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长链非编码rna hotair在CKD小鼠肾脏纤维化中的作用及机制研究

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浙江医学 2023年第22期45卷 2357-2362,I0003页

作者：刘琳任燕陈茂盛王敏敏浙江省人民医院(杭州医学院附属人民医院)肾脏病科杭州310014

目的探讨长链非编码rna(lncrna)hotair在慢性肾脏病(CKD)小鼠模型肾脏纤维化中的作用及其机制。方法采用随机数字表法将36只小鼠分为对照组、CKD组、CKD+短发夹rna-对照(sh-Ctrl)组、CKD+短发夹rna-hotair(shhotair)组,每组9只。对照组... 详细信息

目的探讨长链非编码rna(lncrna)hotair在慢性肾脏病(CKD)小鼠模型肾脏纤维化中的作用及其机制。方法采用随机数字表法将36只小鼠分为对照组、CKD组、CKD+短发夹rna-对照(sh-Ctrl)组、CKD+短发夹rna-hotair(shhotair)组,每组9只。对照组喂食正常饲料,其余3组均予0.2%腺嘌呤饲料喂养造模。造模6周后,CKD+sh-Ctrl组和CKD+shhotair组分别予尾静脉注射100μL(10^(11)基因拷贝)包装了对照shrna和hotair-shrna的腺相关病毒,对照组和CKD组予尾静脉注射100μL 0.9%氯化钠注射液。观察8周后处死,检测血清肌酐、尿素氮水平,取肾组织行HE染色和Masson染色观察肾脏纤维化情况。采用qRT-PCR法检测肾皮质hotair、多梳抑制复合体2(PRC2)复合物[Zeste增强子同源物2(EZH2)、Zeste12同源物抑制因子(SUZ12)、胚胎外胚层发育蛋白(EED)]和赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)mrna表达水平,Western blot法检测肾皮质纤维化相关蛋白胶原蛋白1A1(COL1A1)、胶原蛋白4A1(COL4A1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达水平,并检测PRC2复合物和LSD1的蛋白表达水平。结果与对照组比较,CKD组小鼠体重下降、肾功能恶化,出现肾脏纤维化,肾皮质hotair表达升高;与CKD+sh-Ctrl组比较,CKD+sh-hotair组小鼠血清肌酐、尿素氮水平均降低(均Photair表达下降(Prna和蛋白表达水平均升高(均Photair组小鼠COL1A1、COL4A1和α-SMA蛋白表达水平均降低,E-cadherin蛋白表达水平恢复,PRC2复合物中EZH2、EED和LSD1 mrna和蛋白表达水平均下降(均Prna hotair在CKD小鼠模型中表达升高,敲低hotair可缓解肾脏纤维化,可能与hotair作为PRC2和LSD1的分子支架介导的表观遗传修饰相关。

关键词：长链非编码rna hotair 慢性肾脏病纤维化 PRC2复合物

长链非编码rna hotair在急性肝损伤中的表达及其对细胞铁死亡及炎症发生的干预作用

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中国医药 2023年第8期18卷 1200-1204页

作者：史敬东王鹏辉齐中段斌炜首都医科大学附属北京天坛医院普通外科北京100070 首都医科大学附属北京佑安医院普通外科中心器官移植中心北京100069

目的探讨长链非编码rna hotair在急性肝损伤中的表达及其对细胞铁死亡及炎症发生的干预作用。方法选取无特定病原体级C57BL/6小鼠,将小鼠分为对照组、急性肝损伤组、急性肝损伤+hotair对照质粒腺病毒干预组(NC组)、急性肝损伤+hotair过... 详细信息

目的探讨长链非编码rna hotair在急性肝损伤中的表达及其对细胞铁死亡及炎症发生的干预作用。方法选取无特定病原体级C57BL/6小鼠,将小鼠分为对照组、急性肝损伤组、急性肝损伤+hotair对照质粒腺病毒干预组(NC组)、急性肝损伤+hotair过表达腺病毒干预组(OV组)、急性肝损伤+hotair短发夹rna干预组(KD组)、急性肝损伤+hotair过表达腺病毒+Fer-1(一种铁死亡抑制剂)干预组(OV+Fer-1组),急性肝损伤模型通过1%四氯化碳溶液5 ml/(kg·d)的量灌胃得到,对照组小鼠灌胃用等量0.9%氯化钠溶液。比较各组小鼠血清和肝组织中hotair、炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)]、肝损伤标志物(丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶)、铁死亡标志物(Fe^(3+)、谷胱甘肽、丙二醛)水平,观察小鼠肝组织病理变化。结果急性肝损伤组小鼠血清hotair表达水平高于对照组[(2.9±0.6)比(1.1±0.3)](Photair可上调急性肝损伤引起的炎症反应,铁死亡信号通路可能介导了这一作用机制。

关键词：急性肝损伤长链非编码rna hotair 铁死亡

长链非编码rna hotair对HaCaT细胞上皮间质转化的研究

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中华医学美学美容杂志 2023年第1期29卷 54-58页

作者：陈志雄王晨羽张明子刘志飞王晓军南昌大学第二附属医院整形美容科南昌330000 上海市第九人民医院整复外科上海200011 中国医学科学院北京协和医院整形外科北京100730

目的:探讨Lncrna hotair对低氧条件下,HaCaT细胞上皮间质转化的影响。方法:2018年1—12月,在中国医学科学院北京协和医院将HaCaT细胞分成常氧组(A组)、低氧组(B组)、sh-control+低氧组(细胞转染sh-control低氧培养,C组)、sh-hotair+低氧... 详细信息

目的:探讨Lncrna hotair对低氧条件下,HaCaT细胞上皮间质转化的影响。方法:2018年1—12月,在中国医学科学院北京协和医院将HaCaT细胞分成常氧组(A组)、低氧组(B组)、sh-control+低氧组(细胞转染sh-control低氧培养,C组)、sh-hotair+低氧组(细胞转染sh-hotair低氧培养,D组)4个组培养。培养36 h后显微镜下观察细胞形态变化,用qPCR、蛋白质印迹法检测4个组细胞上皮钙黏素和波形蛋白表达,用Transwell法检测细胞迁移情况。结果:qPCR结果,A、B、C、D 4个组上皮钙黏素相对表达量分别为3.076±0.271、1.000±0.089、1.024±0.222、2.595±0.085;波形蛋白相对表达量分别为1.002±0.183、4.170±0.279、4.111±0.477、2.412±0.134。蛋白质印迹结果,4个组上皮钙黏素相对表达量分别为5.748±0.778、0.960±0.263、1.380±0.205、3.026±0.700;波形蛋白相对表达量分别为1.043±0.144、4.074±0.459、4.429±0.530、2.654±0.440。Transwell结果4个组细胞迁移数分别为32.700±3.930、125.400±6.260、120.100±6.790、58.24±7.06。结论:低氧下,上皮细胞发生上皮间质转化,降低Lncrna hotair表达能够抑制上皮间质转化。hotair参与低氧下上皮细胞上皮间质转化过程。

关键词：瘢痕疙瘩上皮细胞长链非编码rna hotair 上皮间质转化

长链非编码rna hotair对胃癌细胞增殖凋亡的影响及可能机制

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长链非编码RNA HOTAIR对胃癌细胞增殖凋亡的影响及可能机制

作者：吴谢慧广西医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨长链非编码rna hotair(Long non-coding rna-hotair,Lncrna-hotair)对胃癌细胞增殖及凋亡的影响及其可能机制。方法:1.将体外培养的人胃腺癌细胞株SGC-7901分为:空白对照组(Blank组)、Lncrna-hotair过表达组和Lncrna-hotair沉默组(si-hotair组),其中空白对照组为单纯的未经转染的人胃腺癌SGC-7901细胞株,Lncrna-hotair过表达组采用慢病毒法转染稳定表达的hotair质粒,hotair基因沉默组采用慢病毒法转染si-hotair质粒,分别与未经转染的空白对照组进行对照试验。2.实时荧光定量法检测各组细胞中Lncrna-hotair表达量。3.CCK8实验、平板克隆形成实验,研究Lncrna-hotair基因过表达或者沉默时对胃癌细胞增殖情况的影响。4.流式细胞术及Caspase3/7活性检测试验,检测Lncrna-hotair过表达或者沉默时对胃癌细胞凋亡情况的影响。5.实时荧光定量法测各组细胞中microrna 126(miR-126)的表达量,验证胃癌细胞中Lncrna-hotair与mirna-126之间的关系。结果:1.Lncrna-hotair过表达组的细胞增殖水平显著高于空白对照组,而凋亡率则低于空白对照组,两组间差异有统计学意义;si-hotair组即hotair基因沉默组细胞的增殖水平显著低于空白对照组,而凋亡率较空白对照组高,两组间其差异具有统计学意义(prna-hotair与miR-126的表达量呈负相关,Lncrna-hotair过表达组的miR-126表达量低于空白对照组,而Lncrna沉默组的miR-126表达量高于空白对照组,两组间差异有统计学意义(prna-hotair可以促进胃癌SGC-7901细胞的增殖并抑制其凋亡,其机制可能与miR-126在胃癌细胞中的表达量有关。

关键词：胃癌长链非编码rna hotair 细胞增殖细胞凋亡微小非编码rna126

舌鳞状细胞癌淋巴结转移与长链非编码rna hotair的关系探讨

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口腔医学研究 2017年第2期33卷 216-220页

作者：朴正国邹瑞汤珊欧阳可雄广州医科大学附属口腔医院·广州口腔病研究所·口腔医学重点实验室

目的:研究hotair在舌鳞状细胞癌中的表达,并探究hotair与舌鳞状细胞癌淋巴结转移的关系。方法:对19例舌鳞状细胞癌患者的癌组织以及其对应的19例癌旁组织进行实时荧光定量PCR检测,检测hotair在癌组织、癌旁组织的相对表达量,把结果与患... 详细信息

目的:研究hotair在舌鳞状细胞癌中的表达,并探究hotair与舌鳞状细胞癌淋巴结转移的关系。方法:对19例舌鳞状细胞癌患者的癌组织以及其对应的19例癌旁组织进行实时荧光定量PCR检测,检测hotair在癌组织、癌旁组织的相对表达量,把结果与患者的TNM分期进行关联比较,并进一步通过构建沉默hotair表达的CAL27、SCC9细胞系,检测肿瘤细胞侵袭、迁移能力的改变。结果:19对舌鳞状细胞癌组织中,26.3%显示出HOTAI的高表达(P=0.016 9hotair呈现低表达(Prna干扰技术降低hotair在CAL27及SCC9细胞系中的表达水平,结果发现细胞侵袭(P长链非编码rna hotair在舌鳞状细胞癌淋巴结转移过程中可能发挥促进因子的作用。

关键词：舌鳞状细胞癌淋巴结转移长链非编码rna hotair

研究长链非编码rna hotair在结直肠癌中的表达、临床意义和预后效果

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临床医药文献电子杂志 2020年第7期7卷 161-162+193页

作者：刘振兴高翔张震魏建昌武安市中医院

目的分析结直肠癌的组织中长链非编码rna hotair的表达和该rna与临床特征以及预后的联系。方法选取本院收治的直结肠癌患者的癌变组织作为研究组,对照组则为正常的黏膜组织,两组各90例,对两组使用荧光定量PCR技术监测hotair在两组中的... 详细信息

目的分析结直肠癌的组织中长链非编码rna hotair的表达和该rna与临床特征以及预后的联系。方法选取本院收治的直结肠癌患者的癌变组织作为研究组,对照组则为正常的黏膜组织,两组各90例,对两组使用荧光定量PCR技术监测hotair在两组中的表达水平,分析其表达水平和结直肠癌的临床病理特征之间的联系,绘制其生存曲线以及Cox回归模型,分析该rna的表达和病变预后的相关联系。结果 hotair mrna在研究组的表达水平为(0.86±0.05),明显高于对照组中的(0.17±0.02),Photair的表达水平和肿瘤的分化程度、肝转移、淋巴结转移、脉管浸润以及神经浸润等均密切相关;共有48位患者死亡,存活率为46.66%,死亡的患者体内hotair表达水平明显高于生存患者,且其表达水平越高,患者的存活时间越短。结论 hotair在结直肠癌中的表达水平高于普通人,并且与临床症状和预后有密切的关系,可以作为未来肿瘤分子的生物标记物使用。

关键词：长链非编码rna hotair 结直肠癌表达预后临床意义

黏液乳头型室管膜瘤WHO组织学分级重新评估及其hotair表达的诊断价值

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临床与实验病理学杂志 2023年第1期39卷 74-78页

作者：徐月梅牛丰南李志文黎琪后梦玥陈丹妮樊祥山孟凡青陈洁宇南京大学医学院附属鼓楼医院病理科南京210008

目的重新评估黏液乳头型室管膜瘤(myxopapillary ependymoma,MPE)的WHO组织学分级及探索hotair表达的诊断价值。方法收集2002~2021年南京大学医学院附属鼓楼医院诊治的19例MPE,分析其临床病理学特征及影像学表现,同时行rna scope检测其... 详细信息

目的重新评估黏液乳头型室管膜瘤(myxopapillary ependymoma,MPE)的WHO组织学分级及探索hotair表达的诊断价值。方法收集2002~2021年南京大学医学院附属鼓楼医院诊治的19例MPE,分析其临床病理学特征及影像学表现,同时行rna scope检测其长链非编码rna hotair的表达。结果19例MPE中男性12例,女性7例。年龄15~52岁,平均年龄31岁。MRI检查均显示长T1长T2信号,增强后稍均匀强化。镜下经典的组织学表现为形态较一致的肿瘤细胞围绕血管黏液样间质呈假乳头状排列,细胞下方缺乏基膜,可见细胞外黏液。部分病例核分裂象增多,所有病例均未见明显坏死及微血管增生。免疫表型:肿瘤细胞弥漫表达GFAP(15/16)及S-100(14/16),部分病例核旁点状表达(2/16)或弱表达(3/16)EMA。Ki-67增殖指数低,个别病例高达20%。5例行rna原位杂交(in situ hybridization,ISH)检测,均表达长链非编码rna hotair。13例获得随访,1例于术后1年因子宫颈癌去世;1例于术后4年复发;其余11例均无复发或转移。结论MPE的组织学特征及生物学行为符合WHO(2021)中枢神经系统肿瘤分类Ⅱ级的诊断标准。hotair的表达对MPE有一定的诊断价值,必要时可行ISH检测以辅助诊断。

关键词：黏液乳头型室管膜瘤 WHO分级长链非编码rna hotair 原位杂交

Lncrna hotair对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡和EMT的影响和作用机制

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国际检验医学杂志 2022年第6期43卷 710-716页

作者：陈文婷黄丽珊曾带娣陈志萍吴志喜南方医科大学附属东莞医院/东莞市人民医院妇产科广东东莞523000

目的探讨长链非编码rna(Lncrna)hotair对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡和上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响及潜在的作用机制。方法收集培养的宫颈癌细胞(Hela细胞)、人永生化宫颈上皮细胞(H8细胞),同时收集宫颈癌组织、癌旁正常组织标本,利... 详细信息

目的探讨长链非编码rna(Lncrna)hotair对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡和上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响及潜在的作用机制。方法收集培养的宫颈癌细胞(Hela细胞)、人永生化宫颈上皮细胞(H8细胞),同时收集宫颈癌组织、癌旁正常组织标本,利用实时荧光定量PCR检测Lncrna hotair、miR-20a-5p和KIF26B的mrna表达;分别下调Lncrna hotair、miR-20a-5p和KIF26B的表达,MTT试验检测Hela细胞增殖能力,Western blot检测Hela细胞内凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin的表达,流式细胞仪检测Hela细胞凋亡情况。miRanda和双荧光素酶报告基因试验分析Lncrna hotair和miR-20a-5p之间的作用靶点及相关性,TargetScan和双荧光素酶报告基因试验分析miR-20a-5p与KIF26B之间的作用靶点及相关性;检测Lncrna hotair通过miR-20a-5p对Hela细胞增殖、凋亡和EMT的影响。结果Hela细胞内Lncrna hotair和KIF26B表达明显高于H8细胞(Prna hotair和KIF26B表达明显升高(Prna hotair、KIF26B表达降低后明显抑制了Hela细胞增殖与EMT,促进Hela细胞凋亡;Lncrna hotair靶向miR-20a-5p,miR-20a-5p靶向KIF26B;miR-20a-5p表达降低后促进Hela细胞增殖与EMT,抑制细胞凋亡;过表达Lncrna hotair通过miR-20a-5p促进Hela细胞增殖与EMT,抑制Hela细胞凋亡。结论Lncrna hotair通过miR-20a-5p/KIF26B轴抑制Hela细胞凋亡,促进了癌细胞增殖及EMT。

关键词：长链非编码rna hotair miR-20a-5p KIF26B 宫颈癌上皮细胞-间充质转化

lncrna hotair通过miR-126/ADAMTS-4轴抑制口腔鳞状细胞癌细胞增殖与侵袭的机制研究

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国际检验医学杂志 2022年第9期43卷 1025-1032页

作者：邱乐宏邓伟王涛海南省人民医院/海南医学院附属海南医院口腔科海南海口570311

目的检测长链非编码rna hotair(lncrna hotair)对口腔鳞状细胞癌增殖与侵袭的影响并探讨潜在的作用机制。方法收集该院临床确诊的口腔鳞状细胞癌患者组织标本和癌旁正常组织标本,并培养TSCCA、Tca8113和HOK细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR... 详细信息

目的检测长链非编码rna hotair(lncrna hotair)对口腔鳞状细胞癌增殖与侵袭的影响并探讨潜在的作用机制。方法收集该院临床确诊的口腔鳞状细胞癌患者组织标本和癌旁正常组织标本,并培养TSCCA、Tca8113和HOK细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncrna hotair、miR-126和ADAMTS-4的表达。取对数生长期的Tca8113细胞,将hotair sirna、ADAMTS-4 sirna转染细胞,并设置sirna NC对照组,采用CCK-8法分析细胞活力,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用Transwell试验检测细胞侵袭数目。预测hotair、miR-126潜在的靶基因,双荧光素酶试验评估lncrna hotair与miR-126、miR-126与ADAMTS-4之间的关系。检测上调lncrna hotair靶向miR-126对Tca8113细胞生物学功能的影响。结果与癌旁组织比较,口腔鳞状癌组织lncrna hotair、ADAMTS-4表达上调,miR-126表达下调(Prna hotair、ADAMTS-4表达上调,miR-126表达下调(Prna hotair与miR-126,miR-126与ADAMTS-4具有结合位点。敲减hotair或ADAMTS-4表达,Tca8113细胞增殖活力与侵袭能力降低,细胞凋亡率上升(Photair对Tca8113细胞增殖与侵袭的促进作用。结论下调lncrna hotair通过miR-126/ADAMTS-4轴抑制了Tca8113细胞增殖及侵袭。

关键词：长链非编码rna hotair miR-126 ADAMTS-4 口腔鳞状细胞癌增殖