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黄山木兰叶片基因组DNA提取方法的比较研究

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分子植物育种 2016年第3期14卷 660-666页

作者：王占军李娇娇张家效徐楠楠欧祖兰徐忠东何子昂沈夏陈延松合肥师范学院生命科学学院合肥230601

以珍贵渐危植物黄山木兰的嫩叶为材料,利用改良CTAB法、SDS法、高盐低p H法和Bio Teke试剂盒法提取基因组DNA,通过超微量紫外分光光度计检测、琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶消化和EST-SSR引物扩增法系统地检测DNA的质量及得率。结果表明... 详细信息

以珍贵渐危植物黄山木兰的嫩叶为材料,利用改良CTAB法、SDS法、高盐低p H法和Bio Teke试剂盒法提取基因组DNA,通过超微量紫外分光光度计检测、琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶消化和EST-SSR引物扩增法系统地检测DNA的质量及得率。结果表明,在DNA纯度和得率方面,改良CTAB法提取的DNA结果最佳,Bio Teke试剂盒法提取的DNA纯度较好但得率较低,SDS法和高盐低p H法提取的DNA有明显的蛋白质杂质、多糖及其他次生代谢物和RNA的污染;酶切消化结果中改良CTAB法和Bio Teke试剂盒法表现良好;EST-SSR引物扩增结果中唯有改良CTAB法提取的DNA扩增目的基因条带数目最多且清晰。综合分析,改良CTAB法是最适合黄山木兰叶片基因组DNA提取的方法。

关键词：黄山木兰叶片基因组DNA 提取方法

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黄山木兰精油对9种植物病原真菌的抑菌活性

浙江林学院学报 2009年第2期26卷 223-227页

作者：史冬辉刘洪波杨小丰张瑜陈安良张立钦浙江林学院林业与生物技术学院浙江临安311300 南京林业大学森林资源与环境学院江苏南京210037

采用生长速率法和番茄Lycopersicon esculentum活体组织法对黄山木兰Magnolia cylindrica精油对植物病原菌的活性进行了测定。离体抑菌实验表明:在500μL.L-1下黄山木兰精油对多种真菌有明显的抑制活性,以对苹果腐烂病菌Valsa mali和小... 详细信息

采用生长速率法和番茄Lycopersicon esculentum活体组织法对黄山木兰Magnolia cylindrica精油对植物病原菌的活性进行了测定。离体抑菌实验表明:在500μL.L-1下黄山木兰精油对多种真菌有明显的抑制活性,以对苹果腐烂病菌Valsa mali和小麦赤霉病菌Fusarium graminerum的抑制率较高,分别为95.23%和93.83%。筛选6种对黄山木兰精油较为敏感的病原真菌进行菌丝生长抑制作用测定,结果表明,黄山木兰对6种真菌的抑制中浓度(EC50)为147.94～223.73μL.L-1,其中对苹果腐烂病菌的活性最强,对油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum的活性最弱。番茄活体组织接种实验表明,1 000μL.L-1的黄山木兰精油对番茄灰霉病Botrytis cinerea的治疗和保护作用优于500μL.L-1的精油溶液和100 mg.L-1的三唑酮溶液。黄山木兰精油具有较强的抑菌活性。

关键词：森林保护学黄山木兰植物精油植物病原真菌抑菌活性

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黄山木兰造林技术

福建林业科技 1999年第1期26卷 74-77页

作者：张纪卯福建省国有来舟林业试验场

黄山木兰在来舟林业试验场引种栽培试验１０余年，结果表明，该树种采种育苗容易掌握，１年生苗高达４０ｃｍ，地径０．７ｃｍ。造林成活率高达９０％，幼林生长快，１０年生时平均高７．５６ｍ，平均胸径８．９２ｃｍ，黄山木兰不仅是... 详细信息

黄山木兰在来舟林业试验场引种栽培试验１０余年，结果表明，该树种采种育苗容易掌握，１年生苗高达４０ｃｍ，地径０．７ｃｍ。造林成活率高达９０％，幼林生长快，１０年生时平均高７．５６ｍ，平均胸径８．９２ｃｍ，黄山木兰不仅是园林绿化的优良树种，而且花蕾可入药，木材又是珍贵用材，因此，对其进行人工造林具有重要意义。

关键词：黄山木兰采种育苗造林抚育

黄山木兰和丹参中具有醌还原酶活性的成分研究

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黄山木兰和丹参中具有醌还原酶活性的成分研究

作者：宋志航浙江大学

学位级别：硕士

醌还原酶(Quinone Reductase:QR)是体内化学预防肿瘤发生的重要二相酶之一,本研究拟从植物中发现具有QR活性的物质。本实验首先对秦皮、丹参、伞花木等数十种植物的提取物进行QR活性的筛选,在此基础上选取黄山木兰(Magnolia cylindrica... 详细信息

醌还原酶(Quinone Reductase:QR)是体内化学预防肿瘤发生的重要二相酶之一,本研究拟从植物中发现具有QR活性的物质。本实验首先对秦皮、丹参、伞花木等数十种植物的提取物进行QR活性的筛选,在此基础上选取黄山木兰(Magnolia cylindrica)提取物二氯甲烷部分和丹参(Salvia miltiorrhiza)水溶性成分提取物进行深入研究。利用现代色谱和鉴定手段从黄山木兰中分离鉴定了8个化合物,多数为木脂素类化合物,分别是syringin、lariciresinol 4-O-glucoside、conicaoside、(+)-syringaresinolO-β-D-glucopyranoside、鹅掌楸树脂酚A、1-(α-L-rhamnosyl(1-6)-β-D-glucopyranosyloxy)-3,4,5-trimethoxybenzene、刺五加苷E和西洋参素L1,以上8个化合物均为首次从该植物中分离得到。丹参水溶性成分提取物主要成分为丹参酚酸B、迷迭香酸、紫草酸,均能与GSH发生结合反应,并用GSH来模拟细胞内化合物与Keap1的结合反应;然而体外QR活性筛选却表明无论是提取物还是上述的单体化合物均显示微弱的OR活性;分析原因认为主要是丹参水溶性成分不易被细胞吸收导致QR活性弱,因此对该部分进行甲基化修饰,发现甲基化修饰后提取物、迷迭香酸、紫草酸甲基化产物QR活性显著提高,并且在细胞内检测到迷迭香酸、紫草酸甲基化产物和它们与GSH结合产物的信号,丹参酚酸B甲基化产物OR活性未有改变,细胞内检测到丹参酚酸B甲基化产物的信号但是体外未发现其与GSH结合产物的信号。

关键词：黄山木兰丹参醌还原酶(QR) 谷胱甘肽(GSH) 结构修饰

黄山木兰-AM真菌共生体发育及对scp1基因表达的影响

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黄山木兰-AM真菌共生体发育及对scp1基因表达的影响

作者：贺淑蕊安徽师范大学

学位级别：硕士

丛枝菌根真菌是最为广泛和古老的真菌之一,能够与植物根部形成共生体,在早期被子植物适应陆地环境中发挥了极其重要的作用。黄山木兰为我国木兰科木兰属的特有植物和珍稀植物。本研究以早期被子植物的代表—黄山木兰和古老真菌的代表—A... 详细信息

丛枝菌根真菌是最为广泛和古老的真菌之一,能够与植物根部形成共生体,在早期被子植物适应陆地环境中发挥了极其重要的作用。黄山木兰为我国木兰科木兰属的特有植物和珍稀植物。本研究以早期被子植物的代表—黄山木兰和古老真菌的代表—AM真菌(Funneliformis mosseae和Funneliformis caledonium温室不同接种处理黄山木兰)为研究对象来探究菌根共生体的发育过程以及菌根特异基因scp1的差异表达,以此来揭示木兰科植物与AM真菌的共生关系和协同进化特征。主要研究结果如下:(1)本研究通过显微定时检测手段,定时检测菌根各器官形态结构规律,明确了黄山木兰菌根共生的基本细胞内结构:典型的“初级菌丝圈串+二级丛枝”发育结构。利用SPSS统计分析软件发现丛枝定殖率与菌丝圈定殖率呈极显著正相关(P黄山木兰根系中典型的Paris-typs菌丝圈共生结构被认为是木兰科植物与AM真菌长期进化中保留的古老协同进化特征。(2)对黄山木兰的生理生化指标分析发现:接种AM真菌处理下黄山木兰根系活力以及根系磷含量基本显著高于未接种处理组,并且AM真菌处理下的黄山木兰根系活力以及根系磷含量最高达0.73μg/(g?h)、12.5μmol/g左右;同时双接种处理下的黄山木兰根系活力和根系磷含量均高于单接种处理组。另外,我们在叶绿体色素指标中发现了同样的影响规律。由此,我们可以认为AM真菌通过促进植物对营养元素的吸收来帮助木兰科植物适应早期的陆生环境。(3)利用改良后CTAB法提取的黄山木兰根系总RNA纯度较高,适合后续的qRT-PCR分子实验。通过qRT-PCR结果来分析不同月份、不同处理方式下黄山木兰根系中scp1基因的差异表达,可以很明显的看出:AM真菌接种处理下黄山木兰根系中scp1基因表达量的比值远高于未接种处理,最高达4.35左右,此外相较于单接种处理,双接种处理下的scp1基因表达也更为活跃。另外,我们发现在9月份之后黄山木兰根系中scp1基因的表达量的比值达到最低(约为0.02),并在此之后未发生大幅度的改变,我们推测是植物适应环境的结果。因此,我们认为scp1基因是木兰科植物在长期的遗传进化中逐渐分化出促进菌根形成的特异基因。基于以上结果我们认为,木兰科植物在与AM真菌的长期共生中仍保留了古老的Paris-type的菌根结构,虽然在长期的协同进化过程中分化出了类似于Arum-type的丛枝结构。这些协同进化特征帮助木兰科植物在复杂的生态环境中得以生存。同时,我们从黄山木兰的生理生化指标以及菌根特异基因scp1的表达结果中发现宿主植物对AM真菌没有专一的喜好性(preference)以及不同真菌种类可以相互促进共生过程,这体现了植物与AM真菌之间长期的协同进化关系。

关键词：丛枝菌根真菌黄山木兰菌根共生体发育 scp1基因协同进化

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黄山木兰

植物杂志 1995年第2期22卷 12-12页

作者：郎楷永

黄山木兰(Magnolia cylindrica)是我国的特有树种,星散分布于长江下游的安徽、湖北、江西、浙江和福建的山地天然林中,由于森林长期过量砍伐以及产地群众每年早春采摘花蕾供药用和践踏幼苗,致使天然更新困难,植株正日益减少,已处于渐危... 详细信息

黄山木兰(Magnolia cylindrica)是我国的特有树种,星散分布于长江下游的安徽、湖北、江西、浙江和福建的山地天然林中,由于森林长期过量砍伐以及产地群众每年早春采摘花蕾供药用和践踏幼苗,致使天然更新困难,植株正日益减少,已处于渐危状态。黄山木兰为木兰科木兰属落叶乔木,高4—10米,胸径10—30厘米;树皮灰白色,光滑;小枝深紫褐色,幼时被绢状毛,后脱落无毛;芽卵圆形,顶端尖,密被灰黄色绵毛。叶在开完花之后才长出,薄纸质。

关键词：黄山木兰珍稀植物木兰科

九龙山自然保护区黄山木兰群落结构特征及其优势种群结构

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浙江林业科技 2010年第1期30卷 1-7页

作者：刘春生章艺刘鹏廖进平张家银刘菊莲康华靖浙江师范大学植物学实验室浙江金华321004 浙江师范大学生态研究所浙江金华321004 衢州学院浙江衢州324000 浙江省九龙山国家级自然保护区管理局浙江遂昌323300 温州科技职业学院浙江温州325006

对浙江省九龙山国家级自然保护区黄山木兰(Magnolia cylindrica)的群落结构特征以及种群结构进行了调查研究。结果表明:黄山木兰群落植被具有热带向温带过渡的性质;群落主要伴生种为多脉青冈(Cyclobalanopsis multinervis);该群落具有... 详细信息

对浙江省九龙山国家级自然保护区黄山木兰(Magnolia cylindrica)的群落结构特征以及种群结构进行了调查研究。结果表明:黄山木兰群落植被具有热带向温带过渡的性质;群落主要伴生种为多脉青冈(Cyclobalanopsis multinervis);该群落具有明显的中亚热带常绿阔叶林特征,以高位芽占绝对的优势,叶的特征以中叶、纸质的单型叶为主;群落成层现象明显,可分为乔木层、灌木层和草本层;群落物种丰富度、多样性、均匀度都偏低;种群结构呈纺锤型,幼苗数量严重不足,种群有衰退的趋势;种群格局呈集群分布。

关键词：黄山木兰群落特征种群结构集群分布

九龙山自然保护区珍稀濒危植物黄山木兰种群生态学研究

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九龙山自然保护区珍稀濒危植物黄山木兰种群生态学研究

作者：刘春生浙江师范大学

学位级别：硕士

本文以我国特有的珍稀濒危植物——黄山木兰(Magnolia cylindrica)为研究对象,在野外调查的基础上,应用数量生态学的方法,从植物区系、群落和种群生态学的角度,对九龙山自然保护区黄山木兰群落进行系统、全面的研究,包括群落特征、物种... 详细信息

本文以我国特有的珍稀濒危植物——黄山木兰(Magnolia cylindrica)为研究对象,在野外调查的基础上,应用数量生态学的方法,从植物区系、群落和种群生态学的角度,对九龙山自然保护区黄山木兰群落进行系统、全面的研究,包括群落特征、物种多样性、种群结构、种群分布格局、种内种间竞争关系、优势种群生态位等。目的在于分析黄山木兰现状及濒危原因,旨在为黄山木兰野生资源的保护和扩大、.营造人工林及可持续利用提供科学依据,也为濒危植物种群生态学的研究提供科学依据。通过上述研究结果的分析,得出以下一些结论：九龙山黄山木兰群落共有维管束植物60种,分属30科46属,其中蕨类植物2科2属3种,单子叶植物1科3属4种,双子叶植物27科41属53种。种子植物属的分布区类型中,属热带分布的属有17属,占总属数的37.778%,温带分布的属有28属,占总属数的62.222%,九龙山黄山木兰群落植被具有热带向温带过渡的性质;群落生活型以高位芽植物占绝对优势,叶的特征以中叶、纸质的单型叶为主;群落成层现象明显,可分为乔木层、灌木层和草本层;群落物种丰富度、多样性、均匀度指数都偏低;群落优势种和伴生种分别为黄山木兰和多脉青冈(Cyclobalanopsis multinervis);依据径级频率分布的形状,将各树种的种群结构归纳为5种类型,并结合生物学、生态学特征,分别讨论其更新类型,随后对群落所处的演替阶段进行了诊断;单峰型的枫香(Liquidamber formosana)、灯台树(Cornus controversa)和云锦杜鹃(Rhododendron fortunei)等阳性高大乔木,为先锋群落优势种或林窗更新种,在演替后期比较稳定的群落中,将最终衰退消失;间歇型的猴头杜鹃(Rhododendron simiarum)、山矾(Symplocos sumuntia)、多脉冬青(Cyclobalanopsis multiervis)等常绿阔叶树种和黄山木兰等落叶阔叶树种,种群结构为不连续生长型,更新具有波动性和机会性,介于顶级群落先锋种和优势种之间;逆-J型的青冈(Cyclobalanopsis glauca)和多脉青冈为强耐荫性的常绿阔叶树种,通过幼苗库和根萌枝进行更新,是顶级群落的优势种;金字塔型的红茴香(Illicium henryi)、尖连蕊茶(Camellia cuspidata)、浙江樟(Cinnamomum chekiangense)、红花油茶(Camellia chekiang-oleosa)和柃木(Eurya japonica)等和单柱型朱砂根(Ardisia crenata)为顶级群落亚乔木层和灌木层的主要组成种;九龙山黄山木兰群落处于顶级阶段的前期,将向双峰型为优势种的群落发展。黄山木兰种群结构呈纺锤型,幼苗严重不足,种群有衰退的趋势;黄山木兰种群更新是以无性繁殖为主;不同样地黄山木兰种群格局都呈集群分布,但不同发育阶段种群,分布格局有所差异：幼苗一般为集群分布,中树和大树向随机分布发展;采用Greig-Smith方法和Kershaw方法,对黄山木兰种群格局强度进行分析,结果显示其格局规模在16m2和32m2之间;黄山木兰种群空间分布格局随海拔上升,聚集强度降低;种群的空间分布格局与生物生态学特性、生境条件关系密切。采用逐步扩大范围法确定对象木的最佳竞争范围,通过对九龙山自然保护区的131株黄山木兰对象木及1107株竞争木的调查,运用改进的竞争指数模型,计算分析了黄山木兰的种内和种间竞争强度。结果表明：在黄山木兰群落中,7m样圆半径是研究黄山木兰种内与种间竞争的最适范围;黄山木兰的种内竞争强度远高于种间竞争强度;竞争强度和对象木胸径的关系服从幂函数关系(CI=AD-B),随着黄山木兰胸径的增大,所受到的竞争压力逐渐减小,当胸径达到30 cm以上时,竞争强度变化不明显。采用生态位定量分析方法对黄山木兰群落乔木层主要种群进行测定,包括生态位宽度和生态位重叠两个指数。结果表明：黄山木兰种群水平生态位宽度显著高于其他种群,多脉青冈、红花油茶、白乳木(Sapium japonicum)、石楠(Photinia serrulata)和荚蒾(Viburnum dilatatum)等种群的水平生态位宽度值较大,多脉冬青、小叶白辛树(Pterostyrax corymbosu)、麂角杜鹃(Rhododendron latoucheae)和秀丽香港四照花(Cornus hongkongensis)的水平生态位宽度值较小;各种群的水平生态位宽度值与重要值呈显著正相关;黄山木兰群落优势乔木种群间水平生态位重叠值较小;多脉青冈的垂直生态位宽度值大于黄山木兰,原因在于黄山木兰林下更新幼苗、幼树少;黄山木兰

关键词：濒危植物群落种群黄山木兰

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黄山木兰育苗技术及幼龄期观察初报

浙江林业科技 1983年第4期 5-6页

作者：陈豪庭郑庆洲浙江省龙泉风阳山自然保护区

黄山木兰(Magnolia cylindrica Wils.)别名野厚朴,为木兰科落叶乔木,高达20余米,胸径50厘米。单叶互生,叶倒披针状长圆形或长圆状披针形,长9～15厘米,宽4～6厘米。先叶开花,两性花,有芳香,单生枝

关键词：黄山木兰林科所浙江龙泉县育苗技术