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酿酒酵母异源合成蒲公英赛醇的研究

酿酒酵母异源合成蒲公英赛醇的研究

作者：谭锦秀天津大学

学位级别：硕士

蒲公英赛醇是一种齐墩果烷型五环三萜类化合物,具有良好的抗炎症、抗肿瘤、抗氧化作用,在治疗糖尿病、保肝等方面也有很好的效果。目前主要通过从植物中萃取获得蒲公英赛醇,鲜少有采用化学合成法或生物合成法合成蒲公英赛醇的研究。酿... 详细信息

蒲公英赛醇是一种齐墩果烷型五环三萜类化合物,具有良好的抗炎症、抗肿瘤、抗氧化作用,在治疗糖尿病、保肝等方面也有很好的效果。目前主要通过从植物中萃取获得蒲公英赛醇,鲜少有采用化学合成法或生物合成法合成蒲公英赛醇的研究。酿酒酵母是常用的模式微生物,本文以酿酒酵母W303为出发菌株,将两种不同来源的蒲公英赛醇合酶基因经密码子优化后分别导入其中,结合ERG1基因的过表达,构建出了能够生产蒲公英赛醇的工程菌WKd E2,产量为1.85mg/L;然后通过过表达蒲公英赛醇生物合成途径中的关键基因t HMG1、ERG20、ERG9,使蒲公英赛醇的产量提高至17.02mg/L;接着通过敲除GAL80基因对酿酒酵母的GAL调控系统进行了改造,构建出的工程菌WTK15蒲公英赛醇产量虽下降至12.51mg/L,但发酵过程中无需再添加诱导剂半乳糖,极大降低了发酵成本;然后再利用HXT1p启动子下调ERG7的表达来控制竞争通路中甾醇的合成,结果发现蒲公英赛醇产量不升反降。对菌株WTK15进行内质网改造,首先用PGK1p启动子与ADH2p启动子分别过表达能够激活磷脂合成的基因INO2,构建出的菌株WTK17与WTK18蒲公英赛醇产量分别为16.12 mg/L、14.80 mg/L,分别提高至WTK15的1.29倍、1.18倍;继续敲除WTK17中的OPI1基因,所得菌株WTK19蒲公英赛醇产量进一步提高至17.35mg/L。摇瓶发酵优化后进行5L罐放大培养,批次发酵蒲公英赛醇产量最高为25.79 mg/L,在以乙醇为补料碳源进行补料发酵时产量最高提升至59.55mg/L。

关键词：蒲公英赛醇酿酒酵母萜类化合物合成生物学

蒲公英赛醇保护胃上皮细胞及抗炎作用的研究进展

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中国当代医药 2022年第20期29卷 30-34页

作者：段惠春蒲华云甘肃中医药大学第四附属医院(甘肃宝石花医院)消化科甘肃兰州730060

随着社会的发展和睡眠的不规律,快节奏生活导致胃黏膜病变成为一种很普遍的现状。目前用于临床的各种抑酸剂和黏膜保护剂对胃黏膜病变的治疗取得一定的效果,但在治疗过程中经常出现各种不良反应。研究结果表明,在我国蒲公英资源很丰富,... 详细信息

随着社会的发展和睡眠的不规律,快节奏生活导致胃黏膜病变成为一种很普遍的现状。目前用于临床的各种抑酸剂和黏膜保护剂对胃黏膜病变的治疗取得一定的效果,但在治疗过程中经常出现各种不良反应。研究结果表明,在我国蒲公英资源很丰富,含有多种活性成分,具有广泛药理作用,其中蒲公英赛醇在保护胃上皮细胞和抗炎方面具有显著疗效,尤其在根除幽门螺杆菌方面,治疗更简便,且副作用小,用它作为保护胃上皮细胞及抗炎作用的药物具有重要的临床意义。它的作用及机制主要通过干预细胞信号转导、诱导炎症相关酶类、调节细胞因子、抑制胃酸、杀灭胃幽门螺杆菌等共同完成。本文从不同环节对其保护胃上皮细胞的作用及抗炎作用进行系统综述,旨在为该药治疗作用提供一定的理论基础。

关键词：蒲公英赛醇胃上皮细胞抗炎信号转导细胞因子幽门螺杆菌

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木荚红豆叶中1个新的木脂素

中草药 2022年第3期53卷 653-658页

作者：王钦陈啸阮诗琪颜武华倪林邹双全邹小兴福建农林大学林学院福建福州350002 福州法莫优科机械科技有限公司福建福州350002 福建农林大学植物保护学院福建福州350002 自然生物资源保育利用福建省高校工程研究中心福建福州350002

目的研究木荚红豆叶Ormosia xylocarpa 70%乙醇提取物的醋酸乙酯萃取物化学成分及其对肝癌HepG2的细胞毒性作用。方法利用多种色谱学方法和波谱学技术分离鉴定化合物,采用CCK-8比色法测定化合物的细胞毒活性。结果从木荚红豆叶70%乙醇... 详细信息

目的研究木荚红豆叶Ormosia xylocarpa 70%乙醇提取物的醋酸乙酯萃取物化学成分及其对肝癌HepG2的细胞毒性作用。方法利用多种色谱学方法和波谱学技术分离鉴定化合物,采用CCK-8比色法测定化合物的细胞毒活性。结果从木荚红豆叶70%乙醇提取物的醋酸乙酯萃取物中分离鉴定8个化合物,分别为3’,4"-二羟基-3,5,4’,3",5"-五甲氧基-7,9’;7’,9-双环氧-4,8"-氧-8,8’-倍半木脂素-丙醇(1)、染料木素(2)、槲皮素(3)、羽扇豆酮(4)、β-香树脂醇(5)、蒲公英赛醇(6)、mundulin(7)和齐墩果酸(8)。化合物7对人肝癌HepG2细胞有细胞毒性作用,半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)值为86.34μmol/L。结论所有化合物均首次从该植物中分离得到,其中化合物1为新的四氢呋喃类木脂素,命名为木荚红豆素;化合物5~8为首次从红豆属中分离得到,化合物7具有一定的细胞毒活性。

关键词：木荚红豆木荚红豆素抗肝癌 β-香树脂醇蒲公英赛醇 mundulin 齐墩果酸

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倒地铃化学成分研究(Ⅰ)

中草药 2011年第8期42卷 1509-1511页

作者：韦建华陈君蔡少芳卢汝梅林世炜广西中医学院广西南宁530001 柳州医学高等专科学校广西柳州545006

目的研究倒地铃Cardiospermum halicacabum的化学成分。方法利用硅胶色谱分离纯化,通过理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果从倒地铃中分离了11个化合物,分别鉴定为正二十七烷(1)、β-香树脂醇棕榈酸酯(2)、β-胡萝卜苷(3)、3β-赤... 详细信息

目的研究倒地铃Cardiospermum halicacabum的化学成分。方法利用硅胶色谱分离纯化,通过理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果从倒地铃中分离了11个化合物,分别鉴定为正二十七烷(1)、β-香树脂醇棕榈酸酯(2)、β-胡萝卜苷(3)、3β-赤杨醇(4)、β-香树脂醇(5)、β-谷甾醇(6)、棕榈酸(7)、蒲公英赛醇(8)、豆甾醇(9)、金圣草黄素(10)、豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(11)。结论化合物1～5、7～11均为首次从该植物中分离得到。

关键词：倒地铃 3β-赤杨醇 β-香树脂醇蒲公英赛醇金圣草黄素

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白背叶中一个新的异戊烯基二氢黄酮

中草药 2006年第8期37卷 1126-1128页

作者：吴桂凡韦松蓝树彬许学健广西中医学院药学院

目的对大戟科植物白背叶Mallotusapelta的叶进行化学成分研究。方法原料的乙醇浸出物,用各种柱色谱进行分离和纯化,所得化合物以理化性质和波谱数据进行鉴定。结果分得5个化合物,分别鉴定为蒲公英赛醇(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、5,7-二羟基-6... 详细信息

目的对大戟科植物白背叶Mallotusapelta的叶进行化学成分研究。方法原料的乙醇浸出物,用各种柱色谱进行分离和纯化,所得化合物以理化性质和波谱数据进行鉴定。结果分得5个化合物,分别鉴定为蒲公英赛醇(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、5,7-二羟基-6-异戊烯基-4′-甲氧基二氢黄酮(Ⅲ)、洋芹素(Ⅳ)、洋芹素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ)。结论化合物为新化合物,命名为白背叶素(mallotusin),化合物Ⅰ、Ⅲ-Ⅴ为首次从白背叶中分得。关键词:白背叶;蒲公英赛醇;5,7-二羟基-6-异戊烯基-4′-甲氧基二氢黄酮;洋芹素;

关键词：白背叶蒲公英赛醇 5,7-二羟基-6-异戊烯基-4’-甲氧基二氢黄酮洋芹素洋芹素-7-O-β-D-葡萄糖苷

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柞树皮化学成分研究

中草药 2014年第21期45卷 3062-3066页

作者：王金兰姚佳刘继梅李军赵明张树军齐齐哈尔大学化学与化学工程学院黑龙江齐齐哈尔161006

目的研究柞树Quercus mongolicus树皮的化学成分。方法采用硅胶柱色谱和高效液相色谱等分离纯化,依据理化性质及波谱数据分析进行结构鉴定。结果从柞树皮中分离得到20个化合物,分别鉴定为蒲公英赛酮(1)、蒲公英赛醇(2)、20β-羟基-达玛... 详细信息

目的研究柞树Quercus mongolicus树皮的化学成分。方法采用硅胶柱色谱和高效液相色谱等分离纯化,依据理化性质及波谱数据分析进行结构鉴定。结果从柞树皮中分离得到20个化合物,分别鉴定为蒲公英赛酮(1)、蒲公英赛醇(2)、20β-羟基-达玛烷-23(24)-烯-3-酮(3)、20(S),24(S)-dihydroxydammara-26-en-3-one(4)、熊果酸乙酯(5)、羽扇豆醇(6)、谷甾酮(7)、异刺树醇isofouquierol(8)、没食子酸(9)、5,6,7,4′-四羟基二氢黄酮(10)、花旗松素(11)、东莨菪内酯(12)、山柰酚(13)、β-谷甾醇(14)、(-)-开环异落叶松树脂酚(15)、古柯二醇(16)、(-)-表儿茶素(17)、胡萝卜苷(18)、(-)-表松脂醇(19)、水杨酸(20)。结论化合物4、7、8为首次从该属植物中分离得到,1、2、5、6和11为首次从该植物中分离得到。

关键词：柞树蒲公英赛酮蒲公英赛醇熊果酸乙酯羽扇豆醇花旗松素高根二醇

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彝族植物药“史补”的化学成分研究

华西药学杂志 1989年第3期4卷 137-139页

作者：肖崇厚刘友平成都中医学院

由“史补”(Cassiope Selagnoides *** Thoms,杜鹃花科)中分得4种结晶,经元素和光谱分析鉴定为:正二十六烷(Hexacosane,Ⅰ),蒲公英赛醇乙酸酯(Taraxerol acetate,Ⅱ),蒲公英赛醇(Taraxerol,Ⅲ)和齐墩果酸(Oleanolic acid,Ⅳ)。这四种化... 详细信息

关键词：彝药史补化学成分蒲公英赛醇

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大理卫矛乙醇提取物的化学成分研究

中国药房 2018年第2期29卷 176-179页

作者：张慧颖付兴情蔡义玲李亶烨张建英左爱学曲靖医学高等专科学校药学系云南曲靖655011 云南中医学院中药学院昆明650500

目的:研究大理卫矛的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、薄层色谱、半制备高效液相色谱对大理卫矛乙醇提取物进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据(质谱、氢谱和碳谱)分析鉴定化合物结构。结果:从大理卫矛乙醇提取物中分离得... 详细信息

目的:研究大理卫矛的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、薄层色谱、半制备高效液相色谱对大理卫矛乙醇提取物进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据(质谱、氢谱和碳谱)分析鉴定化合物结构。结果:从大理卫矛乙醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为蒲公英赛醇(1)、槐二醇(2)、蒲公英萜酮(3)、Sorghumol(4)、十七烷酸(5)、十八烷酸(6)、β-谷甾醇(7)、胡萝卜苷(8)、表木栓醇(9)、木栓酮(10)。结论:上述10个化合物均为首次从大理卫矛中分离得到,化合物1、2、4、5、6为首次从卫矛属植物中分离得到。该研究为大理卫矛的质量评价奠定了一定基础。

关键词：大理卫矛化学成分蒲公英赛醇槐二醇蒲公英萜酮 Sorghumol 十七烷酸十八烷酸 β-谷甾醇胡萝卜苷表木栓醇木栓酮

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轮叶党参抗突变活性成分的研究

轮叶党参抗突变活性成分的研究

作者：吴丽花延边大学

学位级别：硕士

随着全球范围内新化合物的增多和环境污染的加剧，周围环境中大量存在的致突变、致癌物对人类健康造成的威胁日趋严重。从天然植物中寻找抗突变、抗癌有效成分已成为当今国际生命科学领域的重大课题。轮叶党参Codonopsis lanceolata(***... 详细信息

随着全球范围内新化合物的增多和环境污染的加剧，周围环境中大量存在的致突变、致癌物对人类健康造成的威胁日趋严重。从天然植物中寻找抗突变、抗癌有效成分已成为当今国际生命科学领域的重大课题。轮叶党参Codonopsis lanceolata(***.)*** Hook.F.为桔梗科党参属植物。据文献报道轮叶党参水提取液具有显著的抗突变作用，其中的多糖能够抑制小鼠S肉瘤。但对轮叶党参脂溶性部分的抗突变研究，尚未见报道。为了进一步探索和研究轮叶党参的抗突变有效成分，本实验对轮叶党参醇提后的石油醚与乙酸乙酯萃取部分进行了药理学与化学成分的研究。本实验先对轮叶党参醇提后的各个萃取部分—石油醚层、乙酸乙酯层、正丁醇层进行了Ames抗突变试验，筛选有效部位-石油醚层和乙酸乙酯层，并对其进行了化学成分的分离和单体成分的Ames试验。实验结果表明：(Ⅰ)轮叶党参醇提后的各个萃取部分中，石油醚和乙酸乙酯萃取部分在Ames试验中有显著的抗突变活性，能明显抑制菌落回变率。(Ⅱ)石油醚与乙酸乙酯萃取物采用硅胶柱层析法进行进一步的分离，共得到两种油状化合物和四种晶体化合物。四种晶体化合物经理化性质、波谱解析和标准品共正等方法鉴定为：①蒲公英赛醇(Taraxerol)、②α-菠甾醇(α-Spinastenrol)、③二十七烷酸(Heptacosanoicacid)④齐墩果酸(Oleanolic acid);油状物通过气相色谱-质谱联用法测定出两种化合物，确定为：⑤十六烷酸乙酯(Ethyl hexadecanoate)、⑥9一十八炔(9-Octadecyne)。(III)六种化合物中，化合物③和⑥是在该植物中首次得到的成分。(Ⅳ)对四种晶体化合物①、②、③、④进行的Ames试验中，化合物①、②、④有显著的抗突变作用。综上可见：轮叶党参中存在尚未报道过的成分③和⑥;另外，在轮叶党参中除了多糖部分有抗突变作用外，化合物①、②、④也有很好的抗突变作用，是否还有其他有效成分有待于今后进一步研究。

关键词：轮叶党参抗突变齐墩果酸 α-菠甾醇蒲公英赛醇