑制率达到80.4%。该菌株对烟草黑胫病菌（Phytophthora parasitica）、辣椒疫霉病菌（Phytophthora capsici）、油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）柑橘炭疽病菌（Colletotrichum gloeosprioides）和稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）等都表现出不同程度的抑菌作用,抑菌率为55%～75%。利用16S rDNA的通用引物对N039基因组DNA进行PCR扩增,并进行测序。在NCBI中进行BLAST比对,结果发现N039与链霉菌多个种的序列同源性都高达99%,结合培养特征、形态学特征和生理生化特征,初步判断其为华丽黄链霉菌（Streptomyces flaveus）。通过碳氮源单因子变量法和正交设计实验对菌株N039进行发酵培养基的成分研究,结果表明：最佳碳源是葡萄糖,最佳氮源是蛋白胨,其最佳的发酵培养基为20g葡萄糖、11g蛋白胨、2g CaCO3、2g NaCl、水1000m L、28℃、pH7。经优化后,菌丝生长抑制率最高达到86.5%,比优化前提高了5.1%。该研究结果为利用N039菌株对黄瓜疫病进行生物防治提供了科学依据。

关键词：黄瓜疫霉菌生物防治 16SrDNA

黄瓜疫霉菌拮抗菌株的筛选、鉴定及拮抗物质的初步分析

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

黄瓜疫霉菌拮抗菌株的筛选、鉴定及拮抗物质的初步分析

作者：孙莉湖南农业大学

学位级别：硕士

黄瓜疫病(Cucumber phytophthora blight)是黄瓜疫霉菌(Phytophthora melonis)引起的一种对黄瓜影响较大的土传病害,严重影响了黄瓜的生长、产量及品质。目前化学防治效果不佳且存在生态安全问题。因此,筛选、利用有益微生物及其代谢产... 详细信息

黄瓜疫病(Cucumber phytophthora blight)是黄瓜疫霉菌(Phytophthora melonis)引起的一种对黄瓜影响较大的土传病害,严重影响了黄瓜的生长、产量及品质。目前化学防治效果不佳且存在生态安全问题。因此,筛选、利用有益微生物及其代谢产物来防治黄瓜疫病是实施绿色植保的有效措施。本研究将从土壤中分离到的细菌和放线菌与黄瓜疫霉菌进行对峙培养,筛选到2株对黄瓜疫霉菌有明显拮抗作用的生防菌株,对这2株菌株进行了培养性状、生理生化和分子生物学鉴定,并对其中1株拮抗菌进行发酵优化和抑菌活性物质初步分析。主要研究和结果如下：(1)采用土壤稀释法,从采自湖南、北京等地的土壤样品中分离得到269株放线菌和细菌。以黄瓜疫霉菌为靶标菌,通过平板对峙培养法,初步筛选到7株对黄瓜疫霉菌有明显拮抗作用的微生物菌株。经过发酵液稀释5倍后复筛,发现放线菌X54菌株和细菌P3菌株对黄瓜疫霉菌菌丝生长的抑制率达到70%以上。此外,放线菌X54对辣椒炭疽病菌、烟草黑胫病菌、水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌、柑橘炭疽病菌、黄瓜枯萎病菌等都有一定的抑制作用。(2)通过对拮抗菌株X54和P3的培养性状、生理生化特性进行研究,以及利用PCR技术从基因组DNA中扩增16SrRNA序列,并结合生物信息学方法进行分析,初步认为,放线菌X54为弗吉尼亚链霉菌(Streptomyces virginiae),其16SrRNA的登录号KM078926;细菌P3为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),其16SrRNA的登录号KJ872538。(3)对拮抗菌X54进行发酵条件优化,首先对培养基优化,确定其碳氮源的配方：麦芽糖20.0g/L、蛋白胨3.0g/L。再对发酵条件进行单因素以及响应面试验,最终确定对放线菌X54的发酵条件为：种龄37h、温度28℃、转速230r/min、接种量8%、装液量50m1、pH值7.0、发酵时间5d。(4)本研究对放线菌X54产生的抑菌活性物质的传代、酸碱、光照、温度、紫外线这5方面的稳定性进行初步研究,又对其分泌类型、硫酸铵沉淀蛋白质及有机试剂萃取等进行初探。结果表明,活性物质具有较高的遗传稳定性;光照稳定性;能耐高温,可能是非蛋白类物质;在酸碱环境下,稳定性较差,在后期的物质分离纯化等研究中尽量保持pH为7.0;其对紫外线照射不敏感,抑制作用相对稳定。通过物质分泌测试,抑菌活性物质属于胞外分泌型。对X54发酵液做硫酸铵沉淀结果表现抑菌活性物质可能是非蛋白类物质。通过不同极性有机试剂的萃取,发现能易溶于极性较强的甲醇,不溶于氯仿。根据“相似相溶”原理,推断出抑菌活性物质具有一定的极性。

关键词：黄瓜疫霉菌拮抗菌生物学鉴定发酵条件优化抗菌活性物质

三种羧酸酰胺类杀菌剂对黄瓜疫霉菌不同发育阶段的影响及其敏感性测定

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

农药学学报 2010年第2期12卷 168-172页

作者：朱书生陈磊卢晓红李健强刘西莉中国农业大学农学与生物技术学院北京100193 云南农业大学教育部农业生物多样性与病害控制重点实验室昆明650201

离体条件下测定了3种羧酸酰胺类(Carboxylic acid amides,CAAs)杀菌剂氟吗啉、烯酰吗啉和异丙菌胺对黄瓜疫霉菌不同生长发育阶段的抑制作用。结果表明,3种杀菌剂抑制黄瓜疫霉菌休止孢萌发的EC50值分别为0.54,0.46和0.34μg/mL;抑制菌丝... 详细信息

离体条件下测定了3种羧酸酰胺类(Carboxylic acid amides,CAAs)杀菌剂氟吗啉、烯酰吗啉和异丙菌胺对黄瓜疫霉菌不同生长发育阶段的抑制作用。结果表明,3种杀菌剂抑制黄瓜疫霉菌休止孢萌发的EC50值分别为0.54,0.46和0.34μg/mL;抑制菌丝生长的EC50值分别为0.92,0.70和0.67μg/mL;抑制孢子囊形成的EC50值分别为0.48,0.31和0.26μg/mL。但对游动孢子的释放、游动及休止孢的形成均没有抑制作用。氟吗啉、烯酰吗啉和异丙菌胺抑制田间采集的供试菌株菌丝生长的平均EC50值分别为1.09(±0.24),0.29(±0.04)和0.32(±0.07)μg/mL,供试菌株对3种杀菌剂的敏感性均呈正态分布,未检测到抗药性菌株的存在。

关键词：氟吗啉烯酰吗啉异丙菌胺黄瓜疫霉菌生物活性敏感基线

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

湖南省黄瓜疫霉菌的遗传多样性研究

湖南省黄瓜疫霉菌的遗传多样性研究

作者：雷颖湖南农业大学

学位级别：硕士

黄瓜疫病是黄瓜生产中的主要病害之一,是一种毁灭性的土传病害,严重影响了黄瓜的生产,该病主要是由黄瓜疫霉菌（Phytophthora melonis）引起。本研究通过采集湖南省5个黄瓜种植区典型黄瓜疫病症状的植株分离黄瓜疫霉病菌,研究黄瓜疫霉... 详细信息

黄瓜疫病是黄瓜生产中的主要病害之一,是一种毁灭性的土传病害,严重影响了黄瓜的生产,该病主要是由黄瓜疫霉菌（Phytophthora melonis）引起。本研究通过采集湖南省5个黄瓜种植区典型黄瓜疫病症状的植株分离黄瓜疫霉病菌,研究黄瓜疫霉菌的遗传多样性。 1.利用形态学以及分子生物学技术对所分离的黄瓜疫霉菌株进行了鉴定,湖南省5个地区共得到黄瓜疫霉菌株22株,利用斜面保存法以及纸片保存法保存菌种。 2.甲霜灵对分离的黄瓜疫霉菌株毒力测定发现,分离的22个菌株的EC5o值最低值为0.09μg/ml,最高值为0.15μg/ml,平均值达到0.13μg/ml,所分离的黄瓜疫霉菌株均为敏感型菌株,甲霜灵对黄瓜疫霉菌株具有良好的抑制效果。 3.通过离体叶片接种法测定了22株黄瓜疫霉菌株对3个不同黄瓜品种的致病能力,不同来源地菌株的致病性存在一定差异,结果表明,从湖南洪江分离到的菌株致病性最强（HJ-2）,从长沙岳麓区分离到的菌株致病性最弱（CS-3）。 4.利用PCR技术扩增了22个黄瓜疫霉菌株的ITS和P-tubulin序列,分别得到790bp和800bp的DNA片段,测序并与Genbank中下载的相关序列进行比对,构建系统发育树。两种方法构建的系统发育树均表明,黄瓜疫霉与掘氏疫霉（P. drechsleri）分别位于不同的分支,而P. drechsleri与辣椒疫霉（P. capsici）位于同一分支。ITS以及β-tubulin序列构建的系统发育树均能反映出疫霉属不同种的亲缘关系,不同来源地的黄瓜疫霉菌株具有一定的遗传多样性差异,但总的趋势是相同来源地的菌株亲缘关系较近。

关键词：黄瓜疫霉菌 ITS β-微管蛋白抗性致病性系统发育树

防治黄瓜疫霉菌的药剂筛选、复配及增效机理研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

防治黄瓜疫霉菌的药剂筛选、复配及增效机理研究

作者：丁婧湖南农业大学

学位级别：硕士

黄瓜疫病(Cucumber phytophthora blight)是由黄瓜疫霉菌(.Phytophthora meloins)引起的一种毁灭性的土传病害,是黄瓜生产中的主要病害之一,常造成大面积植株烂瓜或死亡,给生产带来严重的损失。使用化学药剂仍然是防治黄瓜疫病的主要手... 详细信息

黄瓜疫病(Cucumber phytophthora blight)是由黄瓜疫霉菌(.Phytophthora meloins)引起的一种毁灭性的土传病害,是黄瓜生产中的主要病害之一,常造成大面积植株烂瓜或死亡,给生产带来严重的损失。使用化学药剂仍然是防治黄瓜疫病的主要手段。本研究筛选了几种作用机理不同的杀菌剂对黄瓜疫霉菌的抑制效果,并进行不同比例的复配,获得有增效作用的组合,并探究其增效的机理。主要研究内容和结果如下几方面：1.测定了甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂肟菌酯、嘧菌酯、醚菌酯,以及酰胺类杀菌剂烯酰吗啉、氟吗啉单剂对黄瓜疫霉菌的抑制作用,有效中浓度(EC50)值分别为130.4714μg/ml、3.1045μg/ml、0.9042μg/ml、0.0891 μg/ml、0.3291μg/ml,再将单剂嘧菌酯与烯酰吗啉、醚菌酯与烯酰吗啉进行复配,发现嘧菌酯：烯酰吗啉1：8时和醚菌酯：烯酰吗啉1：6时产生增效作用。显微镜下观察经在烯酰吗啉0.2μg/ml浓度下、醚菌酯5μg/ml浓度下生长的黄瓜疫霉菌菌丝,其形态均存在不同程度卷曲、断裂、菌丝体膨胀、胞质溶解。在高浓度含药培养基下生长的黄瓜疫霉菌,药剂对菌丝生长的抑制作用具有致死性,而较低浓度下生长的黄瓜疫霉菌接种至正常的培养基后能恢复正常生长。2.、测定了单剂烯酰吗啉和醚菌酯以及二者不同比例的复配后的混剂对黄瓜疫霉菌孢子囊形成以及游动孢子释放的影响,发现烯酰吗啉抑制黄瓜疫霉菌孢子囊形成EC50值为0.57μg/ml,醚菌酯的EC50值为6.38μg/ml,烯酰吗啉相比醚菌酯对黄瓜疫霉菌孢子囊形成具有更强抑制作用。但对于黄瓜疫霉菌游动孢子的释放,烯酰吗啉的效果却远不如醚菌酯,EC50值为22.17μg/ml,而醚菌酯为0.44μg/ml,对黄瓜疫霉菌游动孢子的释放过程表现出强烈抑制作用。3.采用考马斯亮蓝法测定不同处理下黄瓜疫霉菌菌丝的蛋白质含量,发现烯酰吗啉对黄瓜疫霉菌丝体蛋白合成抑制效果略微强于醚菌酯。而醚菌酯和烯酰吗啉复配时,随着烯酰吗啉在混剂中所占比例的增加,混配药剂对黄瓜疫霉菌丝体蛋白质的抑制作用也逐渐增强。4.测定了不同处理下黄瓜疫霉菌菌丝体的电导率,结果表明,烯酰吗啉与醚菌酯在低浓度下对霉菌菌丝体细胞膜的电导率变化值与对照处理接近,但随着药剂浓度的升高以及处理时间的延长,电导率值也表现出不同程度的增大,这可能是由于高浓度或长时间的作用导致细胞膜通透性发生改变,导致细胞内原生质外渗,从而引起电导率增加。混剂中随着烯酰吗啉比例增大,电导率值也增加,说明烯酰吗啉和醚菌酯均能破坏黄瓜疫霉菌的细胞膜通透性,使得菌体细胞内物质的外渗。5.采用氧电极法测定了不同处理对黄瓜疫霉菌菌丝体呼吸代谢作用的影响,发现醚菌酯和烯酰吗啉对黄瓜疫霉菌的呼吸代谢作用都呈正相关增长趋势,随着药剂浓度的增加,黄瓜疫霉菌的呼吸代谢作用受到的影响也随之增强。醚菌酯对黄瓜疫霉菌的呼吸代谢作用影响明显强于烯酰吗啉,烯酰吗啉的影响作用极其微小。

关键词：黄瓜疫霉菌毒力测定孢子囊形成游动孢子释放蛋白质合成抑制电导率值呼吸代谢

黄瓜疫霉菌ITS及β-tubulin的扩增和序列分析

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国农学通报 2015年第32期31卷 48-53页

作者：丁婧吴晓金雷颖易图永湖南农业大学植物保护学院长沙410128 湖南省洪江市农业局湖南黔城418116 植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室长沙410128 湖南省生物农药与制剂加工工程技术研究中心长沙410128

为研究不同来源地黄瓜疫霉菌的系统发育关系以及遗传多样性,从湖南省内5个黄瓜种植区采集具有典型症状的黄瓜疫病病株分离纯化,利用形态学方法观察孢子囊形态。再运用PCR技术分别进行ITS以及β-tubulin扩增测序并与Genbank的中相关序列... 详细信息

为研究不同来源地黄瓜疫霉菌的系统发育关系以及遗传多样性,从湖南省内5个黄瓜种植区采集具有典型症状的黄瓜疫病病株分离纯化,利用形态学方法观察孢子囊形态。再运用PCR技术分别进行ITS以及β-tubulin扩增测序并与Genbank的中相关序列构建系统发育树。经形态学初步鉴定22株黄瓜疫霉菌株,ITS-PCR序列长度约为780 bp,β-tubulin-PCR序列长度约为800 bp,所有测得序列与下载自Genbank的相关序列存在不同程度的相似性。ITS序列的系统发育分析,用于构建系统发育树的序列分为2个大的聚类I和II,黄瓜疫霉菌均位于I组内,由于来源地差异,不同地区的黄瓜疫霉菌又被聚在不同小类;β-tubulin序列在系统发育分析中被分为4个聚类,22个***序列与下载的***序列均在聚类组I中。聚类分析结果表明:疫霉属种群间具有明显的亲缘关系,不同地域的黄瓜疫霉菌遗传多样性表现出差异,但总体趋势是相同来源地的菌株亲缘性比较接近。

关键词：黄瓜疫霉菌遗传多样性系统发育树 ITS β-tubulin 序列分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

黄瓜疫霉菌拮抗菌的筛选与鉴定

黄瓜疫霉菌拮抗菌的筛选与鉴定

中国植物病理学会2012年学术年会

作者：解娜易图永湖南农业大学生物安全科学技术学院植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室植物疾病控制与利用湖南省高校重点实验室

黄瓜疫霉病是黄瓜的重要病害之一,发生时来势凶猛,蔓延迅速,常年造成大面积露地黄瓜死亡,因此对黄瓜的生产影响很大。本研究以黄瓜疫霉菌为指示菌,从湖南、云南等地采取土壤,用土壤稀释法在高氏一号培养基进行土壤放线菌的分离、纯化,... 详细信息

黄瓜疫霉病是黄瓜的重要病害之一,发生时来势凶猛,蔓延迅速,常年造成大面积露地黄瓜死亡,因此对黄瓜的生产影响很大。本研究以黄瓜疫霉菌为指示菌,从湖南、云南等地采取土壤,用土壤稀释法在高氏一号培养基进行土壤放线菌的分离、纯化,利用对峙培养法筛选到6株对黄瓜疫霉菌具有较强拮抗作用的放线菌株,其中G2菌株对黄瓜疫霉病菌有显著抑菌活性。为了进一步获得了对黄瓜疫霉病菌拮抗作用、遗传稳定的生防菌,将经过初筛得到的6株菌用高氏一号液体培养基培养7d,其中该六株菌的5倍发酵稀释液对黄瓜疫霉病菌的菌丝生长抑制率达到84%～77%,;并对水稻稻瘟病菌、辣椒疫霉病菌、烟草黑胫病菌、辣椒炭疽病菌、橘子炭疽病菌也有一定的抑制作用,利用原核生物16S rDNA基因通用引物27F、1492R,进行PCR扩增测序,结果到NCBI进行BLAST,G2与链霉菌多个种的序列同源性都高达99%,在高氏一号培养基上培养和插片法接种的拮抗放线菌在显微镜下观察基内菌丝、气生菌丝形态、孢子的特征和生理生化特征,初步判断其为绛红褐链霉菌（Streptomyces purpeofuscus）。

关键词：黄瓜疫霉菌生防菌 16S rDNA

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

黄瓜疫霉菌拮抗菌的筛选及鉴定

湖南农业科学 2015年第6期 31-34页

作者：周珍向阳解娜易图永湖南农业大学植物保护学院湖南长沙410128 永顺县农业局湖南永顺416700 植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室湖南长沙410128

为更好的防治黄瓜疫病,从湖南、贵州等地采集的土壤样品中分离到放线菌106株,采用平板对峙法及发酵液抑菌试验筛选对黄瓜疫霉菌(Phytophthora melonis)具有拮抗活性的放线菌。结果表明,106株放线菌中有26株对黄瓜疫霉菌有抑制作用,抑菌... 详细信息

为更好的防治黄瓜疫病,从湖南、贵州等地采集的土壤样品中分离到放线菌106株,采用平板对峙法及发酵液抑菌试验筛选对黄瓜疫霉菌(Phytophthora melonis)具有拮抗活性的放线菌。结果表明,106株放线菌中有26株对黄瓜疫霉菌有抑制作用,抑菌带达到5 mm及以上的有5株,其中2号菌株的拮抗作用最明显,发酵液稀释5倍后对黄瓜疫霉菌的菌丝生长抑制率仍达76%。对2号菌株进行培养性状、生理生化特征鉴定及16S r DNA序列分析,初步将其鉴定为绛红褐链霉菌(Streptomyces purpeofuscus)。

关键词：黄瓜疫霉菌 16S r DNA 拮抗放线菌筛选鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

丁子香酚对黄瓜疫霉菌的室内毒力测定

湖南农业科学 2012年第3期 68-70页

作者：杨泓威易图永雷颖戴良英湖南农业大学生物安全科学技术学院湖南长沙410128

黄瓜疫霉病是一种严重危害黄瓜生产的土传病害,筛选对黄瓜疫霉菌有强烈抑制作用的药剂是防治黄瓜疫霉病的主要方法。通过菌丝生长速率法,比较了丁子香酚和嘧肽霉素对黄瓜疫霉菌,以及丁子香酚对黄瓜疫霉菌和稻瘟病菌的室内毒力。对于黄... 详细信息

黄瓜疫霉病是一种严重危害黄瓜生产的土传病害,筛选对黄瓜疫霉菌有强烈抑制作用的药剂是防治黄瓜疫霉病的主要方法。通过菌丝生长速率法,比较了丁子香酚和嘧肽霉素对黄瓜疫霉菌,以及丁子香酚对黄瓜疫霉菌和稻瘟病菌的室内毒力。对于黄瓜疫霉菌,丁子香酚的效果优于嘧肽霉素,EC50值分别为0.622 3和20.673 9 mg/L。而在使用丁子香酚的情况下,对稻瘟病菌的防治效果又好于对黄瓜疫霉菌,其EC50值为0.469 7 mg/L。

关键词：黄瓜疫霉菌丁子香酚毒力测定