非液相等电聚焦蛋白质分离技术获取人热休克蛋白-多肽复合物

作     者：陈橼 张一心 CHEN Yuan;ZHANG Yixin

作者机构：南通大学南通226001 南通大学附属肿瘤医院肝胆外科 

出 版 物：《南通大学学报（医学版）》 (Journal of Nantong University(Medical sciences))

年 卷 期：2011年第31卷第1期

页      面：30-32页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：江苏省科技厅计划指导课题(BS2004524) 

主　　题：肝细胞癌 非液相等电聚焦 热休克蛋白多肽复合物 肿瘤免疫治疗 

摘      要：目的:利用非液相等电聚焦蛋白质分离技术(FS-IEF)从肝细胞癌(HCC)患者的癌组织的裂解液内提纯热休克蛋白多肽复合物(HSP-PCs)。制备热休克蛋白(HSP)肿瘤疫苗。方法:制备HCC细胞蛋白,经等电聚焦蛋白质分离获得目的蛋白,SDS-PAGE电泳和Western-Blot鉴定为热休克蛋白多肽复合物。利用紫外吸收法测定其浓度。结果:利用FS-IEF从HCC肿瘤细胞裂解液中成功分离提纯出HSP-PCs,分离的富含分子伴侣的细胞裂解物(CRCL)经鉴定为CRT、HSgpP96、HSP90和HSP70。这些分子伴侣蛋白沿pH梯度集中分布于4～7号收集管中,pH跨度为4.4～5.2。1g肝癌组织经液相等电聚焦分离后可产生1000μg的热休克蛋白疫苗。结论:通过非液相等电聚焦蛋白质分离技术可获得纯化的所需量的HSP-PCs。