角膜上皮干细胞缺失动物模型的方法研究

作     者：刘先宁 吴洁 朱秀萍 Xian-Ning Liu;Jie Wu;Xiu-Ping Zhu

作者机构：陕西省眼科研究所中国陕西省西安市710002 中国陕西省西安市眼科医院710002 

出 版 物：《国际眼科杂志》 (International Eye Science)

年 卷 期：2009年第9卷第8期

页      面：1583-1584页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

主　　题：角膜上皮干细胞 兔 动物模型 

摘      要：目的:建立兔角膜上皮干细胞缺失动物模型,为人工生物角膜上皮实验研究奠定基础。方法:方法一,单纯去除角膜缘浅板层环周内外宽各2mm,深约100～150μm角膜组织;方法二,在方法一的基础上,再去除角膜中央浅板层组织约100～150μm。术后,裂隙灯显微镜下观察,以角膜混浊、上皮荧光素染色及新生血管为参数评价,3项参数得分之和为该动物时间点总评分。以角膜新生血管评分在3分以上,角膜上皮混浊在2分以上,采用印迹细胞法角膜面取材行角蛋白K3单克隆抗体间接免疫荧光法检测表达为阴性的。结果:单纯去除角膜缘的动物模型10眼有4眼成功(40%),从制作至成功平均时间29.5±1.3d。角膜缘联合角膜中央板层组织共同去除组,10眼均成功(100%),从制作至成功平均时间为15.8±0.8d,两组成功率对比差异有统计学意义(χ2=8.58,P0.01);成功天数比较差异有统计学意义(t=24.5,P0.01)。两组成功模型角膜采用印迹细胞法取材行角蛋白K3单克隆抗体间接免疫荧光法检测表达均为阴性。结论:采用角膜缘联合角膜中央上皮共同去除法制备角膜上皮干细胞缺乏模型成功率高,周期短,值得推广应用。