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th17细胞与血液肿瘤

广东医学 2012年第22期33卷 3501-3503页

作者：宋渊石庆之南昌大学研究生院医学部南昌330006 南昌大学第二附属医院血液科南昌330006

机体特异性免疫应答包括细胞免疫和体液免疫，其中t细胞介导的细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的主体。依据t细胞表面抗原的不同，可将t细胞分为CD4^＋t细胞和CD8^＋t细胞。依据CD4^＋t细胞分化过程和功能特征的不同，传统意义上将CD4^＋t细... 详细信息

机体特异性免疫应答包括细胞免疫和体液免疫，其中t细胞介导的细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的主体。依据t细胞表面抗原的不同，可将t细胞分为CD4^＋t细胞和CD8^＋t细胞。依据CD4^＋t细胞分化过程和功能特征的不同，传统意义上将CD4^＋t细胞分为辅助性t细胞1型（th1细胞）、辅助性t细胞2型（th2细胞）、

关键词： th17细胞血液肿瘤 CD4^+t细胞辅助性t细胞1型 CD8^+t细胞特异性免疫应答 t细胞表面抗原 t细胞介导

粒细胞样髓源性抑制细胞自噬对小鼠Lewis肺癌移植瘤发展的影响

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粒细胞样髓源性抑制细胞自噬对小鼠Lewis肺癌移植瘤发展的影响

作者：郭红叶江苏大学

学位级别：硕士

目的观察Lewis lung carcinoma(LLC)细胞株来源的细胞培养上清(tumor cellconditioned medium,tCCM)对粒细胞样髓源性抑制细胞(granulocytic myeloidderived suppressor cells,G-MDSC)自噬的影响;研究肿瘤微环境下的G-MDSC自噬对其自身生存与免疫抑制功能的影响;研究G-MDSC自噬对小鼠Lewis肺癌移植瘤发展的影响。方法1.G-MDSC分离及鉴定构建小鼠Lewi s肺癌移植瘤模型,磁珠分选脾脏G-MDSC,标记细胞表面Ly-6G、Ly-6C和CD11b后,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测其纯度;将分离得到的细胞涂片后进行瑞士-吉姆萨复合染液染色,观察细胞形态。***细胞株来源的tCCM的制备Lewis细胞用含有10%NBCS(newborn calf serum)的DMEM高糖培养液培养,待细胞汇合度达到90%的时候,用无血清的DMEM替换培养液,培养24h后,收集上清。***抑制G-MDSC凋亡与上调ROS(Reactive oxygen species,ROS)用不同浓度的tCCM处理G-MDSC12h、24h,Annexin V/PI染色法,检测细胞凋亡情况,DCFDA染色后FCM检测对细胞效应分子ROS的影响。***促进G-MDSC自噬的检测磁珠分选得到的G-MDSC在含有tCCM和氯喹(Chloroquine,CQ)的10%FBS(fatal bovine serum)RPMI 1640刺激2h、4h,收集细胞,提取总蛋白,WB(western blot)检测自噬小体形成标志物LC3Ⅱ(light chain 3Ⅱ)的水平。5.自噬抑制G-MDSC凋亡的检测磁珠分选获得G-MDSC,在含有tCCM和3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA自噬的抑制剂)RPMI 1640中培养12h、24h,收集细胞,Annexin V/PI染色,FCM检测自噬对G-MDSC生存的影响。6.自噬上调G-MDSC功能的检测将G-MDSC在含tCCM和3-MA的RPMI 1640中培养。培养12h,收集细胞,与小鼠脾脏CD4t细胞共培养,培养体系中加入抗CD3/CD28抗体,形成CD4t细胞增殖体系,通过3H-胸腺嘧啶核苷([3H]-thymidine,3H-td R)掺入法检测CD4t细胞增殖情况。培养12h、24h,收集细胞,DCFDA染色后FCM检测ROS的表达;提取总蛋白检测精氨酸酶(arginase 1,ARG1)活性。7.G-MDSC自噬对小鼠Lewis肺癌移植瘤发展的影响构建小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,分别在16、23d,尾静脉注射3-MA阻断自噬的G-MDSC,观察小鼠移植瘤生长情况,FCM检测分泌IFN-γ的辅助性t细胞1型(helper t cell type 1,th1)和细胞毒性t细胞1型(cytotoxic t lymphocytes type 1,tc1)的比例。结果1.在体外,将不同浓度的tCCM加入到对G-MDSC培养体系中,FCM检测刺激12h、24h对细胞生存与效应分子ROS的影响。结果显示tCCM有利于G-MDSC在体外存活,存在浓度依赖效应;tCCM上调G-MDSCs的效应分子ROS的水平。2.将G-MDSC在含有tCCM和氯喹(Chloroquine,CQ)RPMI 1640中培养2h、4h,WB检测细胞中LC3Ⅱ水平。结果显示与对照组相比,tCCM处理2、4h上调了胞内LC3Ⅱ水平,表明了肿瘤微环境中,G-MDSC自噬的水平会上调(P1)。3.选取tCCM占培养体系体积的1/2来研究自噬对G-MDSC的影响,用3-MA抑制自噬,体外培养24h,观察抑制自噬对G-MDSC在体外存活的影响。结果显示,与1/2tCCM组相比,1/2tCCM+3-MA组活细胞比例降低,结果具有统计学差异(Pt细胞增殖的影响,结果显示1/4tCCM+3-MA组与1/4tCCM组相比,在抑制了自噬后,G-MDSC对CD4t细胞增殖的抑制作用变弱,结果具有统计学差异(P1/2tCCM+3-MA组与1/2tCCM组相比,G-MDSC抑制CD4t细胞增殖作用变弱,结果也具有统计学差异(Pt细胞增殖的抑制作用。5.体外培养12h,提取细胞总蛋白,检测ARG1活性结果显示,1/2tCCM+3-MA组与1/2tCCM组相比,在抑制了自噬后,G-MDSC细胞中ARG1活性降低,结果具有统计学差异(P1)。6.

关键词：粒细胞样髓源性抑制细胞肿瘤细胞培养上清细胞自噬辅助性t细胞1型细胞毒性t细胞1型精氨酸酶1 活性氧

原发性舍格伦综合征患者血浆弗林蛋白酶和th1型细胞因子水平表达与唇腺损害及相关腺体功能的关系研究

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现代检验医学杂志 2021年第4期36卷 10-14,50页

作者：岳晓琳米晓燕白圆圆周红敏邯郸市中心医院免疫科河北邯郸056000

目的探讨原发性舍格伦综合征(pSS)患者血浆弗林蛋白酶(FURIN)和辅助性t细胞1(th1)型细胞因子水平表达与唇腺损害及相关腺体功能的关系。方法将邯郸市中心医院2017年8月~2019年8月收治的pSS患者109例作为pSS组,选取同期于邯郸市中心医院... 详细信息

目的探讨原发性舍格伦综合征(pSS)患者血浆弗林蛋白酶(FURIN)和辅助性t细胞1(th1)型细胞因子水平表达与唇腺损害及相关腺体功能的关系。方法将邯郸市中心医院2017年8月~2019年8月收治的pSS患者109例作为pSS组,选取同期于邯郸市中心医院体检的健康志愿者90例作为对照组。比较两组血浆FURIN水平及th1型细胞因子[白介素(IL)-2,IL-7,γ干扰素(INF-γ)]与th2型细胞因子(IL-4,IL-13)水平。根据欧洲抗风湿联盟舍格伦综合征疾病活动指数(ESSDAI)将患者分成轻度组(n=37)、中度组(n=48)和重度组(n=24),比较三组上述各指标水平与唇腺损害及相关腺体功能指标(唾液流率、唇腺病理分级和Schirmer试验)水平。分析pSS患者抗SSA抗体、抗SSB抗体、血浆FURIN及th1和th2型细胞因子的关系,并观察血浆FURIN水平和th1,th2型细胞因子水平与唇腺损害及相关腺体功能指标的相关性。结果pSS组血浆FURIN及血清IL-2,IL-7,INF-γ,IL-4,IL-13水平均高于对照组(t=8.054~156.875,均Pth1/th2低于对照组(t=3.624,P=0.000)。中、重度组血浆FURIN及血清IL-2,IL-7,INF-γ,IL-4,IL-13水平、唇腺病理评分高于轻度组(t=5.339~36.092,均Pt=4.240~13.707,均Pth1/th2,唾液流率及左、右眼Schirmer试纸浸湿长度低于轻度组(t=3.013~42.715,均Pt=3.178~18.641,均P性患者的血浆FURIN水平及血清IL-2,IL-7,INF-γ,IL-4,IL-13水平高于阴性患者(t=2.560~14.333,均Pth1/th2低于阴性患者(t=2.363~4.604,均Pth1/th2,唾液流率及左、右眼Schirmer试纸浸湿长度呈负相关(r=-0.715~-0.404,均Pth1及th2型细胞因子水平与唇腺损害及相关腺体功能指标相关,临床可能通过测定血浆FURIN水平,进一步了解pSS的发病机制。

关键词：原发性舍格伦综合征弗林蛋白酶辅助性t细胞1型唇腺损害腺体功能

肠道菌群促进血管紧张素Ⅱ诱导的高血压和血管功能障碍

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中华高血压杂志 2016年第10期24卷 927-927页

作者：刘莉叶鹏 Karbach SH Schnfelder t Brandao I Wilms E Hrmann N Jckel S Schüler R Finger S Knorr M Lagrange J Brandt M Waisman A Kossmann S Schüfer K Münzel t Reinhardt C Wenzel P

肠道微生物对宿主生理反应及对免疫功能的发展来说必不可少。肠道菌群对血压和全身血管功能等这些由免疫细胞功能决定的生理过程的影响知之甚少。方法：与常规饲养的小鼠（conventionally raised rats,CONV-R）比较,未受任何细菌影响的... 详细信息

肠道微生物对宿主生理反应及对免疫功能的发展来说必不可少。肠道菌群对血压和全身血管功能等这些由免疫细胞功能决定的生理过程的影响知之甚少。方法：与常规饲养的小鼠（conventionally raised rats,CONV-R）比较,未受任何细菌影响的无菌小鼠（GF）表现出较为严重的全身性辅助性t细胞1型滞后。

关键词：血管功能障碍肠道菌群血管紧张素Ⅱ 高血压辅助性t细胞1型免疫细胞功能无菌小鼠肠道微生物