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脊柱侧凸关节突中Ⅰ、Ⅱ型胶原和转化生长因子β_1表达的研究

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中华医学杂志 2005年第34期85卷 2391-2394页

作者：邱贵兴郭盛杰刘勇钱文伟吴志宏中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院骨科 100730

目的观察脊柱侧凸患者关节突中Ⅰ、Ⅱ型胶原和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的特点。方法收集9例特发性脊柱侧凸(IS)患者和10例先天性脊柱侧凸(CS)患者的顶椎、上下端椎凸凹侧下关节突,采用苏木素-伊红(HE)染色方法和免疫组化方法染色... 详细信息

目的观察脊柱侧凸患者关节突中Ⅰ、Ⅱ型胶原和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的特点。方法收集9例特发性脊柱侧凸(IS)患者和10例先天性脊柱侧凸(CS)患者的顶椎、上下端椎凸凹侧下关节突,采用苏木素-伊红(HE)染色方法和免疫组化方法染色,免疫组化染色结果采用图像分析系统处理。结果IS、CS顶椎凹侧关节突中Ⅰ型胶原的表达均高于凸侧,分别为193±64对151±45和199±86对179±78(P表达高于凸侧,IS和CS顶椎高于端椎。IS及CS顶椎凹侧TGF-β1的表达高于凸侧,分别为145±43对112±50和120±61对89±32(P表达增高和顶椎的表达增高,异常压应力可能起着非常重要的作用。

关键词：脊柱侧凸胶原转化生长因子β 转化生长因子β1(TGF-β1) 先天性脊柱侧凸下关节突 Ⅱ型胶原表达的研究免疫组化方法特发性脊柱侧凸

子痫前期患者胎盘合体滋养细胞中Fas抗原及其配体、胎盘生长因子表达的研究

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中华妇产科杂志 2005年第5期40卷 320-322页

作者：岳秀云张曦崔世红王秀芹郑州大学第三附属医院妇产科 450052 河南省濮阳市中原油田总医院妇产科

目的　探讨Fas抗原(Fas)及其配体(FasL)、胎盘生长因子(PlGF)在子痫前期患者胎盘合体滋养细胞中的表达变化及其意义。方法　采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶(SP)连接法检测24例正常晚期妊娠妇女(正常晚孕组)、24例轻度子痫前... 详细信息

目的　探讨Fas抗原(Fas)及其配体(FasL)、胎盘生长因子(PlGF)在子痫前期患者胎盘合体滋养细胞中的表达变化及其意义。方法　采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶(SP)连接法检测24例正常晚期妊娠妇女(正常晚孕组)、24例轻度子痫前期产妇(轻度子痫前期组)及24例重度子痫前期产妇(重度子痫前期组)胎盘组织中Fas、FasL及PlGF表达水平。结果Fas、FasL及PlGF主要表达于胎盘合体滋养细胞胞质及胞膜中。FasL、PlGF在轻度子痫前期组(63±4、81±6)及重度子痫前期组(42±6、65±6)胎盘中的表达均低于正常晚孕组(73±9、88±8),分别与正常晚孕组比较,差异均有统计学意义(P表达均高于正常晚孕组(43±6),分别与正常晚孕组比较,差异均有统计学意义(P表达失衡,可能与子痫前期的发病及发展有关。

关键词：合体滋养细胞胎盘生长因子子痫前期 Fas抗原表达的研究配体患者 FasL 晚期妊娠妇女抗生物素蛋白 PlGF 过氧化物酶表达变化免疫组化胎盘组织表达失衡统计学晚孕重度轻度其意义链霉菌产妇

鼠青光眼模型视网膜神经节细胞中热休克蛋白27表达的研究

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中华眼科杂志 2005年第6期41卷 533-539页

作者：吕红彬袁援生李燕李俊昆明医学院第一附属医院眼科

目的探讨热休克蛋白27(HSP27)在鼠青光眼模型视网膜神经节细胞(RGCs)中的表达及其与血清中相应抗体的关系。方法将49只Wistar大鼠随机分为高眼压组(32只鼠)、sham对照(假手术)组(12只鼠)及正常对照组(5只鼠)。电凝鼠巩膜表面至少3组静... 详细信息

目的探讨热休克蛋白27(HSP27)在鼠青光眼模型视网膜神经节细胞(RGCs)中的表达及其与血清中相应抗体的关系。方法将49只Wistar大鼠随机分为高眼压组(32只鼠)、sham对照(假手术)组(12只鼠)及正常对照组(5只鼠)。电凝鼠巩膜表面至少3组静脉及角膜缘周围血管,减少房水静脉回流,建立鼠青光眼模型。分别于术后1、2、3、4及8周分别处死大鼠。处死前测眼压,抽血2ml,供酶联免疫吸附测定使用,分析视网膜组织内HSP27蛋白抗原产生的血清中相应抗体水平。同时对鼠眼视网膜组织进行石蜡切片,采用免疫组化法检测RGCsHSP27的表达及分布情况,并对检测结果进行统计学分析。结果高眼压组右眼术后眼压明显升高,术后3d眼压(27.52±6.63)mmHg(1mmHg=0.133kPa),术后1周眼压(31.42±6.18)mmHg,此后眼压基本稳定。术后各时间点高眼压组右眼眼压与其术前、左眼及sham组右眼和左眼比较,差异有统计学意义(P表达率在术后各时间点,高眼压组右眼与左眼、sham对照组右眼和左眼及正常对照组右眼和左眼比较,差异有统计学意义(P表达随着眼压升高及高眼压持续时间延长逐渐增强,且视网膜神经纤维层中也出现较明显的HSP27的阳性表达。结论内源性HSP27表达增强可能在青光眼视神经病变中具有重要作用。

关键词：视网膜神经节细胞热休克蛋白27 眼模型表达的研究 HSP27 Wistar大鼠酶联免疫吸附测定视网膜神经纤维层正常对照组免疫组化法检测 RGCs 高眼压视网膜组织统计学分析阳性表达率视神经病变周围血管静脉回流抗体水平

血管内皮细胞生长因子受体在子宫内膜异位症中表达的研究

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中华医学杂志 2005年第22期85卷 1555-1559页

作者：王含必郎景和冷金花朱兰刘珠凤孙大为中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科 100730

目的探索血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体(Flt1,KDR)在子宫内膜异位症(简称内异症)患者的异位及在位子宫内膜组织中的定位及表达情况。方法分别采用免疫组化、Western印迹法和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测内异症患者37份在位子宫内膜... 详细信息

目的探索血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体(Flt1,KDR)在子宫内膜异位症(简称内异症)患者的异位及在位子宫内膜组织中的定位及表达情况。方法分别采用免疫组化、Western印迹法和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测内异症患者37份在位子宫内膜组织、34份卵巢子宫内膜异位囊肿组织、15份腹膜红色病变组织、4份腹壁子宫内膜异位灶组织,以33例非内异症患者的在位子宫内膜组织作为对照,比较不同组织中Flt1、KDRmRNA及蛋白的阳性表达率和表达强度的差异。结果Flt1、KDR蛋白质除在血管内皮细胞中表达外,还在子宫内膜的腺细胞和间质细胞中表达。Flt1、KDR在内异症患者子宫内膜的阳性表达率分别为94.3%,91.4%,高于卵巢巧克力囊肿(分别为74.3%,77.1%)两者比较P0.05)的表达率相仿。Flt1、KDR在内异症患者在位子宫内膜组织的核酸水平[吸光度(A)比值]分别为2.4±1.2,3.0±1.4;蛋白质水平灰度值分别为31±17,36±24;同期卵巢巧克力囊肿组织中的核酸水平(A)比值分别为1.5±0.9,1.8±1.0;蛋白质水平灰度值分别为17±6,20±11(P0.05)。结论VEGF可能通过子宫内膜细胞上的相应受体而发挥一定的生物学作用。内异症患者的异位子宫内膜中Flt1、KDR的表达可能与血管形成相关。

关键词：子宫内膜异位症血管内皮细胞生长因子受体血管内皮细胞生长因子(VEGF) 表达的研究子宫内膜组织 Western印迹法卵巢子宫内膜异位囊肿卵巢巧克力囊肿逆转录聚合酶链反应 Flt-1 阳性表达率蛋白质水平核酸水平子宫内膜细胞

乳腺癌中同源异型盒基因(HOX)A5表达的研究

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中华病理学杂志 2005年第9期34卷 569-574页

作者：曾郁杨文涛张瑰红朱雄增复旦大学肿瘤医院病理科上海200032

目的研究乳腺癌组织中同源异型盒基因(HOX)A5mRNA和蛋白表达,并分析其与乳腺癌临床病理参数间的相关性,以探讨HOXA5基因在乳腺癌发生、发展及转移中的作用。方法运用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RealtimeRTPCR)技术检测60例... 详细信息

目的研究乳腺癌组织中同源异型盒基因(HOX)A5mRNA和蛋白表达,并分析其与乳腺癌临床病理参数间的相关性,以探讨HOXA5基因在乳腺癌发生、发展及转移中的作用。方法运用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RealtimeRTPCR)技术检测60例乳腺癌(其中54例浸润性导管癌)和24例乳腺良性病变中HOXA5mRNA表达,免疫组织化学SP法检测HOXA5蛋白表达。统计学方法分析HOXA5基因表达与乳腺癌临床病理参数间的关系。结果(1)乳腺癌中HOXA5mRNA相对表达量为0.73～193.07,均值为20.85;乳腺良性病变中相对表达量为5.42～81.91,均值为30.94。乳腺癌HOXA5mRNA表达明显低于良性乳腺病变(P表达减少或消失。(3)淋巴结转移阳性乳腺癌病例HOXA5mRNA表达明显低于转移阴性组,两者间差异有统计学意义(P表达差异具有显著性(P表达或表达缺失,在淋巴结转移阴性的乳腺癌中主要呈中度至强阳性表达。(4)HOXA5mRNA和蛋白表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小、临床分期、组织学分型、浸润性导管癌分级等其他临床病理学参数间未见相关性(P>0.05)。结论HOXA5基因表达异常可能与乳腺癌有关。HOXA5基因表达抑制可能与乳腺癌淋巴结转移有关。

关键词：乳腺肿瘤逆转录聚合酶链反应免疫组织化学基因,homeobox A5 同源异型盒基因乳腺癌组织表达的研究实时荧光定量逆转录聚合酶链反应 mRNA表达

CD80/IgG融合基因重组表达载体的构建及在CHO细胞中功能性表达的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第9期25卷 747-751页

作者：何伟张敏冯献启刘芳邹萍华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所

目的构建CD80/IgG真核表达载体,使其在中国地仓鼠卵巢细胞(Chinesehamsterovum,CHO)中功能性表达,寻找消除白血病细胞免疫逃逸的有效方法。方法采用定向分子克隆技术将小鼠CD80胞外段和IgG1Fc段的cDNA串联至真核表达载体pcDNA3.0中,运... 详细信息

目的构建CD80/IgG真核表达载体,使其在中国地仓鼠卵巢细胞(Chinesehamsterovum,CHO)中功能性表达,寻找消除白血病细胞免疫逃逸的有效方法。方法采用定向分子克隆技术将小鼠CD80胞外段和IgG1Fc段的cDNA串联至真核表达载体pcDNA3.0中,运用脂质体将所得的重组子转染CHO细胞,经免疫印迹、斑点ELISA检测其表达,免疫亲和层析法纯化其表达产物,用流式细胞术、MTT比色法及ELISA在体外检测该产物的生物学活性。结果两段目的基因按预期设想克隆入空载体中并得到了表达,亲和层析纯化获得了高纯度目的蛋白,该蛋白能够将白血病细胞表面CD80分子密度提高5倍,并可显著增强同种异体小鼠淋巴细胞的增殖、对白血病细胞的杀伤以及IL-2的分泌。结论成功构建了融合基因真核表达载体,其表达产物在体外具有相应的生物学功能,有希望成为消除白血病细胞免疫逃逸的有力工具。

关键词：融合基因免疫逃逸免疫治疗转染CHO细胞重组表达载体功能性表达表达的研究融合基因基因真核表达载体 ELISA检测白血病细胞分子克隆技术

人骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞及运动神经元生存蛋白表达的研究

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中华医学杂志 2005年第16期85卷 1125-1128页

作者：杨晓苏吴海香肖波中南大学湘雅医院神经内科长沙410008

目的　定向诱导人骨髓间质干细胞(hMSC)分化为神经元样细胞,并检测诱导前后细胞的运动神经元生存(SMN)基因mRNA及蛋白质的表达。方法　分离和纯化hMSC;在体外用碱性成纤维细胞生长子预诱导hMSC,再用二甲基亚砜和丁化羟基苯甲醚诱导hMSC... 详细信息

目的　定向诱导人骨髓间质干细胞(hMSC)分化为神经元样细胞,并检测诱导前后细胞的运动神经元生存(SMN)基因mRNA及蛋白质的表达。方法　分离和纯化hMSC;在体外用碱性成纤维细胞生长子预诱导hMSC,再用二甲基亚砜和丁化羟基苯甲醚诱导hMSC分化为神经元样细胞;用免疫细胞化学方法鉴定诱导前后的细胞是否表达神经元特异性标志物神经元稀醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)以及SMN蛋白;用RT- PCR检测诱导前hMSC及诱导后神经元样细胞SMN基因mRNA的表达。结果　hMSC诱导3h后,大多数细胞转变为类似于神经元的形态,有长的突起,相互之间连接呈网状。NSE、NF进行鉴定,结果显示NSE、NF呈阳性。诱导前的hMSC及诱导后的神经元样细胞均可见SMN基因mRNA表达,但诱导后表达增加,差异有统计学意义(P表达为阳性。结论　hMSC能分化为神经元样细胞,并表达神经元的特异性标志物。hMSC分化的神经元样细胞既能高表达SMN基因的mRNA,也表达SMN蛋白。

关键词：神经元样细胞运动神经元生存蛋白间质干细胞分化表达的研究人骨髓间质干细胞免疫细胞化学方法基因mRNA表达特异性标志物碱性成纤维细胞 SMN蛋白分离和纯化二甲基亚砜神经丝蛋白 PCR检测 SMN基因定向诱导蛋白表达

大鼠心肺复苏后脑组织基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达的研究

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中国危重病急救医学 2005年第9期17卷 548-551页

作者：李章平陈寿权王姗姗黄唯佳程俊彦王卫王万铁谭映霞温州医学院附属第一医院急诊科 325000 温州医学院病理生理教研室温州医学院医学科学研究所 325000

目的探讨心肺复苏早期脑组织基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9及基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)的mRNA表达变化。方法用窒息法建立大鼠心肺复苏模型。80只SD大鼠随机分为假手术对照组和复苏组,然后依据时间分为假手术或复苏自主循环恢复(... 详细信息

目的探讨心肺复苏早期脑组织基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9及基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)的mRNA表达变化。方法用窒息法建立大鼠心肺复苏模型。80只SD大鼠随机分为假手术对照组和复苏组,然后依据时间分为假手术或复苏自主循环恢复(ROSC)后即刻及0.5、3、6和9h组。检测各组大鼠脑组织MMP2、MMP9及TIMP1的mRNA表达情况。结果心肺复苏后3h大鼠脑组织MMP9及TIMP1的mRNA表达水平均开始上升,6h时显著增高,MMP9/TIMP1比值也相应增大。MMP2mRNA水平在心肺复苏后9h内未见明显升高。结论心肺复苏后早期就出现MMP9、TIMP1的mRNA表达增加及比例失衡,而MMP2mRNA水平在早期无明显变化。

关键词：心肺复苏术基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶组织抑制剂基质金属蛋白酶-2(MMP-2) 心肺复苏 SD大鼠后脑组织 MMP-9/TIMP-1 表达的研究 mRNA表达

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人类外周血hPer1基因节律性表达的研究

中国现代医学杂志 2006年第3期16卷 381-383,386页

作者：刘姝陈彪蔡彦宁温玫左晓虹首都医科大学宣武医院老年病医学研究中心神经生物学研究室北京100053

目的生物节律广泛存在于人类生活和工作中,为研究正常人节律基因表达特点,定量检测正常年轻人外周血中节律基因Per1(humanPeriod1,hPer1)的表达。方法实验对象为7名大学生(H1-H7),年龄24￣30岁,男性3名,女性4名。其中H7于实验前1天晚上... 详细信息

目的生物节律广泛存在于人类生活和工作中,为研究正常人节律基因表达特点,定量检测正常年轻人外周血中节律基因Per1(humanPeriod1,hPer1)的表达。方法实验对象为7名大学生(H1-H7),年龄24￣30岁,男性3名,女性4名。其中H7于实验前1天晚上值夜班。分别在09:00,15:00,21:00,03:00,09:00点抽取肘静脉血6mL,抽提全血总RNA。应用竞争性RT-PCR方法定量检测实验对象外周血中每人每个时间点hPer1基因的表达。结果人类外周血中hPer1基因的表达有显著节律性。表达高峰在09:00而低峰在21:00,两者之间的差异达2.29±0.9倍(P表达水平又回到最高峰。结论hPer1基因的表达在外周血中存在节律性。

关键词：生物节律 hPerl基因竞争性RT—PCR 人类外周血 1基因节律性表达的研究 Period 基因表达水平节律基因