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蓝布正总酚酸的大孔树脂纯化工艺与质量标准研究

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中国新药杂志 2024年第9期33卷 924-933页

作者：孔熙贤田广环吴桐潘福竺欧阳意吴宏伟中国中医科学院中药研究所北京100700 遵义医科大学药学院遵义563000 遵义医科大学基础药理教育部重点实验室暨特色民族药教育部国际合作联合实验室遵义563000

目的:优化大孔吸附树脂富集蓝布正总酚酸的纯化工艺,建立蓝布正总酚酸部位指纹图谱,并测定二聚鞣花鞣质A、没食子酸乙酯、鞣花酸及总酚酸含量。方法:采用单因素实验,以总酚酸的吸附率、解吸附率以及总酚酸含量、转移率为指标,筛选最佳... 详细信息

目的:优化大孔吸附树脂富集蓝布正总酚酸的纯化工艺,建立蓝布正总酚酸部位指纹图谱,并测定二聚鞣花鞣质A、没食子酸乙酯、鞣花酸及总酚酸含量。方法:采用单因素实验,以总酚酸的吸附率、解吸附率以及总酚酸含量、转移率为指标,筛选最佳大孔树脂型号、吸附条件、除杂条件和解吸附条件;采用HPLC和紫外可见分光光度法,建立总酚酸部位指纹图谱及二聚鞣花鞣质A、没食子酸乙酯、鞣花酸和总酚酸含量测定的质量控制方法。结果:选择HPD-400型大孔树脂,最佳工艺条件为提取物上样质量浓度为8 mg·mL^(-1),吸附流速为2 BV·h^(-1),径高比为1∶8,上样量为3 BV,10%乙醇4 BV洗脱除杂,除杂流速为3 BV·h^(-1),50%乙醇5 BV洗脱,洗脱流速4 BV·h^(-1),3批次验证实验得到的总酚酸平均含量67.75%(RSD为3.02%),平均转移率为74.53%(RSD为1.20%);12批样品指纹图谱中共有个18共有峰,指认了其中6个峰,分别为二聚鞣花鞣质B、二聚鞣花鞣质G、二聚鞣花鞣质A、特里马素Ⅱ、没食子酸乙酯、鞣花酸,相似度均≥0.9,二聚鞣花鞣质A、没食子酸乙酯、鞣花酸、总酚酸含量测定方法学考察符合要求,3种成分在各自范围内线性关系良好(R2≥0.997),平均加样回收率为93.00%~103.53%,RSD为1.92%~3.87%,其12批次样品的含量范围分别为5.35%~15.25%,0.12%~0.62%,1.84%~6.27%,以没食子酸计,总酚酸线性范围良好(R2=0.995),平均加样回收率为95.30%,RSD为1.40%,其12批次样品总酚酸含量范围为53.65%~73.16%。结论:纯化工艺稳定可靠,可用于蓝布正总酚酸部位的富集。指纹图谱与含量测定方法稳定可靠,可用于蓝布正总酚酸部位的质量控制。

关键词：蓝布正总酚酸大孔树脂纯化工艺 HPLC指纹图谱质量控制二聚鞣花鞣质A

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民族药蓝布正化学成分及药理作用研究进展

中草药 2018年第1期49卷 233-238页

作者：陶薇王凯王金凤冯知涛梅志刚三峡大学医学院国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002

蓝布正为我国民间传统药物,常用于治疗头痛头晕、小儿惊风、高血压、腰腿疼痛、月经不调等疾病,然而其潜在的药理作用机制尚不明了。截至目前,蓝布正中已发现的化学成分主要有萜类(主要为单萜、倍半萜和三萜类)、鞣质类、苯丙素类等。... 详细信息

蓝布正为我国民间传统药物,常用于治疗头痛头晕、小儿惊风、高血压、腰腿疼痛、月经不调等疾病,然而其潜在的药理作用机制尚不明了。截至目前,蓝布正中已发现的化学成分主要有萜类(主要为单萜、倍半萜和三萜类)、鞣质类、苯丙素类等。研究显示,蓝布正具有抗凝血、抗高血压、抗炎、抗肿瘤和治疗缺血性疾病等多种药理作用。对近40年来国内外关于蓝布正的活性成分、药理作用的研究进展进行综述,为蓝布正临床合理推广应用与相关新药的研发提供参考。

关键词：蓝布正萜类鞣质类苯丙素类抗凝血活性抗高血压活性抗炎活性

基于层次分析-熵权法和网络药理学的蓝布正质量标志物研究

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中国中药杂志 2023年第20期48卷 5450-5459页

作者：杨钊郑治波周浩明徐顶巧乐世俊唐于平陕西中医药大学陕西省中医药管理局中药配伍重点实验室陕西西安712046

该研究采用层次分析(analytic hierarchy process,AHP)-熵权法(entropy weight method,EWM)和网络药理学结合的方式筛选蓝布正的潜在质量标志物。基于中药质量标志物的新理念,采用AHP-EWM对蓝布正的质量标志物进行量化辨识。AHP法用于... 详细信息

该研究采用层次分析(analytic hierarchy process,AHP)-熵权法(entropy weight method,EWM)和网络药理学结合的方式筛选蓝布正的潜在质量标志物。基于中药质量标志物的新理念,采用AHP-EWM对蓝布正的质量标志物进行量化辨识。AHP法用于一级指标(要素层)的权重分析,EWM法用于分析二级指标下(控制层)基于文献和实验的数据。此外通过网络药理学构建蓝布正的“成分-靶点-疾病-功效”关联网络,筛选与蓝布正益气健脾、补血养阴、润肺化痰功效关联性较强的成分。将AHP-EWM和网络药理学结果相结合,综合确定鞣花酸、没食子酸、二聚鞣花鞣质G、二聚鞣花鞣质C共4个成分作为蓝布正的潜在质量标志物。该研究采用AHP-EWM和网络药理学相结合的方式,对蓝布正的潜在质量标志物进行筛选,为中药质量标志物的量化评价与辨识提供思路。

关键词：蓝布正质量标志物层次分析-熵权法网络药理学

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蓝布正HPLC指纹图谱建立及8种成分测定

中成药 2023年第1期45卷 123-126页

作者：杨钊高欢周浩明李佳佳乐世俊唐于平陕西中医药大学陕西省中医药管理局中药配伍重点研究室陕西咸阳712046

目的建立蓝布正Geum japonicum *** Bolle HPLC指纹图谱,并测定没食子酸、大麻黄鞣宁、二聚鞣花鞣质G、二聚鞣花鞣质C、木麻黄鞣亭、特马里素Ⅱ、蛇含鞣质、鞣花酸的含量。方法蓝布正的分析采用Waters XSelect HSS T3 C 18色谱柱(250 mm... 详细信息

目的建立蓝布正Geum japonicum *** Bolle HPLC指纹图谱,并测定没食子酸、大麻黄鞣宁、二聚鞣花鞣质G、二聚鞣花鞣质C、木麻黄鞣亭、特马里素Ⅱ、蛇含鞣质、鞣花酸的含量。方法蓝布正的分析采用Waters XSelect HSS T3 C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长254 nm。结果10批样品指纹图谱中有18个共有峰,相似度均大于0.963。8种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9991),平均加样回收率82.87%~106.14%,RSD 0.52%~4.18%。结论该方法稳定可靠,可用于蓝布正的质量控制。

关键词：蓝布正 HPLC指纹图谱化学成分

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蓝布正总鞣质提取纯化工艺的优化

中成药 2021年第5期43卷 1291-1295页

作者：王凯黄亚光陶薇何毓敏梅志刚冯知涛三峡大学医学院湖北宜昌443002 天水市卫生学校甘肃天水741099 湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208

目的优化蓝布正总鞣质提取纯化工艺。方法以料液比、乙醇体积分数、超声温度、超声时间为影响因素,总鞣质提取率为评价指标,正交试验优化提取工艺;以洗脱剂(乙醇)体积分数、洗脱剂用量、上样质量浓度、上样量为影响因素,总鞣质吸附量和... 详细信息

目的优化蓝布正总鞣质提取纯化工艺。方法以料液比、乙醇体积分数、超声温度、超声时间为影响因素,总鞣质提取率为评价指标,正交试验优化提取工艺;以洗脱剂(乙醇)体积分数、洗脱剂用量、上样质量浓度、上样量为影响因素,总鞣质吸附量和洗脱率为评价指标,单因素试验优化纯化工艺。HPLC法测定纯化前后鞣花酸含量变化。结果最优提取工艺为料液比1∶10,乙醇体积分数40%,超声温度60℃,超声时间60 min,总鞣质提取率为3.16%;最优纯化工艺为取HPD100型大孔吸附树脂,加入20 mL 1.15 mg/mL上样液,40 mL 50%乙醇洗脱。纯化后,鞣花酸含量大幅提高至纯化前的2倍。结论该方法可靠稳定,可用于蓝布正总鞣质的提取纯化。

关键词：蓝布正总鞣质提取纯化正交试验单因素试验 HPLC

蓝布正提取物对血管性痴呆小鼠海马NF-κB、IL-6表达的影响

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中药药理与临床 2017年第3期33卷 108-111页

作者：刘明刘杨徐姗姗郭馨江蓓吕金田蔡兵贵阳中医学院基础医学院贵阳550025 国家苗药工程技术研究中心贵阳550002 贵州盛世龙方制药股份有限公司贵阳550001

目的:观察蓝布正提取物对血管性痴呆小鼠学习记忆能力及海马核因子κB(NF-κB)、白介素-6(IL-6)表达的影响。方法:采用脑缺血再灌注合并尾静脉放血的方法制备小鼠血管性痴呆模型,将小鼠随机分成假手术组,模型组,天保宁0.01g/kg剂量组,... 详细信息

目的:观察蓝布正提取物对血管性痴呆小鼠学习记忆能力及海马核因子κB(NF-κB)、白介素-6(IL-6)表达的影响。方法:采用脑缺血再灌注合并尾静脉放血的方法制备小鼠血管性痴呆模型,将小鼠随机分成假手术组,模型组,天保宁0.01g/kg剂量组,蓝布正10g/kg、5g/kg、2.5g/kg剂量组,每组12只,各组灌胃相应药物20ml/kg,连续35d。给药35d后利用跳台仪、Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力;采用苏木素-伊红(HE)染色考察海马区病理形态;采用免疫组织化学染色法检测海马区NF-κB、IL-6表达。结果:与模型组相比,蓝布正10g/kg、5g/kg剂量组小鼠的逃避潜伏期明显缩短,穿越平台数显著增加;与模型组比较,蓝布正10g/kg、5g/kg、2.5g/kg剂量组小鼠海马组织病变情况改善,海马区NF-κB、IL-6表达显著下降。结论:炎症反应在血管性痴呆的发生中起到重要作用,蓝布正可能是通过降低NF-κB表达,抑制炎性因子(如IL-6)的释放,保护脑神经元,改善血管性痴呆小鼠的学习记忆能力。

关键词：蓝布正血管性痴呆学习记忆核因子κB 白介素-6

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蓝布正挥发油化学成分的GC-MS分析

分析测试学报 2002年第4期21卷 82-84页

作者：周欣梁光义王道平徐必学贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550002

研究贵州产蓝布正(HerbaGei)挥发油的化学成分 ,采用水蒸气蒸馏法提取蓝布正挥发性成分,用气相色谱 -质谱进行分离测定 ,结合计算机检索技术对分离的化合物进行鉴定 ,应用色谱峰面积归一化法测定各成分的相对含量 ;水蒸气蒸馏提取物得率... 详细信息

研究贵州产蓝布正(HerbaGei)挥发油的化学成分 ,采用水蒸气蒸馏法提取蓝布正挥发性成分,用气相色谱 -质谱进行分离测定 ,结合计算机检索技术对分离的化合物进行鉴定 ,应用色谱峰面积归一化法测定各成分的相对含量 ;水蒸气蒸馏提取物得率是0.10 % ,共分离出103种成分,鉴定出40个化学成分 ,其主要成分为脂肪酸及其甲酯类化合物、萜烯类及其含氧衍生物等 ,主要有棕榈酸 (13.2% )、11 ,14 ,17_二十碳三烯酸甲酯 (10.4 % )、亚油酸 (8.6 % )、石竹烯氧化物 (3.9 % )、丁子香酚 (3.4% )和反式_植醇 (3.2 % )

关键词：蓝布正挥发油化学成分 GC-MS 分析水蒸气蒸馏法气相色谱-质谱植物药

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蓝布正化学成分的研究

时珍国医国药 2009年第4期20卷 798-799页

作者：王莉宁徐必学林华容梁光义贵州省·中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550002 贵阳中医学院贵州贵阳550007

目的对蓝布正Geum japonicum *** ***乙醇提取物的化学成分的研究。方法利用Sephadex LH-20，硅胶柱色谱和硅胶制备薄层色谱等分离方法反复分离纯化，通过理化性质及光谱数据确定化合物的结构。结果从蓝布正的乙醇提取部分分离得到5个... 详细信息

目的对蓝布正Geum japonicum *** ***乙醇提取物的化学成分的研究。方法利用Sephadex LH-20，硅胶柱色谱和硅胶制备薄层色谱等分离方法反复分离纯化，通过理化性质及光谱数据确定化合物的结构。结果从蓝布正的乙醇提取部分分离得到5个化合物，分别鉴定为翻白叶苷A①，17^3-脱镁叶绿素乙酯②，甘油-1-棕榈酸酯③，棕榈酸④，β-谷甾醇⑤。结论化合物1-5均首次从该植物中分离得到。

关键词：蓝布正蔷薇科黄酮苷

蓝布正通过抑制星形胶质细胞凋亡保护脑缺血再灌注损伤的研究

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蓝布正通过抑制星形胶质细胞凋亡保护脑缺血再灌注损伤的研究

作者：陶薇三峡大学

学位级别：硕士

目的:拟探讨中药蓝布正（Geum japonicum ***,GJ）对脑缺血再灌注（Cerebral ischemia reperfusion,CIR）损伤SD大鼠和星形胶质细胞的保护作用,及其相关机制,为蓝布正用于缺血性脑病的临床应用及新药研发提供理论依据。方法:***提取物... 详细信息

目的:拟探讨中药蓝布正（Geum japonicum ***,GJ）对脑缺血再灌注（Cerebral ischemia reperfusion,CIR）损伤SD大鼠和星形胶质细胞的保护作用,及其相关机制,为蓝布正用于缺血性脑病的临床应用及新药研发提供理论依据。方法:***提取物对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用（1）72只雄性SD大鼠随机分为4组,每组18只:假手术组（Sham组）、模型组（I/R组）、蓝布正提取物（7.00g/kg）组（GJ-H组）和蓝布正提取物（1.75g/kg）组（GJ-L组）。GJ-H和GJ-L组大鼠分别灌胃给予蓝布正提取物7.00g/kg和1.75g/kg,连续给药7天,假手术和模型组分别给予相应剂量的生理盐水。最后一次给药后,通过线栓法建造大鼠右侧大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型;（2）所有大鼠在缺血再灌注24h后进行神经功能缺损情况的观察,进行神经功能评分;（3）采用TTC染色法对缺血再灌注24h后的大鼠脑进行染色,计算大鼠脑的梗死体积;（4）采用Nissl染色法和TUNEL染色法检测缺血再灌注24h后大鼠皮质尼氏体数量和神经细胞凋亡情况;（5）采用免疫组织化学法检测缺血再灌注24h后大鼠缺血侧皮质Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3的表达;（6）采用Western blot法检测大鼠缺血侧皮质的Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白的表达。***提取物对星形胶质细胞的影响（1）将SD乳鼠原代星形胶质细胞分为5组:正常对照组（Control组）、氧糖剥夺模型组（OGD/R组）、氧糖剥夺+蓝布正低剂量处理（1.75g/kg）组（OGD/R+GJ-L组）、氧糖剥夺+蓝布正高剂量处理（7.00g/kg）组（OGD/R+GJ-H组）和抑制剂组（OGD/R+GJ-H组+LY294002组）。除Control组正常条件培养外,其余四组缺氧缺糖培养6h,加入药物及抑制剂10μM后,复氧复糖培养12h建立OGD/R模型;（2）MTT法检测细胞存活率;（3）流式细胞术检测星形胶质细胞凋亡情况;（4）免疫荧光法检测星形胶质细胞标记物GFAP的表达;（5）采用实时荧光定量PCR检测各组星形胶质细胞BDNF、PI3K、Bcl-2、Bax及Caspase-3 m RNA的表达;（6）采用Western blot法检测各组星形胶质细胞BDNF、Trk B、PI3K、p-Akt、p-CREB、Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白的表达。结果:体内实验结果发现,蓝布正提取物预处理可显著改善缺血1.5h再灌注24h后大鼠的神经功能缺损情况,减少梗死体积,增加大鼠皮质尼氏体数量,减轻神经细胞凋亡情况。同时,蓝布正提取物可显著增加Bcl-2/Bax的表达比例、减少Cleaved caspase-3的表达,且高剂量药物效果更好。体外实验发现,蓝布正含药血清可显著增加氧糖剥夺再灌后星形胶质细胞的细胞活力、减少其凋亡情况、减少GFAP的表达。同时,蓝布正含药血清能显著增加Bcl-2/Bax的表达比例,减少Cleaved caspase-3的表达。此外,蓝布正含药血清能显著增加BDNF、Trk B、PI3K、p-Akt、p-CREB的表达,且高剂量组作用更明显;在加入PI3K通路抑制剂LY294002后,上述基因和蛋白表达被逆转。结论:蓝布正对脑缺血再灌注损伤具有良好的防治作用,其发挥作用可能是通过激活BDNF/PI3K/Akt/CREB信号通路,抑制星形胶质细胞凋亡,从而减轻脑缺血再灌注损伤。

关键词：脑缺血再灌注蓝布正凋亡星形胶质细胞 BDNF/PI3K/Akt/CREB信号通路