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lncRNA Gm44981抑制心脏衰老的作用和机制研究

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现代医药卫生 2024年第5期40卷 745-749页

作者：李洁李林淋曹慧霞河南省人民医院肾内科河南郑州450000

目的分析小鼠心脏衰老过程中长链非编码(lnc)RNA Gm44981的表达水平,探索其抑制心脏衰老的机制。方法选取3月龄年轻和24月龄年老小鼠各5只,提取心肌组织RNA后,采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测Gm44981的表达水平。另选取4月龄... 详细信息

目的分析小鼠心脏衰老过程中长链非编码(lnc)RNA Gm44981的表达水平,探索其抑制心脏衰老的机制。方法选取3月龄年轻和24月龄年老小鼠各5只,提取心肌组织RNA后,采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测Gm44981的表达水平。另选取4月龄快速老化小鼠10只,分为对照组和Gm44981过表达组(构建Gm44981过表达快速老化小鼠模型),各5只。采用qRT-PCR检测对照组和Gm44981过表达组小鼠Gm44981和衰老相关分泌表型(SASP)表达水平,β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测SA-β-gal活性,蛋白质免疫印迹试验检测p53和Sirt1衰老相关蛋白表达水平。采用qRT-PCR检测miRNA-34a表达水平。结果Gm44981在年老小鼠的心肌组织中表达水平较年轻小鼠低,差异有统计学意义(P衰老过程中表达下调,其可能通过作用于miRNA-34a/Sirt1抑制心脏衰老。

关键词：心脏衰老长链非编码RNA 衰老相关蛋白实时定量聚合酶链式反应小鼠

番木瓜成熟衰老蛋白基因CpSSA的克隆与表达分析

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分子植物育种 2017年第4期15卷 1212-1217页

作者：冯力杨云杨菲颖耿姣姣李科申艳红福建农林大学园艺学院福州350002 福建农林大学园艺植物遗传育种研究所福州350002

衰老相关蛋白(senescence-associated protein,SSA)基因在果实成熟衰老中起重要作用。为了探究番木瓜衰老相关蛋白基因,以‘大白八号’番木瓜果实为材料,采用RACE技术扩增出番木瓜SSA基因全长cDNA序列,命名为CpSSA(登录号:KX885408)。... 详细信息

衰老相关蛋白(senescence-associated protein,SSA)基因在果实成熟衰老中起重要作用。为了探究番木瓜衰老相关蛋白基因,以‘大白八号’番木瓜果实为材料,采用RACE技术扩增出番木瓜SSA基因全长cDNA序列,命名为CpSSA(登录号:KX885408)。生物信息学分析显示,CpSSA全长1 203 bp,包含一个420 bp的开放性阅读框。番木瓜SSA蛋白含有139个氨基酸,分子质量为15.172 4 kD,等电点为9.61。该蛋白的氨基酸序列与桃、葡萄、杨树、菠菜的氨基酸序列有较高的同源性。系统进化树显示,番木瓜SSA与葡萄SSA表现出最小的进化距离,亲缘关系最接近。用荧光定量PCR分析在不同处理不同成熟度番木瓜果实中CpSSA基因的表达差异,结果显示在乙烯处理后的6 h和12 h表达量显著升高,在1-MCP处理中表达量较低,在乙烯/1-MCP处理果实中的表达模式与成熟衰老有一定相关性,推测CpSSA基因可能参与了番木瓜果实的成熟衰老进程。

关键词：番木瓜衰老相关蛋白 RACE 基因克隆

基于免疫-炎症-衰老探讨八子补肾胶囊对自然衰老小鼠老化过程的延缓作用

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中国实验方剂学杂志 2023年第9期29卷 146-155页

作者：宋亚辉马坤张雅萍王丹东毛昕菁张少兰魏聪河北中医学院石家庄050091 河北医科大学石家庄050017 南京中医药大学南京210046 络病研究与创新中药国家重点实验室石家庄050035 河北省络病重点实验室石家庄050035 国家中医药管理局中医络病学重点学科石家庄050035

目的:探讨八子补肾胶囊延缓自然衰老小鼠老化过程的功效作用及作用机制。方法:以13月龄自然衰老小鼠为实验研究对象,将其按体质量随机分为4组,即自然衰老组,八子补肾低、高剂量组(1、2 g·kg^(-1)),雷帕霉素组(0.002 g·kg^(-1))。通过... 详细信息

目的:探讨八子补肾胶囊延缓自然衰老小鼠老化过程的功效作用及作用机制。方法:以13月龄自然衰老小鼠为实验研究对象,将其按体质量随机分为4组,即自然衰老组,八子补肾低、高剂量组(1、2 g·kg^(-1)),雷帕霉素组(0.002 g·kg^(-1))。通过行为学实验检测小鼠的衰弱表征并测定其虚弱指数;流式细胞术检测小鼠脾脏T和B淋巴细胞、效应性T细胞(TE)、记忆性T细胞(TM)、幼稚性T细胞(TN)、辅助性T细胞(Th)、细胞毒性T细胞(Tc)、Th1细胞、Th2细胞和调节性T细胞(Treg)比例;细胞增殖与活性检测(CCK-8)试剂盒检测小鼠淋巴细胞的增殖能力;苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠脾脏组织病理学变化;免疫组化法(IHC)检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(p16)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)的表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测衰老相关蛋白p16和p21的mRNA表达情况;Luminex检测小鼠外周血血清炎症因子:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-4、IL-10、IL-12 p70水平。结果:与自然衰老组比较,八子补肾组和雷帕霉素组小鼠的衰弱表征明显改善,虚弱指数评分明显降低(P衰老相关蛋白p16和p21蛋白表达量减少(P衰老小鼠衰弱表征,调节机体免疫稳态及炎症水平,减少免疫细胞衰老的作用,起到了延缓衰老的作用功效。

关键词：八子补肾胶囊炎症免疫衰老淋巴细胞亚群衰老相关蛋白

中国野生葡萄病原菌诱导响应VqSAP基因的克隆及表达分析

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果树学报 2012年第4期29卷 563-568页

作者：牛姣张玉成郭荣荣王西平西北农林科技大学园艺学院.农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点开放实验室陕西杨凌712100 旱区作物逆境生物学国家重点实验室陕西杨凌712100 西北农林科技大学葡萄酒学院陕西省葡萄与葡萄酒工程技术研究中心陕西杨凌712100

【目的】为了验证SAP基因在葡萄抗病防御机制中的作用，【方法】在前期通过抑制消减杂交技术（SSH）获得中国野生葡萄毛葡萄株系‘商-24’衰老相关蛋白（SAP）基因EST序列的基础上，采用RT—PCR从毛葡萄‘商-24’中分离到SAP基因cDNA序... 详细信息

【目的】为了验证SAP基因在葡萄抗病防御机制中的作用，【方法】在前期通过抑制消减杂交技术（SSH）获得中国野生葡萄毛葡萄株系‘商-24’衰老相关蛋白（SAP）基因EST序列的基础上，采用RT—PCR从毛葡萄‘商-24’中分离到SAP基因cDNA序列，并通过实时定量PCR和半定量PCR分析了SAP基因的表达特异性。【结果】序列分析表明该基因具有完整的的开放阅读框，序列长度为819bp，编码272个氨基酸残基，相对分子质量为30．56ku，等电点为8．78，将其命名为VqSAP。多重比较结果显示VqSAP基因与油棕、玉米、萱草、拟南芥、水稻等植物SAP基因的同源性为65％～74％。实时定量结果表明，在白粉菌诱导初期，抗病的毛葡萄株系‘商-24’和感病的华东葡萄株系‘湖南-1’VqSAP基因表达量均升高，这可能是因为它参与了病原菌诱导的细胞程序性死亡过程。水杨酸（SA）、茉莉酸甲酯（MeJA）、乙烯（Eth）处理表明衰老相关蛋白基因表达受激素分子调节，但在抗病和感病株系中基因的表达量有所差异。在嫩叶、嫩茎、花、果皮、卷须等不同葡萄组织中的表达表明VqSAP基因的表达具有空间差异性。【结论】这些结果暗示着VqSAP的表达响应病原菌侵染并受生物胁迫相关激素的调控，很有可能在葡萄防御病原菌侵染的机制中发挥重要作用。

关键词：毛葡萄衰老相关蛋白 VqSAP基因克隆表达分析

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百合切花采后衰老相关机理的研究

百合切花采后衰老相关机理的研究

作者：林香福建农林大学

学位级别：硕士

百合花(Lilium spp．)在近年的切花市场中异军突起。在荷兰的鲜花拍卖市场，百合切花的销量逐渐赶上郁金香成为第二大切花。在中国，百合花因其花姿优美，并具有“百年好合”、“高贵纯洁”等美好寓意，百合切花在婚礼等庆典上广泛使用... 详细信息

百合花(Lilium spp．)在近年的切花市场中异军突起。在荷兰的鲜花拍卖市场，百合切花的销量逐渐赶上郁金香成为第二大切花。在中国，百合花因其花姿优美，并具有“百年好合”、“高贵纯洁”等美好寓意，百合切花在婚礼等庆典上广泛使用，倍受消费者青睐。鉴于百合切花销售的商业潜力和百合切花保鲜方面的迫切要求，本试验研究了新型保鲜剂1-MCP对百合切花的保鲜效果以及最佳施用方法;并用SDS-PAGE方法分析了百合花瓣衰老过程蛋白质组分变化，试图从蛋白质水平上解释百合切花衰老的过程，以期对百合切花的衰老机理作一些探讨;试验还从花瓣的超微结果方面对花瓣衰老的过程进行分析。本试验研究结果如下：1．本试验用1-MCP和1-MCP与ETP组合作为药剂，采用不同浓度、不同时间在百合切花的不同发育时期对其进行处理，目的是对1-MCP的保鲜效果和1-MCP拮抗乙烯的效果进行全面的研究和分析。发现：1.2mg／L的1-MCP密闭熏蒸百合切花16h，对五个品种的百合均有良好的保鲜效果，并对百合切花的观赏品质有极大的提升作用;1-MCP处理提高了SOD和CAT活性，降低了MDA活性，延缓了百合落瓣现象的产生;同时，本试验还表明了在百合切花不同的发育时期对其进行1-MCP的处理均有保鲜效果，在百合切花保鲜过程中可以持续施用1-MCP，并且持续有效，1-MCP除了能在乙烯产生前期和乙烯竞争合成前体外，还可以抑制外源乙烯的作用，降低乙烯释放的峰值。2．本试验对不同药剂处理下的、与衰老有关的生理指标的进行了测定，用以研究与分析百合切花花瓣衰老过程中各生理指标变化情况、保护酶系统以及脂膜过氧化与衰老之间的关系，以期为百合切花的品种选择、采后保鲜提供理论依据。3．本试验用SDS-PAGE电泳方法对百合切花花瓣衰老过程中的蛋白质组分的变化进行了分析研究，确立了百合切花花瓣的SDS-PAGE电泳体系。利用计算机辅助的图像分析技术分析电泳结果，表明：五种百合切花具有部分相同的蛋白质条带，不同品种间的条带差异明显，但是相同的杂交品系之间蛋白条带的相似性要明显高于不同杂交品系;并且在百合花花瓣衰老过程中有一部分蛋白质的含量不断下降，有部分保持不变，在花瓣衰败期有新的蛋白条带出现，这些条带可能与花瓣衰老相关，是衰老特异蛋白。4．花衰老过程是一个受遗传和内外因子影响的有序的死亡过程，并伴随着大分子物质的降解以及花瓣细胞的形态变化，如亚细胞上叶绿体和其他细胞器的有序衰退。本试验通过投射电镜对索邦百合花瓣的三个时期即绿蕾期、盛花期、衰败期的超微结构进行观察，观察到花瓣细胞内各种细胞器的有序性衰败过程。

关键词：百合切花衰老 1-MCP 乙烯利蛋白组分衰老相关蛋白超微结构