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日粮添加裂壶藻对鸡蛋DHA含量、品质及蛋鸡生产性能的影响

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中国饲料 2015年第11期 37-39,42页

作者：李浩洋班甲陈骏佳徐晓燕王帆班雯婷胡雪梅广州甘蔗糖业研究所广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室广东广州510316

为研究在蛋鸡日粮添加裂壶藻粉生产富含二十二碳六烯酸(DHA)鸡蛋的效果,在蛋鸡日粮中分别加入1%、2%、3%DHA含量为15%的裂壶藻粉,测定蛋鸡生产性能,鸡蛋品质及鸡蛋油脂中DHA、花生四烯酸(ARA)等脂肪酸的含量。结果表明:与对照组相比,添... 详细信息

为研究在蛋鸡日粮添加裂壶藻粉生产富含二十二碳六烯酸(DHA)鸡蛋的效果,在蛋鸡日粮中分别加入1%、2%、3%DHA含量为15%的裂壶藻粉,测定蛋鸡生产性能,鸡蛋品质及鸡蛋油脂中DHA、花生四烯酸(ARA)等脂肪酸的含量。结果表明:与对照组相比,添加组鸡蛋的DHA含量随饲养时间延长而不断提高,且高添加量鸡蛋DHA含量也较高;饲养25 d时,各添加组鸡蛋油脂中DHA含量由1.5%分别提高至3.95%、4.60%、5.25%;各添加组ARA的含量略有下降,其他脂肪酸含量无显著变化;各添加组蛋黄胆固醇含量有所下降。添加量低于3%时,对蛋鸡生产性能、鸡蛋品质均无显著影响,证明裂壶藻粉可用作生产富含DHA鸡蛋的饲料添加剂。

关键词：裂壶藻二十二碳六烯酸多不饱和脂肪酸鸡蛋品质生产性能

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高产DHA裂壶藻突变株的选育

中国酿造 2015年第4期34卷 106-109页

作者：吕小义付杰尹佳田华陈涛何东平武汉轻工大学食品科学与工程学院湖北武汉430023 中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430071

利用60Co-γ射线辐照诱变裂壶藻(Schizochytrium limacinum)ATCC20888,以平板生长情况、生物量、含油率和二十二碳六稀酸(DHA)产量为综合指标,最终选育出一株高产突变株,命名为1.6-7-1,其摇瓶发酵生物量为47.37 g/L,油脂含量为31.41%,DH... 详细信息

利用60Co-γ射线辐照诱变裂壶藻(Schizochytrium limacinum)ATCC20888,以平板生长情况、生物量、含油率和二十二碳六稀酸(DHA)产量为综合指标,最终选育出一株高产突变株,命名为1.6-7-1,其摇瓶发酵生物量为47.37 g/L,油脂含量为31.41%,DHA产量为5.65 g/L,且DHA产量较出发菌株提高了约40%,经连续5代发酵培养,其遗传性能稳定。

关键词： 60Co-γ射线裂壶藻二十二碳六烯酸

不同甲酯化方法对裂壶藻产油脂肪酸的影响及GC-MS分析

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食品工业科技 2018年第1期39卷 257-261页

作者：林源锋付杰鲁昊田华陈涛何东平武汉轻工大学食品科学与工程学院湖北武汉430023 嘉必优生物工程(武汉)有限公司湖北武汉430073 湖北天基生物能源科技发展有限公司湖北汉川432300 中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430071

为了研究不同的甲酯化方法对裂壶藻产油脂肪酸的影响,本文通过对裂壶藻进行发酵培养得到纯藻体,再经过酶法破壁、冷冻干燥得到干藻体后采用索氏提取法提取油脂。运用酸法、碱法和三氟化硼法三种甲酯化方法对藻油进行处理,基于气相色谱-... 详细信息

为了研究不同的甲酯化方法对裂壶藻产油脂肪酸的影响,本文通过对裂壶藻进行发酵培养得到纯藻体,再经过酶法破壁、冷冻干燥得到干藻体后采用索氏提取法提取油脂。运用酸法、碱法和三氟化硼法三种甲酯化方法对藻油进行处理,基于气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析了藻油中DHA(二十二碳六烯酸)等脂肪酸的组成和含量。结果表明:酸法、碱法、三氟化硼法分别鉴定出11种、19种和12种脂肪酸,占裂壶藻藻油总量的89.50%、97.88%和90.12%。其中酸法酯化的藻油中DHA占脂肪酸总量的38.89%;碱法酯化的藻油中DHA占脂肪酸总量的46.76%;三氟化硼法酯化的藻油中DHA占脂肪酸总量的40.54%。所以,碱法相较于酸法和三氟化硼法有明显的优势,更适合用于裂壶藻藻油的脂肪酸分析。进一步对碱法的甲酯化温度进行梯度实验,结果表明温度为55℃时,DHA的相对含量为47.45%,藻油的甲酯化效果最好。这一研究对长链多不饱和脂肪酸的检测鉴定有着重要的意义。

关键词：裂壶藻甲酯化气相色谱-质谱联用(GC-MS) 脂肪酸二十二碳六烯酸

维生素C、E和裂壶藻对中国对虾非特异性免疫功能影响的研究

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维生素C、E和裂壶藻对中国对虾非特异性免疫功能影响的研究

作者：冯伟上海海洋大学

学位级别：硕士

维生素C和维生素E是两种在维持水产动物健康养殖中应用较广的免疫增强剂,裂壶藻是一种富含不饱和脂肪酸的海洋真菌,本文通过结合免疫应答信号通路的相关基因的研究,探索两种维生素在机体中的免疫途径,初步研究裂壶藻与维生素E的免疫互... 详细信息

维生素C和维生素E是两种在维持水产动物健康养殖中应用较广的免疫增强剂,裂壶藻是一种富含不饱和脂肪酸的海洋真菌,本文通过结合免疫应答信号通路的相关基因的研究,探索两种维生素在机体中的免疫途径,初步研究裂壶藻与维生素E的免疫互作效应,为其免疫机制研究提供新的思路。本文以中国对虾为研究对象,在不同水平上研究了维生素C、维生素E和裂壶藻对中国对虾非特异免疫因子及TLR、NF-κB表达水平的影响。研究分为两部分: 第一部分是以中国对虾为实验动物,对其投喂分别添加不同Vc含量（0%、0.5%、1%、2%）的饲料,在试验的第1、3、6、9、12和15天进行取样,以存活率、诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）、过氧化氢酶（CAT）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、溶菌酶（LZM）为免疫指标,探讨了不同浓度的Vc对中国对虾存活率及非特异性免疫效应的影响;并应用实时定量PCR方法研究了不同浓度的Vc对中国对虾TLR、NF-κB基因表达的影响。结果表明,（1）与对照组相比,Vc添加组增强了中国对虾的存活率,Vc1%添加组存活率达90.28%,显著高于其他组（P＜0.05）。Vc的不同处理组在一定程度上提高了中国对虾iNOS、CAT、及LZM活性且1%含量Vc组对酶活性的增强影响较大。Vc对中国对虾T-SOD活性的提高具有一定的作用,2%浓度组对肝胰腺、鳃、肌肉T-SOD活性影响较大,1%浓度组对血清中T-SOD活性影响较大（2）实时定量PCR结果表明,Vc可以上调TLR在血液和鳃中TLR的表达水平。血液中1%浓度组对TLR的表达水平的上调作用最大,其次为0.5%浓度组。鳃中Ve对TLR的上调作用具有一定的浓度效应,即表达水平2%浓度组＞1%浓度组＞0.5%浓度组。在肝胰腺中Vc对0.5%、1%浓度组TLR的表达水平起到抑制作用,而对2%浓度组TLR则是先抑制后上调,在第十二天表达量达到最大值,为对照组的6.87倍。肌肉中Vc对2%浓度组TLR mRNA表达具有下调作用,对0.5%、1%浓度组TLR的表达呈现出先抑制后促进的状况。TLR、NF-κB在组织中的表达趋势并不一致,0.5%、2%浓度组在四种组织中均表现出下调作用。1%浓度组在血液、肌肉中对NF-κB的调节作用相同,与各自对照组相比均可以上调NF-κB的表达水平。而在鳃、肝胰腺中1%浓度Vc所起到的作用与血液和肌肉相反。第二部分是以中国对虾为实验动物,在基础饲料中添加不同含量的Ve和10裂壶藻,配制成五种试验饲料,即B组（10裂壶藻）、C组（200mg/kgVe）、D组（400mg/kgVe）、E组（600mg/kgVe）、F组（400mg/kgVe+10裂壶藻）,以基础饲料为A组（空白对照饲料）。进行为期1个月的饲养。在试验第1、15、30天进行体重、体长测量,检测Ve对中国对虾生长指标的影响。记录每日对虾死亡数,统计存活率。并以组织中的诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）、丙二醛（MDA）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、溶菌酶（LZM）、谷胱甘肽酶（GSH）为免疫指标,探讨了不同浓度的Ve对中国对虾存活率及非特异性免疫效应的影响;应用实时定量PCR方法研究了不同浓度的Ve对中国对虾TLR、NF-κB基因表达的影响。结果表明,（1）Ve可以促进中国对虾体重、体长的增长。D组生长指标增长高于C、E组,但显著低于添加了裂壶藻的F组。存活率随着Ve添加浓度的增加而增大,E、F组显著高于其他各组。说明Ve对中国对虾的生长及存活率的提高有着显著的作用。添加裂壶藻也对生长和存活率的提高起到促进作用。通过对中国对虾非特异性酶活的检测,结果表明,与空白对照组相比,Ve抑制了MDA活性、肌肉中iNOS活性。对于其他非特异酶均表现出不同程度的促进作用。裂壶藻添加组B组与A组相比较非特异性酶活性无显著性差异,但与F组表现出显著性差异（P＜0.05）,即F组酶活性显著高于B组。（2）应用实时定量PCR方法研究了不同浓度的Ve对中国对虾血液、肌肉及肝胰腺中TLR、NF-κB基因表达的影响。结果表明,Ve可以下调血液、肝胰腺和肌肉中的TLR表达水平,并具有一定的浓度效应;中浓度Ve对三个组织NF-κB基因的表达均起到抑制作用。添加10裂壶藻后, A、B、D、F组TLR表达水平在肝胰腺和肌肉中的趋势相同,表达水平为A＞B＞D＞F;NF-κB基因表达在血液和肝胰腺中的趋势相同,表达水平为B＞A＞D＞F,说明饲料中添加一定量的裂壶藻可以降低机体内TLR、NF-κB基因的表达水平,Ve和裂壶藻联合对免疫基因的调控能力更加显著。

关键词：维生素C 维生素E 裂壶藻中国对虾非特异性免疫

高产DHA裂壶藻突变株的选育与发酵工艺研究

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高产DHA裂壶藻突变株的选育与发酵工艺研究

作者：吕小义武汉轻工大学

学位级别：硕士

二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid)是ω-3系多不饱和脂肪酸(ω-3Polyunsaturated fatty acids,ω-3 PUFAs),是组成大脑和视网膜的重要结构性物质,因具有多种生理功能而得到广泛的应用。裂壶藻(Schizochytrium sp.)是一种富含DHA的... 详细信息

二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid)是ω-3系多不饱和脂肪酸(ω-3Polyunsaturated fatty acids,ω-3 PUFAs),是组成大脑和视网膜的重要结构性物质,因具有多种生理功能而得到广泛的应用。裂壶藻(Schizochytrium sp.)是一种富含DHA的海洋微藻,具有生长速度快、脂肪酸组成简单、易于提纯等优势,被认为是一种极具工业化生产前景的微生物资源。本文以裂壶藻(Schizochytrium sp.)ATCC20888为出发藻株,首先对其进行藻种诱变改良,筛选出高产DHA的突变株;然后对突变株生长特性进行研究,优化其培养基和培养条件,并在50L发酵罐中发酵,探索出一套溶氧双阶段调控体系,最后对其进行分批补料,以高密度发酵方式增加其DHA产量。主要研究结果如下:1.裂壶藻诱变选育利用Co-γ射线辐照诱变裂壶藻ATCC20888,以平板生长形态、生物量、含油率和二十二碳六稀酸(DHA)产量为综合指标,最终选育出一株高产突变株,命名为1.6-7-1,其摇瓶发酵生物量为47.37 g/L,油脂含量为31.41%,DHA产量为5.65 g/L,且DHA产量较出发藻株提高了约40%,经连续5代发酵培养,其遗传性能稳定。2.裂壶藻发酵培养基的优化通过Plackett-Burman(PB)试验设计从8种培养基组分中筛选出对产DHA有显著影响的3个关键因素葡萄糖、谷氨酸钠和NaCl,然后再通过最陡爬坡试验设计逼近最优点,以此作为响应面设计的中心点,最后通过响应面法(RSM)设计得到裂壶藻产DHA的最佳培养基组成:葡萄糖125.46g/L,谷氨酸钠12.44 g/L,NaCl 4g/L,在此最优培养条件下,裂壶藻产DHA达到了6g/L左右。3.裂壶藻培养条件的优化首先通过单因素实验考察接种量,培养时间,培养温度,培养基初始pH值等对DHA产量的影响,然后选择装液量,培养温度,培养基初始pH值3个主要影响因素,采用Box-Behnken设计,得到摇瓶产DHA的最佳发酵条件为:选择接种量为10.5%,温度为26.5℃,初始pH为6.5,在此培养条件下,裂壶藻DHA产量平均达到6.10g/L4.溶氧调控对裂壶藻产脂影响先在不同溶氧条件下考察裂壶藻在培养6d后的生物量、油脂产量、DHA含量的变化,得出高溶氧利于裂壶藻生长增殖,低溶氧利于裂壶藻体内DHA的产生和积累这一套基本规律,然后在此基础上设计了一套双阶段溶氧控制培养体系,使裂壶藻DHA产量得到显著提高。5.裂壶藻的分批补料工艺首先选择最适初始糖浓度,然后对裂壶藻的代谢特性研究选择最佳补料时间,接着确定最佳补糖浓度,最后通过3种不同补料方式找到最优的补料发酵工艺。结果表明在初始糖浓度为80g/L,藻种培养至第72h补糖2%一次,24h后再补糖2%一次,其生物量、油脂产量和DHA产量可分别达到52.7g/L,23.54g/L,9.52g/L,对比不补料工艺大大增强了裂壶藻良好的生产潜力。

关键词：二十二碳六烯酸裂壶藻诱变选育发酵

棉籽糖和裂壶藻在凡纳滨对虾饲料中的应用研究

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棉籽糖和裂壶藻在凡纳滨对虾饲料中的应用研究

作者：杨帆中山大学

学位级别：硕士

本论文主要研究了饲料中添加不同水平棉籽糖和裂壶藻对凡纳滨对虾生长性能、免疫功能和肠道消化酶活性的影响。主要结果和结论如下:1.为了研究饲料中添加棉籽糖对凡纳滨对虾生长性能、免疫功能、肠道消化酶活性以及抗应激能力的影响,进... 详细信息

本论文主要研究了饲料中添加不同水平棉籽糖和裂壶藻对凡纳滨对虾生长性能、免疫功能和肠道消化酶活性的影响。主要结果和结论如下:1.为了研究饲料中添加棉籽糖对凡纳滨对虾生长性能、免疫功能、肠道消化酶活性以及抗应激能力的影响,进行了为期8周的养殖实验。共配制了6组饲料,棉籽糖有效添加水平分别为0、0.02%、0.04%、0.08%、0.12%、0.2%,每组四个平行,每天饱食投喂三次。实验结果表明,随着饲料中棉籽糖剂量的增加,凡纳滨对虾增重率和特定生长率有上升的趋势,当棉籽糖添加量为0.2%时,凡纳滨对虾的末均重和饲料系数与对照组相比有显著性差异。随着棉籽糖剂量的增加,血清甘油三酯(TG)水平显著升高,总胆固醇(T-CHO)含量有下降趋势,肝胰腺总抗氧化能力(T-AOC)显著提高,丙二醛(MDA)含量显著下降,肝胰腺酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性显著增加,肝胰腺溶菌酶(LZM)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)基因的表达水平显著提高,但是两个肠道消化酶—胰蛋白酶(trypsin)和糜蛋白酶(chymotrypsin)基因的表达水平都有下降的趋势。此外,随着饲料中棉籽糖剂量的增加,凡纳滨对虾24 h、48 h、72 h和96 h低溶氧应激后的存活率也逐渐提高。以上结果说明饲料中添加0.2%棉籽糖能改善凡纳滨对虾的生长性能,提高免疫功能,同时棉籽糖的添加还能提高凡纳滨对虾低溶氧环境下的抗应激能力。2.为了研究饲料中添加裂壶藻对凡纳滨对虾生长性能、免疫功能和肠道消化酶活性的影响,进行了为期8周的养殖实验。共配制了7组饲料,D1为对照组,不添加裂壶藻粉,D2、D3和D4组分别添加1.5%、3.0%和4.5%破壁裂壶藻粉,D5、D6和D7组分别添加1.5%、3.0%和4.5%未破壁裂壶藻粉,每组三个平行,每天饱食投喂四次。实验结果表明,D3组的对虾末均重、存活率和增重率显著高于其他各组,饲料系数显著低于其他各组,而三个未破壁裂壶藻添加组的各项生长指标与对照组均无显著性差异。而且,在D3组中,对虾血清甘油三酯(TG)和总胆固醇(T-CHO)含量以及高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的比值(HDL/LDL)均显著高于其他各组,对虾肝胰腺总抗氧化能力(T-AOC)显著高于其他各组,肝胰腺丙二醛(MDA)含量显著低于其他各组,且肝胰腺酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性显著高于其他各组,肝胰腺超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)基因的表达水平也显著高于其他各组,肠道胰蛋白酶(trypsin)和糜蛋白酶(chymotrypsin)基因的表达水平显著高于其他各组,此外,D3组对虾的胰脂酶基因的表达水平也显著高于其他各组。以上结果说明饲料中添加3.0%破壁裂壶藻可以显著提高凡纳滨对虾的生长性能、增强对虾的免疫功能以及肠道的消化吸收功能。

关键词：凡纳滨对虾棉籽糖裂壶藻生长免疫

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低温促进裂壶藻DHA积累的分子机制研究

低温促进裂壶藻DHA积累的分子机制研究

作者：黄琼叶国家海洋局第三海洋研究所

学位级别：硕士

二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)是长链多不饱和脂肪酸,对神经系统发育及视力保护至关重要。本研究选取的裂壶藻(Schizochytrium ***01)具有生长速度快、发酵周期短、高产多不饱和脂肪酸等特点,是目前工业化生产DHA的热门菌... 详细信息

二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)是长链多不饱和脂肪酸,对神经系统发育及视力保护至关重要。本研究选取的裂壶藻(Schizochytrium ***01)具有生长速度快、发酵周期短、高产多不饱和脂肪酸等特点,是目前工业化生产DHA的热门菌种之一。根据已有报道可知低温能显著提高裂壶藻DHA的积累,为了研究参与该生物过程的关键调控蛋白,本论文分别选取30℃对数期(30log)和15℃对数期(15log)的裂壶藻,进行生理生化指标测定、转录组测序、差异表达基因分析及Q-PCR验证等,试图从转录水平上研究低温促进DHA积累的分子机制。具体的研究结果如下:1)裂壶藻在30℃对数期DHA占总脂肪酸含量的百分比为48.36%,15℃对数期DHA占总脂肪酸含量的百分比则达67.38%;2)一共测了100.01 Gb数据,组装并去冗余后得到43,550个Unigene,总长度,平均长度,N50以及GC含量分别为54,436,700 bp,1,249 bp,2,526 bp和47.60%;DEG检测结果发现,15log vs 30log之间有376个上调基因和50个下调基因;3)选取10个差异表达基因进行实时荧光定量PCR,其中9个基因差异表达的趋势与转录组结果一致,表明转录组数据准确可信;4)对差异表达基因进行KEGG富集分析发现与DHA合成相关的脂肪酸代谢通路中,低温条件下FAS途径中脂肪酸合酶及PKS途径中脂肪酸合酶等多个相关基因均表达下调,而下游途径的Δ9脱氢酶、Δ12脱氢酶、Δ9延长酶、Δ8脱氢酶以及Δ4脱氢酶等相关基因则表达上调,推测这些基因在低温积累DHA过程中起着关键作用。同时我们发现与钙调蛋白相关的多个基因表达上调,由于Ca2+-Ca M在低温胁迫中发挥着重要的信号转导功能,故我们进一步推测钙调素相关基因在该过程起着调控作用,可在后续试验中敲除该基因并验证其功能。

关键词：裂壶藻转录组测序差异表达基因

一种裂壶藻（***）和两种硅藻多糖的提取分离、结构表征及抗凝活性研究

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一种裂壶藻（***）和两种硅藻多糖的提取分离、结构表征及抗凝活...

作者：曹欢中国海洋大学

学位级别：硕士

本研究以裂壶藻（Schizochytriumlimacinum）干粉为原料，依次经70℃热水和50℃4%NaOH水溶液提取，从中获得2种粗多糖SLW和SLA，其得率分别为4.18%和1.10%。运用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）、高效液相色谱法（HPLC）、傅里叶变换红外... 详细信息

本研究以裂壶藻（Schizochytriumlimacinum）干粉为原料，依次经70℃热水和50℃4%NaOH水溶液提取，从中获得2种粗多糖SLW和SLA，其得率分别为4.18%和1.10%。运用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）、高效液相色谱法（HPLC）、傅里叶变换红外光谱（FTIR）等方法对其理化性质、单糖组成、分子量以及结构特征进行了初步分析。实验结果表明，SLW和SLA的单糖组成都以半乳糖（Gal）为主，并含有少量的甘露糖（Man）、葡萄糖（Glc）和葡萄糖胺（GlcN）。两者的硫酸基含量分别为9.38%和14.58%;分子量分别为633.2kD和48.1kD。采用Q-SepharoseFastFlow强阴离子交换柱层析对SLW进行分离纯化，得到2个纯品多糖SLW1和SLW2。结果表明，SLW1和SLW2的单糖组成都以Gal（>75%）为主，并含有少量的Man、Glc和GlcN。两多糖的分子量分别为39.79kD和103.83kD;总糖含量分别为54.2%和68.4%;硫酸基含量分别为8.16%和12.84%;蛋白含量分别为10.55%和9.39%。通过红外光谱图可知其硫酸基主要位于半乳糖残基的C6位。采用甲基化反应和NMR等现代仪器分析技术，对多糖SLW2的结构及糖残基组成情况进行了深入研究。结果表明，SLW2含有→3,4)-α-Galp-(1→，→6)-β-Galf-(1→，→3)-β-Galp-(1→，→3)-α-Galp2S-(1→，→4,6)-β-Galp-(1→，→5)-β-Galf-(1→，→6)-α-Galp2S-(1→和→6)-β-Galp-(1→多种连接方式。为确定多糖SLW2的精细结构，采用三氟乙酸（TFA）对SLW2进行可控酸降解得到寡糖;经SuperdexPeptide凝胶层析色谱柱分离纯化，获得7种寡糖，通过ESI-MS和ESI-MS/MS法对7种硫酸半乳寡糖进行序列分析。结果表明，各寡糖连接方式均为1→6连接，且各聚合度的寡糖硫酸基均位于非还原端6位和还原端2位。这些特殊结构的寡糖为糖生物芯片研究，探讨寡糖与蛋白之间的相互作用提供基础。采用甲基化、核磁波谱和质谱技术，推测多糖SLW2是由→3,4)-α-Galp-(1→6)-β-Galf-(1→3)-β-Galp-(1→3)-α-Galp2S-1→4,6)-β-Galp-(1→为主链，→5)-β-Galf-(1→和β-Galp6S-(1→6)-β-Galp-(1]n→6)-β-Galp2S-(1→(n=0～3)为支链的硫酸化半乳聚糖。此外，还从筒柱藻（Cylindrothecafusiformis）和牟氏角毛藻（Chaetoceros muelleri）2种硅藻提取得到筒柱藻多糖CF1和CF2，牟氏角毛藻多糖CM1和CM2。研究表明，筒柱藻多糖CF1和CF2主要含有甘露糖（Man）、鼠李糖（Rha）、半乳糖（Gal）和木糖（Xyl）及少量的葡萄糖醛酸（GlcA）和半乳糖醛酸（GalA），而牟氏角毛藻多糖CM1和CM2主要含有鼠李糖（Rha）、半乳糖（Gal）和木糖（Xyl），不含葡萄糖醛酸（GlcA）和半乳糖醛酸（GalA）;CF1和CF2的硫酸基含量约为2.7%;CM1和CM2的硫酸基含量约为1.5%。通过红外光谱分析可知，这4种多糖均为硫酸多糖。以SLW、SLA、SLW1、SLW2、CF1、CF2、CM1和CM28种多糖为原料，以活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)为评价指标，对8种多糖的抗凝血活性进行了评价。实验结果表明，8种不同来源多糖均具有一定的抗凝活性，但与低分子量肝素抗凝活性差距较大，可对其进行进一步结构修饰以增强其抗凝活性。

关键词：裂壶藻硅藻多糖结构表征抗凝活性

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维生素E和裂壶藻对斑节对虾精荚再生的影响

维生素E和裂壶藻对斑节对虾精荚再生的影响

作者：刘栋梁上海海洋大学

学位级别：硕士

斑节对虾(Penaeus monodon)是我国重要的水产养殖种类,养殖区域遍布我国广东、福建、广西、浙江等各省沿海一带。因其个体大,肉质鲜美,营养价值高等优点,深受广大消费者的青睐,然而,由于近年来雄性亲虾在人工繁育过程中,时常出现产精率... 详细信息

斑节对虾(Penaeus monodon)是我国重要的水产养殖种类,养殖区域遍布我国广东、福建、广西、浙江等各省沿海一带。因其个体大,肉质鲜美,营养价值高等优点,深受广大消费者的青睐,然而,由于近年来雄性亲虾在人工繁育过程中,时常出现产精率低及精荚利用率低的现象,以致于受精后的雌虾产卵率和孵化率过低,从而影响子代的成活率,使斑节对虾人工繁育时的效率难以得到提高。如何提高产精率和精荚利用率是当前生产应用和产业发展中亟需解决的问题。营养是虾类性腺成熟和种苗质量的重要决定因素。沙蚕、牡蛎、鱿鱼、乌贼等天然饵料对亲虾性腺发育和繁殖具有促进作用,其实质是与其特异的营养组成密切相关。本文利用不同营养饵料对斑节对虾雄虾的影响,分别从营养与饲料学、组织学及组织表达分析几个方面,来探究斑节对虾雄虾精荚的发育与再生规律,为斑节对虾的人工繁育提供了理论参考。实验结果如下:1.饲料中添加不同水平维生素E(vitamin E,VE)对雄性斑节对虾精荚再生质量的影响该章节实验用基础饲料来制备了四种不同水平的维生素E(0、200、600、1000 mg·kg-1)配合饲料,人工挤出雄虾的精荚后,精养40 d,来评价斑节对虾雄虾的精荚再生之后的精子数量和质量。添加维生素E的每个实验组雄虾两次再生精荚重量均要显著高于实验初始值,而对照组中雄虾的三次精荚的重量没有显著差异。实验各组的第一次再生的精荚的重量大于对照组,E1000组的精荚重量显著大于对照组(P0.05)。第二次精荚再生后,三个实验组的精子总数均高于对照组,其中E200组精子总数极显著高于对照组(P裂壶藻(Schizochytrium sp.,Sch)对斑节对虾雄虾精荚再次发育和精子数量及活力的影响该章节实验用基础饲料来制备了四种不同的配合饲料(A组:0添加;B组:VE 200;C组:1%Sch;D组:VE 200+1%Sch),人工挤出雄虾的精荚后,精养40 d,结果表明:各实验组第一次再生精荚质量大于对照组,VE 200组和VE 200+1%Sch组的精荚质量显著大于对照组(P0.05);D组的精子总数显著高于A组(P裂壶藻与200 mg·kg-1维生素对斑节对虾雄虾精荚的再生和精子数量的提高有协同作用。3.维生素E和裂壶藻对斑节对虾雄虾精荚组织的显微和亚显微结构的影响该章节实验用基础饲料来制备了四种不同的配合饲料(A组:0添加;B组:VE 200;C组:1%Sch;D组:VE 200+1%Sch),人工挤出雄虾的精荚后,精养40 d,结果表明:饲料中维生素E和裂壶藻添加后,精荚内的精子团数量显著高于对照组(P裂壶藻联合添加比单独添加维生素E或裂壶藻的精子团数量显著升高(P裂壶藻对斑节对虾雄虾精荚发育中MAPK/Erk(mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase)信号通路中的相关基因表达的影响该章节实验用基础饲料来制备了4种不同的配合饲料(A组:0添加;B组:VE 200;C组:1%Sch;D组:VE 200+1%Sch),人工挤出雄虾的精荚后,精养40 d,结果表明:在MAPK/Erk信号通路中,D组的Ras基因表达量均高于其他各组,其中显著高于B组(P<0.05);D组PKC基因表达量显著高于其他各组(P<0.05);C组MP1基因表达量显著高于其他各组(P<0.05);C和D组的Mos和MNK2基因表达量显著高于A组和B组(P<0.05);D组MEK1基因表达量均高于其他各组,其中显著高

关键词：斑节对虾维生素E 裂壶藻精荚电镜 MAPK/Erk信号通路