检索结果-南通市图书馆

中国实用眼科杂志 2002年第6期20卷 411-414页

作者：李炜黄丽娜深圳市松岗人民医院眼科518105 深圳市眼科医院518001

角膜上皮干细胞(corneal epithelial stem cells)的发现及对其生物学特性的逐渐了解,大大增强了人们对部分眼表疾病的认识,针对角膜上皮干细胞缺乏所采取的治疗措施也越来越多地应用于临床.

关键词：干细胞缺乏病因临床表现诊断治疗角膜上皮干细胞

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角膜上皮干细胞缺失动物模型的方法研究

国际眼科杂志 2009年第8期9卷 1583-1584页

作者：刘先宁吴洁朱秀萍陕西省眼科研究所中国陕西省西安市710002 中国陕西省西安市眼科医院 710002

目的:建立兔角膜上皮干细胞缺失动物模型,为人工生物角膜上皮实验研究奠定基础。方法:方法一,单纯去除角膜缘浅板层环周内外宽各2mm,深约100～150μm角膜组织;方法二,在方法一的基础上,再去除角膜中央浅板层组织约100～150μm。术后,裂... 详细信息

目的:建立兔角膜上皮干细胞缺失动物模型,为人工生物角膜上皮实验研究奠定基础。方法:方法一,单纯去除角膜缘浅板层环周内外宽各2mm,深约100～150μm角膜组织;方法二,在方法一的基础上,再去除角膜中央浅板层组织约100～150μm。术后,裂隙灯显微镜下观察,以角膜混浊、上皮荧光素染色及新生血管为参数评价,3项参数得分之和为该动物时间点总评分。以角膜新生血管评分在3分以上,角膜上皮混浊在2分以上,采用印迹细胞法角膜面取材行角蛋白K3单克隆抗体间接免疫荧光法检测表达为阴性的。结果:单纯去除角膜缘的动物模型10眼有4眼成功(40%),从制作至成功平均时间29.5±1.3d。角膜缘联合角膜中央板层组织共同去除组,10眼均成功(100%),从制作至成功平均时间为15.8±0.8d,两组成功率对比差异有统计学意义(χ2=8.58,P角膜采用印迹细胞法取材行角蛋白K3单克隆抗体间接免疫荧光法检测表达均为阴性。结论:采用角膜缘联合角膜中央上皮共同去除法制备角膜上皮干细胞缺乏模型成功率高,周期短,值得推广应用。

关键词：角膜上皮干细胞兔动物模型

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角膜上皮干细胞定位特征的免疫组织化学研究

中国实用眼科杂志 1999年第3期17卷 142-144页

作者：张莉赵光喜吴惠群北京医科大学第三临床医院北京市第四医院

利用单克隆抗体ＡＥ５与分化型角膜上皮细胞中角蛋白Ｋ３特异性结合，研究缺乏分化标志特征的角膜上皮干细胞定位特点，应用免疫组织化学方法显示Ｋ３阳性表达的区域分布于除角膜缘上皮基底部以外所有角膜上皮细胞中，角膜上皮干细胞存... 详细信息

利用单克隆抗体ＡＥ５与分化型角膜上皮细胞中角蛋白Ｋ３特异性结合，研究缺乏分化标志特征的角膜上皮干细胞定位特点，应用免疫组织化学方法显示Ｋ３阳性表达的区域分布于除角膜缘上皮基底部以外所有角膜上皮细胞中，角膜上皮干细胞存在于角膜缘基底部ＡＥ５抗体反应阴性细胞中，即角膜干细胞位于角膜缘上皮层基底部。

关键词：角膜上皮干细胞角蛋白K3 眼表疾病单克隆抗体

人角膜上皮干细胞的低钙培养及碱性成纤维细胞生长因子对其增殖的影响

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中华眼科杂志 2001年第4期37卷 259-262,T003页

作者：才瑜吴静安北京大学第一医院眼科 100034

目的　探讨如何获取较纯的人角膜上皮干细胞 ,以及碱性成纤维细胞生长因子(fibroblastgrowthfactor,bFGF)对人角膜缘上皮干细胞增殖的影响 ,为干细胞的移植奠定基础。方法采用低钙培养法对人角膜缘组织行体外培养 ,将培养的细胞行AE5免... 详细信息

目的　探讨如何获取较纯的人角膜上皮干细胞 ,以及碱性成纤维细胞生长因子(fibroblastgrowthfactor,bFGF)对人角膜缘上皮干细胞增殖的影响 ,为干细胞的移植奠定基础。方法采用低钙培养法对人角膜缘组织行体外培养 ,将培养的细胞行AE5免疫荧光染色 ,观察培养细胞的分化状态 ,并将其分别置于不同浓度的bFGF中 ,通过数码照相技术和计算机图像分析系统 ,检测角膜干细胞的增殖。结果　体外培养的细胞以角膜上皮干细胞为主 ;不同浓度的bFGF(1～ 10 0ng/ml)可促进体外培养的人角膜缘上皮干细胞的增殖 (P 0 0 5 )。结论　将无钙培养液与低钙培养基结合 ,可获得较纯的、未分化的角膜干细胞 ;bFGF对人角膜上皮干细胞的增殖具有重要的促进作用。计算机图像分析系统适用于定量检测呈膜状生长的上皮细胞增殖 ,是一种新颖、实用、准确的检测手段。

关键词：角膜上皮干细胞细胞培养碱性成纤维细胞生长因子计算机辅助图像处理

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改良组织块培养法体外培养人角膜上皮干细胞

中国组织工程研究 2020年第25期24卷 4012-4017页

作者：许中中余晓菲王丽娅郑州人民医院眼科河南省郑州市450003 河南省人民医院眼科河南省郑州市450003

背景:角膜上皮干细胞定位于角膜缘,又称之为角膜缘干细胞,临床上由于眼表严重热烧伤、化学性烧伤、慢性炎症等原因引起的角膜缘干细胞缺乏或功能障碍治疗较为棘手。目前利用组织工程技术体外培养角膜上皮干细胞并进行临床移植成为新型... 详细信息

背景:角膜上皮干细胞定位于角膜缘,又称之为角膜缘干细胞,临床上由于眼表严重热烧伤、化学性烧伤、慢性炎症等原因引起的角膜缘干细胞缺乏或功能障碍治疗较为棘手。目前利用组织工程技术体外培养角膜上皮干细胞并进行临床移植成为新型有效的治疗方向。目的:探讨在无血清培养条件下采用改良组织块培养法培养人角膜上皮干细胞的可行性。方法:人角膜缘组织来自河南省眼库,植片直径小于8 mm角膜移植术后的供者剩余眼球材料,手术显微镜下剖取角膜缘上皮层外2/3区域,采用2种方法培养人角膜上皮干细胞,常规组织块培养组是将组织块上皮面向上贴壁,加入K-SFM培养液后置于37℃、体积分数为5%CO 2细胞培养箱中培养;改良组织块培养组是先将组织块浸泡于K-SFM培养液中,置于细胞培养箱中孵育12 h,然后组织块上皮面向下贴壁培养。组织块周边有细胞游离出贴壁生长记作“培养第1天”,每日相差显微镜下观察细胞生长变化。利用免疫荧光染色技术检测改良组织块培养第5,10,14天时原代细胞中p63及K3的表达。结果与结论:①改良组织块培养组出膜时间明显短于常规组织块培养组(P细胞生长状态良好,培养第10天可见小体积细胞较多,聚集成灶状分布;培养第14天可见细胞克隆灶,克隆灶内细胞体积较小,形态均一;③培养第5天,K3表达量较多,p63表达量较少;培养第10天,K3和p63表达量均增多;培养第14天,K3表达量未见明显增多,p63表达量明显增多;④在无血清培养条件下,改良组织块培养法能显著促进角膜上皮干细胞的游离,提高体外培养细胞数量,为人角膜缘上皮组织片的构建提供种子细胞。

关键词：角膜上皮干细胞无血清培养组织块培养改良 K3 p63 标记物

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活体及体外条件下对角膜上皮干细胞的定位

中国组织工程研究 2014年第1期18卷 94-99页

作者：许中中余晓菲杜连心李晶王丽娅郑州大学第一附属医院眼科河南省郑州市450052 河南省眼科研究所河南省郑州市450003

背景:眼表存在两种形式的上皮干细胞即角膜上皮干细胞和结膜上皮干细胞,角膜上皮干细胞在角膜上皮细胞更新和角膜透明的维持方面起着重要作用。目的:采用活体激光扫描角膜共焦显微镜和免疫荧光染色技术相结合的方法,从活体和体外层面上... 详细信息

背景:眼表存在两种形式的上皮干细胞即角膜上皮干细胞和结膜上皮干细胞,角膜上皮干细胞在角膜上皮细胞更新和角膜透明的维持方面起着重要作用。目的:采用活体激光扫描角膜共焦显微镜和免疫荧光染色技术相结合的方法,从活体和体外层面上对角膜上皮干细胞进行定位研究。方法:收集2009年9月至2012年9月来河南省眼科研究所就诊的单侧角膜缘干细胞缺乏患者,使用活体激光扫描角膜共焦显微镜检查患者双眼,健侧眼为对照。扫描方位依次为中央角膜及上、下、左、右方的角膜缘,记录扫描图像并分析。眼球材料来自于河南省眼库,切取角膜中央和角膜缘组织,组织包埋剂包被、冰冻切片,切片厚度5-7μm;免疫荧光染色技术检测p63、ABCG2、K3和Connexin 43在角膜中央及角膜缘上皮层的表达。结果与结论:共有24例患者确诊为单侧角膜缘干细胞缺乏,活体激光扫描角膜共焦显微镜下患侧眼角膜病变区可见结膜细胞及杯状细胞;角膜缘区域Vogt栅栏状结构消失,色素细胞消失,取而代之的是大量纤维瘢痕化组织。免疫荧光染色示表达ABCG2和p63的细胞主要在角膜缘上皮基底层,尤其在近结膜侧的角膜缘及角膜缘中间部表达相对较高,而中央角膜上皮层细胞不表达;K3及Connexin43在角膜缘上皮基底细胞层不表达,中央角膜上皮全层表达。通过活体激光扫描角膜共焦显微镜观察及干细胞标记物检测显示角膜上皮干细胞主要存在于角膜缘外2/3区域的Vogt栅栏基底部及钉突结构中。

关键词：干细胞培养角膜上皮干细胞活体激光扫描角膜共焦显微镜免疫荧光染色定位国家自然科学基金

角膜上皮干细胞的功能定位及其与眼表疾病的关系

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眼科学 2019年第4期8卷 127-133页

作者：范军华解放军第910医院眼科中心福建泉州

角膜上皮干细胞具有更新修复角膜上皮的重要功能,其定位于角膜缘受到广泛认可,但有越来越多的研究表明,不管是通过特异性标识物定位还是功能定位,都无法证实角膜上皮干细胞仅位于角膜缘,角膜缘干细胞在角膜上皮更新修复方面起到的作用... 详细信息

角膜上皮干细胞具有更新修复角膜上皮的重要功能,其定位于角膜缘受到广泛认可,但有越来越多的研究表明,不管是通过特异性标识物定位还是功能定位,都无法证实角膜上皮干细胞仅位于角膜缘,角膜缘干细胞在角膜上皮更新修复方面起到的作用有限。本文通过对角膜上皮干细胞研究的不同观点和证据的阐述,对近年来有关角膜上皮干细胞的功能定位及其与眼表疾病的关系研究作一综述。

关键词：角膜上皮干细胞角膜缘干细胞眼表疾病角膜缘干细胞功能障碍

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角膜原位癌起源于角膜上皮干细胞的实验研究

眼科新进展 2011年第6期31卷 527-528,532页

作者：刘琳李永平李燕张波林健贤张文忻广州军区广州总医院眼科广东省广州市510010 中山大学中山眼科中心广东省广州市510060

目的研究角膜原位癌的组织病理学特性,探讨角膜上皮干细胞在角膜原位癌发生过程中的作用。方法收集8例角膜原位癌标本,常规石蜡包埋切片,HE染色,做形态学检查;并对其做P63和AE5免疫组化研究。结果病理检查发现角膜原位癌的癌细胞在上皮... 详细信息

目的研究角膜原位癌的组织病理学特性,探讨角膜上皮干细胞在角膜原位癌发生过程中的作用。方法收集8例角膜原位癌标本,常规石蜡包埋切片,HE染色,做形态学检查;并对其做P63和AE5免疫组化研究。结果病理检查发现角膜原位癌的癌细胞在上皮内高度增生并呈现明显的异形性,增生的细胞主要为基底细胞,上皮下基底膜完整。当用角膜上皮干细胞特异性标记物P63免疫组织化学染色,发现肿瘤区已发生癌变的恶性细胞,细胞核均染成棕色,但外围或表浅的已分化的梭形细胞未见表达,与其邻近的正常角膜上皮细胞也呈阴性反应。结论角膜原位癌细胞主要由表达P63阳性的肿瘤干细胞和少许不表达P63但表达角质蛋白的分化细胞构成,角膜原位癌起源于角膜上皮干细胞。

关键词：角膜上皮干细胞角膜原位癌 P63

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角膜上皮干细胞的体外生长特征

眼科新进展 2000年第3期20卷 184-186页

作者：钟兴武龚向明中山医科大学中山眼科中心广州市510060

目的　了解角膜上皮干细胞的生长特性。方法　用体外细胞培养的方法 ,从生长曲线、细胞倍增时间、细胞 DNA合成的活跃程度等几个方面 ,观察人角膜缘部、周边部及中央部角膜上皮细胞的生长特征。结果　角膜缘部细胞群体倍增时间最短 (4 9... 详细信息

目的　了解角膜上皮干细胞的生长特性。方法　用体外细胞培养的方法 ,从生长曲线、细胞倍增时间、细胞 DNA合成的活跃程度等几个方面 ,观察人角膜缘部、周边部及中央部角膜上皮细胞的生长特征。结果　角膜缘部细胞群体倍增时间最短 (4 9.79h±1.2 6 h) ,周边部次之 (6 4.89h± 2 .18h) ,中央部最长 (78.86 h± 1.38h) ,3组两两比较 P角膜缘部角膜上皮细胞 DNA合成最活跃 (CPM值 92 7.75± 47.94) ,周边部次之(CPM值 711.75± 2 9.47) ,中央部最弱 (CPM值 5 14.0 0± 72 .82 ) ,3组两两比较 P 角膜上皮干细胞存在于角膜缘的观点 ;也反映了角膜缘在角膜上皮创伤愈合。

关键词：角膜角膜上皮干细胞细胞培养细胞移植

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角膜上皮干细胞定位及功能的研究进展

国际眼科纵览 2012年第3期36卷 149-154页

作者：孙小婷毕燕龙同济大学附属同济医院眼科上海200065

【摘要】角膜上皮干细胞定位于角膜缘已被广泛认可，并被命名为角膜缘干细胞，且认为角膜缘干细胞在角膜上皮的自我更新和损伤修复中起重要作用。但近年来的一些研究却提出了与之相悖的观点：整个眼表层均含有寡能干细胞，且角膜缘干细... 详细信息

【摘要】角膜上皮干细胞定位于角膜缘已被广泛认可，并被命名为角膜缘干细胞，且认为角膜缘干细胞在角膜上皮的自我更新和损伤修复中起重要作用。但近年来的一些研究却提出了与之相悖的观点：整个眼表层均含有寡能干细胞，且角膜缘干细胞在维持自我更新及稳态方面并未起到至关重要的作用。这些发现提示可能还有其他干细胞存在并维持着角膜上皮的自我更新，但也有人对这些新观点提出质疑。本文通过对最新研究的不同观点及证据的阐述，对近年来角膜上皮干细胞的定位及其功能等方面的进展作一综述。

关键词：角膜上皮干细胞角膜缘干细胞寡能干细胞