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参与连翘苯丙烷合成途径的WRKY转录因子的筛选与鉴定

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中草药 2023年第18期54卷 6055-6064页

作者：张佳琪刘晓冉陈佳茜郭广洋谭新杰赵杏利胥华伟刘浩侯典云河南科技大学农学院河南洛阳471023 洛阳市道地药材繁育与创新利用工程技术研究中心河南洛阳471023

目的筛选出参与连翘Forsythia suspensa苯丙烷合成途径的WRKY转录因子并进行生物信息学分析。方法通过对从连翘转录组数据中筛选出的62条连翘WRKY基因序列进行鉴定;通过采用蛋白理化性质和基序分析、蛋白结构分析、系统进化分析、功能... 详细信息

目的筛选出参与连翘Forsythia suspensa苯丙烷合成途径的WRKY转录因子并进行生物信息学分析。方法通过对从连翘转录组数据中筛选出的62条连翘WRKY基因序列进行鉴定;通过采用蛋白理化性质和基序分析、蛋白结构分析、系统进化分析、功能注释、蛋白互作分析、外源激素处理后实时荧光定量分析等方式进行相关分析。结果最终筛选出52条具有WRKY结构域的连翘WRKY转录因子。WRKY转录因子编码蛋白的氨基酸数目在105~728,相对分子质量在12277.95~80321.99。蛋白基序分析显示其均有WRKY结构域,与拟南芥WRKY转录因子构建系统进化树将连翘52个WRKY转录因子进一步分为3大类;筛选出5个可能参与连翘苯丙烷合成途径的连翘WRKY转录因子,并推测其可能以被MAPK级联反应所调控的方式介导连翘中苯丙烷合成途径。结论通过分析转录组测序结果,从52个连翘WRKY转录因子中筛选出5个可能参与连翘苯丙烷合成途径的转录因子,其表现出组织特异性表达,且对不同浓度茉莉酸甲脂表现出不同的响应,为进一步研究其作用机制提供研究方向。

关键词：连翘次生代谢产物 WRKY 转录因子苯丙烷合成途径

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经典名方中连翘的本草考证

中国实验方剂学杂志 2022年第10期28卷 111-122页

作者：李石飞张立伟詹志来山西大学分子科学研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室太原030006 中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地北京100700

通过查阅历代相关本草、医籍和方书,笔者对经典名方中所用连翘的名称、基原、药用部位、商品规格、性味功效、产地、品质评价及采收加工方法等进行了本草考证,结果表明连翘药材在宋代以前来源为藤黄科湖南连翘Hypericum ascyron及其同... 详细信息

通过查阅历代相关本草、医籍和方书,笔者对经典名方中所用连翘的名称、基原、药用部位、商品规格、性味功效、产地、品质评价及采收加工方法等进行了本草考证,结果表明连翘药材在宋代以前来源为藤黄科湖南连翘Hypericum ascyron及其同属多种植物,多部位入药;宋朝以后转为木犀科连翘Forsythia suspensa的果实。从明代开始,根据采收时间不同,连翘分为青翘和老翘2个规格和2个用法。根据考证结果,建议在经典名方开发过程中对连翘运用时参考以下意见:(1)明清以来经典名方选择木犀科连翘作为基原;(2)方剂出处若无特殊要求,建议明清以来经典名方中选用老翘;(3)无论用青翘还是老翘,青翘采收时间应该是在阳历7月下旬至8月上旬,老翘则在9月份期间采收连翘果实后去子用壳。

关键词：经典名方连翘本草考证木犀科药用部位商品规格功效采收加工

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平山县林果产业发展建议

河北果树 2024年第2期 56-57页

作者：王静璞河北省平山县林业工作站 050400

河北省平山县山场面积广阔,区位优势明显,森林资源丰富,非常适合林果产业发展。整体来看,全县产业化、市场化的林果产业格局尚未形成,本文通过分析总结全县核桃、花椒、连翘现有规模及发展前景,提出平山县几种主要林果产业发展思路和建议。

关键词：核桃花椒连翘产业发展

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连翘提取物对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠甲状腺损伤的影响

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中国免疫学杂志 2023年第5期39卷 978-982页

作者：栗粟陈红跃樊艳王灿于洋梁栋申鹏张小路河南省中医院河南中医药大学第二附属医院甲状腺乳腺病科郑州450000 河南省人民医院郑州大学人民医院乳腺外科郑州450000 河南省中医院河南中医药大学第二附属医院普外一科郑州450000

目的:探讨连翘提取物(FSE)对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)的影响及其可能的作用机制。方法:将90只SD大鼠分为对照组、模型组、FSE 25 mg/kg组、FSE 50 mg/kg组、FSE 100 mg/kg组和硒酵母片组(Selenious组,300μg/kg),除对照组外,其余... 详细信息

目的:探讨连翘提取物(FSE)对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)的影响及其可能的作用机制。方法:将90只SD大鼠分为对照组、模型组、FSE 25 mg/kg组、FSE 50 mg/kg组、FSE 100 mg/kg组和硒酵母片组(Selenious组,300μg/kg),除对照组外,其余各组大鼠均采取皮下注射含猪甲状腺球蛋白的不完全弗氏佐剂制备EAT模型,末次注射完成后FSE25 mg/kg组、FSE 50 mg/kg组、FSE 100 mg/kg组分别给予25、50、100 mg/kg FSE灌胃,Selenious组灌胃300μg/kg硒酵母片,模型组和对照组灌胃等体积生理盐水,连续灌胃2周。HE染色观察甲状腺病理学变化,放射免疫法测定甲状腺功能血清学指标,qRT-PCR检测甲状腺组织炎症相关因子的mRNA水平,ELISA检测血清氧化应激指标,Western blot检测NLRP3/Caspase-1通路蛋白表达情况。结果:对照组甲状腺泡呈椭圆形或圆形,甲状腺组织无淋巴浸润现象,模型组甲状腺泡萎缩、损伤,且伴有上皮增生和间质淋巴浸润现象,FSE(50、100 mg/kg)组、Selenious组甲状腺泡损伤、生皮质增生和炎症细胞浸润改善明显。模型组血清TgAb、TPOAb、TSH、T3、T4、蛋白质羰基、8-OHdG和MDA水平均明显高于对照组(P<0.05),甲状腺组织IL-17、IFN-γmRNA水平和NLRP3、ASC、cleaved-Caspase-1/Pro-Caspase-1及cleaved-IL-1β/Pro-IL-1β蛋白表达均高于对照组(P<0.05),而甲状腺组织中IL-4和IL-10 mRNA水平均低于对照组(P<0.05)。FSE 50 mg/kg组、FSE 100 mg/kg组和Selenious组血清TgAb、TPOAb、TSH、T3、T4、蛋白质羰基、8-OHdG及MDA水平均明显低于模型组(P<0.05),甲状腺组织中IL-17、IFN-γmRNA水平和NLRP3、ASC、cleavedCaspase-1/Pro-Caspase-1及cleaved-IL-1β/Pro-IL-1β蛋白表达均低于模型组(P<0.05),而甲状腺组织中IL-4和IL-10 mRNA水平均高于模型组(P<0.05)。结论:FSE可改善EAT大鼠甲状腺损伤,可能与调节NLRP3炎症小体和免疫失调有关。

关键词：实验性自身免疫性甲状腺炎连翘炎症免疫 NLRP3

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中国不同地区连翘精油成分比较分析

天然产物研究与开发 2023年第10期35卷 1739-1746页

作者：邱智军原江锋龚明贵河南科技大学食品与生物工程学院河南省食品微生物工程技术研究中心洛阳471023

为了探讨连翘生长环境和采收时间的影响,对我国主产区连翘精油进行了系统评价。采用GC-MS技术对不同产地的青翘(green Forsythiae Fructus,GF)和老翘(ripe Forsythiae Fructus,RF)中的精油成分进行了分析,为连翘的资源化利用提供参考。... 详细信息

为了探讨连翘生长环境和采收时间的影响,对我国主产区连翘精油进行了系统评价。采用GC-MS技术对不同产地的青翘(green Forsythiae Fructus,GF)和老翘(ripe Forsythiae Fructus,RF)中的精油成分进行了分析,为连翘的资源化利用提供参考。共鉴定出54种化合物,其中常见化合物12种,烯烃和醇类是最丰富的两种成分,且结构多样。基于主成分分析(PCA)的质量评价表明,湖北武汉RF、陕西洛南RF和安徽六安RF的综合评价得分较高;PCA和聚类分析(CA)能够区分样品中的GF和RF,也表明,采收期和区域环境共同影响连翘精油的成分。从精油成分角度考虑,应优先选用老翘进行开发和利用。应用精油的特性作为连翘采收期和区域环境的化学分类标志是可行的。

关键词：连翘精油聚类分析主成分分析气相色谱-串联质谱

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连翘的研究进展及质量标志物的预测分析

中华中医药学刊 2022年第4期40卷 19-27页

作者：赵佩媛韩立柱汪芸兰邱金清张新博段玺宋逍陕西中医药大学陕西咸阳712046 陕西中医药大学附属医院陕西咸阳712000

连翘为我国常用的大宗中药材之一,主要化学成分为苯乙醇苷类、木脂素类、萜类及挥发油、酚酸类等成分,具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤、抗氧化等活性。由于连翘中有效成分较多且比较复杂,采用单一的指标作为质量标准的依据不太准确,所... 详细信息

连翘为我国常用的大宗中药材之一,主要化学成分为苯乙醇苷类、木脂素类、萜类及挥发油、酚酸类等成分,具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤、抗氧化等活性。由于连翘中有效成分较多且比较复杂,采用单一的指标作为质量标准的依据不太准确,所以对连翘化学成分和药理作用进行归纳总结,并以此为基础,从化学成分特有性、有效性、可测性、入血化学成分、不同配伍中表达组分几个方面预测连翘质量标志物,推测苯乙醇苷类、木脂素类、连翘酯苷A、连翘苷等成分可作为质量标志物,为连翘质量控制评价、后续研究与开发提供依据。

关键词：连翘化学成分药理作用质量标志物

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连翘叶褐斑病生防细菌的筛选与鉴定

中药材 2022年第11期45卷 2550-2555页

作者：张永芝袁王俊刘鹏张维瑞马园园何艳霞河南大学中医药研究院河南开封475004 郑州绿博园管理中心河南郑州451450 河南大学生命科学学院河南开封475004

目的:筛选对连翘叶褐斑病病原菌链格孢Alternaria alternatay有抑制作用的生防细菌。方法:采用平板对峙法,从健康连翘植株根际土壤中分离和筛选生防细菌;结合形态学特征和分子生物学方法进行鉴定;通过抑菌率评估生防潜力。结果:菌株BS30... 详细信息

目的:筛选对连翘叶褐斑病病原菌链格孢Alternaria alternatay有抑制作用的生防细菌。方法:采用平板对峙法,从健康连翘植株根际土壤中分离和筛选生防细菌;结合形态学特征和分子生物学方法进行鉴定;通过抑菌率评估生防潜力。结果:菌株BS301在平板对峙试验中对链格孢菌的抑制率达59.52%;菌株BS301属于枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis;菌株BS301发酵液、上清液和菌悬液对链格孢菌的抑菌率分别为91.94%,86.83%和70.33%;菌株BS301发酵液稀释1000倍和嘧菌环胺800倍稀释液对连翘叶褐斑病的抑制率分别为68.53%和69.04%,二者没有显著差异。结论:枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(菌株BS301)对链格孢菌具有显著抑制作用,综合生态安全和抑菌效果,其可推广应用于连翘叶褐斑病的防治。

关键词：连翘褐斑病生防细菌枯草芽孢杆菌

连翘FsUGT83A1基因的克隆、生物信息学和表达分析

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中药材 2022年第10期45卷 2340-2345页

作者：金宗元赵娟娟张全玲吴娜娜王建华房信胜山东农业大学农学院/作物生物学国家重点实验室山东泰安271018

目的:克隆连翘糖基转移酶基因FsUGT83A1,并对其进行生物信息学和组织表达分析,了解其与连翘苷合成的相关性。方法:基于连翘基因组和转录组数据,利用RT-PCR扩增FsUGT83A1全长cDNA并进行生物信息学分析;运用实时荧光定量PCR检测基因在不... 详细信息

目的:克隆连翘糖基转移酶基因FsUGT83A1,并对其进行生物信息学和组织表达分析,了解其与连翘苷合成的相关性。方法:基于连翘基因组和转录组数据,利用RT-PCR扩增FsUGT83A1全长cDNA并进行生物信息学分析;运用实时荧光定量PCR检测基因在不同组织中的表达;采用HPLC测定成分在不同组织中的含量。结果:FsUGT83A1基因的蛋白质编码区(CDS)全长为1 365 bp,编码一个由454个氨基酸组成的蛋白,该蛋白为亲水性非跨膜蛋白,亚细胞定位主要在细胞质中。多序列比对分析表明,该基因具有UGT特有的保守序列PSPG-box;系统进化分析表明,FsUGT83A1与拟南芥UGT83A1聚在一个亚家族,与同科植物油橄榄UGT83A1的同源性最高。该基因在叶中的表达显著高于花、果等组织。HPLC定量分析表明,连翘苷在叶中的含量显著高于其他组织。FsUGT83A1的组织表达与连翘苷的组织分布具有显著相关性,推测该基因可能是调控连翘苷糖基化合成过程的功能基因。结论:FsUGT83A1为首次从连翘中克隆得到的UGT基因,为进一步研究该基因的功能及调控机制提供了研究基础。

关键词：连翘 UGT 基因克隆生物信息学分析组织表达

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连翘抗肿瘤活性物质的分离提取及鉴定

黑龙江畜牧兽医 2023年第23期 90-97页

作者：徐子茗金德利江毓桦李丹娜何玉霞魏梓如李鑫刘微哈尔滨市南岗区疾病预防控制中心健康教育科哈尔滨150040 哈尔滨市南岗区疾病预防控制中心地方病科哈尔滨150040 哈尔滨医科大学公共卫生学院流行病学教研室哈尔滨150086 哈尔滨医科大学公共卫生学院教学实验中心哈尔滨150086 深圳市第二人民医院病理科广东深圳518025

为了从连翘中提取出高效低毒的抗肿瘤活性物质,试验采用水煮提取、乙醇沉淀、大孔吸附树脂柱层析、薄层层析的方法从连翘中分离提取到连翘抗肿瘤活性物质FS-4,通过超高效液相色谱仪串联四级杆飞行时间质谱仪鉴定FS-4的化学成分,并研究了... 详细信息

为了从连翘中提取出高效低毒的抗肿瘤活性物质,试验采用水煮提取、乙醇沉淀、大孔吸附树脂柱层析、薄层层析的方法从连翘中分离提取到连翘抗肿瘤活性物质FS-4,通过超高效液相色谱仪串联四级杆飞行时间质谱仪鉴定FS-4的化学成分,并研究了FS-4对SGC-7901的增殖抑制作用及超微结构的影响。结果表明:从连翘中分离提取到14种化学成分,分别由咖啡酸、齐墩果酸、白桦脂酸、熊果酸、软脂酸、硬脂酸6种已知成分和8种未知成分组成。FS-4对SGC-7901的增殖具有抑制作用,FS-4浓度越高,时间越长对其增殖抑制作用越大,具有剂量时间依赖性;在6,12,24,36小时时,FS-4作用于SGC-7901的半数抑制浓度(IC50)分别为87.38,56.10,34.45,3.23μg/mL。FS-4作用SGC-7901后,其核浆比明显减小,核仁消失,胞浆中出现明显的空泡,染色质密集边缘化,细胞表面绒毛脱失,且质膜呈现叶片样突起,并有凋亡小体形成。说明从连翘中分离、提取得到的FS-4具有抗肿瘤活性,可抑制SGC-7901的增殖及诱导其凋亡。

关键词：连翘胃癌细胞株SGC-7901 抗肿瘤活性物质分离提取鉴定