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间隙连接蛋白在高催乳激素血症大鼠卵巢中的表达及肝脾调控的影响

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时珍国医国药 2018年第1期29卷 30-32页

作者：张泰魏李燕贵阳中医学院贵阳550002

目的运用逍遥散加减方干预高催乳激素血症(HPRL)模型动物,观察其对HPRL大鼠卵巢间隙连接蛋白Cx37/Cx43的影响。方法选取48只性成熟雌性大鼠随机划分6组:正常组,阴性组,阳性组,中药高、中、低剂量组。采用ip甲氧氯普胺制作HPRL模型大鼠,... 详细信息

目的运用逍遥散加减方干预高催乳激素血症(HPRL)模型动物,观察其对HPRL大鼠卵巢间隙连接蛋白Cx37/Cx43的影响。方法选取48只性成熟雌性大鼠随机划分6组:正常组,阴性组,阳性组,中药高、中、低剂量组。采用ip甲氧氯普胺制作HPRL模型大鼠,中药灌胃30天后,取模型动物卵巢,采用蛋白质印迹法检测各组卵巢组织中间隙连接蛋白Cx37、CX43表达的情况。结果与正常组比较,造模组卵巢中缝隙连接蛋白Cx37、CX43表达减少,差异有统计学意义(P间隙连接蛋白Cx37、CX43的表达水平较低,逍遥散加减方具有调节卵巢间隙连接蛋白Cx37、CX43表达的作用,与中药剂量成一定的正比关系。

关键词：间隙连接蛋白高催乳激素血症卵巢肝脾调控

间隙连接蛋白Cx43在骨巨细胞瘤和骨肉瘤中表达的研究

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中华骨科杂志 1998年第11期18卷 675-677,I001页

作者：马兴王全平第四军医大学西京医院全军创伤骨科研究所

目的：探讨间隙连接蛋白Ｃｘ４３与骨肿瘤恶性程度的关系及其生物学意义。方法：应用ＳＰ免疫组织化学法检测Ｃｘ４３在５８例骨巨细胞瘤（ＧＣＴ，按Ｊａｆｅ分级：Ⅰ级１４例、Ⅱ级１８例、Ⅲ级２６例）及２０例骨肉瘤（ＯＳ）中的表... 详细信息

目的：探讨间隙连接蛋白Ｃｘ４３与骨肿瘤恶性程度的关系及其生物学意义。方法：应用ＳＰ免疫组织化学法检测Ｃｘ４３在５８例骨巨细胞瘤（ＧＣＴ，按Ｊａｆｅ分级：Ⅰ级１４例、Ⅱ级１８例、Ⅲ级２６例）及２０例骨肉瘤（ＯＳ）中的表达。结果：Ｃｘ４３蛋白阳性表达定位于骨巨细胞瘤、骨肉瘤细胞的胞浆中和胞膜上。Ｃｘ４３在骨巨细胞瘤Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级和骨肉瘤中的表达阳性率分别为５７．１％、３８．９％、１５．４％和１５．０％。Ｃｘ４３表达阳性率在骨巨细胞瘤Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级中的差异有显著性意义（χ２＝７．６５，Ｐ＜０．０５），并与骨巨细胞瘤恶性进程呈负相关（Ｐｅａｒｓｏｎ列联系数Ｐ＝０．３４，Ｐ＜０．０５）。在骨巨细胞瘤Ⅲ级和骨肉瘤中Ｃｘ４３的表达阳性率差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５）。结论：Ｃｘ４３表达下降，可能是骨肿瘤发生发展的重要环节，为骨肿瘤的研究提供了新途径。

关键词：骨肉瘤巨细胞瘤间隙连接蛋白 Cx43

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间隙连接蛋白43在系统旁观者效应中的作用

上海医学 2002年第6期25卷 350-353页

作者：王驹丁学华蔡如珏朱诚卢亦成第二军医大学长征医院神经外科上海200003

目的　研究细胞间间隙连接蛋白 4 3(connexin4 3,Cx4 3)在单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶基因及更昔洛韦 (HSV tk GCV)系统旁观者效应中的作用 ,探讨旁观者效应的机制。方法　用带tk基因的逆转录病毒载体感染不同Cx4 3表达水平的中国仓鼠卵... 详细信息

目的　研究细胞间间隙连接蛋白 4 3(connexin4 3,Cx4 3)在单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶基因及更昔洛韦 (HSV tk GCV)系统旁观者效应中的作用 ,探讨旁观者效应的机制。方法　用带tk基因的逆转录病毒载体感染不同Cx4 3表达水平的中国仓鼠卵巢细胞 (CHO) ,获得不同Cx4 3表达水平的tk+ 细胞 ,tk+ /tk-细胞按不同比例混合 ,经更昔洛韦 (GCV)作用后 ,用细胞计数检测混合细胞体系的生长抑制率 ,用流式细胞仪检测各组细胞的DNA含量并分析细胞周期。结果　体外实验证实 ,tk+ /tk-混合细胞经GCV作用后生长受抑制的程度与Cx4 3表达水平有关 ,Cx4 3表达水平高的混合细胞在含有 5 %tk+ 细胞时就表现出旁观者效应 ,而Cx4 3表达水平低的混合细胞在含有 2 0 %tk+ 细胞时才表现出明显的旁观者效应。结论　在HSV tk GCV系统的基因治疗过程中。

关键词：间隙连接蛋白旁观者效应基因治疗中国仓鼠卵巢细胞 CHO Cx43 相关性肿瘤

紫草素对慢性皮肤溃疡大鼠间隙连接蛋白家族的蛋白表达及基因表达水平的影响

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中医药信息 2022年第3期39卷 50-54页

作者：杜伟鹏张现峰王晓歌马立人平顶山中医医院河南平顶山467000

目的:探讨紫草素对慢性皮肤溃疡大鼠间隙连接蛋白家族(Cx)的蛋白表达及基因表达水平的影响。方法:SPF级健康SD大鼠42只,选择30只大鼠进行慢性皮肤溃疡造模,筛选造模成功24只大鼠模型进入后续实验,随机分为模型组、紫草素组,每组12只,剩... 详细信息

目的:探讨紫草素对慢性皮肤溃疡大鼠间隙连接蛋白家族(Cx)的蛋白表达及基因表达水平的影响。方法:SPF级健康SD大鼠42只,选择30只大鼠进行慢性皮肤溃疡造模,筛选造模成功24只大鼠模型进入后续实验,随机分为模型组、紫草素组,每组12只,剩余12只未造模大鼠作为假手术组。造模1周后进行药物干预,模型组给予重组牛碱性成纤维细胞生长因子纱条,紫草素组给予4 mg/mL紫草混悬液纱条,假手术组给予等量生理盐水。每日换药1次,连续给药12 d。在干预7、12 d后观察创面愈合情况;干预结束后取溃疡肉芽组织标本,采用HE染色观察病理组织学变化;WesternBlot法检测Cx26、Cx30、Cx43蛋白表达变化;RT-PCR法检测Cx26、Cx30、Cx43 mRNA相对表达情况。结果:与本组干预7 d后比较,模型组、紫草素组大鼠干预12 d后的创面愈合率均升高(P0.05)。HE染色显示,紫草素组干预7、12 d后创面愈合情况均优于模型组。模型组、紫草素组Cx26、Cx30、Cx43蛋白和mRNA表达均低于假手术组(P蛋白和mRNA表达均高于模型组(P<0.05)。结论:紫草素治疗慢性皮肤溃疡大鼠效果明显,可加速创面愈合,其作用机制可能与提高Cx26、Cx32、Cx43水平有关。

关键词：紫草素慢性皮肤溃疡间隙连接蛋白

间隙连接蛋白Cx26、Cx43在膀胱癌的表达及意义

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间隙连接蛋白Cx26、Cx43在膀胱癌的表达及意义

作者：吴传璋南华大学

学位级别：硕士

【目的】研究间隙连接蛋白Cx26和Cx43在正常膀胱上皮和膀胱癌中的表达情况并探讨其与膀胱癌不同分级，分期之间的关系，为膀胱癌的诊断和治疗寻找新的方法。【方法】取正常膀胱上皮组织22例(为我科行肾移植取肾源时所得)，标本经HE染... 详细信息

【目的】研究间隙连接蛋白Cx26和Cx43在正常膀胱上皮和膀胱癌中的表达情况并探讨其与膀胱癌不同分级，分期之间的关系，为膀胱癌的诊断和治疗寻找新的方法。【方法】取正常膀胱上皮组织22例(为我科行肾移植取肾源时所得)，标本经HE染色证实无癌变等病理改变，常规石蜡包埋处理，应用免疫组化SABC法检测常规石蜡包埋处理的22例正常膀胱上皮组织和54例膀胱癌(经病理切片证实为不同分级与分期膀胱癌)中Cx26以及Cx43蛋白的表达水平，分别由两名经验丰富的病理科医师在不知临床和病理资料的情况下独立观察切片(至少5个具有代表性的高倍视野，不少于1000个细胞)，对免疫组织化学结果进行评估。并采用计算机图像分析系统对Cx26、Cx43的表达进行定量分析。【结果】Cx26，Cx43分别高表达于正常标本中移行细胞的胞浆以及胞膜中，其表达阳性率分别为100％和100％，计量检测灰度值分别为82.91±13.83和88.77±10.90，而在膀胱癌中表达明显减低，其表达阳性率分别为37.04％和44.44％，计量检测灰度值分别为134.30±15.92和141.94±13.63，且分布不均匀或异常分布于胞浆或核膜上，两者相比差异具有显著性(p＜0.01)，Cx26，Cx43的阳性表达的定性和定量检测均与膀胱癌恶性程度密切相关(P＜0.01)，而与肿瘤分期无关(P＞0.05)。【结论】1、Cx26、Cx43的表达随着在膀胱肿瘤分级的增高而降低。 2、Cx26、Cx43在膀胱肿瘤中的表达异常可能是膀胱肿瘤发生发展的重要因素之一。

关键词：膀胱移行细胞癌间隙连接蛋白免疫组织化学

间隙连接蛋白43在前列腺癌中的表达和临床意义

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间隙连接蛋白43在前列腺癌中的表达和临床意义

作者：郑久鸣华北煤炭医学院

学位级别：硕士

研究背景前列腺癌是欧美等西方国家最常见的恶性肿瘤,在我国随着人口老龄化、饮食结构调整及诊疗技术水平的提高,其发病率呈逐年升高的趋势,老龄化是前列腺癌的危险因素之一,大于70%的患者确诊时年龄大于65岁。对前列腺癌的治疗,包括... 详细信息

研究背景前列腺癌是欧美等西方国家最常见的恶性肿瘤,在我国随着人口老龄化、饮食结构调整及诊疗技术水平的提高,其发病率呈逐年升高的趋势,老龄化是前列腺癌的危险因素之一,大于70%的患者确诊时年龄大于65岁。对前列腺癌的治疗,包括根治手术、内分泌治疗、放疗、化疗、免疫治疗等,如何选择恰当的治疗方案,避免对患者过度治疗或过于姑息保守,需要根据病例确诊时泌尿科医生对于肿瘤预后的估计。目前,泌尿外科临床医生主要应用前列腺特异性抗原(PSA)作为筛查和诊断前列腺癌的指标,应用Gleason分级评分作为判断前列腺癌恶性程度及预后的指标。但是,上述两个指标均存在着明显的不足:PSA在患良性前列腺增生、前列腺炎、尿道或直肠内侵袭性操作后均可升高,缺乏对前列腺癌的特异性;Gleason分级评分则依赖于病理科诊断医生的经验与水平,以及取材切片的质量,存在一定的主观性和随机性。所以,广大泌尿科及病理科等相关领域的专业人员均致力于寻找一种能够准确提示前列腺癌预后的高特异性、高敏感性、客观的标记物。间隙连接蛋白43(Connexin43 Cx43)是间隙连接蛋白家族中的成员,间隙连接蛋白(Connexin Cx)普遍存在于正常组织细胞中,位于细胞的相邻面,由其组成的连接子是沟通相邻细胞的跨膜通道,在质膜上形成的间隙连接斑关系到间隙连接(gap junction, GJ)和间隙连接细胞间通讯(gap junction intercellular communication ,GJIC)的功能。在肿瘤细胞中普遍存在间隙连接蛋白43表达的异常,某些肿瘤间隙连接蛋白43表达减少,使肿瘤表现为侵袭能力的增强,预后差。研究目的我们通过对我院及开滦医院2005年1月—2008年12月确诊前列腺癌并获随访病例(大于2年)进行实验研究,以探讨前列腺癌患者Cx43表达与前列腺癌患者的血清PSA值、Gleason分级、临床分期、转移及复发的关系,评价其作为前列腺癌预后的生物标记物的临床应用价值。材料与方法将我院及开滦医院2005年1月至2008年12月收治确诊前列腺癌患者并获2年以上随访的病例(共76例)建立临床资料数据库。患者年龄52-86岁,中位年龄71.5岁,临床分期A期11例,B期17例,C期22例,D期26例。血清PSA测定值20ng/ml 41例。病例标本应用Gleason分级,其中高分化癌26例,中分化癌22例,低分化癌28例,标本来源:通过经尿道前列腺电切术(TURP)或经膀胱前列腺摘除术后偶发癌14例,直肠活检确诊47例,根治手术15例。确诊无转移的患者(即临床分期为A+B期,共28例)两年内出现转移9例。确诊两年内进入非激素依赖期29例(以患者血清PSA再度明显升高作为标准)。对照组应用同时期年龄相近的BPH确诊病例20例标本。应用免疫组织化学方法检测76例前列腺癌标本、20例前列腺增生标本中CX43蛋白的表达情况,用统计学方法分析其与血清PSA测定值、GLEASON分级、年龄、临床分期、转移和复发的相关性。结果 1. CX43蛋白阳性染色主要定位在细胞膜和细胞质上,CX43蛋白在前列腺癌中的阳性表达率明显低于前列腺增生(P0.05)。 3.随着术前血清PSA测定值、Gleason分级和临床分期的增高,CX43阳性率明显降低,并且在两年内发生转移病例和进入雄激素非依赖期病例中CX43阳性率极低。(P蛋白在前列腺癌中的表达明显降低。 2. Cx43的阳性表达率与血清PSA测定值、Gleason分级、临床分期呈负相关,并与肿瘤的转移和复发密切相关。 3. Cx43对前列腺癌的发生和转移有抑制作用,可作为反应前列腺癌生物学行为和判定前列腺癌预后的生物学标记。

关键词：间隙连接蛋白 43 前列腺癌预后前列腺特异性抗原生物学标记

间隙连接蛋白Cx43和Cx45在体外受精绵羊早期胚胎中的表达

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中国兽医科学 2007年第1期37卷 83-87页

作者：闫真马玉珍刘东军周平旭日干内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室内蒙古呼和浩特010021

为了研究间隙连接蛋白Cx43和Cx45在体外受精绵羊胚胎早期发育过程各阶段的表达情况,利用RT-PCR扩增得到绵羊Cx43(43 ku)及Cx45(45 ku)基因的mRNA,并进行序列测定。收集绵羊未成熟和成熟卵母细胞以及体外受精早期胚胎各发育阶段的卵裂球... 详细信息

为了研究间隙连接蛋白Cx43和Cx45在体外受精绵羊胚胎早期发育过程各阶段的表达情况,利用RT-PCR扩增得到绵羊Cx43(43 ku)及Cx45(45 ku)基因的mRNA,并进行序列测定。收集绵羊未成熟和成熟卵母细胞以及体外受精早期胚胎各发育阶段的卵裂球细胞,通过RT-PCR半定量检测Cx43和Cx45基因的mRNA表达量;通过免疫组织化学方法结合激光扫描共聚焦显微镜检测Cx43和Cx45蛋白在绵羊体外受精的早期胚胎发育过程中的表达情况及表达区域。结果表明,在绵羊卵母细胞成熟过程以及早期胚胎发育的各个时期,Cx43及Cx45在mRNA水平和蛋白水平均有表达;Cx43、Cx45蛋白主要分布在细胞膜表面,在细胞质和细胞核中表达微弱。研究结果为进一步探索Cx43和Cx45在绵羊早期胚胎发育过程中的作用提供了试验数据。

关键词：间隙连接蛋白表达绵羊早期胚胎发育

间隙连接蛋白CX43在滋养细胞疾病中的表达及其临床价值

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间隙连接蛋白CX43在滋养细胞疾病中的表达及其临床价值

作者：张欣文第四军医大学

学位级别：硕士

目的：滋养细胞疾病有较高的发病率，目前虽在治疗上已取得较为满意的结果，但对其发病机理，恶变相关因素，预后评估等仍不明了，尽管对其发病原因和发病机理进行了多年研究，并提出了若干假设，如胚胎早期死亡、营养障碍、病毒感... 详细信息

目的：滋养细胞疾病有较高的发病率，目前虽在治疗上已取得较为满意的结果，但对其发病机理，恶变相关因素，预后评估等仍不明了，尽管对其发病原因和发病机理进行了多年研究，并提出了若干假设，如胚胎早期死亡、营养障碍、病毒感染、空卵受精、双卵受精等但至今仍未达成共识。滋养细胞疾病绝大部份与妊娠有关，是一组来源于胎盘绒毛滋养细胞的疾病，绒毛滋养细胞来源于受精卵，与胚胎及其细胞有着相同的遗传构成，与母体细胞遗传构成却截然不同，然而滋养细胞能够在母体的子宫壁上侵蚀性生长。与这种现象相似的是，肿瘤细胞的遗传构成与该肿瘤患者正常体细胞的遗传构成有一定的差异，但肿瘤细胞也能在患者体内侵蚀性生长。细胞病理学研究也发现，滋养细胞和肿瘤细胞有着相似的细胞行为和细胞生物学特性，滋养细胞转化为滋养层肿瘤的过程与良性肿瘤转化为恶性肿瘤的过程也有相似之处。因此，研究滋养层向滋养层肿瘤的转化过程，就是为研究肿瘤发生的良好细胞模式。细胞间隙连接通讯（GJIC）是细胞获取外界能量、信息的一种细胞直接的通讯，其连接通道可控制某些离子及小分子物质的通过，因此，参与许多重要的生物学功能，如生长发育、细胞分化等。近年发现，肿瘤和转化细胞普遍存在间隙连接蛋白（CX）表达的异常和GJIC 功能的缺陷，CX表达及GJIC的恢复与肿瘤的生长控制和转化表型的抑制相关，CX基因表现出肿瘤抑制基因的特性。第四军医大学硕士学位论文本实验旨在通过研究CX4 3在滋铀－中的驳、渤CX与滋轴－生的相关队为滋铀胞疾病的治疗尝趴腑的途径。方法：采用单克M SP免疫组化技术和核酸原贱交技大颂IJ 定20例正常早孕绒毛K—10周），42例首刎宫的葡萄胎组织，38 例性葡萄胎，30例绒毛膜癌中CX43的表边情况。结果：正常早孕绒毛帕阳性颗粒定位抽胞滋养细胞的胞浆、赚中，胞核上也可见到，合体滋养细顾问质细胞凡乎不秘。滋轴－中CX43的秘明锨弱，有表达池权局肘细胞膜上，胞核及胞浆中肘不雄。正贪即轴眨肩滋铀－中的CX表达有显著跪义，而滋养细胞疾病问则无显著性意义。铡：硝…中的滋铀肺滋袖－中异常增生的滋轴剧。比，o43的表达有显著跪义，o雄酬氏及oIC功能减弱，可g一滋轴鹏变的因素之一。G！’’’－－’－en43 M虽然弱于葡萄胎，钢一龌异，原固尚待研究，我们榔d：葡萄胎滋铀腑同程度的增生具有—定的异型性，对于具有—定肿瘤细蹦性的滋养哪而言，异躺姐身有可S部苑是GJIC功S腻弱撅的。

关键词：间隙连接蛋白细胞间隙通讯滋养细胞疾病免疫组织化学原位杂交

间隙连接蛋白Cx32与肝癌发生发展的相关性研究

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间隙连接蛋白Cx32与肝癌发生发展的相关性研究

作者：王瑜福建医科大学

学位级别：硕士

目的1.研究Cx32在肝癌组织及配对癌旁组织、正常肝组织中的表达情况，分析其与肝癌生物学行为关系。2.构建针对Cx32基因的siRNA真核表达质粒，从而为Cx32蛋白的分子生物学研究提供基础。3.建立Cx32蛋白稳定敲低的肝癌HepG2细胞株，并分... 详细信息

目的1.研究Cx32在肝癌组织及配对癌旁组织、正常肝组织中的表达情况，分析其与肝癌生物学行为关系。2.构建针对Cx32基因的siRNA真核表达质粒，从而为Cx32蛋白的分子生物学研究提供基础。3.建立Cx32蛋白稳定敲低的肝癌HepG2细胞株，并分析该细胞株生物学行为的改变，初步明确Cx32蛋白在肝癌的发生发展过程中的作用。方法1.应用蛋白质印迹法和逆转录聚合酶链式反应方法检测Cx32在蛋白和mRNA水平在肝癌组织及癌旁组织和正常肝脏组织中的表达水平;通过免疫组化SABC法分别观察HCC组织及癌旁组织和正常肝脏组织中Cx32的表达情况。2.利用基因重组技术，构建Cx32-shRNA真核表达质粒载体。3.转染Cx32-shRNA真核表达质粒载体至肝癌细胞系HepG2细胞中，筛选稳定转染细胞株。4.对构建的稳定表达细胞株进行增殖、侵袭及迁移能力的功能学研究。结果1. Cx32蛋白在正常肝组织、肝癌组织及癌旁组织中的表达均为阳性，且在肝癌组织的蛋白水平及mRNA水平均低于配对癌旁组织。2.Cx32蛋白在正常肝组织定位于细胞膜，分布较为均匀。在肝癌组织中出现胞浆定位。3.肝癌细胞系HepG2细胞转染针对Cx32的siRNA真核表达质粒载体后，转染细胞中Cx32蛋白表达明显降低。4.成功构建Cx32蛋白的稳转干扰细胞株，其增殖、侵袭及迁移能力均有所提高。结论1.由正常肝组织向肝癌发展过程中，Cx32蛋白的表达由胞膜定位逐渐改变为胞浆定位。2.在肝癌组织中，Cx32在蛋白及mRNA水平均降低。3.成功构建了pSil-Cx32重组质粒，建立了稳定的Cx32蛋白降表达的HepG2细胞株。4.干扰Cx32蛋白的表达，可增强肿瘤细胞的增殖、侵袭及迁移能力。

关键词：肝癌间隙连接蛋白细胞转染 RNA 干扰