检索结果-南通市图书馆

环境与职业医学 2024年第4期41卷 362-366,374页

作者：张聪罗薇王莎巢杰东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室江苏南京210009 东南大学医学院医学生理系江苏南京210009

[背景]肺纤维化疾病目前早期缺少筛查诊断方法,后期缺乏特效治疗措施,因此急需探究其机制并开发针对性的治疗方法。[目的]筛选病理条件下差异表达的环状RNA(circRNA)hsa_circUCK2的表达情况,探究其对肺纤维化的影响。[方法]在细胞实验中... 详细信息

[背景]肺纤维化疾病目前早期缺少筛查诊断方法,后期缺乏特效治疗措施,因此急需探究其机制并开发针对性的治疗方法。[目的]筛选病理条件下差异表达的环状RNA(circRNA)hsa_circUCK2的表达情况,探究其对肺纤维化的影响。[方法]在细胞实验中,使用小干扰RNA(siRNA)敲除HPF-a细胞中hsa_circUCK2,TGF-β1刺激HPF-a细胞,设立si-NC组、si-circUCK2组、si-NC+TGF-β1处理组、si-circUCK2+TGF-β1处理组4组,Western blot法检测4组HPF-a细胞中纤连蛋白(FN1)表达情况,划痕实验检测HPF-a细胞迁移能力,CCK-8实验检测TGF-β1刺激的2组(si-NC+TGF-β1处理组和si-circUCK2+TGF-β1处理组)HPF-a细胞活性。在动物实验中,健康SPF级雄性C57BL/6小鼠48只,随机分为生理盐水+si-con组,生理盐水+si-circ_0000115组,SiO_(2)+si-con组,SiO2+si-circ_0000115组4组。mmu_circ_0000115是hsa_circUCK2的小鼠同源基因,气管滴注siRNA敲除小鼠肺circRNA mmu_circ_0000115,48 h后通过气管滴注SiO2悬液(0.2 g·kg^(-1),50 mg·mL^(-1))构建小鼠肺纤维化模型,实时荧光定量PCR检测小鼠各脏器中敲除效率,Western blot检测肺组织中I型胶原α2蛋白(COL1A2)表达情况,天狼星红检测肺组织中胶原合成情况。[结果]在细胞实验中,Western blot结果显示,敲除hsa_circUCK2可下调TGF-β1刺激的HPFa细胞中FN1的表达水平(P 组织中被显著敲除mmu_circ_0000115(P 组相比,敲低mmu_circ_0000115可以降低COL1A2蛋白表达水平(P 组小鼠肺组织中胶原的产生和沉积减少。[结论]敲低hsa_circUCK2抑制成纤维细胞活化和减少肺纤维化模型小鼠中胶原沉积。提示hsa_circUCK2参与肺纤维化进程,可能是肺纤维化的潜在治疗靶点。

关键词：环状RNA 转录组芯片 hsa_circUCK2 肺纤维化人肺成纤维-成人细胞

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LECT2通过与CD209a受体结合激活巨噬细胞提高细菌性败血症小鼠存活率

LECT2通过与CD209a受体结合激活巨噬细胞提高细菌性败血症小鼠存...

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浙江省动物学会第十二届会员代表大会暨学术讨论会

作者：陆新江陈炯虞朝辉史雨红章瑞呈何宇青黄左安吕技能张顺徐磊宁波大学生物与海洋科学系浙江大学医学院附属第一医院消化科宁波市第二医院宁波市第一医院消化科

败血症是临床上主要的死亡原因,主要由细菌感染引起,包括大肠杆菌(Escherichiacoli)和绿脓杆菌(Pseudomonasaeruginosa)。在细菌性败血症模型小鼠中,LECT2注射明显改善存活率。进而发现LECT2注射败血症小鼠血液、肝和脾组织中的载菌量... 详细信息

败血症是临床上主要的死亡原因,主要由细菌感染引起,包括大肠杆菌(Escherichiacoli)和绿脓杆菌(Pseudomonasaeruginosa)。在细菌性败血症模型小鼠中,LECT2注射明显改善存活率。进而发现LECT2注射败血症小鼠血液、肝和脾组织中的载菌量明显低于生理盐水注射组。LECT2注射还减少了大肠杆菌败血症小鼠血浆中促炎性细胞因子肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素1β(IL-1β),同时IL-10水平表达增加。通过氯膦酸二钠脂质体法去除小鼠巨噬细胞和巨噬细胞过继转移两种方法,研究巨噬细胞在LECT2促进大肠杆菌败血症小鼠存活率中的作用。巨噬细胞去除以后,LECT2注射的败血症小鼠存活率没有比对照提高。注射LECT2处理的巨噬细胞以后,败血症小鼠的存活率比对照显著提高。我们的结果显示LECT2可通过巨噬细胞增强败血症小鼠的存活率。为进一步理解LECT2对巨噬细胞的作用细节,表达谱芯片技术用于研究5μg/ml LECT2作用3.5 h和48 h以后腹腔巨噬细胞的基因表达变化。表达谱芯片的原始数据已经提交到GEO数据库,登陆号为GSE33721。采用PathVisio软件分析表达变化基因的信号途径,发现根据p-value细胞因子-细胞因子受体结合途径在LECT2处理3.5 h的表达变化基因的途径中列为首位,而吞噬体途径在LECT2处理48 h的表达变化基因的途径中列为首位。我们据此研究LECT2对巨噬细胞吞噬、杀菌和细胞因子产生的影响。发现LECT2处理的巨噬细胞在杀菌和吞噬能力上也比对照更强。为发现LECT2在巨噬细胞的结合蛋白,通过酵母双杂交筛选腹腔巨噬细胞文库中可与LECT2结合的蛋白。结果发现LECT2可与C型凝集素受体CD209a的CRD区结合,进而在采用免疫共沉淀在人胚肾细胞HEK293T中证实CD209a的CRD区与LECT2的存在特异性互作关系。进而评估LECT2在CD209a敲除小鼠的效果。LECT2显著除低了野生型败血症小鼠的致死率,而对于CD209a敲除小鼠没有显著效果。我们的结果说明CD209a是LECT2在巨噬细胞的内源性受体,为CLRs可作为自身蛋白受体提供新的证据。我们的研究说明LECT2通过激活巨噬细胞活性可用于治疗败血症,因而拥有潜在的临床价值。另一个重要的发现是LECT2与CD209a可特异性结合,从而调控巨噬细胞活性。因为LECT2参与多种疾病的病理生理并且它可激活巨噬细胞,将来的研究将集中在LECT2治疗其它疾病的作用。

关键词： LECT2 CD209a受体败血症巨噬细胞转录组芯片

来源： cnki会议评论

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