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大泷六线鱼脾脏细胞体外培养的研究

中国海洋大学学报（自然科学版） 2010年第8期40卷 93-97页

作者：王文君张志峰汪岷邵明瑜王华中国海洋大学海洋生命学院海洋生物遗传学与种质工程实验室山东青岛266003 烟台市海洋环境监测预报中心山东烟台264003

应用植块法,比较大泷六线鱼（Hexagrammos otakii）脾脏细胞在2种基础培养基和3个胎牛血清浓度下的体外培养效果。根据细胞的迁出、贴壁、细胞种类以及生长状况,得出大泷六线鱼脾脏细胞适宜的体外培养体系为：MEM＋15%胎牛血清、pH7.2-... 详细信息

应用植块法,比较大泷六线鱼（Hexagrammos otakii）脾脏细胞在2种基础培养基和3个胎牛血清浓度下的体外培养效果。根据细胞的迁出、贴壁、细胞种类以及生长状况,得出大泷六线鱼脾脏细胞适宜的体外培养体系为：MEM＋15%胎牛血清、pH7.2-7.4、20℃;培养产物由6种细胞组成,其中C型细胞培养120 d以上依然状态良好,并进行了传代培养。培养启动12 d后,C型细胞层上出现造血灶,造血灶细胞最长可以维持50 d以上。本研究为大泷六线鱼脾脏细胞系的构建和脾脏功能的研究奠定了基础。

关键词：大泷六线鱼脾脏细胞培养造血灶

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大泷六线鱼（Hexagrammos otakii）肝脏和脾脏细胞学观察及其原代培养的研究

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大泷六线鱼（Hexagrammos otakii）肝脏和脾脏细胞学观察及其原代...

作者：王文君中国海洋大学

学位级别：硕士

鱼类肝脏和脾脏是鱼类生物学研究的重点对象。肝脏是鱼类维持体内代谢平衡的重要器官,能调节营养平衡,合成和分泌多种代谢物质。脾脏是一个多功能复合器官,在鱼类的造血和免疫中有重要作用。大泷六线鱼具有较高的经济价值,是近年来新兴... 详细信息

鱼类肝脏和脾脏是鱼类生物学研究的重点对象。肝脏是鱼类维持体内代谢平衡的重要器官,能调节营养平衡,合成和分泌多种代谢物质。脾脏是一个多功能复合器官,在鱼类的造血和免疫中有重要作用。大泷六线鱼具有较高的经济价值,是近年来新兴的一种海水鱼类养殖品种,然而其生物学背景资料较少。本文采用组织学和细胞学方法对大泷六线鱼的肝脏和脾脏进行了结构研究,进一步对其细胞的体外原代培养进行了研究,旨在丰富大泷六线鱼的生物学研究内涵,为其细胞系的建立奠定基础。组织学和细胞学研究表明,大泷六线鱼肝脏内结缔组织不发达,肝小叶不明显,中央静脉不规则,肝细胞索围绕中央静脉呈不规则放射状排列,肝血窦狭窄。肝门管区不典型。肝细胞较大,呈多边形,细胞间分界明显,细胞质丰富,细胞核大,多为圆形或椭圆形。脾脏被膜较薄,未见明显脾小梁,红髓和白髓混合分布,界限不清,构成脾脏的细胞种类包括淋巴细胞、红血细胞、粒细胞、网状细胞、巨噬细胞等,有大量黑色素巨噬细胞中心分布。本文细胞培养的实验目的是为了建立和优化大泷六线鱼细胞体外培养的体系。在肝脏的原代培养中,通过正交实验和随后进行的两因子三水平实验,分别对培养基种类、血清浓度以及渗透压水平进行了筛选,结果表明,在不改变培养基原有渗透压的条件下,使用MEM培养基,添加15%胎牛血清可以取得较好的实验结果。在该培养条件下,细胞迁出旺盛,迁出细胞呈椭圆或多角形,可存活14d左右。在脾脏原代培养实验中,使用MEM培养基的培养效果明显好于L-15培养基,在10%、15%、20%的血清梯度下,都可以长期维持脾脏细胞的体外培养。其中,C型细胞(成纤维样细胞)在三种血清浓度下均可生长,以含15%胎牛血清的培养基中生长最好,至论文完成前已培养近4个月,目前细胞生长状况正常;D型细胞(巨噬样细胞)则在含20%胎牛血清的培养基中生存时间最长,培养50d时,仍然正常生存。此外,在脾脏细胞原代培养中观察到C型(成纤维样细胞)细胞层上出现了造血灶,这些位置可持续产生圆形、明亮的细胞并将其释放到培养液中,因此推测C型细胞是某种可以支持造血活动的基质细胞,而大泷六线鱼的脾脏也具有活跃的造血功能。

关键词：大泷六线鱼肝脏脾脏结构原代培养造血灶

鸡胚肝脏的造血机能与对“肝细胞板”学说的商榷

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南昌大学学报(医学版) 1961年第1期 89-94页

作者：程廷楷江西医学院组织胚胎学教研组

一、序言在过去的研究工作中,虽然对鸡胚肝脏的形态发生与机能发生,有过较详细的报导[1、2、3],但均未注意到肝脏造血机能的发育情况。Jordan[4]曾报导,在孵出后一个月小鸡的肝内,发现有淋巴小结,从而指出肝脏在此时有产生淋巴球的机能... 详细信息

一、序言在过去的研究工作中,虽然对鸡胚肝脏的形态发生与机能发生,有过较详细的报导[1、2、3],但均未注意到肝脏造血机能的发育情况。Jordan[4]曾报导,在孵出后一个月小鸡的肝内,发现有淋巴小结,从而指出肝脏在此时有产生淋巴球的机能。Olson[5]曾提到鸡胚肝脏是非主要的造血器官,[6]则认为肝是鸡胚的最重要的造血器官,但均未引述任何实验数据。从以上情况看来,仅有的一些有关的研究工作,只限于对个别发育时期的鸡肝作孤立的观察,缺乏对鸡胚肝脏的造血机能作系统的研究与分析,对于其造血机能的估价很不一致。针对以上存在的问题,我们对鸡胚和雏鸡肝脏的造血活动,作了较系统的观察,提出了分析,鸡胚肝脏造血活动的指标,肯定了肝脏的造血机能,给予了鸡胚肝造血机能一新的估价。此外也注意了鸡肝细胞排列形式的特点。

关键词：造血机能肝脏造血灶鸡胚

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再生障碍性贫血的诊断与治疗

日本医学介绍 1985年第4期 181-182页

作者：张秀梅

再生障碍性贫血(简称再障)是因骨髓造血衰竭而引起的以全血细胞减少为特征的疾病。是1888年由Ehrlich首先记载的。发病机理: 再障的发病机理有以下三个因素。一、造血于细胞的异常1.数量的减少:用体外骨髓集落形成法发现粒

关键词：再生障碍性贫血再生不良性贫血再障全血细胞减少骨髓纤维化症造血灶骨髓增生

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造血微环境与造血干细胞

生理科学进展 1981年第3期 271-274页

作者：陈家佩军事医学科学院二所

机体的造血功能不仅取决于造血实质细胞的数量和性质,也有赖于造血实质细胞所处的微环境的结构和功能的健全完善。60年代后,由于脾结节生成法,体外各种细胞培养技术的建立与应用,造血实质细胞包括造血干细胞的研究有了很大进展。与此同... 详细信息

机体的造血功能不仅取决于造血实质细胞的数量和性质,也有赖于造血实质细胞所处的微环境的结构和功能的健全完善。60年代后,由于脾结节生成法,体外各种细胞培养技术的建立与应用,造血实质细胞包括造血干细胞的研究有了很大进展。与此同时,对造血微环境的重要意义也有了进一步的认识。基础学科的成就促进了临床医学的发展。现已发现,部分再生障碍性贫血、骨髓纤维化等疾病的发生和发展与造血微环境的缺陷有关。因此,造血微环境的研究趋于活跃。至今,造血微环境已成为实验血液学和临床血液学中一个专门术语。这一术语或泛指为造血器官内除造血实质细胞以外所有参与调控造血的间质成份的总称,或

关键词：造血干细胞实质细胞骨髓细胞微环境小鼠小家鼠造血灶微血管系统粒系祖细胞

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新生儿肝脏的组织学观察

蚌埠医学院学报 1988年第4期 264-266+2页

作者：沈宣若卓煜娅蚌埠医学院组织胚胎学教研室

本文收集新生儿肝脏12例,用Bouin氏液固定,HE染色。镜下见肝小叶结构明显,相邻肝小叶分界不清,肝板在切面上呈团块状或条索状,与肝血窦交错排列,肝细胞呈多边形,胞质中有细小的嗜酸性颗粒,有3例围成团块状的肝细胞着色深浅不等。肝小叶... 详细信息

本文收集新生儿肝脏12例,用Bouin氏液固定,HE染色。镜下见肝小叶结构明显,相邻肝小叶分界不清,肝板在切面上呈团块状或条索状,与肝血窦交错排列,肝细胞呈多边形,胞质中有细小的嗜酸性颗粒,有3例围成团块状的肝细胞着色深浅不等。肝小叶内有散在的造血灶,门管周围有1～2层门管周围界板细胞。

关键词：肝脏肝板肝血窦造血灶