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circ-13267通过let-7-19/ERBB4通路调控蛋鸭卵泡颗粒细胞凋亡

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中国农业科学 2022年第8期55卷 1657-1666页

作者：吴艳张昊梁振华潘爱銮申杰蒲跃进黄涛皮劲松杜金平湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/湖北省农业科技创新中心动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室

【背景】蛋鸭卵泡发育是决定其产蛋性能的关键因素。已有研究表明，禽类卵泡发育是极为复杂的生物学过程，目前人们已对家禽的卵泡发育模式有了一定的了解，但作为决定产蛋量的重要因素，卵泡发育的具体调控机理仍需进一步深入研究。颗... 详细信息

【背景】蛋鸭卵泡发育是决定其产蛋性能的关键因素。已有研究表明，禽类卵泡发育是极为复杂的生物学过程，目前人们已对家禽的卵泡发育模式有了一定的了解，但作为决定产蛋量的重要因素，卵泡发育的具体调控机理仍需进一步深入研究。颗粒细胞是卵泡中主要的功能细胞，可调控卵泡膜细胞和卵母细胞的生长、分化和成熟，同时也精确的调控卵泡的生长发育，维持卵巢的正常功能（诱导排卵、维持成熟分裂的阻断、为卵母细胞提供底物等）。circRNA是一类新型的内源性非编码RNA，在卵泡发育中发挥重要的调控作用。【目的】通过构建circRNA过表达载体上调circ-13267的表达，研究circ-13267在蛋鸭卵泡颗粒细胞中的作用及其调控机制，为蛋鸭卵泡发育的调控机制解析提供依据。【方法】首先，利用Q-PCR检测蛋鸭卵泡颗粒细胞的细胞质与细胞核中circ-13267的表达水平；构建circ-13267的过表达载体circ-13267-pLCDH，在蛋鸭颗粒细胞中过表达circ-13267后，利用Q-PCR法检测circ-13267、let-7-19、ERBB4、FAS和BCL2的表达水平；分别转染circ-13267-pLCDH和pLCDH-ciR于蛋鸭卵泡颗粒细胞，24 h后利用EdU法检测蛋鸭卵泡颗粒细胞的增殖能力；将circ-13267的线性序列或ERBB4的3′UTR克隆到pmirGLo载体中，同时对上述野生型序列中的let-7-19结合位点进行突变，得到表达突变型序列的载体，利用双荧光素酶报告基因验证circ-13267与let-7-19及let-7-19与靶基因ERBB4的结合关系；在蛋鸭卵泡颗粒细胞中转染circ-13267-pLCDH和pLCDH-ciR，利用流式细胞术和Annexin V-FITC检测蛋鸭卵泡颗粒细胞凋亡情况。【结果】环状RNA circ-13267在细胞质和细胞核中均有表达；双荧光素酶报告基因试验结果显示，let-7-19能与ERBB4结合，进而下调荧光素酶的活性，当ERBB4序列中let-7-19的结合位点突变后，let-7-19则无法抑制荧光素酶的表达，说明ERBB4是let-7-19的一个靶基因；荧光定量检测结果显示，过表达环状RNAcirc-13267后BCL2基因的表达显著降低（P蛋鸭卵泡颗粒细胞数量显著减少，说明其促进了蛋鸭卵泡颗粒细胞的凋亡；然而，在蛋鸭卵泡颗粒细胞中共转染circ-13267和let-7-19后，与对照组相比共转染组中BCL2和FAS的表达量均无显著变化（P>0.05），而与过表达circ-13267组相比，共转组中BCL2基因的表达量极显著降低（P蛋鸭卵泡颗粒细胞凋亡的作用被抑制；利用流式细胞仪检测转染后的蛋鸭卵泡颗粒细胞发现，与共转染circ-13267和let-7-19组相比，仅过表达circ-13267后，晚期凋亡细胞数和总凋亡细胞数均显著增加（P蛋鸭circ-13267在蛋鸭卵泡颗粒细胞的细胞质和细胞核中均有表达，circ-13267可以吸附let-7-19并靶向ERBB4基因，从而促进了蛋鸭卵泡颗粒细胞的凋亡，为解析蛋鸭卵泡发育的调控机制提供理论依据。

关键词： circRNA miRNA 蛋鸭卵泡发育颗粒细胞

饲粮添加锌和锰对产蛋后期蛋鸭产蛋性能、蛋壳品质和骨骼质量的影响

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动物营养学报 2023年第8期35卷 5164-5181页

作者：金永燕田何芳陈伟王爽夏伟光金成龙黄雪冰李凯潮王胜林刘文超郑春田张亚男广东省农业科学院动物科学研究所畜禽育种国家重点实验室农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室广东省动物育种与营养公共实验室广东省畜禽育种与营养研究重点实验室广州510640 广东海洋大学滨海农业学院湛江524000

本试验旨在研究饲粮添加锌和锰对产蛋后期蛋鸭产蛋性能、蛋壳品质和骨骼质量的影响。采用4×3双因素完全随机试验设计,其中锌水平分别为0、20、40和80 mg/kg,锰水平分别为0、20和40 mg/kg。选取864只健康、产蛋率相近的产蛋后期(61周龄... 详细信息

本试验旨在研究饲粮添加锌和锰对产蛋后期蛋鸭产蛋性能、蛋壳品质和骨骼质量的影响。采用4×3双因素完全随机试验设计,其中锌水平分别为0、20、40和80 mg/kg,锰水平分别为0、20和40 mg/kg。选取864只健康、产蛋率相近的产蛋后期(61周龄)龙岩山麻鸭,随机分为12个组,每组6个重复,每个重复12只鸭。对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,其中锌含量24 mg/kg、锰含量38 mg/kg;各试验组在基础饲粮中额外添加对应水平的锌和锰。预试期2周,正试期16周。结果表明:1)80 mg/kg锌添加组蛋鸭第9~12周和第1~16周平均日采食量最低,显著低于其他组(P蛋鸭第13~16周和第1~16周产蛋率、第1~4周和第1~16周平均蛋重、第13~16周和第1~16周日产蛋重、第9~12周和第13~16周平均日采食量以及第1~4周破蛋率有显著交互作用(P蛋鸭产蛋率和日产蛋重均在80 mg/kg锌+40 mg/kg锰添加组最高,平均蛋重在20 mg/kg锌+40 mg/kg锰添加组最高;第1~4周,破蛋率在40 mg/kg锌+20 mg/kg锰添加组最低。2)饲粮添加锌或锰对蛋鸭蛋壳品质指标均无显著影响(P>0.05);饲粮添加锌和锰对第8周蛋壳强度、第4周和第8周蛋壳韧性、第8周蛋壳重以及第12周蛋壳比例有显著交互作用(P蛋鸭胫骨管围、股骨管围和鲜重、肱骨管围和尺骨密度显著降低(P蛋鸭骨骼质量指标均无显著影响(P>0.05)。饲粮添加锌和锰对蛋鸭尺骨密度有显著交互作用(P蛋鸭产蛋性能,改善蛋壳品质,降低破蛋率,但80 mg/kg锌会降低骨骼质量。在改善蛋壳品质和降低破蛋率,且不影响产蛋性能和骨骼质量的前提下,建议产蛋后期蛋鸭(61~76周龄)饲粮中锌和锰的添加水平分别为40和20 mg/kg。

关键词：锌锰蛋鸭产蛋后期交互作用

蛋鸭circ-ZNF326的特征分析、过表达载体的构建及对小肠上皮细胞增殖的影响

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中国畜牧兽医 2022年第3期49卷 837-844页

作者：魏文焯郑超吴艳梁振华皮劲松杜金平李成凤张昊湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室武汉430064 西南科技大学生命科学与工程学院绵阳621010 湖北神丹健康食品有限公司安陆432600

【目的】明确circ-ZNF326的基本特征及对蛋鸭小肠上皮细胞增殖的影响。【方法】以绿头鸭为研究对象,采集鸭胚肠道并培养小肠上皮细胞,提取RNA并反转录为cDNA,参考circ-ZNF326的全长序列设计引物,通过PCR反应扩增获得circ-ZNF326的部分序... 详细信息

【目的】明确circ-ZNF326的基本特征及对蛋鸭小肠上皮细胞增殖的影响。【方法】以绿头鸭为研究对象,采集鸭胚肠道并培养小肠上皮细胞,提取RNA并反转录为cDNA,参考circ-ZNF326的全长序列设计引物,通过PCR反应扩增获得circ-ZNF326的部分序列,测序后利用反向剪接位点验证其成环方式。利用PARISTM Kit提取细胞核与细胞质RNA检测其在细胞中的核质分布情况。合成circ-ZNF326全长序列并利用双酶切及T4连接酶将circ-ZNF326全长序列连接在PLCDH-ciR真核表达载体上,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞扩大培养,提取重组质粒进行双酶切及琼脂糖凝胶电泳检测,将circ-ZNF326过表达载体转染小肠上皮细胞,利用实时荧光定量PCR技术检测circ-ZNF326过表达后的表达效率,利用CCK-8检测过表达circ-ZNF326对蛋鸭小肠上皮细胞增殖的影响。【结果】circ-ZNF326是由ZNF326基因第10、11和12号外显子反向剪接而成,且主要分布在细胞质中。circ-ZNF326过表达载体构建成功,表达效率极显著高于空载组(P蛋鸭小肠上皮细胞的活力,为深入研究circ-ZNF326的生物学功能及其对蛋鸭小肠上皮细胞增殖的调控机制奠定了理论基础。

关键词：环状RNA 蛋鸭 circ-ZNF326 核质分布过表达载体

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蛋鸭营养研究进展

动物营养学报 2020年第10期32卷 4637-4645页

作者：张亚男陈伟阮栋王爽夏伟光郑春田广东省农业科学院动物科学研究所畜禽育种国家重点实验室农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室广东省动物育种与营养公共实验室广东省畜禽育种与营养研究重点实验室广州510640

蛋鸭养殖业已发展成我国畜牧业的重要部分。随着产业进步、环境和生态发展的要求,蛋鸭养殖逐渐由传统的水养向笼养方式转变,相应的营养研究也需不断发展和完善。本文从饲粮营养素需要量、非常规饲料原料的利用、蛋壳品质的营养调控、应... 详细信息

蛋鸭养殖业已发展成我国畜牧业的重要部分。随着产业进步、环境和生态发展的要求,蛋鸭养殖逐渐由传统的水养向笼养方式转变,相应的营养研究也需不断发展和完善。本文从饲粮营养素需要量、非常规饲料原料的利用、蛋壳品质的营养调控、应激对蛋鸭的影响及其营养调控4个方面,简述了蛋鸭营养的研究进展,以期为蛋鸭养殖业的健康可持续发展提供技术支持。

关键词：蛋鸭营养需要非常规原料蛋壳品质应激

饲粮椰子粕和复合酶添加水平对蛋鸭生产性能、蛋品质、血浆生化指标及卵巢发育指标的影响

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动物营养学报 2022年第5期34卷 2980-2990页

作者：王爽张亚男黄雪冰夏伟光李凯潮王胜林陈伟郑春田广东省农业科学院动物科学研究所畜禽育种国家重点实验室农业部华南动物营养与饲料重点实验室农业部家禽遗传育种重点实验室广东省动物育种与营养公共实验室广东省畜禽育种与营养研究重点实验室广州510640

本试验旨在研究饲粮椰子粕和复合酶添加水平对蛋鸭生产性能、蛋品质、血浆生化指标及卵巢发育指标的影响,为椰子粕在蛋鸭饲粮中的合理应用提供参考依据。试验1:选择24周龄、体重接近的健康的山麻鸭种公鸭24只,随机分为2组,每组4个重复,... 详细信息

本试验旨在研究饲粮椰子粕和复合酶添加水平对蛋鸭生产性能、蛋品质、血浆生化指标及卵巢发育指标的影响,为椰子粕在蛋鸭饲粮中的合理应用提供参考依据。试验1:选择24周龄、体重接近的健康的山麻鸭种公鸭24只,随机分为2组,每组4个重复,每个重复3只鸭。禁饲36 h后,强饲代谢饲粮(50%椰子粕+50%玉米淀粉)和无氮饲粮(玉米淀粉),测定椰子粕表观代谢能、蛋白质表观利用率和氨基酸真利用率。试验2:选择健康、体重接近的福建龙岩麻鸭母鸭576只,随机分为8组,每组6个重复,每个重复12只。采用2×4双因子完全随机试验设计,利用试验1椰子粕氨基酸真利用率配制试验饲粮,椰子粕添加水平分别为0、6%、12%、18%,复合酶添加水平分别为0和400 mg/kg。试验期16周。结果表明:1)椰子粕表观代谢能为9.29 MJ/kg,蛋白质表观利用率为30.13%,氨基酸真可利用率在45.58%~87.95%。2)饲粮椰子粕添加水平为6%和12%时蛋鸭产蛋率、日产蛋重显著高于饲粮椰子粕添加水平为0时(P蛋鸭生产性能无显著影响(P>0.05)。3)饲粮椰子粕和复合酶添加水平对蛋鸭蛋品质无显著影响(P>0.05)。4)饲粮椰子粕添加水平对蛋鸭血浆生化指标无显著影响(P>0.05)。饲粮复合酶添加水平为400 mg/kg时蛋鸭血浆白蛋白含量显著高于饲粮复合酶添加水平为0时(P蛋鸭优势卵泡数量显著高于饲粮椰子粕添加水平为0时(P蛋鸭卵巢发育指标无显著影响(P>0.05)。由此可见,饲粮添加12%椰子粕可提高蛋鸭的生产性能,饲粮添加400 mg/kg复合酶对蛋鸭的生产性能和蛋品质无显著影响。

关键词：椰子粕复合酶蛋鸭生产性能蛋品质

制粒丁酸钠对蛋鸭产蛋性能、肠道组织形态及菌群的影响

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中国家禽 2023年

作者：李成凤黄曼曼孙寒雪屈元启李浙烽曾涛田勇卢立志湖北神丹健康食品有限公司浙江省农业科学院畜牧兽医研究所杭州康德权饲料有限公司

试验旨在研究制粒丁酸钠对蛋鸭产蛋性能、肠道组织形态及菌群的影响。试验选用120只48周龄体重与产蛋率相近的蛋鸭分为2组：对照组（C组）饲喂基础饲粮，制粒丁酸钠组（GSB组）在基础日粮中添加500 mg/kg的制粒丁酸钠。每组6个重复，每... 详细信息

试验旨在研究制粒丁酸钠对蛋鸭产蛋性能、肠道组织形态及菌群的影响。试验选用120只48周龄体重与产蛋率相近的蛋鸭分为2组：对照组（C组）饲喂基础饲粮，制粒丁酸钠组（GSB组）在基础日粮中添加500 mg/kg的制粒丁酸钠。每组6个重复，每个重复10只鸭，试验期60 d。结果显示：GSB组蛋鸭产蛋率、平均日采食量、蛋重和料蛋比与C组差异不显著（P>0.05），与C组相比，GSB组蛋鸭十二指肠绒毛高度显著增加（P蛋鸭盲肠菌群的Chao1指数显著高于C组（P蛋鸭盲肠菌群的Good′s coverage指数显著低于C组（P蛋鸭盲肠拟杆菌门丰度显著降低（P蛋鸭盲肠普雷沃菌属显著降低（P蛋鸭肠道组织形态，提高蛋鸭盲肠菌群丰富度，增加有益菌群丰度并减少致病菌的定植，从而促进蛋鸭肠道健康。

关键词：制粒丁酸钠蛋鸭肠道组织形态肠道菌群

表没食子儿茶素没食子酸酯对热应激蛋鸭生产性能及血清生化、抗氧化和免疫指标的影响

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动物营养学报 2023年第11期35卷 7149-7156页

作者：张旭刘洋黄璇邓萍李闯蒋桂韬戴求仲湖南省畜牧兽医研究所动物营养与饲养技术研究室长沙410131 湖南家禽安全生产工程技术研究中心长沙410128

本试验旨在研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对热应激蛋鸭生产性能及血清生化、抗氧化和免疫指标的影响。选用180只42周龄产蛋期临武鸭蛋鸭,随机分成2组,每组6个重复,每个重复15只鸭。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加300 ... 详细信息

本试验旨在研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对热应激蛋鸭生产性能及血清生化、抗氧化和免疫指标的影响。选用180只42周龄产蛋期临武鸭蛋鸭,随机分成2组,每组6个重复,每个重复15只鸭。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加300 mg/kg的EGCG。预试期10 d,正试期42 d,正试期分为热应激期和恢复期2个阶段,各21 d。结果表明:1)在热应激期和恢复期,试验组的产蛋率和平均日产蛋量显著高于对照组(P蛋鸭的产蛋率和平均日产蛋量,提高血清TP、ALB、IgG、IgM、IgA和HSP-70含量及SOD、GSH-Px和CAT活性,增强热应激蛋鸭的抗氧化和免疫能力。

关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯热应激蛋鸭生产性能血清生化指标抗氧化免疫

亚硒酸二葡萄糖酯对产蛋后期蛋鸭肠道形态和微生物的影响

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湖南农业大学学报（自然科学版） 2023年第1期49卷 100-106页

作者：张旭李闯黄璇蒋桂韬邓萍刘胜利李昊帮戴求仲湖南省畜牧兽医研究所湖南长沙410131 湖南家禽安全生产工程技术研究中心湖南长沙410128 山东隆科特酶制剂有限公司山东临沂276400

选用240只50周龄健康的临武鸭蛋鸭,随机分成5组:对照组(第1组)在基础饲粮中添加0.2 mg/kg(以硒计)的亚硒酸钠,第2、3、4、5组分别在基础饲粮中添加0.1、0.2、0.3、0.4mg/kg(以硒计)的亚硒酸二葡萄糖酯。每组6个重复,每重复8只鸭。预试期... 详细信息

选用240只50周龄健康的临武鸭蛋鸭,随机分成5组:对照组(第1组)在基础饲粮中添加0.2 mg/kg(以硒计)的亚硒酸钠,第2、3、4、5组分别在基础饲粮中添加0.1、0.2、0.3、0.4mg/kg(以硒计)的亚硒酸二葡萄糖酯。每组6个重复,每重复8只鸭。预试期7d,正试期63d。试验结束后测定供试鸭的十二指肠、空肠和回肠形态指标及回肠和盲肠的微生物多样性。结果表明:与对照组相比,饲粮添加亚硒酸二葡萄糖酯对产蛋后期蛋鸭的十二指肠、空肠和回肠绒毛高度、隐窝深度、肠壁厚度、绒毛高度与隐窝深度的比值均无显著影响;添加亚硒酸二葡萄糖酯组降低了回肠中变形菌门和埃希氏菌属–志贺氏杆菌属及盲肠中变形菌门和厌氧螺菌属的相对丰度,提高了回肠中肠杆菌属及盲肠中拟杆菌门和普雷沃氏菌属、肠杆菌属、理研菌科RC9菌属的相对丰度;第2组回肠中属、种水平的OTU数显著高于对照组的,肠道菌群α多样性最高,回肠中厚壁菌门相对丰度最高且埃希氏菌属–志贺氏杆菌属相对丰度最低,盲肠中拟杆菌门相对丰度最高。综上可知,饲粮添加亚硒酸二葡萄糖酯降低了回肠中有害微生物的相对丰度,有利于肠道健康,饲粮中亚硒酸二葡萄糖酯的适宜添加量为0.1mg/kg(以硒计)。

关键词：蛋鸭亚硒酸二葡萄糖酯肠道绒毛高度隐窝深度肠壁厚度肠道微生物

生物素对产蛋高峰期蛋鸭产蛋性能、蛋品质、血液生化指标、卵巢发育及胫骨性状的影响

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中国畜牧兽医 2023年第2期50卷 564-572页

作者：梁铭其陈伟张亚男夏伟光黄雪冰李凯潮郑春田王爽仲恺农业工程学院动物科技学院广州510225 广东省农业科学院动物科学研究所畜禽育种国家重点实验室农业部华南动物营养与饲料重点实验室广东省动物育种与营养公共实验室广东省畜禽育种与营养研究重点实验室广州510640

【目的】本研究旨在探讨生物素在蛋鸭生产中的应用效果及对蛋鸭卵巢发育和胫骨性状的影响。【方法】采用单因素完全随机试验设计,将432羽健康、处于产蛋高峰期的福建龙岩山麻鸭随机分为6个处理,每个处理6个重复,每个重复12羽。采用小麦... 详细信息

【目的】本研究旨在探讨生物素在蛋鸭生产中的应用效果及对蛋鸭卵巢发育和胫骨性状的影响。【方法】采用单因素完全随机试验设计,将432羽健康、处于产蛋高峰期的福建龙岩山麻鸭随机分为6个处理,每个处理6个重复,每个重复12羽。采用小麦-豆粕型基础饲粮,生物素添加水平分别为0、0.05、0.10、0.15、0.20、0.25 mg/kg,试验期12周。于第12周,每个重复随机选取4枚蛋,以及2只试验鸭进行采血、屠宰取样,检测蛋品质、血液生化指标及卵巢发育和胫骨性状指标。【结果】①饲粮生物素添加水平对产蛋性能影响不显著(P>0.05)。②饲粮生物素添加水平为0.10 mg/kg时,蛋黄重量最低,显著低于0.05和0.20 mg/kg添加组(P蛋鸭血浆生化指标、卵巢发育指标及胫骨发育指标均无显著影响(P>0.05)。【结论】饲粮中添加不同水平生物素对高峰期蛋鸭产蛋性能、卵巢发育和胫骨性状均无显著影响;饲粮添加生物素水平为0.25 mg/kg时可降低蛋黄脂质过氧化水平,添加水平为0.10~0.25 mg/kg时增加了胆固醇在蛋黄中的沉积。

关键词：生物素蛋鸭产蛋性能蛋品质