检索结果-南通市图书馆

上海口腔医学 2013年第6期22卷 623-627页

作者：黎景景高鑫李宽钰王文梅南京大学医学院附属口腔医院口腔黏膜病科江苏南京210008 南京大学医学院江苏省医学分子技术重点实验室.江苏南京210093

目的:构建重组质粒pPHU281-C-Spec-E,用于敲除菌毛蛋白次要组分基因fimcde。构建fimcde缺陷的牙龈卟啉单胞菌,为进一步研究fimcde在感染中的作用奠定基础。方法:厌氧罐培养牙龈卟啉单胞菌菌株ATCC33277,提取基因组DNA后,PCR扩增获得含... 详细信息

目的:构建重组质粒pPHU281-C-Spec-E,用于敲除菌毛蛋白次要组分基因fimcde。构建fimcde缺陷的牙龈卟啉单胞菌,为进一步研究fimcde在感染中的作用奠定基础。方法:厌氧罐培养牙龈卟啉单胞菌菌株ATCC33277,提取基因组DNA后,PCR扩增获得含有人工设计的酶切位点的fimC基因的上游片段及fimE的下游片段,将其克隆到自杀质粒pPHU281内,命名为pPHU281-C-E;再将抗大观霉素的抗性基因插入到C及E片段之间,最终获得重组质粒pPHU281-C-Spec-E。结果:酶切及DNA序列分析验证重组质粒pPHU281-C-Spec-E构建成功。结论:成功构建了含有牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白次要组分基因fimC上游及fimE下游片段的重组质粒pPHU281-CSpec-E,可用于构建菌毛蛋白次要组分fimcde缺陷的的突变体。

关键词：牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白次要组分fimcde突变体载体构建

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