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V_γ4^+γδT细胞清除可缓解咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮炎

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免疫学杂志 2017年第2期33卷 101-106页

作者：诸蓉蔡小薇李漪倩黄珂冉磊贺伟峰何威王儒鹏第三军医大学新桥医院皮肤风湿免疫科重庆400037 第三军医大学西南医院烧伤研究所重庆400038

目的观察V_γ4^+γδT细胞在咪喹莫特乳膏诱导的Balb/c小鼠银屑病模型中的作用。方法雌性8周龄Balb/c小鼠随机分为野生型组和V_γ4清除型组。咪喹莫特乳膏诱导银屑病模型后,采用PASI评分标准分别评判2组小鼠银屑病模型皮损的严重程度,H... 详细信息

目的观察V_γ4^+γδT细胞在咪喹莫特乳膏诱导的Balb/c小鼠银屑病模型中的作用。方法雌性8周龄Balb/c小鼠随机分为野生型组和V_γ4清除型组。咪喹莫特乳膏诱导银屑病模型后,采用PASI评分标准分别评判2组小鼠银屑病模型皮损的严重程度,HE染色观察皮损组织形态学改变,流式细胞仪分别检测2组小鼠正常及炎症时真皮组织中V_γ4T细胞的比例,Western blot检测2组小鼠正常及炎症时真皮组织蛋白IL-17、IL-23、IL-1β的表达水平。结果连续6 d涂抹0.5%咪喹莫特乳膏后,野生型组小鼠背部脱毛区域出现红斑、鳞屑、斑块的典型银屑病样皮损比V_γ4清除型组小鼠严重。流式细胞仪检测到野生型组正常小鼠真皮细胞内在少量的V_γ4T细胞,炎症时该细胞数量增多,V_γ4清除型组正常及炎症小鼠均无V_γ4T细胞表达。同时Western blot检测到V_γ4清除组小鼠真皮组织蛋白IL-17、IL-23、IL-1β炎性因子的表达水平也低于野生型组。结论清除小鼠体内V_γ4T细胞后,咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎减轻,同时IL-17、IL-23、IL-1β3种炎性因子的蛋白表达水平均降低。

关键词： V_γ4T细胞咪喹莫特银屑病样皮炎 IL-17

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阿达木单抗诱发银屑病样皮炎1例

中国皮肤性病学杂志 2019年第12期33卷 1416-1418页

作者：李高洁 Krista Shrestha 马文婷刘宏杰李薇四川大学华西医院皮肤性病科四川成都610041 四川师范大学医院皮肤科四川成都610011

患者男,25岁,双足红斑、丘疹伴瘙痒4+个月,累及双手1个月。发疹前1 d患者因“强直性脊柱炎”予阿达木单抗第4次注射。皮损组织病理示:表皮明显角化过度,棘层增生,真皮浅层小血管周围稀疏淋巴细胞浸润。诊断:①银屑病样皮炎;②强直性脊... 详细信息

患者男,25岁,双足红斑、丘疹伴瘙痒4+个月,累及双手1个月。发疹前1 d患者因“强直性脊柱炎”予阿达木单抗第4次注射。皮损组织病理示:表皮明显角化过度,棘层增生,真皮浅层小血管周围稀疏淋巴细胞浸润。诊断:①银屑病样皮炎;②强直性脊柱炎。停用生物制剂,处理予外擦药后皮疹逐渐消退,非甾体类抗炎药和甲泼尼龙控制强直性脊柱炎。

关键词：阿达木单抗银屑病样皮炎

Tc17细胞及相关细胞因子在银屑病样皮炎模型小鼠中的表达

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医药导报 2022年第7期41卷 942-946页

作者：张平俞莺胡枫陈宏翔武汉市第一医院皮肤科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属同济医院风湿免疫科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属协和医院皮肤科武汉430022

目的观察Tc17细胞及相关细胞因子在银屑病样皮炎模型小鼠的表达。方法将BALB/c雄性小鼠随机分为模型组及正常对照组各10只,模型组局部皮肤涂抹5%咪喹莫特软膏60 mg·d^(-1),连续7 d。流式细胞术检测分选出小鼠血液细胞毒性Tc17细胞与辅... 详细信息

目的观察Tc17细胞及相关细胞因子在银屑病样皮炎模型小鼠的表达。方法将BALB/c雄性小鼠随机分为模型组及正常对照组各10只,模型组局部皮肤涂抹5%咪喹莫特软膏60 mg·d^(-1),连续7 d。流式细胞术检测分选出小鼠血液细胞毒性Tc17细胞与辅助性Th17细胞比例,逆转录聚合酶链反应检测小鼠Tc17细胞中白细胞介素-17A(IL-17A)、IL-22、视黄酸相关孤儿受体(RORγt)及信号传导与转录激活因子(STAT3)表达水平。结果模型组Tc17与Th17细胞占比分别为(4.63±0.10)%,(8.30±1.67)%,正常对照组分别为(0.30±0.07)%,(1.47±0.40)%,模型组均显著高于正常对照组(P银屑病样皮炎过程,且分化及作用机制与Th17相似;咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎小鼠模型能模拟免疫相关的细胞因子变化。

关键词：咪喹莫特 Tc17细胞银屑病样皮炎细胞因子

KLF2在银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠中的作用及机制研究

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KLF2在银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠中的作用及机制研究

作者：杨文翠中国人民解放军陆军军医大学

学位级别：硕士

研究背景银屑病(psoriasis)是一种常见复发性疾病,其发病机制尚未完全阐明,已有研究证实银屑病是一种与T细胞免疫密切相关的慢性炎症性疾病,IL-23/Th17轴在其中起着重要作用。银屑病与多种共病相关,包括代谢综合征和心血管疾病等。研究... 详细信息

研究背景银屑病(psoriasis)是一种常见复发性疾病,其发病机制尚未完全阐明,已有研究证实银屑病是一种与T细胞免疫密切相关的慢性炎症性疾病,IL-23/Th17轴在其中起着重要作用。银屑病与多种共病相关,包括代谢综合征和心血管疾病等。研究发现,银屑病和代谢综合征之间可能具有共同的炎症通路,代谢综合征是银屑病患者死亡的重要原因。目前常见的治疗银屑病的药物(如甲氨蝶呤和环孢素)可能对代谢综合征产生不良影响。因此,探索银屑病与代谢综合征之间的潜在机制,寻找合适的治疗靶点十分迫切。已有研究报道Krüppel样转录因子2(Krüppel-like transcription factor 2,KLF2)通过调节脂质代谢在动脉粥样硬化中起保护作用,同时还参与减轻多发性硬化、类风湿关节炎、冠状动脉粥样硬化等炎症性疾病。KLF2已被证实通过调节T细胞免疫发挥抗炎作用,而T细胞相关免疫信号参与银屑病炎症启动、维持全过程。因此,我们推测KLF2可能参与银屑病的发生。本研究拟构建银屑病小鼠模型,明确KLF2表达与银屑病炎症程度相关性,并用阿托伐他汀激活银屑病小鼠皮肤中KLF2表达,研究KLF2对皮肤炎症细胞浸润、角质形成细胞增殖情况的影响;然后建立银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠模型,并在此基础上用阿托伐他汀激活KLF2表达,进一步探讨KLF2对银屑病样皮炎伴代谢综合征的作用,同时在两种模型中探讨KLF2与NF-κB的相互作用。通过探讨KLF2在银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠中的作用及临床意义,可能为其提供新的治疗思路。目的通过利用阿托伐他汀激活银屑病小鼠中KLF2表达,探讨其对银屑病样皮炎的影响,并在此基础上建立银屑病样皮炎伴代谢综合征模型,进一步探究KLF2对银屑病伴代谢综合征共病的作用。方法***2在银屑病患者皮肤中的表达免疫组织化学检测寻常型银屑病患者皮损和健康正常皮肤组织中KLF2的表达。***2对银屑病样皮炎的影响及机理研究将C57BL/6小鼠随机分为正常饮食(ND)对照组、模型组、阿托伐他汀低(5mg/kg)、中(10 mg/kg)、高(20 mg/kg)剂量组,利用5%咪喹莫特乳膏(IMQ)建立银屑病模型;免疫组织化学(IHC)和免疫印迹(WB)检测小鼠皮肤中KLF2表达变化;通过红斑、鳞屑、厚度评分和HE染色评价皮肤炎症程度;流式细胞术检测表真皮内Vγ4γδT细胞和Vγ4IL17AT细胞的数量;q PCR检测皮肤中促炎细胞因子的表达;WB分析NF-κB及其磷酸化蛋白水平。***2对银屑病样皮炎伴代谢综合征的作用及机理研究将C57BL/6小鼠随机分为正常饮食对照组、模型组和高脂饮食(HFD)对照组、模型组、阿托伐他汀(20 mg/kg)组,利用HFD和IMQ同时处理C57BL/6小鼠建立银屑病样皮炎伴代谢综合征模型,通过体重、脂肪肝和血脂水平评估代谢综合征情况;IHC和WB检测小鼠皮肤中KLF2表达情况;通过红斑、鳞屑、厚度评分和HE染色评价皮肤炎症程度;流式细胞术检测表真皮内Vγ4γδT细胞和Vγ4IL17AT细胞的数量;q PCR检测皮肤中促炎细胞因子的表达;WB分析NF-κB及其磷酸化蛋白水平。结果***2在银屑病患者皮肤中表达下降。2.银屑病小鼠皮肤中KLF2表达低于健康正常小鼠;阿托伐他汀各剂量组皮肤中KLF2表达高于模型组,且阿托伐他汀浓度越高,KLF2表达越高。3.与银屑病组相比,阿托伐他汀各剂量组银屑病样皮炎显著减轻,表皮和真皮中Vγ4γδT细胞和Vγ4IL17AT细胞数量减少,促炎细胞因子表达降低,p-NF-κB蛋白表达减少。4.成功构建银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠模型;与银屑病小鼠相比,银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠在有超重、脂肪肝、高脂血症等代谢障碍的同时还表现出更严重的皮肤炎症,促炎细胞因子分泌增多。***2在银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠中的表达较高脂饮食对照组减少,高脂饮食阿托伐他汀组中KLF2表达较高脂饮食模型组增加。与高脂饮食模型组相比,高脂饮食阿托伐他汀组银屑病样皮炎显著减轻,表皮和真皮中Vγ4γδT细胞和Vγ4IL17AT细胞数量减少,促炎细胞因子表达降低,p-NF-κB蛋白表达减少;同时血脂水平下降。结论皮肤组织中KLF2表达减少可能是导致银屑病炎症恶化的一个重要因素;利用阿托伐他汀激活KLF2表达,可能通过调控NF-κB信号通路,抑制表皮和真皮中Vγ4IL17AT细胞浸润和促炎细胞因子的分泌,减轻银屑病样皮炎;另外,阿托伐他汀作用于银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠,通过激活KLF2表达,在减轻皮肤炎症的同时调节血脂代谢情况。

关键词： KLF2 银屑病样皮炎咪喹莫特银屑病共病 Vγ4+IL17A+T细胞

Vγ4+γδ+T细胞对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮炎的影响研究

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Vγ4+γδ+T细胞对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮炎的影响研究

作者：诸蓉第三军医大学

学位级别：硕士

研究背景银屑病是一种常见病,其中最常见的类型为寻常型银屑病,临床主要表现为鳞屑性红斑。遗传、感染、内分泌紊乱、免疫系统异常等多种致病因素均可导致银屑病的发生;皮损好发于面部、躯干及四肢,易反复,严重影响患者的身心健康。T细... 详细信息

研究背景银屑病是一种常见病,其中最常见的类型为寻常型银屑病,临床主要表现为鳞屑性红斑。遗传、感染、内分泌紊乱、免疫系统异常等多种致病因素均可导致银屑病的发生;皮损好发于面部、躯干及四肢,易反复,严重影响患者的身心健康。T细胞主要参与细胞免疫,在识别抗原、分化为效应细胞以及记忆细胞等方面有着极其重要的作用。分化的效应细胞具有分泌淋巴因子并与靶细胞结合发挥免疫效应的作用,分化的记忆细胞具有分化成效应T细胞的功能,这使得T细胞能够保护机体免于感染、物理、化学等多方面的伤害。也正是由于T细胞具有重要的防御作用,因此T细胞参与的细胞免疫系统的紊乱与异常将导致自身免疫系统疾病发生的发生,如银屑病、系统性红斑狼疮、天疱疮等。虽然目前对于这些免疫系统疾病的研究有很多,但关于Vγ4γδT细胞在表皮内对银屑病发病的作用国内外均未见报道。由于前期的文献已报道Vγ4T细胞对银屑病样皮炎有促进作用,结合我们前期预实验结果:清除BABL/c鼠体内的Vγ4T细胞后,咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎减轻。在本课题中,我们利用Vγ4T细胞清除鼠,探讨Vγ4γδT细胞在表皮内对银屑病样皮炎的作用;同时探讨了第二次利用咪喹莫特诱导银屑病样皮炎后真皮内的Vγ4γδT细胞对银屑病样皮炎的影响。我们推测在Vγ4T细胞清除鼠,无论是第一次利用咪喹莫特乳膏诱导的银屑病样皮炎还是第二次利用咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎均会减轻。目的本课题研究拟通过构建不同状态下的小鼠银屑病样皮炎模型,探索Vγ4T细胞在银屑病样皮炎中发挥作用的机理,为进一步明确银屑病发病机制提供新的思路。方法1.分组及构建Vγ4清除鼠雌性6-8周C57BL/6鼠随机分为两组,即野生组、Vγ4清除组;Vγ4清除组采用腹腔注射Vγ4清除抗体,野生组采用腹腔注射等体积PBS缓冲液;Vγ4清除组真皮内使用流式细胞仪检测不出Vγ4T细胞即为建模成功。2.构建咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎模型小鼠背部脱毛区域连续6天涂抹咪喹莫特乳膏(60mg/只/天)诱导银屑病样皮炎,采用国际化PASI评分标准对每只小鼠的银屑病样皮炎严重程度进行评分,HE染色观察皮损表皮组织的厚度及炎性细胞浸润的程度;3.Vγ4T细胞在表皮内对银屑病样皮炎的影响及其机理研究3.1构建银屑病样皮炎模型后,通过Western blot技术检测野生组小鼠表皮组织内IL-17的表达;通过流式细胞仪技术分别检测野生组表皮内IL-17A+γδ+T细胞、Vγ4γδT细胞以及IL-17A+Vγ4+T细胞的数量;3.2通过银屑病的PASI评分标准以及病理HE染色评估两组小鼠的皮炎变化,利用流式细胞仪检测Vγ4T细胞清除组小鼠表皮细胞内Vγ4γδT细胞、表皮细胞胞内的IL-17A分泌情况;3.3通过免疫组化技术检测小鼠表皮内IL-23、IL-1β的表达,之后中和小鼠皮下IL-23、IL-1β并比较其与野生型正常小鼠皮炎的变化;同时检测健康皮肤与银屑病患者皮损内IL-23、IL-1β的表达;4.小鼠真皮内Vγ4T细胞对第二次利用咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎的影响及机理研究4.1通过银屑病的PASI评分标准以及组织病理HE染色评估:野生组第一次利用咪喹莫特诱导银屑病样皮炎组与野生组第二次利用咪喹莫特诱导银屑病样皮炎组,两组小鼠的炎症程度;利用流式细胞仪技术检测两组小鼠真皮内Vγ4T细胞以及其分泌的IL-17A、γ-IFN、IL-22;4.2第二次诱导银屑病样皮炎前清除小鼠体内的Vγ4T细胞,外用咪喹莫特诱导银屑病样皮炎模型后,观察其与野生组第二次诱导的银屑病样皮炎的不同;采用流式细胞仪技术检测两组小鼠真皮内分泌的IL-17A、γ-IFN、IL-22;结果1.成功构建了Vγ4清除鼠模型;2.连续6天涂抹0.5%咪喹莫特乳膏后,野生组小鼠背部脱毛区域出现红斑、鳞屑、斑块的典型银屑病样皮损比Vγ4清除组小鼠严重,组织切片HE染色显示野生组表皮增厚较Vγ4清除组明显;3.流式细胞仪检测显示野生组及Vγ4清除组正常小鼠表皮细胞内无Vγ4T细胞,诱导炎症后表皮内出现的Vγ4T细胞约占γδT细胞总量的20%,其中约40%Vγ4T细胞分泌IL-17A;Vγ4清除组诱导炎症后小鼠表皮内无Vγ4T细胞表达,表皮细胞分泌的IL-17A明显减少;*** blot检测结果显示野生组小鼠表皮组织蛋白促炎因子IL-23、IL-1β的表达高于Vγ4清除组;利用IL-23、IL-1β中和抗体中和小鼠皮下的IL-23、IL-1β后,咪喹莫特乳膏诱导的银屑病样皮炎减轻并且表皮内Vγ4T细胞分泌的IL-17A较野生组小鼠减少;5.第二次利用咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎较初发皮炎严重,并且真皮内的Vγ4T细胞在第二次诱导银屑病样皮炎后发生快速分化、增殖;此外,真皮内的Vγ4T细胞分泌的IL-17A、γ-IFN、IL-22在

关键词：银屑病样皮炎 IL-17 银屑病复发 Vγ4+γδ+T细胞

噻唑类化合物硝唑尼特对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样的治疗作用

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广东化工 2023年第7期50卷 51-53页

作者：章彦文王倩黄竹芸孙双勇天津医科大学药学院天津300070 津药生物科技(天津)有限公司天津300193

目的:探讨硝唑尼特对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮炎的干预作用及其机制。方法:30只健康雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型组、硝唑尼特组(100 mg/kg)3组,每组10只,利用5%咪喹莫特乳膏涂抹小鼠背部制备银屑病样皮炎模型,模型制... 详细信息

目的:探讨硝唑尼特对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮炎的干预作用及其机制。方法:30只健康雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型组、硝唑尼特组(100 mg/kg)3组,每组10只,利用5%咪喹莫特乳膏涂抹小鼠背部制备银屑病样皮炎模型,模型制备成功后观察小鼠受损皮肤情况并进行PASI评分,检测小鼠脾指数变化情况,对小鼠皮肤进行HE染色观察皮损情况,并采用ELISA法测定小鼠皮肤内炎症因子分泌的变化。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠PASI评分明显增加(P病理切片结果显示皮肤增厚;与模型组比较,硝唑尼特组小鼠银屑病样皮损减少,PASI评分明显减少(P银屑病样皮炎。

关键词：硝唑尼特银屑病样皮炎石蜡切片HE染色