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南通大学学报（医学版） 2011年第1期31卷 30-32页

作者：陈橼张一心南通大学南通226001 南通大学附属肿瘤医院肝胆外科

目的:利用非液相等电聚焦蛋白质分离技术(FS-IEF)从肝细胞癌(HCC)患者的癌组织的裂解液内提纯热休克蛋白多肽复合物(HSP-PCs)。制备热休克蛋白(HSP)肿瘤疫苗。方法:制备HCC细胞蛋白,经等电聚焦蛋白质分离获得目的蛋白,SDS-PAGE电泳和Wes... 详细信息

目的:利用非液相等电聚焦蛋白质分离技术(FS-IEF)从肝细胞癌(HCC)患者的癌组织的裂解液内提纯热休克蛋白多肽复合物(HSP-PCs)。制备热休克蛋白(HSP)肿瘤疫苗。方法:制备HCC细胞蛋白,经等电聚焦蛋白质分离获得目的蛋白,SDS-PAGE电泳和Western-Blot鉴定为热休克蛋白多肽复合物。利用紫外吸收法测定其浓度。结果:利用FS-IEF从HCC肿瘤细胞裂解液中成功分离提纯出HSP-PCs,分离的富含分子伴侣的细胞裂解物(CRCL)经鉴定为CRT、HSgpP96、HSP90和HSP70。这些分子伴侣蛋白沿pH梯度集中分布于4～7号收集管中,pH跨度为4.4～5.2。1g肝癌组织经液相等电聚焦分离后可产生1000μg的热休克蛋白疫苗。结论:通过非液相等电聚焦蛋白质分离技术可获得纯化的所需量的HSP-PCs。

关键词：肝细胞癌非液相等电聚焦热休克蛋白多肽复合物肿瘤免疫治疗

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