KLF2在银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠中的作用及机制研究

作     者：杨文翠 

作者单位：中国人民解放军陆军军医大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王儒鹏

授予年度：2023年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100206[医学-皮肤病与性病学] 10[医学] 

主      题：KLF2 银屑病样皮炎 咪喹莫特 银屑病共病 Vγ4+IL17A+T细胞 

摘      要：研究背景银屑病(psoriasis)是一种常见复发性疾病,其发病机制尚未完全阐明,已有研究证实银屑病是一种与T细胞免疫密切相关的慢性炎症性疾病,IL-23/Th17轴在其中起着重要作用。银屑病与多种共病相关,包括代谢综合征和心血管疾病等。研究发现,银屑病和代谢综合征之间可能具有共同的炎症通路,代谢综合征是银屑病患者死亡的重要原因。目前常见的治疗银屑病的药物(如甲氨蝶呤和环孢素)可能对代谢综合征产生不良影响。因此,探索银屑病与代谢综合征之间的潜在机制,寻找合适的治疗靶点十分迫切。已有研究报道Krüppel样转录因子2(Krüppel-like transcription factor 2,KLF2)通过调节脂质代谢在动脉粥样硬化中起保护作用,同时还参与减轻多发性硬化、类风湿关节炎、冠状动脉粥样硬化等炎症性疾病。KLF2已被证实通过调节T细胞免疫发挥抗炎作用,而T细胞相关免疫信号参与银屑病炎症启动、维持全过程。因此,我们推测KLF2可能参与银屑病的发生。本研究拟构建银屑病小鼠模型,明确KLF2表达与银屑病炎症程度相关性,并用阿托伐他汀激活银屑病小鼠皮肤中KLF2表达,研究KLF2对皮肤炎症细胞浸润、角质形成细胞增殖情况的影响;然后建立银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠模型,并在此基础上用阿托伐他汀激活KLF2表达,进一步探讨KLF2对银屑病样皮炎伴代谢综合征的作用,同时在两种模型中探讨KLF2与NF-κB的相互作用。通过探讨KLF2在银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠中的作用及临床意义,可能为其提供新的治疗思路。目的通过利用阿托伐他汀激活银屑病小鼠中KLF2表达,探讨其对银屑病样皮炎的影响,并在此基础上建立银屑病样皮炎伴代谢综合征模型,进一步探究KLF2对银屑病伴代谢综合征共病的作用。方法***2在银屑病患者皮肤中的表达免疫组织化学检测寻常型银屑病患者皮损和健康正常皮肤组织中KLF2的表达。***2对银屑病样皮炎的影响及机理研究将C57BL/6小鼠随机分为正常饮食(ND)对照组、模型组、阿托伐他汀低(5mg/kg)、中(10 mg/kg)、高(20 mg/kg)剂量组,利用5%咪喹莫特乳膏(IMQ)建立银屑病模型;免疫组织化学(IHC)和免疫印迹(WB)检测小鼠皮肤中KLF2表达变化;通过红斑、鳞屑、厚度评分和HE染色评价皮肤炎症程度;流式细胞术检测表真皮内Vγ4γδT细胞和Vγ4IL17AT细胞的数量;q PCR检测皮肤中促炎细胞因子的表达;WB分析NF-κB及其磷酸化蛋白水平。***2对银屑病样皮炎伴代谢综合征的作用及机理研究将C57BL/6小鼠随机分为正常饮食对照组、模型组和高脂饮食(HFD)对照组、模型组、阿托伐他汀(20 mg/kg)组,利用HFD和IMQ同时处理C57BL/6小鼠建立银屑病样皮炎伴代谢综合征模型,通过体重、脂肪肝和血脂水平评估代谢综合征情况;IHC和WB检测小鼠皮肤中KLF2表达情况;通过红斑、鳞屑、厚度评分和HE染色评价皮肤炎症程度;流式细胞术检测表真皮内Vγ4γδT细胞和Vγ4IL17AT细胞的数量;q PCR检测皮肤中促炎细胞因子的表达;WB分析NF-κB及其磷酸化蛋白水平。结果***2在银屑病患者皮肤中表达下降。2.银屑病小鼠皮肤中KLF2表达低于健康正常小鼠;阿托伐他汀各剂量组皮肤中KLF2表达高于模型组,且阿托伐他汀浓度越高,KLF2表达越高。3.与银屑病组相比,阿托伐他汀各剂量组银屑病样皮炎显著减轻,表皮和真皮中Vγ4γδT细胞和Vγ4IL17AT细胞数量减少,促炎细胞因子表达降低,p-NF-κB蛋白表达减少。4.成功构建银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠模型;与银屑病小鼠相比,银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠在有超重、脂肪肝、高脂血症等代谢障碍的同时还表现出更严重的皮肤炎症,促炎细胞因子分泌增多。***2在银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠中的表达较高脂饮食对照组减少,高脂饮食阿托伐他汀组中KLF2表达较高脂饮食模型组增加。与高脂饮食模型组相比,高脂饮食阿托伐他汀组银屑病样皮炎显著减轻,表皮和真皮中Vγ4γδT细胞和Vγ4IL17AT细胞数量减少,促炎细胞因子表达降低,p-NF-κB蛋白表达减少;同时血脂水平下降。结论皮肤组织中KLF2表达减少可能是导致银屑病炎症恶化的一个重要因素;利用阿托伐他汀激活KLF2表达,可能通过调控NF-κB信号通路,抑制表皮和真皮中Vγ4IL17AT细胞浸润和促炎细胞因子的分泌,减轻银屑病样皮炎;另外,阿托伐他汀作用于银屑病样皮炎伴代谢综合征小鼠,通过激活KLF2表达,在减轻皮肤炎症的同时调节血脂代谢情况。