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螺旋藻激酶提取物对血栓形成的影响

中国老年学杂志 2009年第12期29卷 1462-1464页

作者：陈高斯李小花庞辉贾晓栋秦小茹罗冬覃颖脱李运福广西医科大学生理教研室广西南宁530021

目的探索螺旋藻激酶(SPK)提取物对血栓形成的影响。方法体外采用试管法测定家兔全血凝固时间;体内采用结扎老年大鼠下腔静脉法复制静脉血栓模型,称取血栓重量,采用毛细管法、剪尾法测定老年小鼠凝血时间(CT)和出血时间(BT)的变化,观察SP... 详细信息

目的探索螺旋藻激酶(SPK)提取物对血栓形成的影响。方法体外采用试管法测定家兔全血凝固时间;体内采用结扎老年大鼠下腔静脉法复制静脉血栓模型,称取血栓重量,采用毛细管法、剪尾法测定老年小鼠凝血时间(CT)和出血时间(BT)的变化,观察SPK提取物对静脉血栓形成的影响。结果SPK使体外试管法CT显著延长,使血栓形成实验的静脉血栓重量减轻,同时SPK也可以使老年小鼠的CT和BT显著延长,且各结果均具有明显的剂量-效应依赖关系。结论SPK提取物具有明显的抗凝作用。

关键词：螺旋藻激酶抗凝血血栓形成

螺旋藻激酶对肾上腺素损伤内皮细胞分泌t-PA和PAI-1的影响

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基因组学与应用生物学 2016年第5期35卷 1049-1053页

作者：王慧杰肖云晓庞辉陈萌蒋皓广西医科大学南宁530021 清华大学北京100084

研究不同浓度螺旋藻激酶(spirulina kinase,SPK)对肾上腺素(Adr)损伤血管内皮细胞分泌组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的影响。采用不同浓度SPK处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC),MTT法检测不同浓度SPK对HUVEC活力... 详细信息

研究不同浓度螺旋藻激酶(spirulina kinase,SPK)对肾上腺素(Adr)损伤血管内皮细胞分泌组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的影响。采用不同浓度SPK处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC),MTT法检测不同浓度SPK对HUVEC活力影响;建立Adr损伤模型,酶联免疫吸附法检测细胞培养液中t-PA和PAI-1含量的变化。结果显示SPK浓度在10μg/mL^2 mg/mL范围内,细胞活力明显升高且不影响细胞分泌t-PA和PAI-1的量;SPK作用于Adr损伤模型,各剂量组均可降低Adr损伤下HUVEC分泌PAI-1的量,提高t-PA/PAI-1比值。本研究揭示了SPK可通过降低PAI-1、提高t-PA/PAI-1比值来实现保护Adr损伤的血管内皮细胞。

关键词：螺旋藻激酶组织型纤溶酶原激活物人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂肾上腺素

螺旋藻激酶对人脐静脉内皮细胞抗氧化能力的影响

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中国药理学通报 2016年第2期32卷 293-294页

作者：陈萌庞辉王慧杰陈相宜广西医科大学生理教研室广西南宁530021

内皮细胞损伤是动脉粥样硬化发生的起始步骤,氧化应激则被认为是血管内皮损伤最重要的致病因子之一[1-2].研制抗氧化内皮细胞保护剂已成为国内外研究的热点.我们前期的研究证明螺旋藻激酶（SPK）具有抗凝溶栓、保护细胞的能力[3].本研... 详细信息

内皮细胞损伤是动脉粥样硬化发生的起始步骤,氧化应激则被认为是血管内皮损伤最重要的致病因子之一[1-2].研制抗氧化内皮细胞保护剂已成为国内外研究的热点.我们前期的研究证明螺旋藻激酶（SPK）具有抗凝溶栓、保护细胞的能力[3].本研究建立脐静脉内皮细胞氧化损伤模型,探讨螺旋藻激酶的抗氧化能力和保护细胞的作用.

关键词：螺旋藻激酶人脐静脉内皮细胞氧化损伤丙二醛超氧化物歧化酶谷胱甘肽过氧化物酶

螺旋藻激酶对动脉粥样硬化大鼠炎性因子及血管生长因子的影响

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中国临床药理学杂志 2022年第9期38卷 944-948页

作者：吕莉杨莹韦娇庞辉广西医科大学药学院广西南宁530021 广西医科大学基础医学院广西南宁530021

目的研究螺旋藻激酶对动脉粥样硬化大鼠血管的影响。方法将SD大鼠随机分为6组:对照组、模型组、阳性药组和低、中、高剂量实验组。对照组大鼠给予常规饲料,其余组大鼠给予高脂饲料和维生素D3构建动脉粥样硬化大鼠模型,低、中、高剂量... 详细信息

目的研究螺旋藻激酶对动脉粥样硬化大鼠血管的影响。方法将SD大鼠随机分为6组:对照组、模型组、阳性药组和低、中、高剂量实验组。对照组大鼠给予常规饲料,其余组大鼠给予高脂饲料和维生素D3构建动脉粥样硬化大鼠模型,低、中、高剂量实验组分别灌胃给予80,160和320 U·kg^(-1)螺旋藻激酶溶液,阳性药组灌胃4 mg·kg^(-1)辛伐他汀混悬液,对照组和模型组灌胃给予等体积的0.9%NaCl溶液,每天给药1次,持续12周。以酶联免疫吸附法检测血清C反应蛋白(CRP)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的含量;以蛋白质印迹法检测腹主动脉的血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达水平;以免疫组化法检测腹主动脉VEGF蛋白的表达水平;以苏木精-伊红染色法观察腹主动脉病理变化,并用Image Pro Plus软件测量其内膜-中膜厚度(IMT)。结果对照组、模型组、阳性药组和低、中、高剂量实验组的CRP的含量分别(1 633.75±23.94),(2 177.50±145.06),(1 833.75±132.88),(1 971.50±37.67),(1 790.00±64.55),(1 608.75±89.85)ng·mL;MMP-9含量分别为(76.07±6.21),(109.70±17.91),(88.93±12.70),(92.86±14.97),(85.29±8.46),(81.43±6.78)ng·mL^(-1);IMT分别为(323.19±13.23),(492.79±6.41),(303.21±13.36),(348.99±5.55),(308.77±8.04),(288.00±6.02)μm。与模型组比较,对照组、阳性药组和中、高剂量实验组的CRP、MMP-9、IMT、VEGF指标,差异均有统计学意义(P螺旋藻激酶对动脉粥样硬化大鼠血管有保护疗效,可能与降低炎症因子CRP、MMP-9和VEGF的表达水平有关。

关键词：螺旋藻激酶动脉粥样硬化 C-反应蛋白基质金属蛋白酶9 血管内皮生长因子

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螺旋藻激酶分离提纯方法初探

时珍国医国药 2011年第6期22卷 1399-1400页

作者：肖云晓陈高斯庞辉广西医科大学广西南宁530021

目的研究螺旋藻激酶的分离纯化方法,为工业化放大生产螺旋藻激酶药物提供一定的实验依据,为后续的酶学性质研究打下基础。方法配制螺旋藻激酶粗酶液,通过离心沉淀,饱和硫酸铵分级盐析,透析,凝胶层析来分离提纯螺旋藻激酶,最后用SDS-PAG... 详细信息

目的研究螺旋藻激酶的分离纯化方法,为工业化放大生产螺旋藻激酶药物提供一定的实验依据,为后续的酶学性质研究打下基础。方法配制螺旋藻激酶粗酶液,通过离心沉淀,饱和硫酸铵分级盐析,透析,凝胶层析来分离提纯螺旋藻激酶,最后用SDS-PAGE电泳法验证螺旋藻激酶纯度,测定分子量。结果通过一系列的分离提纯得到了较纯的蛋白,酶回收率达到42.3%,纯化倍数达到6.1。所得螺旋藻激酶的分子量为40 KD。结论初步探索出较为优化的螺旋藻激酶的分离纯化方法。

关键词：螺旋藻激酶分离纯化凝胶层析

螺旋藻激酶抗血管内皮细胞氧化损伤与一氧化氮的相关性

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中国老年学杂志 2020年第7期40卷 1525-1528页

作者：杨晓梅陈萌庞辉赵杰王慧杰韦娇广西医科大学基础医学院广西南宁530021

目的探讨螺旋藻激酶(SPK)对过氧化损伤内皮细胞的保护作用.方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HU-VEC),采用过氧化氢(H2 O2)诱导细胞损伤模型,实验分为正常组、模型组、阳性对照组(维生素E 10 mg/L)、SPK低、中、高剂量组(1、2、3 g/L),... 详细信息

目的探讨螺旋藻激酶(SPK)对过氧化损伤内皮细胞的保护作用.方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HU-VEC),采用过氧化氢(H2 O2)诱导细胞损伤模型,实验分为正常组、模型组、阳性对照组(维生素E 10 mg/L)、SPK低、中、高剂量组(1、2、3 g/L),测定内皮细胞活力、细胞培养液中三磷酸腺苷(ATP)含量、一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性.结果与对照组比较,模型组细胞活力明显下降(P<0.05),ATP、NO含量降低,NOS活性降低(P<0.05).与模型组比较,SPK中、高剂量组可显著降低氧化损伤造成的细胞损伤,使细胞活力明显上升(P<0.05);SPK低、中、高剂量组能使ATP分泌量显著增加(P<0.05);SPK中、高剂量组能使NO分泌量显著增加(P<0.05);SPK高剂量组使NOS活性显著增加(P<0.05).结论 SPK可减轻H2O2诱导下的内皮细胞损伤,提高HUVEC细胞活力,其机制可能与增加ATP,增强内皮细胞NOS的活性,进一步增加NO含量有关.

关键词：螺旋藻激酶血管内皮细胞三磷酸腺苷一氧化氮一氧化氮合酶

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螺旋藻激酶对急性血瘀模型大鼠的影响

重庆医学 2017年第36期46卷 5047-5048,5051页

作者：黄媛恒覃斐章李映新原春兰蒋丽梅王琳庞辉广西医科大学基础医学院南宁530021 广西医科大学药学院南宁530021 广西医科大学第一临床医学院南宁530021

目的探讨螺旋藻激酶(SPK)对急性血瘀模型大鼠的血液流变学、血小板聚集率和环磷酸腺苷(cAMP)的影响。方法40只SD大鼠分为正常对照组、模型组、阿司匹林组和SPK高、低剂量组,灌胃给药7d,采用肾上腺素冰水浴刺激复制急性血瘀大鼠模型,应... 详细信息

目的探讨螺旋藻激酶(SPK)对急性血瘀模型大鼠的血液流变学、血小板聚集率和环磷酸腺苷(cAMP)的影响。方法40只SD大鼠分为正常对照组、模型组、阿司匹林组和SPK高、低剂量组,灌胃给药7d,采用肾上腺素冰水浴刺激复制急性血瘀大鼠模型,应用全自动血流变测定仪检测全血黏度、血浆黏度、红细胞压积(Hct)、红细胞聚集指数(EAI)、红细胞变形指数(DI)和红细胞刚性指数(ERI),酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆cAMP的水平,采用二磷酸腺苷诱导大鼠血小板聚集,用比浊法测定最大聚集率。结果 SPK可以降低急性血瘀大鼠的全血黏度,血浆黏度、Hct、EAI和血小板最大聚集率,升高血浆cAMP水平,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),对DI和ERI无明显影响。结论 SPK能明显改善急性血瘀大鼠血液流变学的异常变化且具有抗血小板聚集作用。

关键词：螺旋藻激酶血瘀血液流变学血小板聚集环磷酸腺苷

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螺旋藻激酶的酶学性质研究

时珍国医国药 2012年第10期23卷 2512-2513页

作者：蒋皓陈高斯庞辉肖云晓清华大学北京100084 广西医科大学广西南宁530021

目的研究螺旋藻激酶的酶学性质。方法螺旋藻激酶通过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-75凝胶过滤层析、冷冻干燥法从螺旋藻激酶发酵粗提物中纯化而来,用纤维蛋白平板法测定其纤溶活性,研究螺旋藻激酶的作用方式及温度、pH和抑制剂对其纤溶... 详细信息

目的研究螺旋藻激酶的酶学性质。方法螺旋藻激酶通过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-75凝胶过滤层析、冷冻干燥法从螺旋藻激酶发酵粗提物中纯化而来,用纤维蛋白平板法测定其纤溶活性,研究螺旋藻激酶的作用方式及温度、pH和抑制剂对其纤溶活性的影响。结果螺旋藻激酶能直接溶解纤维蛋白;它在45℃时活性最高,最适反应温度范围为45～55℃;最适反应pH为8,pH6～10内稳定性较强;EDTA和DTT对螺旋藻激酶活力无明显影响,而PMSF能完全抑制其活性。结论螺旋藻激酶热稳定性强,适宜碱性的环境。螺旋藻激酶是一种丝氨酸蛋白酶,结构中不含二硫键。

关键词：螺旋藻激酶酶学性质

螺旋藻激酶对人脐静脉内皮细胞t-PAmRNA、PAI-1mRNA表达的影响

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时珍国医国药 2012年第6期23卷 1471-1473页

作者：赵杰肖云晓蒋浩庞辉广西医科大学广西南宁530021 清华大学北京100084

目的研究螺旋藻激酶(Spirulina kinase,SPK)对人脐静脉内皮细胞t-PAmRNA、PAI-1mRNA表达的影响,探讨其抗血栓作用机制,为开发新型溶栓药物提供理论依据。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),建立肾上腺素(Adr)损伤模型加入不同浓度的... 详细信息

目的研究螺旋藻激酶(Spirulina kinase,SPK)对人脐静脉内皮细胞t-PAmRNA、PAI-1mRNA表达的影响,探讨其抗血栓作用机制,为开发新型溶栓药物提供理论依据。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),建立肾上腺素(Adr)损伤模型加入不同浓度的SPK,并以肝素(Hep)为阳性对照,与空白组对照,经过12,24,48 h后,逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR),扩增产物经凝胶电泳分离后,凝胶图像分析仪照相和扫描,测定各组t-PAmRNA、PAI-1mRNA与内参基因三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)mRNA的相对表达量。结果在Adr损伤模型中,2 mg/ml SPK可以上调t-PAmRNA表达,超大剂量SPK降低t-PAmRNA表达。SPK还可以随着剂量的增加明显的抑制PAI-1mRNA的表达,效果强于大剂量的肝素。结论 SPK可能通过小部分活化t-PAmRNA的表达,抑制PAI-1mRNA的表达,从而达到抗血栓的作用。

关键词：螺旋藻激酶组织型纤溶酶原激活物纤溶酶原激活物抑制物逆转录多聚酶链式反应