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蛋白质转导技术的应用及研究进展

西部医学 2007年第6期19卷 1191-1193页

作者：李治昊高梅叶珊赵京卉甘友清成都中医药大学峨眉学院四川峨嵋614201 四川大学华西医学中心基础与法医学院

生物膜的脂质双分子层对极性强的蛋白质、DNA及高分子复合物是一个有力的屏障,使用具有临床应用价值的蛋白质等都必须克服这个障碍。研究发现,一些蛋白质上具有蛋白质转导区(PTD)的小片段,能够有效地通过生物膜,几乎进入所有细胞。以PT... 详细信息

生物膜的脂质双分子层对极性强的蛋白质、DNA及高分子复合物是一个有力的屏障,使用具有临床应用价值的蛋白质等都必须克服这个障碍。研究发现,一些蛋白质上具有蛋白质转导区(PTD)的小片段,能够有效地通过生物膜,几乎进入所有细胞。以PTD为载体,已成功地携带多种物质进入细胞或进入机体的组织器官。蛋白质转导在运送蛋白质、寡核苷酸、特异性杀伤肿瘤细胞、神经退行性疾病等方面具有巨大的潜力。

关键词： PTD 穿膜机制蛋白质转导

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蛋白质转导及在神经科学研究中的应用

中华神经医学杂志 2003年第2期2卷 133-136页

作者：任惠民复旦大学神经病学研究所上海200040

蛋白质转导或蛋白质治疗是通过表达载体法或化学交联法将具有治疗作用的外源性蛋白质与称为蛋白质转导域的氨基酸片段相连,以非受体和非温度依赖的方式越细胞膜进入胞内达到治疗疾病的目的。这种内在化的异质蛋白质不仅依旧保持了原有... 详细信息

蛋白质转导或蛋白质治疗是通过表达载体法或化学交联法将具有治疗作用的外源性蛋白质与称为蛋白质转导域的氨基酸片段相连,以非受体和非温度依赖的方式越细胞膜进入胞内达到治疗疾病的目的。这种内在化的异质蛋白质不仅依旧保持了原有的生物学活性和功能,而且能在保持血脑屏障完整的情况下进入脑内。目前,蛋白质转导技术除用于转导肿瘤特异抗体和物进行抗肿瘤治疗以及制备抗感染或抗病毒的疫苗外,也已广泛应用于神经科学和与神经疾病相关的研究。

关键词：蛋白质转导蛋白质转导域异质蛋白质神经科学神经疾病

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蛋白质转导及其内在化机制

生命科学 2003年第5期15卷 266-269页

作者：付爱玲孙曼霁军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

蛋白质转导是新近发展起来的向细胞内快速输送外源性大分子或高极性分子的有效途径。它实质上是一些蛋白质,尤其是病毒蛋白上被称为蛋白质转导区(PTD)的小片段,蛋白质和其他物质,如DNA、脂质体、纳米颗粒、环孢素A等与之结合后,即能够... 详细信息

蛋白质转导是新近发展起来的向细胞内快速输送外源性大分子或高极性分子的有效途径。它实质上是一些蛋白质,尤其是病毒蛋白上被称为蛋白质转导区(PTD)的小片段,蛋白质和其他物质,如DNA、脂质体、纳米颗粒、环孢素A等与之结合后,即能够被携带进入细胞或穿过血脑屏障。蛋白质转导的内在化机制目前尚不清楚,可能与带正电荷(富Arg)的PTD肽与细胞膜上带负电荷的硫酸乙酰肝素有关,但不排除其他内在化机制。

关键词：蛋白质转导 PTD 富精氨酸肽内在化机制

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蛋白质转导的研究进展

国外医学（药学分册） 2004年第5期31卷 260-263页

作者：付爱玲孙曼霁军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

生物膜的脂质双分子层对极性强的蛋白质、DNA及高分子复合物是一个有力的屏障 ,使用具有临床应用价值的蛋白质等都必须克服这个障碍。研究发现 ,一些蛋白质上具有蛋白质转导区(PTD)的小片段 ,能够有效地通过生物膜 ,几乎进入所有细胞。... 详细信息

生物膜的脂质双分子层对极性强的蛋白质、DNA及高分子复合物是一个有力的屏障 ,使用具有临床应用价值的蛋白质等都必须克服这个障碍。研究发现 ,一些蛋白质上具有蛋白质转导区(PTD)的小片段 ,能够有效地通过生物膜 ,几乎进入所有细胞。以PTD为载体 ,通过非共价或共价结合 ,已成功地携带多种物质进入细胞或进入机体的组织器官。其机制可能与细胞膜上带负电荷的硫酸肝素有关。蛋白质转导在运送蛋白质、寡核苷酸或其他物质治疗病毒感染、特异性杀伤肿瘤细胞、神经退行性疾病等方面具有巨大的潜力。

关键词：蛋白质转导机制硫酸肝素连接方法

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蛋白质转导结构域的研究概况

首都食品与医药 2015年第16期22卷 29-30页

作者：赖利平潘伟男邓水秀郑慧芝刘瑛湖南食品药品职业学院 410208 湖南省长沙市雨花区圭塘街道长重社区卫生服务站 410014

蛋白质转导结构域是一类能携带生物活性物质并有效穿过多种哺乳动物细胞膜的小分子阳离子多肽,由它介导的蛋白跨膜运动称为蛋白质转导,蛋白质转导是向细胞内快速转运外源性大分子或高极性分子的有效新途径。文章就蛋白质转导结构域的作... 详细信息

蛋白质转导结构域是一类能携带生物活性物质并有效穿过多种哺乳动物细胞膜的小分子阳离子多肽,由它介导的蛋白跨膜运动称为蛋白质转导,蛋白质转导是向细胞内快速转运外源性大分子或高极性分子的有效新途径。文章就蛋白质转导结构域的作用特点、跨膜机制和转导过程等内容予以综述。

关键词：蛋白质蛋白质转导蛋白质转导结构域

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利用Cre蛋白质转导重组酶诱导DNA重组

中国畜牧兽医 2003年第2期30卷 45-45页

作者： SunilK.Joshi 曹洪战

Cre是一种可以识别34个碱基对重组loxP位点的DNA重组酶。我们开发了一种可以渗透细胞的Cre重组酶一TAT Cre，把它简单地加入细胞培养中就能够调剂敲除loxP位点的侧翼靶位。因此，TAT Cre可以有效地诱导DNA重组，而不必利用Cre重组酶转... 详细信息

Cre是一种可以识别34个碱基对重组loxP位点的DNA重组酶。我们开发了一种可以渗透细胞的Cre重组酶一TAT Cre，把它简单地加入细胞培养中就能够调剂敲除loxP位点的侧翼靶位。因此，TAT Cre可以有效地诱导DNA重组，而不必利用Cre重组酶转基因或其它的遗传材料。这对于大量设计有loxP位点细胞的遗传调控将大有益处。

关键词： DNA重组 Cre重组酶 TAT 蛋白质转导基因敲除遗传调控 loxP位点

TAT-凋亡素融合蛋白的表达及其抗肿瘤活性

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中国生物化学与分子生物学报 2006年第7期22卷 535-541页

作者：陶站华刘兴汉张宇雯马洪星刘远莉栗亚李丹哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室

凋亡素(apoptin)由鸡贫血病毒vp3基因编码,能特异地诱导肿瘤细胞凋亡而对正常细胞没有毒性.为了获得可转导入细胞内部的凋亡素,将人工合成的编码TAT蛋白转导结构域的DNA片段与凋亡素编码基因克隆入质粒pET-28a内,构建出表达融合蛋白TAT-... 详细信息

凋亡素(apoptin)由鸡贫血病毒vp3基因编码,能特异地诱导肿瘤细胞凋亡而对正常细胞没有毒性.为了获得可转导入细胞内部的凋亡素,将人工合成的编码TAT蛋白转导结构域的DNA片段与凋亡素编码基因克隆入质粒pET-28a内,构建出表达融合蛋白TAT-apoptin的原核表达载体pET-28a-TAT-apoptin.在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达融合蛋白,利用IDA-Ni2+亲和柱纯化,葡聚糖凝胶G25除去尿素后得到可溶的变性蛋白.纯化后的TAT-apoptin加入体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)和人肺癌Anip973细胞,对照组加入TAT-麦芽糖结合蛋白(TAT-MBP).经免疫组化检测,转导1h后TAT-MBP分布于以上两种细胞的胞浆和胞核,TAT-apoptin则主要分布于2种细胞的胞浆内,转导24h后TAT-MBP的亚细胞定位没有变化,TAT-apoptin分别定位于HUVECs的胞浆和Anip973的胞核中.脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)显示转导48h后,TAT-MBP处理过的HUVECs和Anip973细胞、TAT-apoptin处理过的HUVECs没有明显改变,而TAT-apoptin处理过的Anip973细胞大量凋亡.以上结果表明TAT-apoptin融合蛋白在肿瘤治疗上有潜在的应用价值.

关键词：凋亡凋亡素蛋白质转导肿瘤治疗

神经元素3蛋白(Ngn3)诱导大鼠骨髓间充质干细胞向胰岛素表达细胞分化的初步研究

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复旦学报（自然科学版） 2008年第5期47卷 585-592,F0003页

作者：毋慧玲李戈陈静范薇薇沈坤堂卢大儒复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433 复旦大学附属中山医院普外科上海200032

胰腺发育相关基因神经元素3(neurogenin3,Ngn3),属于碱性螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix,bHLH)家族的转录因子,对胰腺内分泌细胞的发育及分化至关重要,且被认为是胰腺祖细胞的标志蛋白质.之前的研究发现,全长Ngn3蛋白具有蛋白质... 详细信息

胰腺发育相关基因神经元素3(neurogenin3,Ngn3),属于碱性螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix,bHLH)家族的转录因子,对胰腺内分泌细胞的发育及分化至关重要,且被认为是胰腺祖细胞的标志蛋白质.之前的研究发现,全长Ngn3蛋白具有蛋白质转导功能,可以高效进入多种真核细胞系.近年来多项研究显示,骨髓间充质干细胞是一种具有多向分化潜能的多能干细胞.利用蛋白质转导技术,将体外表达纯化的胰腺发育重要因子Ngn3蛋白导入体外分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞中,诱导其向胰岛素表达细胞分化.结果显示,经Ngn3蛋白诱导的大鼠骨髓间充质干细胞出现细胞聚集生长现象,并有形状类似胰岛的细胞团出现.RT-PCR结果显示经Ngn3蛋白诱导的大鼠骨髓间充质干细胞可以有效表达胰岛素,并且一些β细胞相关基因如胰十二指肠同源盒基因-1(pancreatic-duodenal homeobox 1,Pdx-1),神经分化因子(neurogenic differentiation,NeuroD),同源结构域基因4(paired box gene 4,Pax4),葡萄糖转运体-2(glucose transporter 2,Glut-2)都有表达.细胞免疫荧光也可检测到胰岛素的表达.通过Ngn3蛋白质诱导分化大鼠骨髓间充质干细胞的初步研究,探索了应用骨髓间充质干细胞体外诱导分化获得胰岛素表达细胞的可行性,为糖尿病治疗提供一定的实验依据.

关键词：蛋白质转导碱性螺旋-环-螺旋家族神经元素3 大鼠骨髓间充质干细胞胰岛素表达细胞

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细胞内转导肽——开启细胞调控之门的钥匙

北京大学学报（医学版） 2001年第4期33卷 292-294页

作者：马大龙北京大学人类疾病基因研究中心北京100083

To establish and develop an efficient import system for bio molecules into cells and nucleus is important for the study of signal transduction as well as therapeutic application. A number of peptides have been found to be able to deliver bio molecules, including proteins, DNAs, and oligonucleotides, into mammalian cells, which are known as transduction peptide or protein transduction domain (PTD). This review gives a brinef introduction to the structures, functions and application of the transduction peptides.

关键词：蛋白质转导肽类导入系统细胞内转导肽